Биологически активный стимулятор и способ повышения общей неспецифической резистентности с его применением

Биологически активный стимулятор и способ повышения общей неспецифической резистентности с его применением

Реферат

Изобретение относится к ветеринарии, касается средства растительного происхождения, обладающего иммуностимулирующим действием, и может быть использовано для повышения общей неспецифической резистентности у молодняка сельскохозяйственных животных.

Устойчивость организма животных к неблагоприятным воздействиям внешней среды определяется состоянием его защитных сил, что делает необходимым наряду с вакцинацией укрепление естественной резистентности к действию микробных факторов.

Известен ряд неспецифических стимуляторов иммунитета (синтетического, бактериального, растительного происхождения), различающихся по структуре и механизмам действия.

Из известных препаратов растительного происхождения иммуностимулирующие свойства наиболее изучены у препаратов элеутерококка, пустырника, препаратов из семян тыквы, травы эхинацеи пурпурной, левзеи сафлоровидной. Однако данные об иммунотропном действии этих препаратов отличаются противоречивостью /1-6/.

Известен также препарат растительного происхождения тетраиммунофит - фитоэкстракционный препарат из травы зверобоя, листа сены, плодов шиповника и корнеплодов свеклы, обладающий иммуностимулирующим действием на гуморальный иммунный ответ /7/.

Наиболее близким к заявленному является средство, обладающее иммуностимулирующим действием, представляющее собой водный экстракт из трав зверобоя продырявленного (Hypericum perforatum L), тимьяна ползучего (Thymus serpyllum), мяты перечной (Mentha piperita L.) и мать-и-мачехи (Tussilago farfara), взятых в равных количествах /8/.

С целью повышения лечебно-профилактического действия и расширения арсенала средств, обладающих иммуностимулирующим действием, предлагается использовать экстракт из травы и соцветий эхинации пурпурной (Echinazea purpurea), мать-и-мачехи (Tussilago farfara), травы тимьяна ползучего (Thymus serpyllum) и корней солодки (Glycyrrhiza glabra), взятых в равных количествах. Техническим результатом изобретения является повышение сохранности и среднесуточного прироста массы телят.

Эхинацея пурпурная (Echinazea purpurea) - многолетнее травянистое растение с коротким корневищем, плод - серовато-бурая семянка. Разводится в южной и средней полосах европейской части России. Собирают цветочные корзинки в июле-августе, корневища с корнями - поздней осенью. Химический состав: эфирное масло (в цветочных корзинках 0,13-0,48%), в состав которого входит нециклический секвитерпен, гликозид, бетаин, смола, органические кислоты (пальмитиновая, линолевая, церотиновая), фитостерины (в корнях). В народной и научной медицине эхинацею пурпурную применяют в комплексной терапии рецидивирующих инфекционно-воспалительных заболеваний верхних и нижних дыхательных путей. Противопоказания к применению: гиперчувствительность, аутоиммунные заболевания, туберкулез, лейкоз, беременность, период лактации, детский возраст, хронические заболевания печени.

Мать-и-мачеха (Tussilago farfara) встречается повсеместно. Собирают листья в первую половину лета. Химический состав: слизь, при гидролизе которой образуются глюкоза, галактоза, уроновые кислоты, горькие гликозиды, эфирное масло, сапонины, фитостерин, каротиноиды, яблочная и винная кислоты и др. В народной и научной медицине мать-и-мачеху применяют как отхаркивающее, мягчительное, противовоспалительное, дезинфицирующее и потогонное средство.

Тимьян ползучий (Thymus serpyllum) естественно растет в лесной зоне. Собирают надземные части растений в период цветения. Химический состав: эфирное масло, дубильные вещества, горечи, флавоноиды, урсоловая и олеаноловая кислоты. В народной и научной медицине чабрец применяют как отхаркивающее, антисептическое, противосудорожное и болеутоляющее средство.

Солодка голая (Glycyrrhiza glabra L.) - многолетнее корнеотпрысковое травянистое растение семейства. В диком виде произрастает на юге Западной Европы, в Средиземноморье, Передней Азии, Иране, Турции, Афганистане, Китае, в России - на юге европейской части и в Западной Сибири. Собирают корневища с корнями весной или летом. Химический состав: тритерпеновый сапонин глицирризин - кальциевая и калиевая соли глицирризоновой кислоты (23%), флаваноиды, производные флаванона и халкона, полисахариды (крахмал, пектиновые вещества), аскорбиновая кислота. Препараты корня солодки применяют как отхаркивающее и слабительное (порошок, экстракты сухой и густой, сироп, эликсир грудной), как противовоспалительное, спазмолитическое и антисекреторное средство при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, антиаллергическое, противовоспалительное при бронхиальной астме, экземах, аллергических дерматитах.

Экстракт из травы и соцветий эхинации пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки готовится фармакопейным способом в соотношении сырья к извлекателю 1:10. В качестве экстрагента используют этиловый спирт концентрацией 70%. Лекарственное сырье измельчают до частиц размером 1-3 мм, смешивают в равных количествах, навеску сырья помещают в стеклянный сосуд, добавляют расчетное количество этилового спирта концентрацией 70%, выдерживают 7 суток в темном месте при температуре 15-20°С. Затем спиртовую настойку процеживают через холст или два слоя марли, отжимая сырье, фильтруют.

Пример 1. В стеклянный сосуд поместили 500 г лекарственного сырья (равные количества из травы и соцветий эхинации пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки), добавили 5,0 л этилового спирта концентрацией 70%, поставили в темное место и выдерживали при температуре 15-20°С в течение 7 суток, после чего процедили через холст, отжимая сырье.

Для повышения общей неспецифической резистентности телят на фоне внутримышечной инъекции неспецифического иммуноглобулина применяют биологически активный стимулятор в соответствии с изобретением в виде раствора 7-8% концентрации, который готовят на охлажденной кипяченой воде и дают внутрь в течение 10-15 дней с интервалом в 24 часа в дозе 2,0-2,5 мл/кг массы животного.

Сущность способа поясняется примерами.

Пример 2. Стимулирующее влияние на факторы неспецифической резистентности оценивали в эксперименте на клинически здоровых телятах 5-7-дневного возраста в 2 сериях опытов. В обеих сериях опытов. отобранных методом аналогов телят распределяли на четыре группы. В первой серии телятам первых трех групп применяли внутрь биологически активный стимулятор в соответствии с изобретением, полученный как в примере 1, в виде водного раствора 7% концентрации в течение 10 дней с интервалом в 24 часа в дозах 2,0; 2,5 и 3,0 мл/кг живой массы животного. Телята четвертой группы стимулятора не получали и служили контролем. Во второй серии телятам первых трех групп биологически активный стимулятор в соответствии с изобретением применяли внутрь на фоне внутримышечной инъекции неспецифического иммуноглобулина. Естественную резистентность оценивали по показателям бактерицидной активности сыворотки крови (определяли по методу О.В.Смирновой и Т.А.Кузьминой, 1966), лизоцимной активности сыворотки крови (определяли по методу В.Г.Дорофейчук, 1968), β-лизинной активности сыворотки крови (определяли по методу О.В.Бухариной и др., 1970) и функциональной активности нейтрофилов крови (определяли в реакции восстановления нитросинего тетразолия по А.Н.Маянскому и др., 1979). Результаты представлены в таблице 1

Как видно из таблицы 1, при испытанных дозах получены стабильные результаты в обеих сериях опытов. В качестве оптимальной дозы для применения на практике можно рекомендовать дозу 2,5 мл/кг массы животного, обеспечившую максимальные показатели относительно контроля и граничных доз. Граничные дозы обеспечивают повышение показателей относительно контроля, но являются экономически нецелесообразными.

Пример 3. Эффективность способа повышения общей неспецифической резистентности с применением биологически активного стимулятора в соответствии с изобретением, полученного как в примере 1, изучали в условиях хозяйства, стационарно неблагополучного по желудочно-кишечным болезням телят, вследствие воздействия на организм ассоциаций вирусов, патогенной и условно патогенной микрофлоры на фоне нарушения условий содержания и кормления стельных коров и телят. Бактериологическими и вирусологическими исследованиями подтверждена этиологическая роль рота- и коронавирусов, а также бактерий родов Escherichia и Proteus. Заболеваемость 87-95%, летальность 25-30%. По принципу аналогов подбирали клинически здоровых телят 5-7-дневного возраста, которых распределяли на четыре группы. Состояние телят оценивали по приросту массы тела, клиническим показателям и показателям общей неспецифической резистентности, как в примере 1 (таблицы 2 и 3).

Таблица 1Влияние биологически активного иммуностимулятора на показатели общей неспецифической резистентности
Показатели	Группы животных
Первая (n-10)	Вторая (n=10)	Третья (n=10)	Четвертая (n=10)
Первая серия
Бактерицидная активность сыворотки крови, %
Лизоцимная активность сыворотки крови, %
Функциональная активность нейтрофилов крови (НСТ-тест), %:
спонтанный
индуцированный
Вторая серия
Бактерицидная активность сыворотки крови, %
Лизоцимная активность сыворотки крови, %
Функциональная активность нейтрофилов крови (НСТ-тест), %:
спонтанный
индуцированный
Примечание. В числителе - показатели до начала опыта, в знаменателе - показатели после окончания опыта

Таблица 2Эффективность способа повышения общей неспецифической резистентности с применением биологически активного стимулятора
Показатели	Группы телят
1 группа	2 группа	3 группа	4 группа
Количество животных, гол.	12	12	12	12
Схема воздействия	НИ* + заявленное средство	НИ + фитоэкстракт (аналог)	НИ (базовый способ)	препараты не применялись (контроль)
Функциональная активность нейтрофилов по НСТ-тесту:
спонтанный, %	8,2±0,4	8,0±0,7	7,6±0,5	4,0±0,2
индуцированный, %	16,4±1,6	16,2±1,5	16,1±1,6	7,4±1,2
Бактерицидная активность, %	39,8±1,4	31,8±0,4	28,8±1,4	22,0±0,9
Лизоцимная активность, %	6,0±0,4	5,4±0,3	3,9±0,3	2,1±0,7
Бетализинная активность, %	28,4±1,0	27,0±0,8	24,4±1,0	18,0±1,2
*НИ - неспецифический иммуноглобулин
Таблица 3Клинико-физиологические показатели телят
Показатели	Группы животных
1 группа	2 группа	3 группа	4 группа
Количество животных, гол.	12	12	12	12
Схема воздействия	НИ* + заявленное средство	НИ + фитоэкстракт (аналог)	НИ* (базовый способ)	препараты не применялись (контроль)
Среднесуточный прирост массы тела, г	436,0±7,0	390,0±5,6	376,0±2,1	320,0±5,6
Заболело, гол. (%)	1 (8,3)	2 (16,6)	4 (33,3)	7 (58,3)
Форма переболевания
- легкая	1	2	1	2
- тяжелая			3	5
Продолжительность болезни, сут.	2,0±0,1	2,3±0,4	3,8±0,3	4,8±0,4
Пало, гол. (%)	-	-	2 (16,6)	4 (33,3)
Сохранность, %	100,0	100,0	83,4	67,7
*НИ - неспецифический иммуноглобулин

Пример 4. Эффективность способа повышения общей неспецифической резистентности с применением биологически активного стимулятора в соответствии с изобретением, полученного как в примере 1, изучали в условиях хозяйства с заболеваемостью респираторными болезнями до 47,0% при летальности до 18,0% с установленной этиологической ролью ассоциаций вирусов парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита. По принципу аналогов подбирали клинически здоровых телят 5-7-дневного возраста, которых распределяли на четыре группы. Состояние телят оценивали по приросту массы тела, клиническим показателям и показателям общей неспецифической резистентности, как в примере 1 (таблицы 4 и 5).

Таблица 4Эффективность способа повышения общей неспецифической резистентности с применением биологически активного стимулятора
Показатели	Группы телят
1 группа	2 группа	3 группа	4 группа
Количество животных, гол.	12	12	12	12
Схема воздействия	НИ* + заявленное средство	НИ + Фитоэкстракт (аналог)	НИ (базовый способ)	препараты не применялись
Функциональная активность нейтрофилов по НСТ-тесту:
спонтанный, %	8,2±0,2	8,0±0,7	6,9±0,4	4,3±0,4
индуцированный, %	18,4±2,6	16,4±1,6	14,3±0,6	6,8±1,0
Бактерицидная активность, %	28,6±1,4	27,б±0,8	21,4±0,4	22,0±0,9
Лизоцимная активность, %	5,4±0,3	4,9±0,2	3,0±0,8	2,1±0,7
Бетализинная активность, %	16,1±1,4	13,8±0,2	6,8±0,4	7,0±0,6
*НИ - неспецифический иммуноглобулин

Таблица 5Клинико-физиологические показатели телят
Показатели	Группы животных
1 группа	2 группа	3 группа	4 группа
Количество животных, гол.	12	12	12	12
Схема воздействия	НИ* + заявленное средство	НИ + фитоэкстракт (аналог)	НИ (базовый способ)	препараты не применялись (контроль)
Среднесуточный прирост массы тела, г	625,0±2,8	548,0±2,5	485,0±5,0	365,0±2,5
Заболело, гол. (%)	-	2 (16,6)	3 (25,0)	5 (41,6)
Форма переболевания
- легкая
- тяжелая		1	1	3
Продолжительность болезни, сут.		12±0,1	14,0±0,2	16±0,4
Пало, гол. (%)		-	1	3
Сохранность, %	100	100	83,4	75,0
*НИ - неспецифический иммуноглобулин

Проведенные нами исследования показали, что экстракт, полученный из смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки с этиловым спиртом 70% концентрации в соотношении 1:10, который выдерживают 7 суток в темном месте при температуре 15-20°С, обладает иммуностимулирующей активностью, которая может быть использована для стимуляции естественной резистентности при инфекционных заболеваниях, патогенетически связанных с недостаточностью иммунной системы, в частности при желудочно-кишечных и респираторных болезнях телят. Положительное влияние на факторы общей неспецифической резистентности объясняется содержанием в биологически активном стимуляторе Mg (мать-и-мачеха - 10,1 мкг/г), Fe (тимьян ползучий - 1,0-3,5 мкг/г), Mn (тимьян ползучий - 1335,0 мкг/г), Мо (мать-и-мачеха - 256,0 мкг/г, тимьян ползучий - 48 мкг/г), Со (мать-мачеха - 1-4 мкг/г), Cu (мать-мачеха, солодка голая, тимьян ползучий - 43,3 мкг/г) и Se (мать-и-мачеха - 22,9 мкг/г), способствующих поддержанию на высоком уровне защитных механизмов, и витаминов С и Е, усиливающих влияние макро- и микроэлементов. Средство является нетоксичным, содержит биодоступные полезные биологически активные вещества, включающие, например, эфирное масло, флавоноиды, картиноиды, фитостерин, сапонины, обладает экологической чистотой.

Источники информации

1. Алтунин А.Д. и др. // Здоровье, разведение и защита мелких домашних животных: Материалы 1 Междунар. конф. - Уфа, 2000.

2. Горлов И.Ф. и др. // Ветеринария, 1996, №7.

3. Ивановский А.А. // Ветеринарный врач, 2000, №2.

4. Коробко А.В. // Ветеринария, 2000, №5.

5. Николаенко В.П. // Ветеринария, 1990, №4.

6. Садыков Ш.Б. // Ветеринария, 1990, №4.

7. Макарадзе Л.А. // Ветеринария, 1999, №3.

8. RU 2250110 C1, 2005.

1. Биологически активный стимулятор, содержащий спиртовой экстракт растительного сырья, отличающийся тем, что в качестве спиртового экстракта он содержит спиртовой экстракт, полученный из смеси равных количеств измельченных травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки с этиловым спиртом 70%-ной концентрации в соотношении 1:10, которую выдерживают 7 сут в темном месте при температуре 15-20°С, процеживают, отжимая сырье и фильтруют.

2. Способ повышения общей неспецифической резистентности, включающий внутримышечную инъекцию неспецифического иммуноглобулина, отличающийся тем, что дополнительно назначают для применения внутрь биологически активный стимулятор по п.1 в виде водного раствора 7-8%-ной концентрации в дозе 2,0-2,5 мл/кг массы животного в течение 10-15 сут с интервалом в 24 ч.