Способ повышения неспецифической резистентности и иммунологической реактивности свиней при вакцинации

Способ повышения неспецифической резистентности и иммунологической реактивности свиней при вакцинации

Реферат

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к методам повышения резистентности свиней при вакцинации.

Вакцинопрофилактика при ряде заболеваний не всегда достаточно эффективна из-за не однородного иммунного ответа животных на введение антигена. В стаде всегда присутствуют особи с низкими титрами специфических антител. Кроме того, сами вакцины в определенные фазы иммунизации способны подавлять сопротивляемость организма к инфекциям. Титры антител при вакцинации на фоне иммунодефицита часто не достигают необходимых значений, что требует увеличения дозы вводимого антигена.

В такой ситуации необходимо применение иммунокоррегирующих средств, способных повысить резистентность животных, напряженность иммунитета и снять вакцинный стресс.

Учеными многих стран проводится большая работа по конструированию иммуномодуляторов, применяющихся для активизации поствакцинального иммунитета. Установлено, что они оказывают на иммунную систему животных значительное влияние, повышая активность иммунокомпетентных клеток, создавая устойчивость организма к воздействию инфекционных агентов.

Известно применение селенита натрия и деполена (селенит бария) в качестве иммунокорректоров с целью повышения резистентности и напряженности иммунитета при вакцинации овец против бруцеллеза и клостридиозов /1/, болезни Нъюкасла /2/, сибирской язвы /3/. Недостатками данного способа является высокая токсичность указанных неорганических соединений селена и низкая эффективность применения этих препаратов.

Прототипом изобретения является способ повышения молочной продуктивности и неспецифической резистентности новотельных коров, предусматривающий введение сухостойным коровам за 15 дней до отела однократно парентерально пролонгированной формы селенопирана, содержащей 300 мг селенопирана /4/.

Недостатками прототипа являются:

- использование дорогостоящих жиров для приготовления инъекционной формы препарата,

- высокая доза препарата - 300 мг,

- низкая терапевтическая широта,

- короткий срок годности препарата - 1 год

- невозможность использования продуктов животноводства после применения селенопирана в течение 10 дней.

Технический результат изобретения - повышение неспецефической резистентности и напряженности при вакцинации свиней.

Способ осуществляется следующим образом: свиноматкам при вакцинации против колибактериоза, сальмонеллеза и анаэробной энтеротоксемии вводят селекор двукратно внутримышечно с интервалом в 10 дней за 35 и 25 дней до опороса в дозе 20 мкг/кг тела свиноматок.

Селекор - раствор 4,4 Ди-[3(5-метилпиразолил)]селедина (ДМПСд) с содержанием в 1 мл 300 или 500 мкг действующего вещества (ДВ, ДМПСд), препарата антиоксидантного действия, содержащего органическую форму селена /5/.

Селекор - препарат 4 класса токсичности, то есть менее токсичен, чем селенопиран, относящийся к 3-му классу. Препарат, кроме антиоксидантных свойств, через пиразолиловое кольцо (в своей структуре) обладает выраженным действием на ферментные системы животного, отвечающие в определенной степени за формирование и напряженность иммунитета (табл.2, 3). Продукты животноводства можно использовать непосредственно после применения селекора свиньям.

Вполне обоснованно можно утверждать, что препараты селена обладают мощным антиоксидантным действием и являются новым поколением высокоэффективных регуляторов повышения неспецифической резистентности и напряженности иммунитета при вакцинации животных.

Испытания проведены в племрепродукторе отделение «Малиновка» ООО-спецхоза «Вишневский» Верхнехавского района, Воронежской области.

Оценку влияния селекора на показатели неспецифической резистентности и специфического иммунитета, при вакцинации свиноматок, проводили на основании исследований крови и сыворотки крови по общепринятым методикам на содержание иммуноглобулинов классов G, A, M, бактерицидную, лизоцимную, комплектарную активности, титра нормальных и специфических антител, показателей фагоцитоза с учетом эпизоотической остановки.

Для опытов было сформировано 2 группы свиноматок крупной белой породы. Животным опытной группы (n=20) при вакцинации бивалентной вакциной против сальмонеллеза из аттенуированных штаммов Salmonella cholerae suis №9 и Salmonella tiphimurium №3 живой и вакциной против либактериоза и анаэробной энтеротоксемии свиней инактированной, а также с интервалом 10 дней двукратно за 35 и 25 дней до опороса вводили внутримышечно селекор в дозе 20 мкг/кг массы тела. Контрольным свиноматкам (n=20) в эти сроки вводили только вакцины.

Установлено, что введение препарата супоросным свиноматкам значительно влияет на гуморальное звено неспецифической резистентности (таблица 1). Так бактерицидная активность через 25 дней после введения препарата повысилась на 13%, в это время как в контроле она снижалась 25%.

Таблица 1
Показатели неспецифической резистентности свиноматок на протяжении опыта.
Показатели	Статистические показатели	Фон (55-60 дней до опороса)	Опытная группа	Контрольная группа
10-14 дней до опороса	2 недели после опороса	10-14 дней до опороса	2-3 недели после опороса
БАСК, %	M±m	90,63±3,22	96,03±0,65	92,32±0,86	82,72±7,74	90,75±2,71
Р<		<0,05	<0,5	-	-
КАСК, % гемолиза	M±m	36,80±9,13	24,26±8,98	43,32±12,48	31,49±17,72	34,8±9,19
Р<		0,7	0,6	-	-
ЛАСК, мкг/л	M±m	2,40±0,16	1,69±0,21	1,28±0,18	1,78±0,09	0,75±0,23
Р<		0,7	0,2	-	-
Титр НГА	M	1:68	1:154,6	1:83,2	1:112	1:70,4
ФАЛ, %	M±m	91,83±1,43	92,67±1,18	93,66±0,67	87,00±2,16	90,66±0,57
Р<		0,05	0,01	-	-
ФИ	M±m	9,14±0,76	9,92±0,84	9,61±0,55	6,87±0,57	7,17±0,19
Р<		0,002	0,002	-	-
ФЧ	M±m	8,44±0,73	9,19±1,02	9,02±0,56	5,95±0,21	6,52±0,16
Р<		0,001	0,002	-	-

Лизоцимная активность после вакцинации постепенно снижалась в обеих группах (в группе селекора на 29,5%, в контроле на 25,8%). Это согласуется с данными /3/, что иммунизация приводит к продолжительному угнетению лизоцимной активности и одновременно к снижению содержания в крови других неспецифических белков, что является атрибутом иммунологической перестройки организма.

Титр нормальных гемагглютининов в группе свиноматок, где применялся ДДПСд перед опоросом в 1,38 раза превышал таковой в контрольной группе (таблица 1)

Полученные данные показывают, что фагоцитарная активность нейтрофилов в опытной группе повышалась через 25 дней после вакцинации на 6,12% относительно контроля. Следует отметить, что интенсивность фагоцитоза в опытной группе достоверно превышала агрессивность нейтрофилов контрольной группы: фагоцитарный индекс (ФИ) на 30,75%, фагоцитарное число (ФЧ) - на 35,26%. Вакцинация в период глубокой супоросности является стресс-фактором, который ведет к усилению процессов свободнорадикального окисления. По-видимому, в критический период стресса селекор, обладающий антиоксидантными свойствами, оказывал предохранительное действие на нейтрофилы крови, разрушающиеся под воздействием свободных радикалов.

После опороса титр нормальных антител снижался в обеих группах, однако в группе, где применялся селекор, он продолжал превышать контроль на 15,38%.

Через 2 недели после опороса бактерицидная активность сыворотки крови в группе контроля возрастала на 8,85%, а в группе селекора незначительно снижалась, однако превышала этот показатель в контроле. Комплиментарная активность сыворотки крови после опороса возрастала в обеих группах, но больше - в опытной (на 19,67%).

Тенденция к снижению лизоцимной активности сохранялась у всех животных, но к концу подсосного периода этот показатель на 41,4% был выше у свиноматок, получавших селекор.

Значительных изменений активности фагоцитов в обеих группах после опороса не было отмечено и поглотительная способность гранулоцитов у контрольных свиноматок оставалась ниже, чем у опытных более чем в 1,3 раза.

Стоит отметить, что у животных опытной группы показатели неспецифической резистентности на протяжении опыта имели более выраженную стабильность, что свидетельствует о положительном влиянии селенорганического препарата.

При оценке клеточного звена иммунитета установлено, что препарат положительно влияет на Т- и В-клеточную популяции лимфоцитов (таблица 2), стимулируя увеличение Т-лимфоцитов на 10,52%, а В-лимфоцитов на 28,27%, в то время как у контрольных животных количество клеток снижалось.

Таблица 2
Иммунологические показатели свиноматок
Показатели	Статистические показатели	Фон (55-60 дней до опороса)	Опытная группа	Контрольная группа)
10-14 дней до опороса	2-3 недели после опороса	10-14 дней до опороса	2-3 недели после опороса
Т-лимфоциты, %	M±m	55,52±2,18	62,05±3,00	57,23±1,95	54,96±3,63	60,64±1,54
Р<		0,2	0,2	-	-
В-лимфоциты, %	M±m	15,31±2,10	20,30±2,89	30,13±3,40	14,56±2,97	27,44±3,17
Р<		0,3	0,6	-	-
Ig A, г/л	M±m	0,71±0,12	0,74±0,11	0,96±0,13	0,84±0,26	1,3±0,23
Р<		0,7	0,3	-	-
Ig G, г/л	M±m	19,83±1,12	18,33±2,29	19,07±1,78	20,30±1,91	16,9±0,62
Р<		0,4	0,6	-	-
Ig M, г/л	M±m	3,55±0,25	3,79±0,32	2,93±0,2	3,00±0,41	2,45±0,42
Р<		0,01	0,4	-	-

После опороса количество В-лимфоцитов в обеих группах увеличивалось, однако в группе, где применялся препарат, их уровень оставался выше на 8,93%.

Результаты исследований показали, что селекор способствовал увеличению числа Т- и В-клеток, особенно в стрессовых ситуациях (вакцинация, опорос), то есть когда это особенно необходимо организму животного.

Мы считаем, что снижение количества лимфоцитов в крови контрольных свиноматок в условиях предродового и вакцинального стресса связано с повреждающим действием избыточных количеств продуктов свободнорадикального окисления, а предохранительный эффект селекора определяется его антиоксидантными и адаптогенными свойствами. К этому следует добавить, что на плазматической мембране Т-лимфоцитов имеется монооксигеназная система с цитохромом Р-450, которая, вероятно, участвует в метаболизации селенорганических соединений /4/. Стимулируя данную систему, селекор возможно влияет и на пролиферативные процессы Т-клеток.

Как показали исследования, данное соединение селена влияет и на гуморальные показатели иммунитета, способствуя более быстрой адаптации организма (таблица 2).

Перед опоросом уровень IgA закономерно возрастал, что связано с активизацией местных механизмов защиты, у свиноматок обеих групп. После опороса (к 3-ей неделе) динамика роста IgA сохранялась в большей степени в интактной группе и разница с группой, в которой животным применяли селекор, составляла 26,15%. Это свидетельствует о напряжении локального иммунитета в контрольной группе после опороса (послеродовые заболевания в этой группе регистрировались у 50% свиноматок).

К концу беременности у опытных животных отмечена тенденция к снижению иммуноглобулинов класса G (на 7,56%), что может объясняться накоплением их в молочной железе, для обеспечения иммунитета родившихся впоследствии поросят. В подсосный период уровень IgG в опытной группе значительно не менялся, тогда как у контрольных животных наблюдалось достоверное снижение этого показателя (на 16,75%), что объясняется оттоком IgG в репродуктивные органы, вследствие возникновения послеродовых заболеваний.

После вакцинации в группе животных, которым применялся препарат, уровень IgM увеличивался (на 6,33%), а в контроле снижался (на 18,31%). Это свидетельствует о более высокой напряженности иммунитета против сальмонелл и эшерихий в опытной группе, чем в контроле, что также подтверждается более высоким титром специфических антител в реакции агглютинации.

После опороса тенденция к снижению уровня IgM отмечалась в обеих группах, однако в контрольной группе этот показатель был все таки ниже, чем в опытной на 16,38%.

Изменение титра специфических антител также указывает на положительное влияние применения селекора совместно с вакцинацией (таблица 3).

Таблица 3
Титр специфических антител у свиноматок
Титр специфических антител против:	Фон	10-14 дней до опороса	2-4 день после опороса	Молозиво
Селекор	Контроль	Селекор	Контроль	Селекор	Контроль
Эшерихий	1:35,4	1:216,7	1:62,5	1:360	1:110	1:200	1:66,6
Сальмонелл	1:54,15	1:150	1:50	1:300	1:60	1:230	1:66,6

Через 25 дней после вакцинации титр агглютининов к эшерихиям у животных опытной группы возрастал более чем в 6 раз (в контроле в 2 раза), а к сальмонеллам в 3 раза (в контроле без изменений). После опороса у животных, обработанных селекором, титр специфических антител к эшерихиозному антигену был более чем в 3 раза, а к сальмонеллезному в 5 раз выше, чем в контроле.

Титр специфических антител в молозиве свиноматок опытной группы был выше в 3-3,5 раза, чем в контроле, что также свидетельствует о более высокой напряженности специфического иммунитета.

Из вышеизложенного следует, что введение свиноматкам селекора в период супоросности на фоне вакцинации против сальмонеллеза и колибактериоза положительно действует на показатели неспецифической резистентности и иммунологической реактивности организма, увеличивая показатели фагоцитоза, титр естественных гемагглютининов, бактерицидную активность, количество Т- и В-лимфоцитов, иммуноглобулина М, а после опороса комплиментарную и лизоцимную активности сыворотки крови, и обеспечивает более высокую и продолжительную напряженность иммунитета против сальмонеллеза и колибактериоза.

Источники информации

1. Кадымов Р.А. Влияние селена на поствакцинальный иммунитет у овец / Р.А.Кадымов, Р.И.Асланов // Ветеринария, 1989. - №12. - С.38-39.

2. Лысенко А.А. Влияние селена на формирование поствакцинального иммунитета против болезни Ньюкасла у кур / А.А.Лысенко, Я.М.Ляпкало, М.Ю.Мишанин // Труды Кубанского гос. агр. университета. - Краснодар, 1999. - Вып.375. - С.147-153.

3. Горковенко Н.Е. Фармакокоррекция иммунной недостаточности у крупного рогатого скота / Н.Е.Горковенко, Ю.А.Макаров // Краснодарской НИВС - 55 лет: Сб. науч. тр. - Краснодар, 2001. - Т.1. С.176.

4. RU 2002112883 A, 2003.12.27.

5. Саноцкий И.В. Незаменимый селен / И.В.Саноцкий // Незаменимый селен. Предупреждение и лечение заболеваний. - М., 2001. - С.18-21.

Способ повышения неспецифической резистентности и иммунологической реактивности свиней при вакцинации, включающий введение вакцины против колибактериоза, сальмонеллеза и анаэробной энтеротоксемии и селенорганического препарата, отличающийся тем, что в качестве селенорганического препарата используют Селекор двукратно, внутримышечно, с интервалом в 10 дней за 35 и 25 дней до опороса в дозе 20 мкг/кг массы тела свиноматок.