Способ повышения резистентности организма в эксперименте

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано для повышения резистентности организма, в том числе при проведении противоопухолевой химиотерапии. Для этого проводят забор 0,7-1,0 мл крови из вены, филграстим в дозе 10 мг/кг веса инкубируют с этой кровью 45 минут при 37°С, после чего осуществляют реинфузию. Способ обеспечивает общее повышение сопротивляемости организма за счет стимуляции образования не только нейтрофильных лейкоцитов и моноцитов, но и эритроцитов, а также снижения числа тучных клеток и ретикулярных клеток стромы, снижает токсичность противоопухолевых химиопрепаратов. 1 табл.

Реферат

Изобретение относится к медицине, точнее к способам и средствам повышения резистентности организма при различных патологических состояниях или осложнениях, вызванных применением видов лечения, проявляющих побочное токсическое действие, при лучевой терапии и химиотерапии, в частности.

Известен способ повышения резистентности организма путем улучшения качественного состава крови с применением лекарственных препаратов, таких как «Ферковен», «Феррум Лек» (М.Д.Машковский. Лекарственные средства, изд.14, М.: Новая волна, 2003).

Применение этих препаратов дает несомненное положительное воздействие на состав крови, а в конечном счете на резистентность организма.

Однако использование этих лекарственных средств имеет ряд ограничений, которые делают их применение не всегда возможным. Помимо длительности применения есть еще и противопоказания, такие как заболевания печени, коронарная недостаточность, гипертопическая болезнь II-III ст.

Известен способ улучшения качественного и количественного состава периферической крови и повышения резистентности организма, когда используют для этого нейпоген (филграстим), раствор которого вводят подкожно в рекомендованных дозах. («Регистр лекарственных средств России», выпуск 9, 2002, М., ООО «РЛС-2002»).

Однако, несмотря на положительную сторону использования нейпогена (филграстима) есть и отрицательные качества, препятствующие его применению. К ним относятся сопутствующая костная патология, заболевания почек и печени. Кроме того, при проведении химиотерапии злокачественных новообразований, он не снимает таких побочных ее проявлений как анемия и тромбоцитопения.

Целью настоящего изобретения является улучшение качества крови и кроветворения.

Поставленная цель достигается тем, что производят забор 0,7-1 мл аутокрови, соединяют ее с нейпогеном (филграстимом) в дозе 10 мкг/кг, инкубируют в течение 45 минут при 37°С, после чего вводят внутривенно.

Проведенный сопоставительный анализ известных способов повышения резистентности организма и заявляемого позволяет говорить о новизне и существенных отличиях последнего.

Новизна предлагаемого «Способа повышения резистентности организма в эксперименте» заключается в том, что нейпоген вводят в организм, предварительно растворив его в аутокрови и подвергнув инкубации.

В известных открытых источниках информации России, стран СНГ и за рубежом аналогов предлагаемому способу не обнаружено.

«Способ повышения резистентности организма в эксперименте» является промышленно применимым. Он может быть воспроизведен и многократно повторен в эксперименте и в клинике в специализированных лечебных учреждениях.

Имеющийся немногочисленный опыт клинической апробации полученных в эксперименте положительных результатов, дает основание говорить о возможном использовании нейпогена в разработанном варианте в клинической практике. Клиническая апробация способа у 3-х больных распространенным раком молочной железы с метастазами в подмышечные лимфоузлы позволила нивелировать токсические побочные проявления противоопухолевой неоадъювантной химиотерапии и провести ее полным курсом. Анализы крови и костного мозга проведенные «до» и «после» курса химиотерапии показали значительное улучшение состояния крови и миелограммы.

Способ осуществляется следующим образом.

У белой беспородной крысы-самца производят забор 0,7-1 мл аутокрови, далее соединяют ее с филграстимом (нейпогеном) в дозе 10 мкг/кг веса животною, затем раствор инкубируют в течение 45 минут при 37°С и вводят животному внутривенно. Через два дня после введения раствора животное декапитируют, извлекают костный мозг из бедренной кости животного. На предметном стекле фиксируют мазки кусочков костного мозга, окрашивают краской Май-Грюнвальда-Романовского, исследуют под микроскопом, подсчитывают количество каждого вида клеток и составляют миелограмму.

Пример конкретного выполнения способа.

У крысы-самца, белого, беспородного, весом 200 г производили забор 0,7-1 мл крови и соединяли ее с нейпогеном (филграстимом) из расчета 10 мкг/кг, затем инкубировали смесь в течение 45 минут при 37°С, после чего вводили той же крысе внутривенно. Через два дня после введения инкубированной смеси нейпогена и аутокрови, животное декапитировали, извлекали костно-мозговое вещество из бедренной кости, готовили на предметном стекле мазки костного мозга, обрабатывали их красителем-фиксатором Май-Грюнвальда-Романовского. Далее проводили микроскопический анализ мазков костного мозга и подсчет количества каждого вида клеток в поле зрения, составляли миелограмму. Результаты, представленные в миелограмме показали, что предлагаемый способ введения нейпогена (филграстима) стимулирует не только образование нейтрофильных лейкоцитов и моноцитов, но и эритроцитов, а снижение числа плазматических, тучных клеток и ретикулярных клеток стромы указывает, что метод не оказывает какого-либо токсического или аллергизирующего влияния.

Технико-экономическая эффективность заявляемого «Способа повышения резистентности организма в эксперименте» состоит в возможности:

- повысить общую сопротивляемость организма за счет улучшения кроветворения;

- свести к минимуму или исключить вообще токсические побочные проявления противоопухолевых химиопрепаратов.

Табл.1Миелограмма (%)
Вид клетокКонтроль, п=10Внутривенно нейпоген на 5% глюкозе, п=7Внутривенно нейпоген на аутокрови, п=7
Миелобласты2,8±0,193,31±0,212,99±0,16
Промиелоциты3,91±0,284,25±0,264,03±0,25
Миелоциты6,03±0,46,52±0,445,98±0,34
Метамиелоциты6,09±0,527,26±0,517,01±0,48
Палочкоядерные лейкоциты21,22±2,7822,13±2,1121,8±1,89
Сегментоядерные лейкоциты19,6±1,1919,55±1,7418,17±1,53
В том числе эозинофилы6,44±0,366,0±0,425,45±0,37
Эритробласты, пронормоциты1,91±0,121,83±0,132,16±0,17
Нормоциты базофильные6,67±0,445,09±0,32*7,15±0,54**
Нормоциты полихроматофильн.12,23±1,078,59±0,54*13,38±1,09**
Нормоциты оксифильные0,82±0,040,33±6,01*0,46±0,02* **
Лимфоциты и их бласты13,25±1,0513,86±1,0712,35±1,05
Моноциты и их бласты2,53±0,143,55±0,16*2,81±0,12**
Плазматические клетки, бласты0,4±0,020,48±0,020,23±0,01* **
Мегакарциоциты0,96±0,050,5±0,02*0,47±0,02*
Ретикулярные клетки стромы0,79±0,030,73±0,040,02±0,01* **
Макрофаги0,71±0,051,91±0,15*0,98±0,06*
Тучные клетки0,08±0,010,11±0,010,01±0,01* **
* - достоверно отличается от контрольной группы, р<0,05
** - достоверно отличается от обычного введения препарата на 5%-ной глюкозе, р<0,05

Способ повышения резистентности организма в эксперименте, заключающийся в том, что проводят забор 0,7-1,0 мл крови из вены, филграстим в дозе 10 мг/кг веса инкубируют с этой кровью 45 мин при 37°С, после чего осуществляют реинфузию.