Способ стимуляции репаративной регенерации сухожилий и связок

Способ стимуляции репаративной регенерации сухожилий и связок

Реферат

Изобретение относится к области медицины, а именно к восстановлению поврежденных сухожилий и связок методом трансплантации тканей.

Основными факторами, способствующими регенерации поврежденного сухожилия, являются следующие: сохранение иннервации и внутриорганной сосудистой сети, благоприятное состояние окружающих мягких тканей, воспринимающего ложа, отсутствие инфекции, рубцов и хорошее кровоснабжение.

Известны методы трансплантации стволовых клеток (Awad et al., 1999; Smith et al., 2003; Young et al., 1998) и генетического материала (Mulligan, 1993; Lou et al., 1997; Nakamura et al., 1998) для стимуляции репаративной регенерации сухожилия, однако они недостаточно изучены и апробированы.

Известно применение аллотрансплантатов для восстановления сухожилий (Лаврищева Г.И., Морфологические и клинические аспекты репаративной регенерации опорных органов и тканей. - М.: Медицина, 1996, с.49-57, с.176-181; Аллопластика в хирургии опорно-двигательного аппарата Г.Д.Никитин, В.Н.Ефимов, С.А.Линин, 1985, т.134, № 5, с.114-118).

К недостаткам известных способов репаративной регенерации сухожилия можно отнести антигенную активность трансплантатов, послеоперационные спаечные процессы с окружающими сухожилие тканями.

Наиболее близким к предложенному является метод локального введения биоматериала на основе нативного коллагена (Муслимов С.А. Морфологические аспекты регенеративной хирургии. - Уфа: Башкортостан, - 2000. - 168 с.). При этом достигается медленная направленная репаративная регенерация сухожилия.

Однако нативный солерастворимый коллаген не является адекватным модулятором регенерации, и известный метод требует довольно долгого периода иммобилизации.

Задачей изобретения является уменьшение периода иммобилизации пациента и формирование адекватного регенерата за счет эффективной стимуляции регенерации сухожилий и связок.

Поставленная задача решается способом стимуляции репаративной регенерации сухожилий и связок, включающим инъекционное введение в поврежденную область трансплантата на основе биоматериала. В отличие от прототипа в качестве трансплантата используют диспергированный биоматериал «Аллоплант» (ДБМА)- стимулятор регенерации с преимущественным содержанием гиалуроновой кислоты во внеклеточном матриксе, который разводят в растворе местного анальгезирующего средства в соотношении 150-300 мг биоматериала на 10 мл раствора, а инъекции осуществляют перифокально в количестве 1-6. В качестве анальгезирующего средства можно использовать лидокаин, новокаин и др.

Свойства биоматериала «Аллоплант» (ТУ 42-2-537-2002), получаемого из донорской трупной ткани путем соответствующей обработки, позволяют успешно использовать его в регенеративной хирургии (патент РФ № 2189257, МПК А 61 L 27/00, опубл. 20.09.2002 г.)

Известно использование диспергированного биоматериала «Аллоплант» для инъекционного введения в биологически активные точки и зоны с целью лечения и профилактики различных заболеваний (патент РФ № 2238076, МПК А 61 Н 39/08, А 61 К 35/12, опубл. 20.10.2004 г.).

Предложенный способ обеспечивает получение нового терапевтического эффекта при репаративной регенерации сухожилий и связок. Этот эффект обусловлен воздействием на травмированные ткани гликозаминогликанов (ГАГ) - основных экстрактивных веществ биоматериала «Аллоплант» - стимулятора регенерации. При введении его в мягкие ткани идет высвобождение некоторого количества ГАГ из трансплантата за счет экстрагирования тканевыми жидкостями. Происходит деградация коллагеновых волокон ДБМА и фагоцитоз лизированных фрагментов макрофагами, что способствует формированию коллагеновых волокон сухожилия. Постепенно происходит полная резорбция частиц ДБМА, и они замещаются новообразованной плотной соединительной тканью, по структуре мало отличающейся от окружающей. Таким образом, вещества, экстрагируемые из ДБМА, а также освобождающиеся при его биологической деградации, стимулируют регенерацию сухожилия.

Способ осуществляют следующим образом. Для инъекционного введения в травмированную область сухожилия или связки готовят жидкую форму из диспергированного биоматериала «Аллоплант» - стимулятора регенерации (ТУ 42-2-537-2002). Для этого 150-300 мг биоматериала разводят в 10 мл раствора местного анальгезирующего средства, после чего производят перифокальное обкалывание области травмы в 1-6 точках. В качестве анальгезирующего средства можно использовать лидокаин, новокаин и др. Концентрация ДБМА и количество обкалываемых точек зависит от тяжести травмы.

Для апробации способа была проведено 2 серии экспериментов на крысах. После разреза кожи над пяточным сухожилием наносили насечку на ¹/₂ его ширины. Область травмы обкалывали диспергированным биоматериалом «Аллоплант» - стимулятором регенерации в опытной серии и нативным коллагеном в контрольной серии. На кожные покровы накладывались швы.

В контроле с использованием нативного коллагена появившиеся в ранние (3 суток) аргирофильные волокна образуют беспорядочную сеть у краев раны сухожилия, фибробласты и макрофаги также сосредотачиваются в этой области. Через 7-14 дней имеется уже значительное новообразование волокон, которые располагаются более упорядоченно.

На 30 сутки происходило образование фиброзного рубца. В более поздние сроки на 60-90 сутки новообразованная ткань постепенно превращалась в сухожильноподобную, но отличалась от неповрежденного сухожилия более узкими пучками первого порядка, большим количеством клеточных элементов (в том числе менее дифференцированных). Это свидетельствует о незавершенности процесса формирования регенерата.

В опытной серии с использованием ДБМА - стимулятора регенерации были получены следующие результаты. В ранние сроки эксперимента (3-4 суток после введения) наблюдалась полиморфноклеточная инфильтрация ДБМА, наиболее выраженная в области введения. В эти же сроки обнаруживались набухание и гомогенизация коллагеновых волокон ДБМА, свидетельствующие о начинающейся деградации введенных частиц.

Область дефекта заполнялась гелеобразным аморфным матриксом в ранние сроки. В дальнейшем на 7 сутки деградация коллагеновых волокон ДБМА и фагоцитоз лизированных ферментов макрофагами приобретают более интенсивный характер. Наибольшая концентрация макрофагов наблюдалась в зоне контакта частиц ДБМА с окружающими тканями. Примечательно, что макрофаги, фагоцитировавшие продукты распада коллагеновых волокон ДБМА, обнаруживались также в окружающих тканях, что свидетельствует об их миграции. В эти же сроки можно было наблюдать начальное формирование коллагеновых волокон сухожилия.

Далее на 14 сутки формировались более развитые пучки волокон коллагена, окрашивающиеся в красный цвет по Ван-Гизону.

В последующие сроки (30 суток) происходила полная резорбция частиц ДБМА, и они уже гистологически не обнаруживались. Большая часть резорбированного ДБМА замещалась новообразованной плотной соединительной тканью, по структуре мало отличающейся от окружающей.

Таким образом, результаты данного эксперимента свидетельствуют о том, что введенный ДБМА подвергается активной резорбции макрофагами. Вещества, экстрагируемые из ДБМА, а также освобождающиеся при его биологической деградации, стимулируют регенерацию сухожилия.

Результаты экспериментальных исследований позволили перейти к клинической апробации данного метода.

Клинические испытания проведены на 5 пациентах с повреждениями опорно-двигательного аппарата.

Больной К., 19 лет, обратился в отделение травматологии больницы № 10 города Уфы с жалобами на боль в правом коленном суставе при сгибании.

Диагноз: повреждение латеральной коллатеральной связки коленного, сустава.

Больному было проведено обкалывание области повреждения ДБМА - стимулятором регенерации, разведенным на лидокаине - 200 мг препарата на 10 мл 2% раствора лидокаина. Инъекции осуществляли однократно перифокально в 4 точки по 2,5 мл.

Больная Г., 28 лет, обратилась в отделение травматологии больницы № 10 города Уфы с жалобами болезненность в области ахиллова сухожилия левой ноги при ходьбе.

Диагноз: подкожный частичный разрыв ахиллова сухожилия.

Больной было проведено обкалывание области травмы ДБМА - стимулятором регенерации, разведенным на лидокаине - 250 мг препарата на 10 мл 2% раствора лидокаина. Инъекции осуществляли перифокально в 5 точек по 2 мл.

Больной Ш., 35 лет, обратился в отделение травматологии больницы № 10 города Уфы с жалобами на отсутствие полноты движений в правой ноге при ходьбе.

Диагноз: частичное повреждение четырехглавой мышцы бедра.

Больному было проведено обкалывание области повреждения ДБМА - стимулятором регенерации, разведенным на лидокаине -200 мг препарата на 10 мл 2% раствора лидокаина. Инъекции осуществляли перифокально в 5 точек по 2 мл.

Больной М., 22 года, обратился в отделение травматологии больницы № 10 города Уфы с жалобами на отсутствие активных сгибательных движений III пальца кисти.

Диагноз: повреждение сухожилий сгибателей III пальца правой кисти в пределах дистальной поперечной складки ладони.

Больному было проведено обкалывание области повреждения ДБМА - стимулятором регенерации, разведенным на лидокаине - 250 мг препарата на 10 мл 2% раствора лидокаина. Инъекции осуществляли перифокально в 2 точки по 5 мл.

Больная Р., 38 лет, обратилась в отделение травматологии больницы № 10 города Уфы с жалобами на боль при сгибании в правом коленном суставе.

Диагноз: частичное повреждение медиальной коллатеральной связки коленного сустава.

Больной было проведено обкалывание области травмы ДБМА - стимулятором регенерации, разведенным на лидокаине - 200 мг препарата на 10 мл 2% раствора лидокаина. Инъекции осуществляли перифокально в 4 точки по 2,5 мл.

Во всех описанных случаях был получен хороший клинический эффект - относительно раннее и полное восстановление объема движений. В ранние сроки пациенты могли получать физическую нагрузку в отделе реабилитации больницы №10 города Уфы.

Таким образом, предложенное изобретение позволяет эффективно стимулировать регенерацию сухожилия и связок, благодаря чему уменьшается период иммобилизации пациента.

1. Способ стимуляции репаративной регенерации сухожилий и связок, включающий инъекционное введение в поврежденную область биоматериала, отличающийся тем, что в качестве биоматериала используют диспергированный биоматериал «Аллоплант» - стимулятор регенерации с преимущественным содержанием гиалуроновой кислоты во внеклеточном матриксе, разведенный в растворе местного анальгезирующего средства в отношении 150-300 мг биоматериала «Аллоплант» на 10 мл раствора, причем инъекции осуществляют перифокально в 1-6 точек.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве анальгезирующего средства используют лидокаин или новокаин или др.