Антитромботическое, антикоагулянтное, фибриндеполимеризационное, фибринолитическое средства для внутривенного введения

Антитромботическое, антикоагулянтное, фибриндеполимеризационное, фибринолитическое средства для внутривенного введения

Реферат

Изобретение относится к медицине, к средствам, обладающим антикоагулянтной, фибриндеполимеризационной, фибринолитической и антитромботической активностью.

Известно, что ацетилсалициловая кислота обладает антитромбоцитарной активностью и слабым фибриндеполимеризационньм действием (МсКее S.A., Sane D.C., Deliargyris E.N. Aspirin resistance in cardiovascular disease: a review of prevalence mechanisms, and clinical significance // Thromb. Haemost. (Schattauer). 2002. V.88. №5. P.711-715 [1].

Однако она не обнаруживает антикоагулянтной активности и вызывает нежелательные побочные явления - кровоточивость со стороны желудочно-кишечного тракта.

Известен плазмин, обладающий только фибринолитической активностью (Gitabert J., Estelies A., Grancella S., Espana F., Aznar J. Fibrinolytic system and reproductive process with special reference to fibrinolytic failure in preeclampsia // Hum.Reprod. 1995. V.10. Suppl.2. P.121-131) [2].

Однако он не проявляет антикоагулянтной, антитромбоцитарной и антитромботической, фибриндеполимеризационной активностей.

Известны пептиды, продукты расщепления фибриногена, содержащие последовательность трех аминокислот RGD (аргинил-глицил-аспарагиновая кислота) и обладающие антитромботической и антитромбоцитарной активностью и усиливающие локальный фибринолиз (Standker L., Sillard R., Bensch K.W., Ruf A., Raida M., Schulz-Knappe P., Shenky A.G., Patscheke H., Forssmann W.-G. In vivo degradation of humnan fibrinogen Aα.: detection of cleavage sites and release of antithrombotic peptides // Biochem.biophys.research communications. 1995. V.215. №3. P.826-832) [3].

Однако эти известные пептиды не обладают антикоагулянтной активностью.

Известным средством антикоагулянтного действия является гепарин (Zaman S.M., Neiring P., Gandhi M.R., Gaines P.A. The pharmacokinetics and US usage of heparin in vascular intervention// Clin.Radiol. 1996. V.51. №2. P.113-116) [4]. Его применяют путем подкожного и внутримышечного введения.

Однако гепарин имеет следующие недостатки:

1) не обладает антитромбоцитарными свойствами,

2) не обладает фибринолитическим действием,

3) при передозировке высокомолекулярные фракции могут вызвать нежелательные побочные явления кровоточивости.

Известен пептид семакс Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro (патент RU 2045958, А 61 К 38/08, опубл. 20.10.95) [5].

Однако его влияние на процессы свертывания крови не описано.

Техническим результатом, достигаемым настоящим изобретением, является рекомендация известного пептида к применению в качестве средства широкого спектра действия на процессы свертывания крови.

Указанный технический результат достигается тем, что пептид семакс рекомендован к применению в качестве средства, обладающего комплексом свойств: антикоагулянтной, фибриндеполимеризационной, фибринолитической и антитромботической активностями, при его внутривенном введении.

Ниже приведен пример, иллюстрирующий изобретение.

Пример.

Берут 1 мг препарата пептида семакс - Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, растворяют в 2,5 мл физиологического раствора и вводят внутривенно в v.jugularis 5-ти лабораторным крысам по 0,5 мл (200 мкг) на 200 г массы тела. Контрольным животным тем же способом вводят 0,85% раствор NaCl в дозе 0,5 мл на 200 г массы тела. Через 10 мин берут кровь и центрифугируют ее при 1000 об/мин в течение 5 мин для получения богатой тромбоцитами плазмы (для анализа агрегации тромбоцитов), затем дополнительно центрифугируют кровь в течение 10 мин при 2000 об/мин и получают плазму, бедную тромбоцитами.

В богатой тромбоцитами плазме агрегация тромбоцитов в опытных пробах составляла 63%, в то время как в контроле - 100%, т.е. семакс обладает антитромбоцитарной активностью при его внутривенном введении. В бедной тромбоцитами плазме обнаружено увеличение общей фибринолитической активности в 1,8 раза за счет увеличения активности тканевого активатора плазминогена в 2,2 раза, антикоагулянтной активности - в 1,5 раза, фибриндеполимеризационной активности - в 2,5 раза по сравнению с контролем (физиологическим раствором). Кроме того, пептид семакс проявляет высокую антитромботическую активность, превышающую антитромботические свойства плазмы крови здоровых крыс в 4 раза: в контроле вес тромбов составлял 1,6 мг, в опыте - 0,40 мг.

Таким образом, известный пептид семакс при его внутривенном введении обладает антикоагулянтной, фибриндеполимеризационной, фибринолитической и антитромботической активностями.

В таблице представлены данные, свидетельствующие о преимуществах заявленного пептида семакс (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro) по сравнению с эталонными препаратами комплекса гепарин-фибриноген и три- и тетрапептидами (Pro-Gly-Pro и Gly-Pro-Gly-Gly).

Таблица
Активности	Семакс Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro	Комплекс фибриноген-гепарина (прототип)	Pro-Gly-Pro (прототип)	Gly-Pro-Gly-Gly (прототип)
In vitroАнтикоагулянтная	100%	140%	122-140%	118%
Фибринолитическая (суммарная)	9-12 мм2	30-36 мм2	36-42 мм2	24 мм2
Антитромбоцитарная	67%	-	83%	75%
In vivo
Внутривенное введение
Антикоагулянтная активность	126%	135%	173%	100%
Фибринолитическая неферментативная активность	200%	140%	173%	100%
Активность тканевого активатора плазмино-гена	132%	103%	220%	100%
Агрегация тромбоцитов	65°o	-	83%	100%
Антитромботическая активность (по весу тромбов)	25%	48%	-	-

Таким образом, из таблицы видно, что заявленный пептид семакс (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro) имеет преимущества перед препаратами комплекса фиориноген-гепарин и пептидами Pro-Gly-Pro и Gly-Pro-Gly-Gly по степени увеличения антитромбоцитарной активности в условиях in vitro; при внутривенном введении антитромботическая, антикоагулянтная, фибриндеполимеризационная, фибринолитическая активности заявленного пептида семакс (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro) превышают те же активности эталонного тетрапептида Gly-Pro-Gly-Gly и комплекса фибриноген-гепарин.

Применение пептида семакса формулы Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro в качестве антитромботического, антикоагулянтного, фибриндеполимеризационного и фибринолитического средства для внутривенного введения.