Способ лабораторной диагностики внутриутробной инфекции

Способ лабораторной диагностики внутриутробной инфекции

Реферат

Область применения

Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике.

Уровень техники

Аналогами данного изобретения являются описанные в литературе методы исследования, имеющие своей целью лабораторную диагностику внутриутробной инфекции (ВУИ) на основании цитологических и микробиологических методов исследования. По мазкам отпечаткам, взятым раздельно из ворсинчатого хориона, амниотической и децидуальной оболочек можно судить о состоянии клеток, обнаружить бактериальную микрофлору и фуксинофильные включения, характерные для вирусных инфекций (2). При исследовании мазков, образцов крови иммунофлюоресцентным методом и с помощью полимеразной цепной реакции можно выявлять антигены различных микроорганизмов (1, 3, 4, 5). Недостатком цитологических и микробиологических исследований является субъективная оценка и описательный характер диагностических критериев, а также при использовании методов обнаружения возбудителя или антигена имеется вероятность получения ложноположительных или ложноотрицательных результатов.

Прототипом предложенного изобретения является описанный в отечественной литературе способ прогнозирования внутриутробной инфекции, заключающийся в определении концентрации фибронектина, С-реактивного белка и интерлейкина 6 (ИЛ-6) в сыворотке крови новорожденных (6). Несмотря на высокую степень информативности, диагностика данным способом проводится после рождения ребенка, что не позволяет прогнозировать развитие данной патологии на доклиническом этапе исследования (в антенатальный период).

Сущность изобретения

Цель изобретения заключается в разработке способа прогнозирования внутриутробной инфекции в течение беременности на основании лабораторного исследования сыворотки крови, ориентированного на определение концентрации интерлейкина 8 (ИЛ-8), интерферонов и γ (ИНФ-, ИНФ-γ), церрулоплазмина.

Способ осуществляют следующим образом.

Исследование крови проводят натощак, в утренние часы. Венозную кровь в количестве 5 мл забирают в сухую чистую пробирку для исследования концентрации интерлейкина 8 (ИЛ-8), интерферонов и γ (ИНФ-, ИНФ-γ) методом иммуноферментного анализа и церрулоплазмина турбидимитрическим методом исследования. Оценку уровня ИНФ-α и ИНФ-γ проводят на тест-системах "Протеиновый контур" (Россия) согласно инструкции фирмы производителя. Количество ИЛ-8 определяют с использованием наборов «Human» (США), исследование концентрации церрулоплазмина на тест-системах фирмы «SPINREACT» (Испания). Измерение оптической плотности образцов выполняют на анализаторе "VICTOR²".

На основании математической обработки полученных результатов исследования методом дискриминантного анализа сформировано правило лабораторного прогнозирования внутриутробной инфекции у беременных, которое заключается в определении диагностического индекса (D) по формуле:

D=X1·K₁+X2·К₂+Х3·К₃+Х4·К₄+const,

где значения Х соответствуют иммунологическим параметрам:

X1 - интерлейкина 8, пг/мл

Х2 - уровень интерферона - γ, пг/мл

Х3 - количество интерферона -, пг/мл

Х4 - количество церрулоплазмина, мг/дл

K₁=0,05

К₂=0,01

К₃=0,01

К₄=0,03

и const=- 3,32.

При D<0 делают заключение об отсутствии лабораторных признаков внутриутробной инфекции. При D>0 диагностируют наличие лабораторных признаков развития данной патологии.

Предлагаемый способ дает вероятность правильной классификации (специфичность метода) - 100,0% для нормы, для патологии (информативность метода) - 81,8,0%. Эффективность метода 98,4%.

Пример 1. Маркс Е.А. (истор. родов 5828), 25 лет, проходила обследование в однодневном стационаре отделения патологии беременных в сроке 27 недель. Диагноз при поступлении: хроническая фетоплацентарная недостаточность, хламидиоз, трихомонадный кольпит (санированы). При обследовании на урогенитальную инфекцию обнаружены антитела к хламидиям. Титр IgG составил 1/40 (ИФА), антитела класса IgM не обнаружены. Результат полимеразной цепной реакции (ПЦР) - положительный. При дополнительном иммунологическом обследовании получены следующие результаты: интерлейкин 8 - 12,1 пг/мл; ИНФ-γ - 45,76 пг/мл; ИНФ- - 5,92 пг/мл; церрулоплазмин - 58,1 мг/дл. По формуле определили значение диагностического индекса (D).

D=12,1·0,05+45,76·0,01+5,92·0,01+58,1·0,03-3,32=-0,46; иммунологических данных за развитие внутриутробной инфекции не выявлено. Беременность закончилась физиологическими родами в сроке 38-39 недель. Диагноз новорожденного: практически здоров, группа риска по ВУИ.

Пример 2. Старостенко М.Н. (истор. родов №7087), 40 лет. Поступила на обследование в отделение патологии беременных. Диагноз при поступлении беременность 35-36 недель, отягощенный акушерский анамнез (бесплодие, железисто-кистозная гиперплазия), хроническая внутриматочная инфекция (ВПГ, ЦМВ) пролечена. По данным УЗИ внутриутробные пороки развития плода не выявлены. При обследовании на урогенитальную инфекцию обнаружены антитела к цитомегаловирусу (ЦМВ) и вирусу простого герпеса (ВПГ). Титр ЦМВ IgG составил 1/1600, IgM - положительный результат (ИФА), ВПГ - IgG - 1/6400, антитела класса IgM не обнаружены. Проведено дополнительное иммунологическое обследование: интерлейкин 8 - 48,95 пг/мл; ИНФ-γ - 57,48 пг/мл; ИНФ - 25,4 пг/мл; церрулоплазмин - 93,19 мг/дл. По формуле определили значение диагностического индекса (D).

D=48,95·0,05+57,48·0,01+25,4·0,01+93,19·0,03-3,32=2,74; следовательно имеются иммунологические признаки внутриутробной инфекции. Пациентка выделена в группу риска по развитию данной патологии.

Клинический диагноз новорожденного Старостенко (ист.развития новорожденного №57087): «Инфекция перинатального периода (везикулез, гипоксически-токсическое поражение ЦНС), ринит, конъюгационная желтуха».

Пример 3. Сафонова И.Р. (истор. родов №1002), 28 лет. Наблюдалась в однодневном стационаре отделения патологии беременности с 12 недель. При обследовании на урогенитальную инфекцию обнаружены антитела к хламидиям. Титр IgG составил 1/60 (ИФА), антитела класса IgM не обнаружены Результат полимеразной цепной реакции (ПЦР) - положительный. Проведено соответствующее лечение.

В сроке 30 недель результаты в ИФА и ПЦР отрицательные (хламидии не обнаружены). Диагноз: Беременность 30 недель, ОАА (беспл.1), НЦД по гиперт.типу, пиелонефрит, ожирение (2 степень), бактериальный вагиноз, диффузное увеличение щитовидной железы. При дополнительном иммунологическом обследовании сыворотки крови получены следующие показатели: интерлейкин 8 - 31,35 пг/мл; ИНФ-γ - 0,0 пг/мл; ИНФ- - 10,81 пг/мл; церрулоплазмин - 88,57 мг/дл. По формуле определили значение диагностического индекса (D).

D=31,35·0,05+0,0·0,01+10,81·0,01+88,57·0,03-3,32=1,01; следовательно имеются иммунологические признаки внутриутробной инфекции. Пациентка выделена в группу риска по развитию внутриутробной инфекции.

Клинический диагноз новорожденного Сафонова (ист.развития новорожденного №51072): Инфекция перинатального периода (дообследование на ВУИ), анемия, хроническая гипоксия легкой степени тяжести, морфофункциональная незрелость.

Таким образом, предлагаемый способ дает возможность выявить лабораторные признаки, характерные для развития внутриутробной инфекции в течение беременности, и повысить эффективность диагностики данной патологии.

Источники информации

1. Дегтярев Д.Н., Дегтярева М.В., Ковтун И.Ю., Шаламова Л.В. Принципы диагностики внутриутробных вирусных инфекций и тактика ведения детей группы риска / Перинатология сегодня. - №3. - 1997. - С.18-24.

2. Пустотина О.А., Бубнова Н.И. Диагностика внутриутробной инфекции (компоненты последа и амниотической жидкости // Акуш. и гин. - 1999. - №4. - С.3-4.

3. Радзинский В.Е. Беременность при урогенитальном хламидиозе / В.Е.Радзинский, Т.Г.Тареева, А.В.Микаелян, И.И.Антипова, Л.Э.Кузьменко, Е.Ю.Цветаева, И.И.Федотова // Вест. Рос. Ассоц. Акуш. гинекол. - 1996. - №4. - С.105-111;

4. Царегородцев А.А. Заболеваемость новорожденных внутриутробными инфекциями и задачи по ее снижению в Российской Федерации / А.А.Царегородцев, И.И.Рюмина // Рос. вестн. перинат. и педиатр. - 2001. - №2. - С.4-7.

5. Dong Z.W. Detection of Chlamydia trachomatis intrauterine infection using polymerase chain reaction on chorionic villi/Z.W.Dong, Li Y., L.Y.Zhang, R.M. // Int. J.Gynaecol. Obstet. - 1998. - Vol.61 (1). - P.29-32.

6. Szczapa J.The concentration of fibronectin and interleykin - 6 in blood serum of neonates with intrauterine infection / J.Szczapa., K.Drews, L.Zak et al. // Вестник медицины. - 1997. - №1.

Способ прогнозирования внутриутробной инфекции, отличающийся тем, что в сыворотке крови у беременных женщин определяют концентрацию интерлейкина 8 (ИЛ-8), интерферонов α и γ (ИНФ-α, ИНФ-γ), церрулоплазмина и вычисляют диагностический показатель (D) по формуле

D=X1×K₁+X2×К₂+Х3×К₃+Х4×K₄+const,

где X1 - интерлейкина 8, пг/мл;

Х2 - уровень интерферона - γ, пг/мл;

Х3 - количество интерферона - α, пг/мл;

Х4 - количество церрулоплазмина, мг/дл;

K₁=0,05;

К₂=0,01;

К₃=0,01;

К₄=0,03

и const=- 3,32,

и при D менее 0 делают заключение об отсутствии лабораторных признаков развития внутриутробной инфекции, а при D более 0, диагностируют наличие лабораторных признаков, характерных для развития данной патологии у беременной.