Вакцинная композиция и способ ее применения

Вакцинная композиция и способ ее применения

Реферат

Описание

Настоящая заявка является частичным продолжением и имеет приоритет предварительной заявки США №60/150514, поданной 24 августа 1999 г. Содержание упомянутой выше заявки включено в настоящую заявку в качестве ссылки.

В настоящей заявке различные ссылки включают в себя указания авторов и полного названия. Описание указанных публикаций целиком включено в настоящую заявку в качестве ссылки для более полного описания состояния области, к которой относится настоящее изобретение.

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к стабильной плотной, прессованной или таблетированной вакцинной композиции, имеющей плотную твердую форму, включающей в себя один или более высушенных путем замораживания (лиофилизированных) антигенных компонентов и вспомогательный агент, способствующий растворению. Указанная стабильная плотная вакцинная композиция сохраняет все выгодные свойства ее лиофилизированных компонентов, включая стабильность титра и растворимость, в то же время обеспечивая полное и быстрое растворение в разбавителе. Более того, вакцинная композиция согласно настоящему изобретению не имеет недостатков, присущих известным ранее лиофилизированным препаратам. Также описан способ иммунизации субъекта с использованием стабильной вакцинной композиции для приготовления раствора вакцины.

Предпосылки к созданию изобретения

Хорошо известно, что биологические материалы в растворах, такие как вакцины, являются чувствительными к различным влияниям, включая нагревание, окислители, соли, рН, свет и протеолитические ферменты.

Известно несколько способов уменьшения этих вредных воздействий в целом и, более конкретно, способов улучшения стабильности вакцины, особенно во время хранения. Например, хранение при температуре ниже 0°С и до -70°С в морозильной камере является хорошо известным способом. Многие биологические материалы, включая живые клетки, можно успешно хранить в течение многих лет даже при еще более низких температурах, например, в жидком азоте. Однако подобные способы не всегда удобны в ситуациях, когда, например, надо прививать находящийся на свободном выпасе домашний скот.

Лиофилизация, или сушка путем замораживания, представляет собой другой известный способ сохранения живых клеток и вирусов для применения в качестве вакцин. Во время сушки замораживанием раствор, содержащий биологический материал, сначала замораживают, а затем выпаривают из него воду путем сублимации, обычно в условиях высокого вакуума и температурах ниже нуля. В предыдущих подходах использовали сушку замораживанием и другие методики для изготовления вирусных вакцин, однако все еще остаются другие трудности, касающиеся изготовления и введения окончательной стабильной лекарственной формы.

Например, в патенте США №4251509 (Hanson и Abegunde) описана стабильная состоящая из частиц вирусная вакцина, предназначенная для перорального введения в сухом состоянии находящемуся на свободном выпасе домашнему скоту. Однако описанная лекарственная форма является не лиофилизированной, а изготовленной путем концентрирования и экструзии высушенной пасты с образованием гранул.

Для обеспечения термостабильности требуются антиоксиданты, выбор которых будет зависеть от конкретного вируса. Подобную композицию бывает трудно изготовить, и она не очень хорошо подходит для тех случаев, когда перед иммунизацией вакцину желательно растворить.

В патентах США №№3458621 и 3608030 (Tint) описано применение лиофилизированных вирусных препаратов для изготовления таблетки для перорального введения с целью иммунизации кишечника. Однако изготовленные таблетки предназначаются для перорального введения и изготавливаются с энтеросолюбильным покрытием для задержки распада. Во время испытаний in vitro они распадаются медленно и, как было установлено, распадаются только "в течение 25 минут" при воздействии жидкости, имитирующей кишечный сок. Более того, время распада измеряли в жидкости, имитирующей кишечный сок, не принимая во внимание, таким образом, эффекты энтеросолюбильного покрытия. Помимо этого, Tint далее подчеркивает, что до тех пор, пока таблетки имеют "прессованное покрытие", они будут терять свой титр, как показано при сравнении таблеток с прессованным покрытием и непрессованным покрытием. Tint отмечает, что таблетки с непрессованным покрытием" не только не смогли вызвать ответ в виде выработки антител у всех индивидуумов, не имеющих антител, но, кроме того, степень повышения титра была значительно более низкой". (См. столбец 4, строка 40).

В публикации РСТ № WO 99/21579 (Seager et al.), принадлежащей R.P.Scherer Corp., описана "быстро" диспергирующаяся композиция для ветеринарной вакцины, такой как вакцина против ньюкаслской болезни, которая является лиофилизированной и "рыхлой". Лекарственная форма описана как "открытая матриксная сеть", такая как "твердая пена", со ссылкой на патент США №4371516 (копия патента UK №1548022), как противопоставляемая прессованной форме или твердому таблетированию. Кроме того, вакцины предназначены для перорального введения и нацелены на задержку в ткани слизистой оболочки. Вспомогательные вещества служат для обеспечения достаточного для всасывания времени задержки. Описанная вакцинная композиция не предусматривает ни приготовления жидкой дозы для последующей иммунизации, ни средств для легкого приготовления стабильного отмеренного вакцинного раствора для введения в качестве жидкой дозы, ни для приготовления стабильного прессованного или в виде твердой таблетки лиофилизата для облегчения его последующего введения.

В патенте США №5587180 (Allen, Jr. et al.) описан способ изготовления особо прочного матрикса для быстрорастворимой таблетки. В этом способе авторы отходят от лиофилизации и используют обычную методику сушки распылением. Особо прочный матрикс удобен для введения дозы при помещении в ротовую полость. Кроме того, не предложена стабильная вакцинная композиция в качестве вакцинного раствора в виде жидкой лекарственной формы.

В патенте США №5336666 (Neway et al.) описана лиофилизированная жидкая вакцина, из которой можно формировать таблетку для повторного растворения в жидкую форму. Однако вакцина ограничивается полярным гликопептидом определенной бактерии и не предусматривает полного или быстрого растворения.

Несмотря на то что лиофилизацию биологического материала можно осуществлять согласно методикам лиофилизации, хорошо известным специалистам, для получения стабильного вакцинного препарата, титр живого вируса к концу лиофилизации обычно уже не такой, который имелся в растворе до процесса лиофилизации. В целом, невозможно провести титрование до лиофилизации, поскольку раствор является нестабильным до тех пор, пока он не лиофилизирован. Помимо этого, во время лиофилизации титр будет изменяться непредсказуемым образом. Как следствие, оценка исходного титра, основанная на опыте, только подтверждается титрованием после лиофилизации. В результате всего вышеперечисленного почти невозможно добиться определенного точно требуемого титра.

Если лиофилизацию осуществляют с лиофилизатом, который уже помещен во флаконы, переделать серию обычно невозможно, и в некоторых случаях всю серию приходится выбрасывать, если она не соответствует спецификации.

В патенте США №5897852 (Wilderbreek et al.) попытались разрешить эту проблему, используя различные "лиофилизированные тела" с "лиосферами", чтобы устранить недостатки титра лиофилизированного остатка. Однако каждая лиосфера имеет свой собственный титр, делая, таким образом, необходимым титрование множества тел, для получения нужного титра. Даже в лучшем случае этом способ не позволяет достичь точного требующегося титра, поскольку он является только приблизительным из-за использования комбинированных тел для достижения нужного титра. Кроме того, изготовление лиосфер является относительно трудным процессом по сравнению с более простой сушкой растворов замораживанием, с получением лепешки или порошка. Помимо этого, часто требуется специальный матрикс для того, чтобы предотвратить распыление лиосферного материала после сушки. В целом, способ требует изготовления отдельных растворов, каждый из которых имеет свой титр, добавок и вспомогательных агентов. Указанный способ не решает ту проблему, что титр в серии живого вируса редко бывает однородным, и отличается в разных флаконах, особенно в областях холодных пластин аппарата для лиофильной сушки. Таким образом, определение необходимого количества лиосфер во флаконе всегда приблизительно.

Лиофилизация может также быть пригодной для вакцин, включающих в себя более одного иммуногенного компонента. Например, в ЕР 290197А описана лиофилизированная тетравалентная вакцина. Описана процедура смешивания и последующей лиофилизации четырех живых вирусов, являющихся компонентами вакцины.

Недостатком имеющихся в настоящее время методик лиофилизации вакцинных препаратов является то, что указанный процесс очень сложен, имеет много параметров, что делает его очень трудным для воспроизводимого осуществления с целью получения нужного продукта и однородности дозировок. Это особенно проблематично для ветеринарных вакцин, когда в одном флаконе лиофилизировано большое количество доз. Указанная проблема не является такой распространенной при изготовлении вакцин, предназначенных для человека, хотя и оценивается таким же образом, если необходимы массовые прививки, например, в военное время или в ситуациях пандемической инфекции. Например, стандартный флакон с одновалентной вакциной для вакцинации домашней птицы включает в себя в себя 1000 или 2000 доз и регистрируется в качестве такового. Перед лиофилизацией производится приблизительная оценка титра материала, но конечный титр можно определить только после лиофилизации, поскольку во время лиофилизации титр часто снижается достаточно непредсказуемым образом. Кроме того, сырой материал живого вируса или бактерий обычно невозможно сохранить стабильным достаточно долго, чтобы получить точные результаты титра до лиофилизации.

На практике часто оказывается, что контейнер, исходно содержавший более 2000 доз, после лиофилизации содержит только 1900 доз. В этом случае флакон может продаваться только как флакон на 1000 доз, поскольку обычно только это является следующей официально регистрируемой дозировкой. В подобном случае может наблюдаться потеря 47% материала и соответствующее повышение стоимости. Эта проблема относится и к комбинированным вакцинам, поскольку для характеристики всей серии должна использоваться доза компонента с наименьшим титром. Еще одним недостатком является то, что когда флаконы, предназначенные для обеспечения 2000 однократных доз, впоследствии продают как флаконы на 1000 доз и используют для иммунизации 1000 животных, животные, привитые таким образом, без необходимости получают избыточную дозу. Кроме того, вынужденное увеличение количества доз до лиофилизации нельзя считать удовлетворительной альтернативой, если учесть, что некоторая часть вакцинной серии высушивается более эффективно. В этой ситуации просто прекращают впустую расходовать материал.

Указанные проблемы будут приобретать все большее значение, поскольку органы регистрации в настоящее время работают над системой регистрации, в которой количество титров вакцинных доз будет иметь строго определенные верхний и нижний пределы. При заданных многих параметрах как для производства, так и для процесса лиофилизации будет трудно придерживаться указанных пределов при производстве в промышленных масштабах. Как указано, данная проблема будет даже более выраженной, если потребуется комбинированная вакцина.

Еще одним недостатком известных ранее лиофилизированных комбинированных вакцин является то, что большое количество составленных комбинаций должно сохраняться при хранении. Это происходит потому, что различные компоненты в комбинированной вакцине обычно смешивают до лиофилизации. Таким образом, для изготовления полного ряда одно-/многокомпонентных вакцин против, например, двух болезней в качестве маточных компонентов должны сохраняться три различных продукта: (1) продукт, включающий в себя анти-А вакцину, (2) продукт, содержащий анти-В вакцину, и (3) продукт, содержащий анти-А-, и анти-В вакцину. В случае вакцин против трех болезней необходимо изготовить и хранить семь различных вакцин/комбинаций. Для четырех болезней это количество увеличивается до пятнадцати различных вакцин/комбинаций. Поэтому часто необходимо создавать и поддерживать большие мощности для хранения.

В патентах США №№5397569 и 5871748 (Whitfill et al.) описаны способ получения активного иммунитета против вируса ньюкаслской болезни (NDV) у птиц путем введения in ovo вакцинного комплекса, составленного из живого вакцинного вируса, и присоединенных к нему нейтрализующих антител. Whitfill описывает, что соотношение вируса и нейтрализующего антитела или его фрагмента будет определять успех иммунизации. Однако для того, чтобы подобный способ можно было эффективно использовать против NDV, необходимо поддерживать указанное соотношение в узких пределах величин, так, чтобы успешная иммунизация происходила без гибели цыплят. Кроме того, непредсказуемость титра при использовании лиофилизированного NDV (как и для других вирусных препаратов) означает, что такие способы как способ Whitfill нелегко применять при NDV. Таким образом, желательно иметь такой способ, который сможет гарантировать более точные титры NDV и антител для изготовления подобной вакцины.

Еще одним недостатком имеющихся в настоящее время вакцинных композиций и способов их изготовления является то, что существующий процесс лиофилизации требует больших пространств. Обычно лиофилизация вакцины требует сначала разлива солюбилизированной вакцины в стеклянные флаконы. Флаконы затем неплотно закрывают резиновыми пробками и помещают на поддонах на стеллажи в камере для сушки замораживанием или в конденсере. Сконцентрировать очень высокие дозы солюбилизированного вакцинного материала в очень малом пространстве трудно.

В результате флаконы, которые обычно используются при лиофилизации для множества доз вакцины, всегда содержат относительно большой объем жидкости. Для эффективной лиофилизации требуется, чтобы большая поверхность жидкости, которую нужно лиофилизировать, подвергалась воздействию вакуума. Следовательно, поскольку только верхушка замороженной гранулы находится в контакте с вакуумом, вакцины лиофилизируют в относительно больших стеклянных бутылках или флаконах с широким дном. Такие флаконы иногда имеют высоту 5 сантиметров, из которых дополнительные 2 см высоты требуются для резиновых пробок. В результате соотношение продукта и пустого пространства в аппарате для лиофилизации является крайне неэффективным, что выражается в менее эффективном в отношении стоимости процессе производства.

Другим недостатком обычных композиций для изготовления лиофилизированных вакцин в стеклянных флаконах является то, что резиновые пробки могут препятствовать свободному переносу молекул воды из флакона в конденсор по время лиофилизации. Это может увеличивать парциальное давление возгоняющихся газов внутри флакона, понижая, таким образом, эффективность лиофилизации, а также увеличивать риск спадения лиофилизированного материала. Стекло также препятствует переносу тепла, что дополнительно влияет на эффективность лиофилизации. Такой процесс изготовления вакцины, при котором будут устранены как стеклянные флаконы, так и пробки путем использования поддонов для лиофилизации, должен повысить эффективность. Кроме того, процесс лиофилизации требует длительного времени. Компоненты вакцины обычно хранят при температуре ниже температуры замерзания для сокращения времени возгонки воды. Однако более продолжительный период сушки почти неизбежно ведет к снижению титра. Стеклянные флаконы с их пробками и алюминиевыми крышками обычно представляют собой факторы, затрудняющие процесс. В условиях производства они могут составлять более 50 процентов стоимости изготовленной вакцины. В полевых условиях разбавитель нужно инъецировать во флакон, а полученный раствор извлечь и разбавить, если это необходимо. Это представляет собой неудобство, которое не всегда подходит к условиям на месте, таком как курятник. Нередко в таких ситуациях во время данной процедуры работник случайно может инъецировать самого себя. Еще одним недостатком указанной упаковки и изготовления вакцины является то, что некоторое количество концентрированного раствора будет оставаться во флаконе. Таким образом, общепринято, что необходимы излишки содержимого, чтобы компенсировать неоднородность и потери при изготовлении, а также потери в течение периодов хранения. Стеклянные флаконы также нужно ликвидировать безопасным образом, и они могут представлять потенциальную опасность для здоровья и окружающей среды.

В результате применение обычных лиофилизированных вакцинных композиций требует сложных технологий производства, которые являются дорогостоящими, а сами вакцины трудно применять в полевых условиях. Таким образом, указанные обычные вакцинные композиции не подходят для вакцинаций в развивающихся странах, в которых экономическое положение и полевые условия не позволяют проводить дорогостоящие кампании, а также не подходят для случаев массовых иммунизаций, которые могут потребоваться, например, в качестве защиты в случае применения биологического оружия или при других потенциальных катастрофах или эпидемиях.

Таким образом, желательной является вакцинная композиция, при которой можно избежать применения стеклянных флаконов для введения, делающая возможной менее дорогостоящую альтернативу упаковки массы продукта. Также желательна вакцинная композиция и способ ее применения, при которых обеспечивается более высокая точность дозирования и простота использования, при сохранении стабильности, стерильности, растворимости и однородности как для моно-, так и для поливалентных вакцинных композиций. Вакцинная композиция и улучшенный способ иммунизации, который облегчает более точное, воспроизводимое и эффективное введение, могут обеспечить такие преимущества, как более удобное использование в полевых условиях, улучшенная безопасность, улучшенное соотношение стоимости и эффективности, меньший расход и сохранение окружающей среды.

Краткое описание существа изобретения

Соответственно, целью настоящего изобретения является создание вакцинной композиции и способа иммунизации, выполняемого простым растворением твердой, стабильной по плотности формы лиофилизированной вакцины в разбавителе, что устраняет, таким образом, необходимость использования стеклянных флаконов, в то же время позволяя получить значительно более высокую точность дозирования и простоту применения.

Еще одной целью настоящего изобретения является создание лиофилизированной живой или инактивированной вакцины, которая компактно изготовлена, спрессована или таблетирована в виде стабильного по плотности твердого вещества, которое будет сохранять свою потенциальную иммунизирующую способность во время изготовления и на период времени, требующийся для достаточного срока хранения коммерческой вакцины.

Еще одной целью настоящего изобретения является создание лиофилизированной живой или инактивированной вакцины, которая компактно изготовлена, спрессована или таблетирована в виде стабильного по плотности твердого вещества, которое облегчает изготовление вакцинных препаратов in ovo и их применение.

Еще одной целью настоящего изобретения является создание лиофилизированной живой или инактивированной вакцины, которая компактно изготовлена, спрессована или таблетирована в виде стабильного по плотности твердого вещества, которое облегчает упаковку вакцин в контейнеры, не являющиеся флаконами, и их применение.

Другой целью настоящего изобретения является создание вакцинной композиции и способа иммунизации, обеспечивающих большую гибкость при вакцинациях, и их применение.

Еще одной целью настоящего изобретения является создание вакцинной композиции и способа иммунизации, который снижает потребность в избыточном вакцинном материале, необходимом для компенсации неточностей титра, присущих упакованной вакцине, изготовленной известными способами.

Другой целью настоящего изобретения является создание вакцинной композиции и способа иммунизации, обеспечивающего большую гибкость для типов вакцинных композиций, которые могут вводиться.

Еще одной целью настоящего изобретения является создание вакцинной композиции и способа иммунизации, который облегчает получение вакцинного раствора, содержащего множество доз, и его применение.

Другой целью настоящего изобретения является создание вакцинной композиции и способа иммунизации, который облегчает массовую иммунизацию людей.

Другой целью настоящего изобретения является создание вакцинной композиции и способа иммунизации, который является подходящим и эффективным в отношении стоимости вакцинаций в развивающихся странах, в которых стоимость и полевые условия не позволяют осуществлять сложное изготовление и проводить дорогостоящие кампании.

Еще одной целью настоящего изобретения является создание вакцинной композиции и способа иммунизации, подходящего для применения в качестве защиты в случае применения биологического оружия, при котором массовая иммунизация является обязательной.

Эти и другие цели настоящего изобретения могут достигаться с помощью настоящего изобретения, которое относится к стабильной вакцинной композиции, содержащей по меньшей мере один предварительно оттитрованный лиофилизированный антигенный компонент и вспомогательный агент, способствующий растворению; причем указанная вакцинная композиция имеет форму твердой таблетки. Помимо этого, настоящее изобретение относится также к способу иммунизации субъекта против болезни, включающему в себя этапы: растворения вакцинной композиции в разбавителе с получением раствора; причем вакцинная композиция содержит по меньшей мере один лиофилизированный антигенный компонент и вспомогательный агент, способствующий растворению; причем указанная вакцинная композиция имеет форму твердой таблетки и обеспечивает защиту против указанной болезни; и введения полученного раствора субъекту в количестве, эффективном для иммунизации субъекта против болезни.

Настоящее изобретение в его конкретных признаках станет более очевидным благодаря следующему подробному описанию со ссылками на прилагающиеся примеры. Следующее описание продолжит обсуждение проблем и решений, предложенных настоящим изобретением, с точки зрения ветеринарного применения. Однако нижеследующее не должно интерпретироваться как ограничение или неприменимость для вакцинации человека.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение относится к стабильной прессованной вакцинной композиции, содержащей по меньшей мере один лиофилизированный антигенный компонент и вспомогательный агент, способствующий растворению.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения вакцинная композиция имеет форму твердой таблетки.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения композиция полностью и быстро растворяется в воде.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения композиция является стерильной.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения вспомогательный агент, способствующий растворению, представляет собой шипучий агент или пару агентов, разрыхлитель, поверхностно-активный агент или солюбилизирующий агент.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения шипучая пара включает в себя соль и кислоту.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения шипучая пара включает в себя лимонную кислоту и в качестве соли - бикарбонат.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения вакцинная композиция включает в себя связующий агент и смазывающий агент.

В еще одном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения композиция полностью и быстро распадается в воде.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения активный материал представляет собой предварительно оттитрованный лиофилизат, который до употребления хранят в сухой атмосфере азота при температуре ниже температуры замерзания.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения лиофилизированный компонент составляет до 80% от массы композиции.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения вакцинная композиция характеризуется полным растворением менее чем через 80 секунд при контакте с разбавителем.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения полное растворение вакцинной композиции наблюдается при соотношении разбавителя и композиции между 0,5 мл разбавителя на 200 мг композиции и 100 мл разбавителя на 400 мг композиции.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения стабильность вакцинной композиции характеризуется потерей титра, не превышающей разницу между 10^9,7 EID₅₀/мл и 10^9,2 EID₅₀/мл, через 5 дней при 37°С.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения стабильность вакцинной композиции характеризуется потерей титра, не превышающей разницу между 10^9,7 EID₅₀/мл и 10^9,3 EID₅₀/мл/ через 9 месяцев при 4°С.

В еще одном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения антигенный компонент вакцинной композиции представляет собой цельный вирус, цельную бактерию или цельный микроорганизм.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения антигенный компонент вакцинной композиции представляет собой живую бактерию или живой вирус.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения вакцинная композиция включает в себя индикатор наличия антигенного компонента.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения индикатор представляет собой краситель.

Настоящее изобретение относится также к стабильной вакцинной композиции, содержащей по меньшей мере один лиофилизированный антигенный компонент и вспомогательный агент, способствующий растворению; причем вакцинная композиция имеет форму твердой таблетки, а антигенный компонент включает в себя липополисахарид или белок как натуральный, так и рекомбинантный или модифицированный.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения антигенный компонент представляет собой живой вирус, выбранный из группы, состоящей из вируса или бактерии ньюкаслской болезни, штамма VH вируса ньюкаслской болезни, вируса инфекционной болезни бурсы, вируса болезни Гумборо, поксвируса птиц, вируса ларинготрахеита, вируса инфекционного бронхита домашней птицы, вируса Гумборо-Винтерфильда, вируса инфекционного бронхита (IB-H120), поксвируса овец, вируса Rinderpest, спор возбудителя сибирской язвы, Salmonella SPP., E.coli или смеси одного или более из вышеназванных микроорганизмов, как встречающихся в естественных условиях, так и рекомбинантных или модифицированных.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения антигенный компонент выбирают из группы, состоящей из спор возбудителя сибирской язвы, Salmonella SPP., E.coli или смеси одного или более из вышеназванных микроорганизмов, как встречающихся в естественных условиях, так и рекомбинантных или модифицированных.

В еще одном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения антигенный компонент представляет собой живой вирус, а композиция дополнительно включает в себя нейтрализующие антитела против указанного вируса.

Настоящее изобретение относится также к способу иммунизации субъекта против болезни, включающему в себя этапы: растворения вакцинной композиции в разбавителе с получением раствора, причем вакцинная композиция включает в себя по меньшей мере один лиофилизированный антигенный компонент и вспомогательный агент, способствующий растворению, где указанная вакцинная композиция имеет форму твердой таблетки и обеспечивает защиту против указанной болезни; и введения полученного раствора субъекту в количестве, эффективном для иммунизации субъекта против болезни.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения этап растворения в способе иммунизации дополнительно характеризуется полным растворением вакцинной композиции.

В еще одном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения полное растворение во время этапа растворения в способе иммунизации наблюдается при соотношении разбавителя и композиции между 0,5 мл разбавителя на 200 мг композиции и 100 мл разбавителя на 400 мг композиции.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения этап растворения в способе иммунизации дополнительно характеризуется полным растворением менее чем через 80 секунд при контакте с разбавителем.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения этап введения включает в себя инъецирование раствора субъекту.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения этап введения включает в себя опрыскивание субъекта аэрозолем, образованным из раствора.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения этап введения включает в себя введение субъекту раствора в виде глазных капель.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения этап введения включает в себя пероральное введение раствора субъекту.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения способ иммунизации применяется по отношению к субъекту, который является птицей, а болезнь выбрана из группы, состоящей из ньюкаслской болезни, инфекционной болезни бурсы, оспы птиц, ларинготрахеита, инфекционного бронхита домашней птицы.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения этап введения включает в себя введение раствора субъекту in ovo.

Настоящее изобретение относится также к упаковке, включающей вакцинную композицию, имеющую по меньшей мере один лиофилизированный антигенный компонент и вспомогательный агент, способствующий растворению; причем указанная вакцинная композиция имеет форму твердой таблетки или дополнительно содержит индикатор наличия антигенного компонента.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения упаковка представляет собой блистерную упаковку.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения упаковка представляет собой стерильный шприц.

Настоящее изобретение относится также к стерильному шприцу, включающему в себя компактно изготовленную вакцинную композицию; причем вакцинная композиция содержит по меньшей мере один лиофилизированный антигенный компонент и вспомогательный агент, способствующий растворению.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения компактно изготовленная вакцинная композиция в стерильном шприце представляет собой прессованную композицию.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения прессованная вакцинная композиция в стерильном шприце имеет форму твердой таблетки.

Настоящее изобретение относится также к способу иммунизации субъекта против болезни, который включает в себя добавление разбавителя в стерильный шприц, содержащий компактно изготовленную вакцинную композицию; причем вакцинная композиция включает в себя по меньшей мере один лиофилизированный антигенный компонент и вспомогательный агент, способствующий растворению; или компактно изготовленная вакцинная композиция в стерильном шприце дополнительно характеризуется как прессованная композиция, или прессованная композиция в стерильном шприце имеет форму твердой таблетки, так, чтобы в шприце получать раствор, и введение полученного раствора субъекту.

Растворы, которые получаются после растворения вакцинной композиции согласно настоящему изобретению, можно вводить любыми удобными способами. В способе иммунизации субъекта против болезни согласно настоящему изобретению можно применять ряд способов для введения жидкого раствора, полученного из вакцинной композиции. Примерами способов введения являются внутримышечная инъекция, подкожная инъекция, внутривенная инъекция, интраперитонеальная инъекция, глазные капли, с питьем, аэрозоль или назальный спрей. В случае, когда животное, которого иммунизируют, является птицей, указанная птица может быть недавно вылупившимся птенцом (т.е. около одного дня после вылупления), подростком или взрослой птицей. Вакцина согласно настоящему изобретению может быть пригодной для введения птицам in ovo, как описано в патенте США №4458630, выданном Sharma.

Под высушенной замораживанием (лиофилизированной) предварительно оттитрованной вакцинной композицией согласно настоящему изобретению понимают препарат, составленный по меньшей мере из одного лиофилизированного предварительно оттитрованного вакцинного компонента, наполнителей и, необязательно, вспомогательных агентов, которые компактно изготовлены или спрессованы в плотную форму.

Используемый в настоящем документе термин "плотная" относится к вакцинной композиции, имеющей плотность более 1,0 г/см³. Обычно плотность вакцинной композиции будет более 1,5 г/см³. В типичном случае пределы плотности вакцинной композиции будут составлять приблизительно от 1,5 г/см³ до 2,5 г/см³.

Вакцинная композиция может быть компактно изготовленной, прессованной или иметь форму твердой таблетки.

Используемый в настоящем документе термин "компактная" относится к вакцинной композиции, имеющей плотность более 1,0 г/см³, но не имеющей измеримой твердости в единицах Strong-Cobb (SCU) и испытанной на твердость на аппарате для определения твердости таблеток ERWEKA Tablet Hardness Tester Model TBH20.

Используемый в настоящем документе термин "прессованная" относится к вакцинной композиции, имеющей твердость по меньшей мере 2,0 SCU, а термин "твердая таблетка" относится к вакцинной композиции в форме таблетки или другой плотной формы, имеющей твердость по меньшей мере 3,0 SCU.

Плотно изготовленную, прессованную вакцинную композицию или твердые таблетки вакцинной композиции можно изготавливать на автоматизированном аппарате Manesty F3 Single Punch 12 mm Flat Beveled или с помощью стандартных 6 мм вогнутых штампов.

Вакцинную композицию в форме твердой таблетки изготавливали под давлением максимум 4 тонны. Таблетки испытывали на твердость на аппарате для определения твердости таблеток ERWEKA Tablet Hardness Tester Model TBH20, как описано выше, и было установлено, что все они имеют твердость более 3,0 SCU.

Под такой "таблеткой" обычно понимают классическую таблетку, связанную с терапевтическими агентами. Однако понятно, что под такое определение подходит также любая компактно изготовленная или прессованная плотная форма, включая те из них, которые менее часто используются в фармацевтической области. Например, большие "брикеты" будут удобны, если конечное применение требует большого объема материала.

Понятно, что препарат, который распадается или растворяется в разбавителе "полностью" или "быстро", представляет собой препарат, который способен к этому в чистой воде, даже если предусмотрено использование не чистой воды, а раствора, например физиологического раствора, или неводного носителя.

Под "полным растворением" подразумевается, что не остается нерастворенного растворимого компонента. Под "быстрым распадом или растворением" подразумевается, что распад или растворение является полным в течение приблизительно нескольких минут или менее, когда для малого объема прессованной лиофилизированной вакцинной композиции используется большой объем воды, например 100 мл воды на 400 мг шипучую таблетку. Указанное время возрастает, когда объемы разбавителя соответствующим образом уменьшаются. Таким образом, для одной и той же та