Способ профилактики и лечения лейкоза крупного рогатого скота
Иллюстрации
Показать всеИзобретение относится к области ветеринарии. Коровам и телятам вводят лигфол 1 раз в месяц в дозах: коровам 5,0 мл; телятам: в первый месяц жизни - 0,1 мл, во второй - 0,2 мл, в третий 0,3 мл, в четвертый - 0,4 мл, в пятый и последующие - 0,5 мл. Введение лигфола осуществляют до достижения устойчивого благополучия. Использование способа способствует нормализации состояния белой и красной крови, биохимического гомеостаза, структурно-функционального состояния лимфоидных и других паренхиматозных органов, улучшению продуктивности. 2 ил., 12 табл.
Реферат
Изобретение относится к области ветеринарии.
Лейкоз крупного рогатого скота - широко распространенное хроническое заболевание вирусно-опухолевой природы. Возбудителем болезни является РНК-содержащий вирус из семейства retroviridae, вызывающий злокачественное перерождение клеток кроветворных органов. Затем патологический процесс охватывает весь организм. Возникает и постепенно нарастает лейкоцитоз. Увеличиваются лимфоузлы. Резко увеличивается в размерах селезенка. Перерождаются паренхиматозные органы.
Происходит не только лейкоцитоз. При лимфоидном лейкозе лимфоциты инфильтрируют все внутренние органы. Изменяется лейкоцитарный профиль и качественно и количественно. Происходят патологические изменения красной крови.
Одним из важнейших факторов высокой восприимчивости к инфекции является генетически предопределенная недостаточность защитных сил у изнеженных интенсивно эксплуатируемых животных.
Диагноз на лейкоз ставится по трем основным критериям: 1 - серологической реакцией иммунодиффузии (РИД); 2 - подсчетом в крови общего количества лейкоцитов и их форм - обязательно лимфоцитов и нейтрофилов (гематология); 3 - клиническим и патологоанатомическим обследованием животных.
Известен способ оздоровления хозяйств от лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС), включающий оздоровительные мероприятия, которые проводят по вариантам в зависимости от первоначальной инфицированности стада, определенной по результатам серологического исследования, причем при первоначальной инфицированности стада до 2,5% инфицированных животных немедленно сдают на убой, а остальных животных исследуют каждые 3 месяца с обязательным удалением инфицированных животных; в хозяйствах, где выявлено 2,6-10,0% животных, инфицированных ВЛКРС, инфицированных животных собирают на отдельной ферме, откуда молодняк после откорма, коров после отела и по мере прекращения лактации сдают на убой, оставшихся животных исследуют серологическим методом на ВЛКРС и вновь выявленных инфицированных животных немедленно переводят на указанную ферму; при первоначальной инфицированности стада 10,1-40% всех животных в хозяйстве делят на две группы: серопозитивные и серонегативные и содержат их изолированно друг от друга, инфицированных животных каждые 6 месяцев исследуют гематологическим методом и признанных больными сдают на убой, а коров и нетелей, не инфицированных ВЛКРС, исследуют серологическим методом с интервалом три месяца, при этом вновь выявленных серопозитивных животных переводят в группу инфицированных коров; при первоначальной инфицированности стада более 40,0% всех взрослых животных исследуют только гематологическим методом через каждые 6 месяцев и выявленных больных сдают на убой /1/.
Известен способ профилактики и ликвидации лейкоза крупного рогатого скота в хозяйствах с недостатком животноводческих помещений. Сущность его заключается в следующем: поэтапный групповой вывод малопродуктивных коров каждые 3-8 месяцев проводят с одновременным вводом такого же количества ремонтных телок (нетелей, первотелок), проверенных серологически 3-4 раза (с отрицательным результатом), начиная с 6-месячного возраста с интервалом 6 мес. Серологический контроль на лейкоз вновь введенных серонегативных животных проводят через 1-2 мес. Количество выведенных и введенных животных должно соответствовать числу животных, закрепленных за одной дояркой /2/.
Недостаток двух вышеуказанных способов в том, что не применяется медикаментозного лечения, используется лишь метод выявления и выбраковки.
Известен способ профилактики лейкоза крупного рогатого скота, заключающийся в коррекции клеточных и гуморальных факторов активности иммунной системы до физиологической нормы, посредством препарата, состоящего из 0,01%-ного раствора Т-активина в дозе 4 мкг/кг или 0,04 мл/кг и В-активина в дозе 6 мг лиофилизированного порошка, растворенного в 0,01%-ном растворе Т-активина, однократно в сутки в течение 3 дней телятам 20-30-суточного возраста /3/.
При использовании способа активизируется иммунная система, однако недостаток его в том, что не уничтожается непосредственно вирус лейкоза.
Известен способ профилактики лейкоза крупного рогатого скота, в ходе которого животным в 20-30-суточном возрасте вводят подкожно Т-активин в дозе 4 мкг/кг или 0,04 мл/кг 0,01%-ного раствора и В-активин в дозе 6 мг лиофилизированного порошка, растворенного 0,01%-ным раствором Т-активина, однократно в сутки, в течение 3 дней с последующим исследованием животных по РИД (реакция иммунодиффузии). Способ позволяет в течение 12 месяцев сохранить активность иммунной системы и естественную резистентность в пределах физиологической нормы и профилактировать заболевание животных лейкозом /4/.
В данном случае также не обеспечивается инактивация вируса лейкоза, способ направлен, в первую очередь, на устранение иммунодефицита.
Известен способ профилактики и лечения лейкоза крупного рогатого скота, включающий введение лекарственного средства метронидазол и дополнительно йодированной поваренной соли; при этом метронидазол и йодированную поваренную соль вводят курсами один раз в сутки в течение 30 дней с интервалом в 6 месяцев. С профилактической целью введение животным метронидазола и йодированной поваренной соли осуществляют с 6-месячного до 18-месячного возраста в следующих дозах (г/гол): метронидазол - 0,25, 0,5 и 1,0; йодированная поваренная соль - 30,0, 50,0 и 70,0; причем с возраста 12 месяцев животным дополнительно вводят сульфаниламидный препарат в дозах соответственно 0,5 и 1,0 мг/гол. С лечебной целью метронидазол вводят в дозе 1,0 г/гол, а йодированную поваренную соль в дозе 70-90 г/гол, при этом дополнительно вводят сульфаниламидный препарат (стрептоцид белый или сульфадимезин или норсульфазол) в дозе 1,0 г/гол, курс лечения повторяют в течение двух лет /5/.
Способ недостаточно эффективен, т.к. нет специфического воздействия на вирус лейкоза. Химиотерапевтические препараты обладают бактерицидным, а не вирулицидным действием.
В целом лечение животных, больных лейкозом и его лекарственная профилактика практически не разработаны. Вакцин нет.
Согласно правил по профилактике и борьбе с лейкозом крупного рогатого скота в основу проводимых мероприятий положены общие и специфические организационно-хозяйственные мероприятия. Они включают: эпизоотологический и плановый диагностический контроль; ограничительные мероприятия; оздоровление путем раздельного содержания больных и здоровых, убоя клинически больных и постепенной замены больных животных на здоровых.
Технический результат изобретения - повышение эффективности профилактики и лечения лейкоза крупного рогатого скота.
Технический результат достигается использованием способа, в ходе которого коровам и телятам применяют внутримышечно лигфол по 1 разу в месяц в дозах коровам 5,0 мл, телятам: в первый месяц жизни - 0,1 мл, во второй - 0,2 мл, в третий 0,3, в четвертый - 0,4 мл, в пятый и последующие - 0,5 мл; введение лигфола осуществляют до достижения устойчивого благополучия.
Лигфол - наставление по его применению в ветеринарии в качестве адаптогена стресс-корректора утверждено 03.05.2001 г., р.н. ПВР-2-5-.0100594. Это самопролонгированный препарат, действующим началом которого являются высокомолекулярные гуминовые вещества. В основе фармакологической активности лигфола лежат иммуноантиоксидантные механизмы. После однократной внутримышечной инъекции действие лигфола продолжается до 30 дней.
В ряде экспериментальных исследований лигфол проявил высокую противоопухолевую активность, используется в качестве противоопухолевого средства у собак и кошек. Препарат испытан с положительными результатами при лейкозе кур, гепатите С, в культуре клеток, зараженных ВИЧ-вирусом.
Исследования проведены на 36 коровах черно-пестрой породы на 2-7 годах лактации с удоем от 5 до 7 тысяч кг молока. Кроме этого наблюдения вели на 16 телятах, рожденных этими коровами. Схема опытов заключалась в следующем. Животных распределили на три равные группы, каждую из которых еще разделили на две подгруппы.
Первая группа - условно здоровые животные с отрицательной серологической реакцией, без клинических признаков лейкоза и нормальным содержанием лейкоцитов в крови. Вторая группа - серологически положительные коровы с отсутствием клинических признаков и выраженного лейкоцитоза. Третья группа - клинически больные коровы с положительной серологической реакцией и выраженным лейкоцитозом за счет повышенного содержания в крови лимфоцитов.
Коровам и их телятам первых подгрупп с января по ноябрь 2005 года по одному разу в месяц в его середине внутримышечно вводили по 5,0 мл и от 0,1 до 0,5 мл соответственно стерильного физиологического раствора. Животным вторых подгрупп применяля внутримышечно лигфол по 1 разу в месяц в дозах коровам 5,0 мл, телятам: в первый месяц жизни - 0,1 мл, во второй - 0,2 мл, в третий 0,3, в четвертый - 0,4 мл, в пятый и последующие - 0,5 мл. В марте, мае, июле и ноябре у животных брали кровь для исследований и у 2 животных проводили клинические обследования, вносимые в карты индивидуальных наблюдений (КИП).
Морфологические и биохимические исследования крови проводили с использованием современных, общепринятых в ветеринарной медицине методов исследований. Изучали общее содержание лейкоцитов, лимфоцитов, лейкоцитарный профиль. Выведены коэффициенты соотношения отдельных клеток белой крови друг к другу. Определена степень патологии клеток белой крови, в частности цитолиз эозинофилов, кариорексис, пикноз, ридеровские формы лимфоцитов, лопнувшие (тени и недифференцируемые) клетки и другие. Рассчитан индекс ядерного сдвига нейтрофилов. В системе красной крови изучены содержание эритроцитов, гемоглобина, гематокрит, скорость оседания эритроцитов, цветной показатель, содержание гемоглобина в одном эритроците.
В конце наблюдений проведена комплексная оценка биохимического гомеостаза коров всех подгрупп. По показателям АлАТ, АсАТ, ЩФ, холестерола характеризовали состояние паренхимы печени. О витаминном гомеостазе в связи с системой антиоксидантной защиты судили по показателям каротина, витамина А и витамина Е. Определяли содержание в крови общего белка, общих липидов, мочевины. О состоянии фосфор-кальциевого обмена судили по содержанию в сыворотке крови кальция и фосфора. Об уровне активного йода судили по содержанию СБИ. В сыворотке крови определяли содержание альбуминов, α-, β-, γ- -глобулинов.
По каждой опытной корове взяты данные по молочной продуктивности за лактацию, жирности молока, общей массе жира и количества белка в молоке.
В целом клеточный и биохимический гомеостаз коров в опыте оценивали в динамике и конце наблюдений по 53 показателям. При этом взято и исследовано 144 пробы крови коров и телят.
Весь полученный цифровой материал обработан статистически с использованием компьютерных программ.
В конце наблюдений из трех подгрупп коров, которым применяли лигфол, убили по одному животному. У каждого из них для морфологических исследований взяли лимфоузлы, селезенку, печень, сердце, почки. Провели общее патологоанатомическое исследование.
В январе 2005 года у всего стада молочных коров взяли кровь для оценки состояния по лейкозу. Провели в лаборатории реакцию иммунодиффузии (РИД) и посчитали общее количество лейкоцитов, в мазках определили процент лимфоцитов и сегментоядерных (зрелых) нейтрофилов. По данным комплексного обследования и с учетом Правил по профилактике и борьбе с лейкозом крупного рогатого скота (Приказ Минсельхозпрода России от 11 мая 1999 г. №359) выделили три группы молочных коров: 1 - условно здоровые - на 2-й, 3-й лактации, РИД - отрицательные с содержанием общего количества лейкоцитов и лимфоцитов в пределах среднего количества (норма); 2 - РИД-положительная (содержание лейкоцитов и лимфоцитов в верхних пределах нормы); 3 - РИД положительных с лейкоцитозом (гематология - лейкоцитоз за счет преимущественного увеличения содержания лимфоцитов в крови), условно обозначены: РИД + гематология. В три группы подобрали по 10 коров, каждую из которых разделили на две подгруппы. В первой подгруппе по одному разу в месяц вводили стерильный физиологический раствор по 5,0 мл на животное, а во второй - соответственно лигфол. На фоне организационных и противолейкозных мероприятий препарат вводили по одному разу в месяц с января по ноябрь. Новорожденным телочкам с первых 10 дней жизни и по 1 разу в месяц по той же схеме применяли физиологический раствор и лигфол в дозах от 0,1 до 0,5 мл на животное.
В марте, мае, июне и ноябре у всех животных брали и исследовали кровь по показателям, характеризующим состояние крови и всего гомеостаза организма. В декабре 2005 года убили 3 коровы из разных групп, получавших лигфол, и провели у них соответствующие морфологические исследования.
Пример 1. Изучение состояния белой крови
Как уже было подчеркнуто выше, лейкоз коров, а наиболее распространен лимфолейкоз, первично связан с творением белой крови. Поэтому одно из главных вниманий уделено детальному изучению состояния белой крови у коров в динамике опыта.
Данные по динамике содержания общего количества лейкоцитов в крови коров приведены в таблице 1.
Таблица 1Влияние лигфола на динамику содержания общего количества лейкоцитов в крови коров | |||
№ п/п | Дата взятия крови | Количество лейкоцитов, 109/л | |
Физиологический раствор | Лигфол | ||
УСЛОВНО ЗДОРОВЫЕ | |||
1 | 18.03.05 | 10,83±2,23 | 8,18±0,88 |
2 | 28.05,05 | 9,45±0,34 | 8,31±0,37 |
3 | 20.07.05 | 8,55±1,21 | 5,22±0,14 |
4 | 09.11.05 | 9,43±1,06 | 6,61±0,60 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ | |||
5 | 18.03.05 | 15,15±0,60 | 7,68±0,88 |
6 | 28.05,05 | 13,40±2,68 | 14,25±4,66 |
7 | 20.07.05 | 10,73±1,32 | 7,98±1,64 |
8 | 09.11.05 | 12,70±3,12 | 10,39±3,55 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ + ЛЕЙКОЦИТОЗ | |||
9 | 18.03.05 | 23,29±1,35 | 32,40±4,00 |
10 | 28.05,05 | 28,66±4,25 | 30,32±4,28 |
11 | 20.07.05 | 15,09±3,22 | 16,74±2,66 |
12 | 09.11.05 | 24,31±4,39 | 19,59±3,79 |
Несмотря на большой разброс по индивидуальным особенностям продуктивных молочных коров в условиях реального продуктивного животноводства прослеживается ряд закономерных тенденций. Прежде всего, в контроле у условно здоровых коров от марта к ноябрю содержание лейкоцитов в крови колебалось на верхних пределах нормы, но не в широких пределах, составляющих 21,0%. Условно здоровые животные, которым применяли лигфол, имели более низкое содержание лейкоцитов на верхнем пределе на 23,3%, а на низком - на 38,9%. Полученные данные по условно здоровым животным (коровы молодые с первыми лактациями) говорит о том, что применение лигфола способствует организму удержанию пула лейкоцитов на минимально необходимом уровне.
У субклинически больных, РИД-положительных животных динамика содержания общего количества лейкоцитов носила хаотический характер и колебалась в пределах 29,2%. При этом минимальные показатели по сравнению с условно здоровыми превышали в 1,25 раза, а максимальные - в 1,40 раз.
Применение таким животным лигфола показало, что на фоне незакономерной динамики содержания общего количества лейкоцитов в крови они существенно отличались как от контрольных РИД-положительных, так и от условно здоровых, получавших препарат по той же схеме. У коров, получавших лигфол, по минимальному уровню общее содержание лейкоцитов по сравнению с аналогичными было ниже на 29,5%, а по максимальному - на 5,9%. У РИД-положительных коров, получавших лигфол, по сравнению с таковыми условно здоровыми в целом содержание лейкоцитов было выше на 47,1%-71,5%. Однако на РИД-положительном фоне лигфол удерживал нарастание лейкоцитоза.
РИД-положительные животные с клинически выраженной инфекцией по содержанию общего количества лейкоцитов как без применения лигфола, так и с ним существенно отличались от условно здоровых и РИД-положительных без выраженных клинических признаков инфекции. Так, в подгруппах с применением физиологического раствора на минимальном уровне это больше в 1,76 раза, а максимальном - в 2,65 раза (условно здоровые) и 1,4; 1,89 раз соответственно.
Интересно отметить, что применение лигфола больным коровам не сдерживало лейкоцитоз, но потенцировало его. По сравнению с коровами, получавшими физиологический раствор, применение лигфола способствовало увеличению содержания лейкоцитов в крови на минимальном уровне в 1,11 раза, а на максимальном - в 1,13. Существенно подчеркнуть, что здесь от начала до конца наблюдений прослеживается выраженная тенденция уменьшения количества лейкоцитов. Разница между первым и последним взятием крови составила 12,81.109 клетки на 1 литр крови. Это больше, чем у условно здоровых коров, не получавших лигфол.
Данные по динамике лимфоцитов в крови коров приведены в таблице 2.
Таблица 2Характеристика влияния лигфола на динамику содержания лимфоцитов в крови коров | |||
№ п/п | Дата взятия крови | Количество лимфоцитов, 109/л | |
Физиологический раствор | Лигфол | ||
УСЛОВНО ЗДОРОВЫЕ | |||
1 | 18.03.05 | 5,43±0,83 | 4,23±0,46 |
2 | 28.05,05 | 6,04±0,35 | 4,40±0,26 |
3 | 20.07.05 | 6,50±0,83 | 3,58±0,27 |
4 | 09.11.05 | 7,17±1,04 | 3,89±0,38 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ | |||
5 | 18.03.05 | 13,51±0,40 | 5,33±0,11 |
6 | 28.05,05 | 10,13±2,76 | 10,33±3,87 |
7 | 20.07.05 | 10,06±0,98 | 6,05±1,69 |
8 | 09.11.05 | 9,78±3,29 | 8,70±3,38 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ + ЛЕЙКОЦИТОЗ | |||
9 | 18.03.05 | 21,90±2,00 | 28,00±4,20 |
10 | 28.05.05 | 25,09±3,90 | 24,79±3,90 |
11 | 20.07.05 | 13,51±3,04 | 15,10±2,39 |
12 | 09.11.05 | 21,11±4,03 | 17,11±3,77 |
У условно здоровых коров, которым вводили физиологический раствор, от марта к ноябрю уровень лимфоцитов возрос в 1,32 раза. Применение условно здоровым животным лигфола, наоборот, способствовало некоторому уменьшению содержания лимфоцитов в крови по сравнению с исходным (на 8,0%). При этом, если к 3 месяцу применения лигфола разница в сторону уменьшения количества клеток составила 22,0%, то в конце наблюдений - 45,8%.
Таким образом, по условно здоровым коровам прослеживаются некоторые выраженные тенденции: 1 - у животных, которым вводили физиологический раствор, содержание лимфоцитов в крови постепенно нарастало; 2 - у коров, получавших лигфол, наблюдали обратную тенденцию; 3 - в результате разнонаправленной динамики различия между животными обеих подгрупп по данному ведущему показателю, характеризующему отношение коров к лейкозу, все возрастали. Это наглядно представлено на фиг.1.
У РИД-положительных (инфицированных) коров обеих подгрупп содержание лимфоцитов в крови в целом существенно превосходило таковое по группе условно здоровых животных практически за весь период наблюдений. Здесь по подгруппе с физиологическим раствором при высоком разбросе данных можно увидеть некоторую тенденцию снижения уровня лимфоцитов в динамике наблюдения. Так, от марта к ноябрю оно составило 27,6%. В то же время по сравнению с условно здоровыми оно возросло в пределах двух раз как по минимальным, так и максимальным показателям.
В подгруппе РИД-положительных коров, получавших лигфол, при очень существенном разбросе данных в динамике наблюдений, можно говорить об обратной тенденции - увеличении (на 63,2%) содержания лимфоцитов в крови от марта к ноябрю. Но как и в предыдущих подгруппах, оно возросло по сравнению с условно здоровыми животными, получавшими лигфол, в пределах двух раз и по минимальным и по максимальным показателям. В то же время животные опытной подгруппы отличались от контрольной в меньшую сторону по минимальным показателям на 45,5%, а по максимальным - на 33,5%.
В целом можно говорить о выраженной тенденции удержания бурного лимфоцитоза у РИД-положительных животных при применении им лигфола.
У больных лейкозом коров уровень лимфоцитоза был высоким в обеих подгруппах на протяжении всего периода наблюдений. Исключение составило летнее взятие крови, когда корм был сочным, особенно богатым водой. В контрольной подгруппе количество лимфоцитов в крови было высоким и существенно не колебалось. Уровень микрофагов до 5 раз превосходил таковой у условно здоровых коров и в 2 раза - РИД-положительных. Это дополнительно подтверждает диагноз - лимфоцитарный лейкоз. Применение лигфола больным животным в первые 5 месяцев не оказало закономерного влияния на уровень лимфоцитов в крови. Но в ноябре оно снизилось на 19,0% по сравнению с контролем.
В итоге здесь также можно говорить о тенденции сдерживающего влияния лигфола на лимфоцитоз при лейкозе у коров.
Таблица 3 показывает реакцию уровня зрелых нейтрофилов белой крови в динамике годового течения лейкоза у коров и при применении им лигфола.
Таблица 3Характеристика влияния лигфола на динамику содержания зрелых нейтрофилов в крови коров | |||
№ u/u | Дата взятия крови | Количество сегментоядерных нейтрофилов, 109/л | |
Физиологический раствор | Лигфол | ||
УСЛОВНО ЗДОРОВЫЕ | |||
1 | 18.03.05 | 3,19±0,50 | 2,74±0,83 |
2 | 28.05,05 | 1,85±0,49 | 2,29±0,16 |
3 | 20.07.05 | 1,29±0,22 | 1,14±0,26 |
4 | 09.11.05 | 0,87±0,19 | 1,39±0,30 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ | |||
5 | 18.03.05 | 1,11±0,79 | 1,01±0,70 |
6 | 28.05,05 | 1,65±0,48 | 1,86±0,37 |
7 | 20.07.05 | 0,39±0,30 | 1,34±0,50 |
8 | 09.11.05 | 0,95±0,23 | 0,72±0,06 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ + ЛЕЙКОЦИТОЗ | |||
9 | 18.03.05 | 0,76±0,06 | 2,94±0,70 |
10 | 28.05.05 | 1,50±0,28 | 2,9±0,69 |
11 | 20.07.05 | 1,06±0,23 | 1,14±0,23 |
12 | 09.11.05 | 1,57±0,31 | 1,08±0,14 |
С учетом того, что нейтрофилы, как в прочем и другие клетки, проходят ряд стадий созревания. По их содержанию и соотношению в крови (юные - палочкоядерные - сегментоядерные) можно хотя бы косвенно судить о функциональном состоянии костномозгового кроветворения.
По результатам исследований видно, что у условно здоровых животных от марта к ноябрю стабильно уменьшалось содержание зрелых нейтрофилов в крови, и разница достигала 3,7 раза. У коров, которым вводили лигфол, происходил тот же процесс, но он протекал существенно мягче. Так, если в марте у последних было меньше зрелых нейтрофилов по сравнению с контрольными на 14,1%, то в ноябре - больше на 59,8%. При этом разница в начале и конце наблюдений составила 1,97 раза, то есть в 1,88 раза меньше.
Сопоставляя данные по общему содержанию лейкоцитов, уровням лимфоцитов и зрелых нейтрофилов можно по условно здоровым коровам выдвинуть предположение, что животные были именно условно здоровыми и в начале опыта - РИД-отрицательными. Однако в последующем они скорее всего заболевали, о чем свидетельствуют изменения в лейкоцитарном профиле крови. В то же время применение таким животным лигфола явно сдерживало развитие процесса.
У РИД-положительных животных контрольной подгруппы динамика содержания зрелых нейтрофилов не носила характера закономерности и даже тенденции. Их содержание при каждом взятии крови было различным и колебалось в пределах 4,2 раза. В опытной подгруппе от марта к маю наблюдали существенное увеличение уровня зрелых нейтрофилов крови, а затем оно постепенно снижалось. В конце наблюдений если в контрольных подгруппах условно здоровой и РИД-положительной групп уровень зрелых нейтрофилов в крови был примерно одинаковым, то в опытных подгруппах у РИД-положительных животных по сравнению с условно здоровыми он был в 2 раза ниже.
У больных лейкозом коров контрольной подгруппы содержание зрелых нейтрофилов в начале исследований было ниже, чем у условно здоровых животных, в 4,2 раза. Затем оно в 2 раза увеличилось, упало и снова возросло. К концу наблюдений оно стало выше, чем у условно здоровых в 1,8 раза. Больные животные, получавшие лигфол в весенне-летний периоды по уровню зрелых нейтрофилов в крови, не отличались от таковых условно здоровой опытной подгруппы. Затем у них количество этих клеток несколько снизилось. По сравнению с контрольной подгруппой в первой половине исследований уровень нейтрофилов у опытных животных резко отличался в большую сторону, а в конце наблюдений резко упал.
Обобщая полученные данные по влиянию лигфола на уровень зрелых нейтрофилов в крови коров с разным состоянием, можно подчеркнуть, что данный показатель не имеет закономерных изменений и выраженных тенденций в зависимости от групп животных, их подгрупп и динамики наблюдений.
В таблице 4 приведены данные по влиянию лигфола на содержание эозинофилов в крови коров.
Таблица 4Характеристика влияния лигфола на динамику содержания эозинофилов в крови коров | |||
№ п/п | Дата взятия крови | Количество эозинофилов, 10/л | |
Физиологический раствор | Лигфол | ||
УСЛОВНО ЗДОРОВЫЕ | |||
1 | 18.03.05 | 0,23±0,03 | 0,15±0,07 |
2 | 28.05,05 | 0,12±0,06 | 0,07±0,03 |
3 | 20.07.05 | 0,37±0,13 | 0,24±0,07 |
4 | 09.11.05 | 0,61±0,29 | 0,54±0,24 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ | |||
5 | 18.03.05 | 0,31±0,15 | 0,59±0,37 |
6 | 28.05,05 | 0,47±0,10 | 0,11±0,09 |
7 | 20.07.05 | 0,16±0,02 | 0,25±0,07 |
8 | 09.11.05 | 1,07±0,48 | 0,46±0,15 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ + ЛЕЙКОЦИТОЗ | |||
9 | 18.03.05 | 0,40±0,21 | 0,22±0,15 |
10 | 28.05.05 | - | - |
11 | 20.07.05 | 0,38±0,11 | 0,29±0,06 |
12 | 09.11.05 | 0,54±0,15 | 0,57±0,18 |
Показано, что динамика клеток, отражающих силу и степень стресс-реакции у животных, при лейкозе коров и применении им лигфола не претерпевает закономерных изменений или же тенденций. Так, у условно здоровых контрольных коров от марта к ноябрю их уровень то снижается, то возрастает. Колебания достигают 5-кратной величины. Максимум содержания наблюдали в ноябре. У условно здоровых коров, получавших лигфол, установлена такая же картина. В целом у них уровень эозинофилов был несколько ниже во всей динамике наблюдений.
РИД-положительные животные контрольной и опытной групп практически не отличались друг от друга по данному показателю. Это же относится и к больным лейкозом коровам. В 5 из 6 случаев максимальное количество эозинофилов в крови обнаруживали в ноябре.
Из таблицы 5 видно, что у контрольных условно здоровых коров содержание моноцитов в крови от марта к ноябрю постепенно снижается. Такая же тенденция прослеживается и у животных, которым вводили лигфол. Хотя низкий уровень содержания самих макрофагов в крови и существенный индивидуальный разброс данных не позволяет выявить какую-либо закономерность или хотя бы тенденцию. То же видно и по остальным группам коров.
Таблица 5Динамика влияния лигфола на содержание моноцитов в крови коров | |||
№ п/п | Дата взятия крови | Количество моноцитов, 109/л | |
Физиологический раствор | Лигфол | ||
УСЛОВНО ЗДОРОВЫЕ | |||
1 | 18.03.05 | 0,26±0,01 | - |
2 | 28.05,05 | 0,10±0,03 | 0,14±0,07 |
3 | 20.07.05 | 0,07±0,02 | 0,03±0,02 |
4 | 09.11.05 | 0,06±0,02 | 0,04±0,01 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ | |||
5 | 18.03.05 | 0,05±0,04 | 0,21±0,02 |
6 | 28.05,05 | 0,07±0,03 | 0,23±0,08 |
7 | 20.07.05 | 0,03±0,01 | 0,07±0,02 |
8 | 09.11.05 | 0,03±0,01 | 0,03±0,01 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ + ЛЕЙКОЦИТОЗ | |||
9 | 18.03.05 | 0,17±0,09 | 0,13±0,08 |
10 | 28.05.05 | 0,16±0,06 | 0,17±0,09 |
11 | 20.07.05 | 0,10±0,03 | 0,10±0,04 |
12 | 09.11.05 | 0,07±0,04 | 0,08±0,04 |
В целом же оценивая лейкоцитарный профиль коров с разным физиологическим состоянием и применением лигфола, можно подчеркнуть, что наиболее ярко отражают состояние здоровья животных уровень лимфоцитов в крови. При этом применение лигфола оказывает выраженное сдерживающее влияние на развитие лимфоцитоза, особенно у условно здоровых животных.
Исследования мазков крови показали, что в зависимости от физиологического состояния, динамики наблюдений и применения лигфола претерпевали изменения не только количественные показатели белой крови. Обнаружилось, что лейкоз вызывал существенную патологию всех форм лейкоцитов. В таблице 6 приведены сводные данные по динамике патологических форм лейкоцитов по группам животных.
У условно здоровых коров контрольной подгруппы к лету содержание патологических форм лейкоцитов возросло в 7,2 раза. В опытной подгруппе сначала их количество уменьшилось в 3,6 раза, а затем возросло в 3,1 раза.
Таблица 6Динамика патологических форм лейкоцитов у коров при применении лигфола | |||
№ п/п | Дата взятия крови | Количество патологических форм лейкоцитов, единиц, на 400 клеток | |
Физиологический раствор | Лигфол | ||
УСЛОВНО ЗДОРОВЫЕ | |||
1 | 18.03.05 | 7,88±0,65 | 21,25±1,43 |
2 | 28.05,05 | 15,38±1,09 | 5,88±0,36 |
3 | 20.07.05 | 56,75±3,21 | 65,05±3,12 |
4 | 09.11.05 | 0 | 0 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ | |||
5 | 18.03.05 | 19,51±1,24 | 39,50±2,18 |
6 | 28.05.05 | 7,14±0,55 | 11,60±0,77 |
7 | 20.07.05 | 60,16±4,16 | 65,40±4,81 |
8 | 09.11.05 | 35,53±1,28 | 55,77±3,23 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ + ЛЕЙКОЦИТОЗ | |||
9 | 18.03.05 | 5,50±0,38 | 38,33±2,09 |
10 | 28.05,05 | 32,08±2,14 | 12,83±0,76 |
11 | 20.07.05 | 37,63±2,83 | 85,52±6,31 |
12 | 09.11.05 | 27,60±1,99 | 34,30±1,88 |
РИД-положительные коровы контрольной подгруппы по уровню патологических форм белых клеток на протяжении всей динамики наблюдений не отличались от условно здоровых. Применение лигфола здесь способствовало некоторому увеличению общего количества патологических форм лейкоцитов. Та же тенденция отмечается и у больных лейкозом животных.
Среди общего количества патологических форм белой крови дифференцировали лопнувшие, распадающиеся клетки, нейтрофилы с патологической зернистостью, эозинофилы с цитолизом, лимфоциты вакуолизированные, кариорексисные, пикнотические, ридеровские формы и тени Боткина-Гумпрехта. Показано, что применение лигфола особенно условно здоровым коровам не только способствует предупреждению лимфоцитоза, но и гибели перезревших форм лимфоцитов.
Пример 2. Изучение динамики изменений в крови коров уровней эритроцитов, гемоглобина, гематокрита, цветного показателя, содержания гемоглобина в 1-м эритроците.
В таблице 7 приведены данные по уровню эритроцитов. У условно здоровых коров контрольной подгруппы их колебание в динамике колебалось в пределах 20,7% и носило лишь характер тенденции. В опытной подгруппе колебания носили больший характер. Они достигали 42,1%. Содержание эритроцитов в крови коров нарастало от марта к июлю, а затем снизилось. Но и в конце наблюдений количество красных клеток в крови коров опытной подгруппы было на 11,3% больше, чем в контрольной.
Таблица 7Динамика уровня эритроцитов у коров под влиянием лигфола | |||
№ п/п | Дата взятия крови | Количество эритроцитов, 10/л | |
Физиологический раствор | Лигфол | ||
УСЛОВНО ЗДОРОВЫЕ | |||
1 | 18.03.05 | 6,18±0,22 | 4,90±0,50 |
2 | 28.05,05 | 7,04±0,59 | 6,34±0,79 |
3 | 20.07.05 | 6,53±0,55 | 8,47±0,39 |
4 | 09.11.05 | 5,58±0,20 | 6,21±0,74 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ | |||
5 | 18.03.05 | 4,50±0,46 | 5,45±0,35 |
6 | 28.05.05 | 7,22±0,96 | 6,35±0,51 |
7 | 20.07.05 | 4,38±0,38 | 5,45±1,01 |
8 | 09.11.05 | 5,59±0,38 | 5,54±0,33 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ + ЛЕЙКОЦИТОЗ | |||
9 | 18.03.05 | 7,00±0,30 | 5,05±0,75 |
10 | 28.05,05 | 56,69±0,46 | 5,85±0,64 |
11 | 20.07.05 | 5,78±0,34 | 6,45±0,83 |
12 | 09.11.05 | 6,01±0,41 | 6,28±0,84 |
Содержание эритроцитов в крови РИД-положительных животных обеих подгрупп было ниже, чем у условно здоровых животных. Общая тенденция динамики и колебания не носили какой-либо направленности. У контрольных животных от марта к ноябрю в отдельные периоды различия достигали 39,3%, а у опытных - 14,2%. К концу наблюдений по этому показателю животные не отличались друг от друга.
У больных лейкозом коров уровень красных клеток крови в динамике наблюдений не отличался существенно от условно здоровых. Максимальный уровень колебаний составил 19,7%. Коровы опытной подгруппы по этому показателю не отличались существенно от контрольных. Максимальный уровень колебаний в динамике наблюдений был - 21,7%. В конце наблюдений животные практически не отличались друг от друга.
Содержание гемоглобина в крови у условно здоровых коров обеих групп колебалось в динамике опыта от 93,7±1,2 до 125,7±4,6 г/л и имело тенденцию к постепенному нарастанию. Животные подгрупп по данному показателю практически не отличались друг от друга, за исключением начала опыта.
Несколько другую картину между подгруппами наблюдали у РИД-положительных коров. Это наглядно представлено на фиг.2. У коров, получавших лигфол, содержание гемоглобина в крови значительно возрастало с увеличением длительности применения препарата.
Больные лейкозом коровы как по подгруппам, так и в динамике содержания гемоглобина в крови не отличались друг от друга. Так, его содержание колебалось от 105,1±7,2 до 118,1±13,1 г/л и находилось в пределах 11,0%.
Как известно, гематокрит характеризует соотношение плотной (эритроциты в основном) и жидкой частей крови. Исследования обеих подгрупп условно здоровых коров не показали изменений этого критерия оценки крови в динамике и влияния на него испытуемого препарата. Гематокрит колебался от 0,265±0,050 до 0,330±0,064 единиц, что находилось в крайних пределах 19,7%.
В группе РИД-положительных коров отмечается тенденция, сходная с плотностью крови у условно здоровых. Если в подгруппе контрольных коров плотность крови увеличилась к концу наблюдений на 11,5%, то опытных - на 20,0%-24,0%.
По больным лейкозом коровам можно отметить общую тенденцию еще более высокой плотности крови, хотя полученные данные в большинстве случаев не носили достоверного характера. В любом случае, если в контрольной подгруппе по сравнению с первым взятием гематокрит возрос на 9,7% - максимально, то в опытной - на 41,7%. Полученные данные в той или иной мере говорят об уплотнении крови с развитием лейкоза и потенцировании этого процесса лигфолом.
В таблице 8 приведены данные по скорости оседания эритроцитов (СОЭ).
Таблица 8Влияние лигфола на динамику СОЭ в крови коров с разным состоянием | |||
№ п/п | Дата взятия крови | СОЭ, мм/час | |
Физиологический раствор | Лигфол | ||
УСЛОВНО ЗДОРОВЫЕ | |||
1 | 18.03.05 | 0,61±0,02 | 0,44±0,02 |
2 | 28.05,05 | - | - |
3 | 20.07.05 | 0,38±0,04 | 0,33±0,01 |
4 | 09.11.05 | 0,38±0,03 | 0,31±0,05 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ | |||
5 | 18.03.05 | 0,65±0,06 | 0,65±0,02 |
6 | 28.05,05 | - | - |
7 | 20.07.05 | 0,36±0,04 | 0,49±0,06 |
8 | 09.11.05 | 0,32±0,05 | 0,42±0,05 |
РИД-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ + ЛЕЙКОЦИТОЗ | |||
9 | 18.03.05 | 0,60±0,10 | 0,67±0,03 |
10 | 28.05.05 | - | - |
11 | 20.07.05 | 0,41±0,03 | 0,41±0,03 |
12 | 09.11.05 | 0,40±0,08 | 0,33±0,03 |
Последняя характеризует два основных фактора, влияющих на этот процесс: 1 - скорость свертывания эритроцитов в конгломераты и 2 - плотность крови.
У условно здоровых животных в подгруппе контрольных животных СОЭ ускоряется на 18,5%. У опытных, получавших лигфол, она изначально выше на 28,8%, а в конце наблюдений - на 18,4%. Если в контрольной подгруппе - это 18,4%, то в опытной - на 29,5%.
У РИД-положительных животных в контрольной подгруппе СОЭ ускоряется от начала и к концу наблюдений на 40,8%, а в опытной - на 35,4%. Тенденция больных животных по СОЭ была идентичной остальным группам. Характерно ускорение в