Высокомеченный тритием [3h]-ацетонид 9альфа-фторо-16альфа-гидроксипреднизолона

Высокомеченный тритием [3h]-ацетонид 9альфа-фторо-16альфа-гидроксипреднизолона

Реферат

Изобретение относится к области органической химии и может найти применение в аналитической химии, биоорганической химии, биохимии и прикладной медицине.

Для изучения физиологически активных соединений необходимы их меченые аналоги и разработка способа их получения.

Известно, что замена атомов соединений на их меченые аналоги не приводит к изменению каких-либо свойств исходного соединения, включая их биологическую активность (Evans Е.А. - Tritium and its compounds London Butterworths,1974, p.48) [1].

Известен ацетонид 9α-фторо-16α-гидроксипреднизолона формулы:

Данное соединение является известным биологически активным соединением и используется для лечения хронической астмы

(K.FIorey, Anal. Profiles Drug Subs. 1, 397 1972) [2].

Однако его меченный тритием аналог не описан.

Техническим результатом, достигаемым настоящим изобретением, является расширение ассортимента меченых аналогов физиологически активных веществ.

Достигается указанный технический результат получением нового меченого физиологически активного соединения - высокомеченного тритием [³Н]-ацетонида 9α-фторо-16α-гидроксипреднизолона формулы:

Ниже приведен пример реализации изобретения.

Пример 1.

В первую камеру реакционной двукамерной ампулы помещали катализатор: 30 мг окиси палладия и 30 мг 5% PdO/BaSO₄, в другую - 225 мкл абсолютного диоксана, 25 мкл триэтиламина и 5 мг ацетонида 9α-фторо-16α-гидроксипреднизолона. Вторую камеру замораживали жидким азотом, ампулу вакуумировали до давления 0.1 Па и заполняли газообразным тритием до давления 333 гПа. Затем первую камеру нагревали до 70°С, в результате чего окись палладия восстанавливалась. Полученная тритиевая вода перемораживалась во вторую камеру. Реакционную ампулу вакуумировали до давления 0,1 Па, продолжая нагревать первую ампулу до 70°С, и заполняли аргоном. Затем содержимое второй камеры переносили в первую камеру, которую запаивали. Таким образом, реакционная смесь состояла из восстановленного катализатора, тритиевой воды, триэтиламина и раствора ацетонида 9α-фторо-16α-гидроксипреднизолона в диоксане. Содержимое ампулы нагревали в течение 30 мин при 140°С. Затем ампулу вскрывали, реакционную смесь разбавляли 0.5 мл метанола, катализатор отделяли фильтрованием и промывали метанолом (5×1 мл). Тритиевую воду, диоксан и триэтиламин отгоняли на роторе. Лабильный тритий удаляли и полученный продукт несколько раз растворяли в метаноле (5х2 мл), упаривая последний.

Первый этап очистки полученного [³H]-ацетонида 9α-фторо-16α-гидроксипреднизолона проводили методом тонкослойной хроматографии. Реакционную смесь растворяли в 0,1 мл метанола и наносили на силикагельную пластинку Sorbfil (АО "Сорбполимер", ПТСХ-П-А-УФ). Подвижная фаза - хлороформ-ацетон (10:1) Rf=0.26. Зону, содержащую [³H]-ацетонид 9α-фторо-16α-гидроксипреднизолона, вырезали и экстрагировали метанолом (5×5 мл). Метанол упаривали и анализировали методом ВЭЖХ.

ВЭЖХ [³H]-ацетонида 9α-фторо-16α-гидроксипреднизолона проводили на колонке Kromasil 100 C₁₈, 7 мкм, 4×150 мм, в системе метанол-вода (70:30), скорость элюента - 1,0 мл/мин, время удерживания - 4,19 мин. Для приема и обработки хроматографических данных использовался программно-аппаратный комплекс "МультиХром" (ЗАО "Амперсенд", Россия) на базе IBM PC/AT. Радиоактивность измеряли на сцинтилляционном счетчике с эффективностью регистрации трития 30% в диоксановом сцинтилляторе.

Выход [³H]-ацетонида 9α-фторо-16α-гидроксипреднизолона после очистки составил 22%, молярная радиоактивность 1,3 Ки/ммоль. Радиохимическая чистота 97-99%.

Таким образом получено новое высокомеченное тритием физиологически активное соединение.

Высокомеченный тритием [³Н]-ацетонид 9α-фторо-16α-гидроксипреднизолона формулы