Способ повышения резистентности организма в эксперименте
Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано для повышения резистентности организма, в том числе при проведении противоопухолевой химиотерапии. Для этого проводят забор 0,7-1,0 мл крови из вены, филграстим в дозе 10 мг/кг веса инкубируют с этой кровью 45 минут при 37°С, после чего осуществляют реинфузию. Способ обеспечивает общее повышение сопротивляемости организма за счет стимуляции образования не только нейтрофильных лейкоцитов и моноцитов, но и эритроцитов, а также снижения числа тучных клеток и ретикулярных клеток стромы, снижает токсичность противоопухолевых химиопрепаратов. 1 табл.
Реферат
Изобретение относится к медицине, точнее к способам и средствам повышения резистентности организма при различных патологических состояниях или осложнениях, вызванных применением видов лечения, проявляющих побочное токсическое действие, при лучевой терапии и химиотерапии, в частности.
Известен способ повышения резистентности организма путем улучшения качественного состава крови с применением лекарственных препаратов, таких как «Ферковен», «Феррум Лек» (М.Д.Машковский. Лекарственные средства, изд.14, М.: Новая волна, 2003).
Применение этих препаратов дает несомненное положительное воздействие на состав крови, а в конечном счете на резистентность организма.
Однако использование этих лекарственных средств имеет ряд ограничений, которые делают их применение не всегда возможным. Помимо длительности применения есть еще и противопоказания, такие как заболевания печени, коронарная недостаточность, гипертопическая болезнь II-III ст.
Известен способ улучшения качественного и количественного состава периферической крови и повышения резистентности организма, когда используют для этого нейпоген (филграстим), раствор которого вводят подкожно в рекомендованных дозах. («Регистр лекарственных средств России», выпуск 9, 2002, М., ООО «РЛС-2002»).
Однако, несмотря на положительную сторону использования нейпогена (филграстима) есть и отрицательные качества, препятствующие его применению. К ним относятся сопутствующая костная патология, заболевания почек и печени. Кроме того, при проведении химиотерапии злокачественных новообразований, он не снимает таких побочных ее проявлений как анемия и тромбоцитопения.
Целью настоящего изобретения является улучшение качества крови и кроветворения.
Поставленная цель достигается тем, что производят забор 0,7-1 мл аутокрови, соединяют ее с нейпогеном (филграстимом) в дозе 10 мкг/кг, инкубируют в течение 45 минут при 37°С, после чего вводят внутривенно.
Проведенный сопоставительный анализ известных способов повышения резистентности организма и заявляемого позволяет говорить о новизне и существенных отличиях последнего.
Новизна предлагаемого «Способа повышения резистентности организма в эксперименте» заключается в том, что нейпоген вводят в организм, предварительно растворив его в аутокрови и подвергнув инкубации.
В известных открытых источниках информации России, стран СНГ и за рубежом аналогов предлагаемому способу не обнаружено.
«Способ повышения резистентности организма в эксперименте» является промышленно применимым. Он может быть воспроизведен и многократно повторен в эксперименте и в клинике в специализированных лечебных учреждениях.
Имеющийся немногочисленный опыт клинической апробации полученных в эксперименте положительных результатов, дает основание говорить о возможном использовании нейпогена в разработанном варианте в клинической практике. Клиническая апробация способа у 3-х больных распространенным раком молочной железы с метастазами в подмышечные лимфоузлы позволила нивелировать токсические побочные проявления противоопухолевой неоадъювантной химиотерапии и провести ее полным курсом. Анализы крови и костного мозга проведенные «до» и «после» курса химиотерапии показали значительное улучшение состояния крови и миелограммы.
Способ осуществляется следующим образом.
У белой беспородной крысы-самца производят забор 0,7-1 мл аутокрови, далее соединяют ее с филграстимом (нейпогеном) в дозе 10 мкг/кг веса животною, затем раствор инкубируют в течение 45 минут при 37°С и вводят животному внутривенно. Через два дня после введения раствора животное декапитируют, извлекают костный мозг из бедренной кости животного. На предметном стекле фиксируют мазки кусочков костного мозга, окрашивают краской Май-Грюнвальда-Романовского, исследуют под микроскопом, подсчитывают количество каждого вида клеток и составляют миелограмму.
Пример конкретного выполнения способа.
У крысы-самца, белого, беспородного, весом 200 г производили забор 0,7-1 мл крови и соединяли ее с нейпогеном (филграстимом) из расчета 10 мкг/кг, затем инкубировали смесь в течение 45 минут при 37°С, после чего вводили той же крысе внутривенно. Через два дня после введения инкубированной смеси нейпогена и аутокрови, животное декапитировали, извлекали костно-мозговое вещество из бедренной кости, готовили на предметном стекле мазки костного мозга, обрабатывали их красителем-фиксатором Май-Грюнвальда-Романовского. Далее проводили микроскопический анализ мазков костного мозга и подсчет количества каждого вида клеток в поле зрения, составляли миелограмму. Результаты, представленные в миелограмме показали, что предлагаемый способ введения нейпогена (филграстима) стимулирует не только образование нейтрофильных лейкоцитов и моноцитов, но и эритроцитов, а снижение числа плазматических, тучных клеток и ретикулярных клеток стромы указывает, что метод не оказывает какого-либо токсического или аллергизирующего влияния.
Технико-экономическая эффективность заявляемого «Способа повышения резистентности организма в эксперименте» состоит в возможности:
- повысить общую сопротивляемость организма за счет улучшения кроветворения;
- свести к минимуму или исключить вообще токсические побочные проявления противоопухолевых химиопрепаратов.
Табл.1Миелограмма (%) | |||
Вид клеток | Контроль, п=10 | Внутривенно нейпоген на 5% глюкозе, п=7 | Внутривенно нейпоген на аутокрови, п=7 |
Миелобласты | 2,8±0,19 | 3,31±0,21 | 2,99±0,16 |
Промиелоциты | 3,91±0,28 | 4,25±0,26 | 4,03±0,25 |
Миелоциты | 6,03±0,4 | 6,52±0,44 | 5,98±0,34 |
Метамиелоциты | 6,09±0,52 | 7,26±0,51 | 7,01±0,48 |
Палочкоядерные лейкоциты | 21,22±2,78 | 22,13±2,11 | 21,8±1,89 |
Сегментоядерные лейкоциты | 19,6±1,19 | 19,55±1,74 | 18,17±1,53 |
В том числе эозинофилы | 6,44±0,36 | 6,0±0,42 | 5,45±0,37 |
Эритробласты, пронормоциты | 1,91±0,12 | 1,83±0,13 | 2,16±0,17 |
Нормоциты базофильные | 6,67±0,44 | 5,09±0,32* | 7,15±0,54** |
Нормоциты полихроматофильн. | 12,23±1,07 | 8,59±0,54* | 13,38±1,09** |
Нормоциты оксифильные | 0,82±0,04 | 0,33±6,01* | 0,46±0,02* ** |
Лимфоциты и их бласты | 13,25±1,05 | 13,86±1,07 | 12,35±1,05 |
Моноциты и их бласты | 2,53±0,14 | 3,55±0,16* | 2,81±0,12** |
Плазматические клетки, бласты | 0,4±0,02 | 0,48±0,02 | 0,23±0,01* ** |
Мегакарциоциты | 0,96±0,05 | 0,5±0,02* | 0,47±0,02* |
Ретикулярные клетки стромы | 0,79±0,03 | 0,73±0,04 | 0,02±0,01* ** |
Макрофаги | 0,71±0,05 | 1,91±0,15* | 0,98±0,06* |
Тучные клетки | 0,08±0,01 | 0,11±0,01 | 0,01±0,01* ** |
* - достоверно отличается от контрольной группы, р<0,05 | |||
** - достоверно отличается от обычного введения препарата на 5%-ной глюкозе, р<0,05 |
Способ повышения резистентности организма в эксперименте, заключающийся в том, что проводят забор 0,7-1,0 мл крови из вены, филграстим в дозе 10 мг/кг веса инкубируют с этой кровью 45 мин при 37°С, после чего осуществляют реинфузию.