Способ прогнозирования течения нервно-психических заболеваний

Способ прогнозирования течения нервно-психических заболеваний

Реферат

Область техники: медицина, иммунохимия, психиатрия, неврология

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

В настоящее время появляется все больше данных, свидетельствующих о тесной функциональной взаимосвязи нервной и иммунной систем организма. Описаны различные изменения в иммунной системе при различной патологии нервной системы, однако роль этих изменений во многом остается неясной (Крыжановский Г.Н., Магаева С.В., Макаров С.В. Нейроиммунопатология. - М.: типография при НИИ труда, 1997; Абрамов В.В. Взаимодействие нервной и иммунной систем. - Новосибирск: Наука, 1988. Shrikant P., Benveniste E.N. The central nervous system as an immunocompetent organ. Role of glial cells in antigen presentation. - J. Immunol. - 1996. - Vol. 157. -¹ 10. - P. 1819-1822).

В норме иммунная система продуцирует антитела практически ко всем антигенам организма, т.е. регуляторные аутоантитела (AT1) (Jerne N.K. The generative grammar of the immune system. Nobel Lecture, December 1984. - Bioscience Reports (Printed in Great Britain). - 1985. - Vol. 5. - P. 439-451). Исследования последних лет показали, что нейроантигены не являются исключением и в сыворотке крови присутствует определенный уровень аутоантител к ним, изменения которого как в сторону патологического повышения, так и аномального снижения могут иметь неблагоприятные последствия для нервной системы (Полетаев А.Б., Морозов С.Г., Клюшник Т.П., Будыкина Т.С., Вабищевич Н.К., Гнеденко Б.Б. "Способ определения степени риска развития нервно-психических заболеваний", патент на изобретение №2147128).

У AT1 есть свои "функциональные противовесы", или антиидиотипические антитела (АТ2), связывающие их подобно антигену. По нашему мнению, оценка состояния такой «иммунной сети» может иметь огромный диагностический потенциал, практически невостребованный в настоящее время.

Нами была разработана тест-система, обозначенная нами как ELI-N-1 (от ELISA, Neuropathology), которую можно использовать для прогнозирования течения нервно-психических заболеваний. С помощью данной тест-системы определяют уровень аутоантител к ряду белков нервной ткани (или их иммунохимическим аналогам) (AT1), уровень соответствующих специфических антиидиотипических антител (АТ2) и коэффициент I, характеризующий отношение АТ2/АТ1.

В качестве ближайшего аналога изобретения может быть работа Warren K.G. с соавторами (Warren K.G., Catz I. Purification of primary antibodies of the myelin basic protein antibody cascade from multiple sclerosis patients. Immunoreactivity studies with homologlus and heterologous antigens. // Clin. Invest. Med. - 1992. - V. 15. - N1. - P. 13-25), которые наглядно продемонстрировали повышенные титры идиотипических аутоантител (AT1) к основному белку миелина (ОБМ) у больных с рассеянным склерозом в стадии обострения. У больных, находящихся в стадии ремиссии, такого повышения не наблюдалось. В то же время данный метод обладает рядом недостатков.

Он не предусматривает определения AT1 к ОБМ с целью прогноза течения заболевания, а определяет наличие или отсутствие обострения заболевания лишь на момент обследования. Кроме того, авторы определяли лишь AT1 и не исследовали содержание соответствующих АТ2. Поэтому с помощью представленного метода не предоставлялась возможность делать заключение о балансе в системе идиотип-антиидиотип.

В отличие от метода, рассматриваемого в качестве аналога изобретения, предлагаемый способ позволяет:

- оценивать сывороточный уровень антител (AT1) не только к антигенам нервной ткани, но и к их иммунохимическим аналогам;

- оценивать сывороточный уровень антиидиотипических антител (АТ2) к используемым в работе антигенам или их иммунохимическим аналогам;

- определять значения коэффициента I, т.е. АТ2/АТ1;

- проводить динамическое наблюдение за пациентом;

- прогнозировать течение имеющихся нервно-психических заболеваний.

Указанное осуществляется с помощью определения в динамике уровня антител к ряду белков нервной ткани (или их иммунохимическим аналогам), соответствующих АТ2, и коэффициента АТ2/АТ1.

В качестве антигенов целесообразно взять, например, следующие белки: a) S100, б) GFAP (глиофибриллярный кислый белок), в) МР65, г) ФРН (фактор роста нервов); д) ОБМ (основной белок миелина) или их иммунохимические аналоги, например F(ab)₂-фрагменты соответствующих АТ2, специфически связывающие AT1 к указанным белкам. В качестве антигенов нервной ткани могут быть использованы также различные фракции, полученные из ткани мозга.

В результате такого обследования определяют степень отклонения уровней всех определяемых AT1 и АТ2 как в сторону патологического повышения, так и патологического снижения, а также значений коэффициента I (AT2/AT1) от эмпирически найденного диапазона нормы.

Реализация существенных признаков предлагаемого изобретения осуществляется следующим образом.

I. На планшеты для иммуноферментного анализа (ИФА) сорбируют антигены нервной ткани или их иммунохимические аналоги, например F(ab)₂-фрагменты специфических АТ2 к белкам S100, GFAP, MP65, МР-С, ФРН и ОБМ. Возможно использование одного, двух, трех, четырех или всех пяти указанных компонентов тест-системы, а также других антигенов нервной ткани или их иммунохимических аналогов.

II. На планшеты для ИФА сорбируют антитела (идиотипические) к антигенам нервной ткани (к тем, которые сорбировали на планшеты - см. п.I.) или их вариабельные участки, например F(ab)₂-фрагменты антител к белкам S100, GFAP, MP65, ФРН и ОБМ.

III. На планшеты наносят образцы тестируемых сывороток и эталонной сыворотки.

IV. Выявляют связывающиеся из тестируемых сывороток антитела (идиотипические или антиидиотипические) с помощью конъюгатов антивидовых (вторичных) антител с ферментом, например пероксидазой хрена. Реакцию в лунках планшета проявляют субстратом, например о-фенилендиамином и Н₂O₂.

V. Обрабатывают полученные данные. Определяют интенсивности реакции в лунках, содержащих тестируемые сыворотки с лунками, содержащими эталонную сыворотку. Определяют коэффициент I, который представляет собой отношение AT2/AT1.

Не вытекает из известного уровня техники тот факт, что по комплексной оценке уровеней аутоантител к ряду белков нервной ткани или полученным из нее фракциям (или их иммунохимическим аналогам), уровней соответствующих АТ2 и коэффициентов AT2/AT1 можно судить о течении нервно-психических заболеваний.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ПОЛУЧЕНИЕ БЕЛКОВ НЕРВНОЙ ТКАНИ И ИХ ИММУНОХИМИЧЕСКИХ АНАЛОГОВ

В работе использовали коммерческие препараты белков S100, GFAP, ОБМ, ФРН фирмы Sigma (США).

Белок МР65 получали следующим способом. Из свежего мозга крупного рогатого скота любым методом выделяют фракцию клеточных мембран (например, мозг гомогенизируют в 0.15 М NaCl с 0.01 М трис-HCl рН 7.5; центрифугируют 5 мин при 1000 g; полученный осадок отбрасывают. К супернатанту добавляют сахарозу до 0.32 М; повторно центрифугируют 10 мин при 3000 g; осадок отбрасывают: к супернатанту добавляют равный объем 0,32 М сахарозы. Процедуру повторяют 2-3 раза. Затем супернатант разбавляют 2-кратно водой и центрифугируют 60 мин при 20000 g. Собирают осадок клеточных мембран. Полученные мембраны гомогенизируют в 0.01 М трис-HCl буфера рН 7,0 с 0,2 М NaCl. Центрифугируют, собирают осадок, отмывают его 0.01 М трис-HCl буфера рН 7.5. Гомогенизируют осадок в 0.01 М трис-HCl буфере рН 7.5 с 0.1% тритона Х-100 и 2 М мочевиной. Центрифугируют 60 мин при 20000 g. Супернатант наносят на колонку анионообменника, уравновешенную тем же буфером. Проводят ступенчатую элюцию белков, используя градиенты NaCl на том же буфере. Отбирают фракцию, элюируемую в диапазоне 0.1-0.3 М NaCl. После диализа против 0.01% тритона Х-100 с 1 М мочевиной на трис-HCl буфере рН 7.5 белки наносят на колонку анионообменника и проводят элюцию в линейном градиенте 0.01-0.6 М KSCN с 0.01% тритона Х-100 с УФ-детекцией на 280 нм. Собирают последний пик. Полученный материал используется в работе.

Получение F(ab)₂-фрагментов молекул АТ2 к белкам нервной ткани, т.е. иммунохимических аналогов этих белков, проводили следующим образом. Кроликов породы "шиншилла" иммунизировали F(ab)₂-фрагментами поликлональных антител к белкам нервной ткани, например к S100, GFAP, MP65, ФРН, ОБМ, а также к МР-С. Из получаемой антисыворотки с помощью иммуноаффинной хроматографии на колонке с иммобилизованными поликлональными антителами к какому-либо из указанных белков выделяли соответствующие АТ2 и в результате протеолитической обработки получали их F(ab)₂-фрагменты, которые использовали для активации планшет (возможно также использование Fab-фрагментов и других аналогов).

Для получения поликлональных антител (AT1) и их F(ab)₂-фрагментов использовали указанные выше белки.

ПРОВЕДЕНИЕ ТВЕРДОФАЗНОГО ИФА

1. Растворы каждого из компонентов тест-системы ELI-N-1 (например, F(ab)₂-фрагменты AT1 и АТ2 к белкам S100, GFAP, MP65, ФРН, ОБМ, диализованные против карбонатного буфера рН 9,2-9,8, вносят в отдельные лунки стандартных 96-луночных плоскодонных планшет для ИФА. Затем планшеты инкубируют 12-18 ч при +2...+4°С.

2. Удаляют (стряхиванием) из лунок растворы с несвязавшимися компонентами и (без дополнительной отмывки) заливают в них блокирующий буфер (например, 0.5% раствор желатина на 0.15 М NaCl). Инкубируют 1 ч при 37°С.

3. Отмывают планшеты отмывочным буфером (с 0.05% твин-20).

4. Вносят на планшеты образцы тестируемых и эталонной сывороток в разведении 1:200 на отмывочном буфере. Инкубируют 12-18 ч при +4°С.

5. Отмывают планшеты отмывочным буфером.

6. Проявление реакции осуществляют следующим образом. Раствор конъюгата пероксидазы хрена (или иного фермента) с антивидовыми антителами к IgG человека вносят во все лунки планшета. Затем планшеты инкубируют 60-90 мин при 37°С или 12-16 ч при +2...+4°С, после чего конъюгат удаляют, а планшеты отмывают отмывочным буфером. Сразу после этого в лунки вносят раствор субстрата (например, 0.01-0.05% о-фенилендиамина с 0.001-0.005% перекиси водовода на 0.01-0.05 М цитрат-фосфатном буфере в случае применения пероксидазных конъюгатов). Инкубируют планшеты в темноте 10-20 мин при комнатной температуре.

7. По достижении оптимального уровня окрашивания реакцию останавливают добавлением 0.2-0.4 М серной кислоты.

8. Интенсивность окрашивания оценивают с помощью ИФА-ридера любой модели.

9. Обрабатывают полученные данные.

а) Из трех дублирующих друг друга значений результатов реакции эталонной и тестируемых образцов сыворотки выбирают среднее.

б) Рассчитывают относительную интенсивность реакции с компонентами тест-системы тестировавшихся сывороток по отношению к реакции эталонной сыворотки (в процентах) по полученным значениям оптической плотности лунок. Рассчитывают коэффициент I, представляющий собою отношение АТ2/АТ1. Коэффициент I рассчитывают для каждой пары АТ1-АТ2.

10. Интерпретируют полученные данные.

В случае, если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любым из компонентов тест-системы не выходит за пределы от 65% до 135% по сравнению с реакцией эталонной сыворотки, а все определяемые коэффициенты I в пределах 0,7-1,3, данную сыворотку относят к классификационной группе №1 - норма (прогноз течения нервно-психического заболевания относительно благоприятен).

В случае, если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любым из компонентов тест-системы выходит за пределы группы №1, но составляет не менее 40% и не более 180% по отношению к реакции эталонной сыворотки, или какой-либо из определяемых коэффициентов I выходит за пределы 0,7-1,3, но составляет не менее 0,5 и не более 1,5, данную сыворотку относят к классификационной группе №2 - умеренные отклонения (повышена вероятность обострения течения нервно-психического заболевания - оно наступило или его следует ожидать).

В случае, если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любым из компонентов тест-системы выходит за пределы групп №1 и №2 или коэффициент I выходит за пределы 0,5-1,5, данную сыворотку относят к классификационной группе №3 - резкие отклонения (высокая вероятность обострения течения нервно-психического заболевания - оно наступило или его следует ожидать).

Ниже представлены эмпирические данные, полученные при анализе корреляций между показателями, полученными с помощью тест-системы ELI-N-1, и клиническими наблюдениями.

Как видно из таблицы, характер течения нервно-психических заболеваний коррелирует со степенью отклонений исследуемых показателей (при условии, если при исследовании в динамике - на протяжении нескольких месяцев - показатели остаются в пределах одной группы). Чем более выражены эти отклонения, тем больше вероятность обострения течения заболевания (если оно уже не наступило). По-видимому, поддержание в крови физиологических концентраций аутоантител к нейроантигенам, соответствующих АТ2, а также определенного баланса между ними, необходимо для нормального функционирования нервной системы.

В качестве эталонной сыворотки брали пулированную сыворотку здоровых лиц определенного возраста: до 3 лет, от 3 до 10 лет, от 10 до 16 лет, от 16 до 50 лет, от 50 до 70 лет, свыше 70 лет, т.е. 5 эталонных сывороток для каждой возрастной группы. При обследовании пациентов и здоровых лиц для постановки использовали ту эталонную сыворотку, которую получали от аналогичной возрастной группы. Это связано с тем, что для каждой из этих возрастных групп характерен свой физиологический уровень исследуемых антител.

Чем больше используется предложенных компонентов тест-системы ELI-N-1, тем более точно определить риск развития нервно-психических заболеваний и оценить характер его течения, что увеличивает стоимость анализа. Мы считаем, что предложенные пять пар АТ1-АТ2 являются одним из наиболее оптимальных вариантов.

Положительный эффект от реализации изобретения сводится к получению тест-системы (диагностикума) ELI-N-1, с помощью которого можно выявить лиц (с различными нервно-психическими заболеваниями), сыворотки которых содержат аномальные уровни AT1 и АТ2 к нейроантигенам, аномальные соотношения между ними, что является признаком повышенного риска обострения заболевания.

Заявленный способ может быть применим для мониторинга течения широкого спектра заболеваний нервной системы, особенно тех, где имеет место деструктивный процесс. Так, данный способ был апробирован у больных с рассеянным склерозом, болезнью Паркинсона, эпилепсией, а также с шизофренией, невротической депрессией.

При проведении анализа ELI-N-1 следует учитывать, что наличие различных инфекционных, эндокринных и др. заболеваний может влиять на исследуемые параметры, что может привести к неточной интерпретации исследуемых показателей.

ПРИМЕРЫ

Пример-1

Пациент К., 34 года, страдает с 17 лет вялотекущей шизофренией.

Результаты теста ELI-N-1:

AT1 к S100	АТ2 к S100	I	AT1 к GFAP	АТ2 к GFAP	I	AT1 кМР65	АТ2 к МР65	I	AT1 к ФРН	АТ2 к ФРН	I	AT1 к ОБМ	АТ2 к ОБМ	I
91	98	1,1	124	101	0,8	76	85	1,1	100	104	1,0	110	129	1,2

Группа №1.

Исследуемые показатели спустя 1,5 мес:

AT1 к S100	АТ2 к S100	I	AT1 к GFAP	АТ2 к GFAP	I	AT1 к MP65	АТ2 к MP65	I	AT1 к ФРН	АТ2 к ФРН	I	AT1 к ОБМ	АТ2к ОБМ	I
78	90	1,2	110	97	0,9	77	68	0,9	96	96	1,0	105	111	1,1

Группа №1. В течение последующих 5 мес обострения заболевания не отмечалось.

Пример-2

Пациент Р. 57 лет. Страдает 5 лет болезнью Паркинсона. Кровь взята во время ремиссии. Результаты теста ELI-N-1:

AT1 к S100	АТ2 к S100	I	AT1 к GFAP	АТ2 к GFAP	I	AT1 к MP65	АТ2 к MP65	I	AT1 к ФРН	АТ2 к ФРН	I	AT1 к ОБМ	АТ2 к ОБМ	I
130	134	1,0	100	119	1,2	99	107	1,1	87	99	1,1	98	75	0,8

Результаты теста ELI-N-1 спустя 2 мес:

AT1 к S100	АТ2 к S100	I	AT1 к GFAP	АТ2 к GFAP	I	AT1 к МР65	АТ2 к МР65	I	AT1 к ФРН	АТ2 к ФРН	I	AT1 к ОБМ	АТ2 к ОБМ	I
196	173	0,9	120	176	1,5	126	149	1,2	103	100	1,0	154	167	1,1

Группа №3. Результаты теста ELI-N-1 спустя 4 мес после первого анализа:

AT1 к S100	АТ2 к S100	I	AT1 к GFAP	АТ2 к GFAP	I	AT1 к MP65	АТ2 к MP65	I	AT1 к ФРН	АТ2 к ФРН	I	AT1 к ОБМ	АТ2 к ОБМ	I
210	263	1,3	139	196	1,4	135	144	1,1	121	113	0,9	157	175	1,1

Группа №3. Спустя 1 мес после взятия последнего анализа у пациента наблюдали обострение заболевания.

Пример-3

Больной С., 17 лет. С 12 лет страдает эпилепсией. Результаты теста ELI-N-1:

AT1 к S100	АТ2 к S100	I	AT1 к GFAP	AT2 к GFAP	I	AT1 к MP65	AT2 к MP65	I	AT1 к ФРН	AT2 к ФРН	I	AT1 к ОБМ	AT2 к ОБМ	I
89	85	1,0	90	82	0,9	61	70	1,1	80	94	1,2	90	90	1,0

Группа №1.

Результаты теста ELI-N-1 спустя 3 мес:

AT1 к S100	AT2 к S100	I	AT1 к GFAP	AT2 к GFAP	I	AT1 к MP65	AT2 к MP65	I	AT1 к ФРН	AT2 к ФРН	I	AT1 к ОБМ	AT2 к ОБМ	I
154	205	1,3	181	104	0,6	187	99	0,5	156	100	0,6	119	126	1,1

Группа №1. Спустя 2 нед после последнего анализа наблюдали обострение заболевания.

Пример-4

Больная П., 38 лет. С 21 года страдает рассеянным склерозом. Результаты теста ELI-N-1:

AT1 к S100	AT2 к S100	I	AT1 к GFAP	AT2 к GFAP	I	AT1 к MP65	AT2 к MP65	I	AT1 к ФРН	AT2 к ФРН	I	AT1 к ОБМ	AT2 к ОБМ	I
155	132	0,9	164	155	0,9	117	130	1,1	133	80	0,6	118	119	1,0

Группа №2. Результаты теста ELI-N-1:

AT1 к S100	AT2 к S100	I	AT1 к GFAP	AT2 к GFAP	I	AT1 к MP65	AT2 к MP65	I	AT1 к ФРН	AT2 к ФРН	I	AT1 к ОБМ	AT2 к ОБМ	I
79	79	1,0	87	99	1,1	104	124	1,2	130	111	0,9	119	131	1,1

Группа №2.

В течение последующих 3 мес обострения заболевания отмечено не было.

Пример-5

Пациент Н., 27 лет. Страдает ремитирующей формой рассеянного склероза. Во время ремиссии была взята кровь для анализа.

Результаты теста ELI-N-1:

В качестве антигенов для определения AT1 использовали нативные белковые препараты. Для определения АТ2 использовали препараты идиотипических антител.

AT1 к S100	АТ2 к S100	I	AT1 к GFAP	АТ2 к GFAP	I	AT1 к MP65	АТ2к MP65	I	AT1 к ФРН	АТ2 к ФРН	I	AT1 к ОБМ	АТ2 к ОБМ	I
94	100	1,1	67	80	1,2	101	97	1,0	112	130	1,2	121	107	0,9

Группа №1.

С этим же препаратом крови провели аналогичный анализ. Только вместо нативных антигенов при определении AT1 использовали их иммунохимические аналоги, а именно -F(ab)₂-фрагменты соответствующих антиидиотипических антител; при определении АТ2 использовали не сами препараты идиотипических антител, а их F(ab)₂-фрагменты.

AT1 к S100	АТ2 к S100	I	AT1 к GFAP	АТ2 к GFAP	I	AT1 к MP65	АТ2 к MP65	I	AT1 к ФРН	АТ2 к ФРН	I	AT1 к ОБМ	АТ2 к ОБМ	I
80	71	0,9	94	111	1,2	123	108	0,9	79	88	1,1	90	98	1,1

Группа №1. В течение последующих 2 мес обострения рассеянного склероза не наблюдалось.

Пример-6

Пациентка К., 49 лет. Страдает приступообразно-прогредиентной шизофренией. Кровь взята во время ремиссии.

Результаты теста ELI-N-1:

В качестве антигенов для определения AT1 использовали нативные белковые препараты. Для определения АТ2 использовали препараты идиотипических антител.

AT1 к S100	АТ2 к S100	I	AT1 к GFAP	АТ2 к GFAP	I	AT1 к MP65	АТ2 к MP65	I	AT1 к ФРН	АТ2 к ФРН	I	AT1 к ОБМ	АТ2 к ОБМ	I
235	116	0,5	200	145	0,7	123	178	1,4	177	164	0,9	289	112	0,4

Группа №3.

С этим же препаратом крови провели аналогичный анализ. Только вместо нативных антигенов при определении AT1 использовали их иммунохимические аналоги, а именно -F(ab)₂-фрагменты соответствующих антиидиотипических антител; при определении АТ2 использовали не сами препараты идиотипических антител, а их F(ab)₂-фрагменты.

AT1 к S100	АТ2 к S100	I	AT1 к GFAP	АТ2 к GFAP	I	AT1 к МР65	АТ2 к МР65	I	AT1 к ФРН	АТ2 к ФРН	I	AT1 к ОБМ	АТ2 к ОБМ	I
247	124	0,5	221	167	0,8	144	160	1,1	179	157	0,9	300	124	0,4

Группа №3.

Спустя 3 нед после взятия анализа у пациента наблюдали обострение заболевания, т.е. наблюдали острый приступ шизофрении.

Пример-7

Больной Л., 67 лет. Страдает болезнью Паркинсона. Результаты теста ELI-N-1:

В качестве антигенов для определения AT1 использовали нативные белковые препараты. Для определения АТ2 использовали препараты идиотипических антител.

AT1 к S100	АТ2 к S100	1	AT1 к GFAP	АТ2 к GFAP	1	AT1 к MP65	АТ2 к MP65	1	AT1 к ФРН	АТ2 к ФРН	1	AT1 к ОБМ	АТ2 к ОБМ	1
178	114	0,6	131	128	1,0	142	123	0,9	150	147	1,0	172	120	0,7

Группа №2.

С этим же препаратом крови провели аналогичный анализ. Только вместо нативных антигенов при определении AT1 использовали их иммунохимические аналоги, а именно - Fab-фрагменты соответствующих антиидиотипических антител; при определении АТ2 использовали не сами препараты идиотипических антител, а их Fab-фрагменты.

AT1 к S100	АТ2 к S100	I	AT1 к GFAP	АТ2 к GFAP	I	AT1 к MP65	АТ2 к MP65	I	AT1 к ФРН	АТ2 к ФРН	I	AT1 к ОБМ	АТ2 к ОБМ	I
170	108	0,6	147	131	0,9	153	129	0,8	155	156	1,0	178	125	0,7

Группа №2. У пациента наблюдается умеренно прогредиентное течение заболевания.

ТЕХНИКО-ЭКОНОМИЧЕСКАЯ И СОЦИАЛЬНАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Применение диагностической тест-системы ELI-N-1 позволяет проводить прогнозирование течения нервно-психических заболеваний. Это может дать возможность клиницистам своевременно проводить профилактику обострений различной патологии нервной системы.

Исследование проводится в лаборатории для иммуноферментного анализа.

1. Способ прогнозирования течения нервно-психических заболеваний, включающий забор крови и получение сыворотки, отличающийся тем, что получают тест-систему ELI-N-1 - сорбированные на планшеты для иммуноферментного анализа антигены нервной ткани или их иммунохимические аналоги, специфически связывающие аутоантитела с направленностью к антигенам нервной ткани, а также идиотипические антитела или их вариабельные участки, специфически связывающие соответствующие антигены нервной ткани, проводят иммуноферментный анализ и скрининг пациентов по уровню определяемых аутоантител, определяют в динамике уровень сывороточных антител к антигенам нервной ткани (ATI), уровень соответствующих антиидиотипических антител (АТ2), коэффициент I, представляющий собой отношение АТ2/АТ1, при этом, если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любым из компонентов тест-системы не выходит за пределы от 65 до 135% по сравнению с реакцией эталонной сыворотки, а все определяемые коэффициенты I находятся в пределах 0,7-1,3, то данную сыворотку относят к группе №1 - норма - благоприятный прогноз; если интенсивность реакции выходит за пределы группы №1, но составляет не менее 40 и не более 180% по отношению к реакции эталонной сыворотки, или какой-либо из определяемых коэффициентов I выходит за пределы 0,7-1,3, но составляет не менее 0,5 и не более 1,5, то данную сыворотку относят к группе №2 - умеренные отклонения - повышенная вероятность обострения течения нервно-психических заболеваний; если интенсивность реакции выходит за пределы групп №1 и №2 или коэффициент I выходит за пределы 0,5-1,5, то данную сыворотку относят к группе №3 - резкие отклонения - высокая вероятность обострения течения нервно-психических заболеваний.

2. Тест-система для определения иммунореактивности сывороточных идиотипических и антиидиотипических аутоантител к антигенам нервной ткани, содержащая стандартные плоскодонные планшеты для иммуноферментного анализа, отмывочный буфер, сыворотку-эталон, раствор конъюгата фермента с антивидовыми антителами к иммуноглобулинам человека, раствор субстрата и раствор 0,2-0,4М серной кислоты для остановки реакции, отличающийся тем, что планшеты содержат сорбированные антигены нервной ткани или их иммунохимические аналоги, специфически связывающие аутоантитела с направленностью к антигенам нервной ткани, а также идиотипические антитела или их вариабельные участки, специфически связывающие соответствующие антигены нервной ткани.