Способ петраша-ильиной электропунктурной оценки воздействия физических, токсических и фармакологических агентов на физиологическое состояние лабораторных животных (крысы, мыши)

Способ петраша-ильиной электропунктурной оценки воздействия физических, токсических и фармакологических агентов на физиологическое состояние лабораторных животных (крысы, мыши)

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Изобретение относится к области биологии и экспериментальной медицины и может использоваться в медико-биологических исследованиях, в частности токсикологических, фармакологических, биофизических и др.

Известны способы оценки воздействия физических, токсических и фармакологических агентов на физиологическое состояние лабораторных животных (крысы, мыши) посредством фиксации исследуемого животного в специальном устройстве (камера, клетка, столик и др.) с последующим измерением физиологических параметров животного (давление крови, дыхательный объем и др.) при проведении изучаемого воздействия (см., например, WO 8101790, 1981; JP 59122949, 1984; US 2002122770, 2002 и др.).

Указанные известные способы дают возможность определить реакцию на воздействие той или иной отдельной функциональной системы организма (кровообращение, дыхание и др.), но не позволяют в рамках единой методики дать целостную системную оценку состояния организма животного.

Известны способы системного контроля состояния живого организма путем измерения электропроводности тела методами электропунктурной резонансной диагностики (см., например, Электропунктурный вегетативный резонансный тест: Методические рекомендации №99/96 / Василенко A.M. и др. - М.: Науч.-практ. центр традиц. мед. и гомеопатии МЗ РФ, 2000. - 28 с.).

Эти способы позволяют в рамках единого методического подхода дать комплексную оценку состояния органов и систем, выявить вид и степень патологического процесса, причем возможно использование для контроля лишь одной точки на теле, однако, они разработаны для человека.

Лабораторные животные неудобный объект для этих исследований в силу своей подвижности и наличия шерсти. Проведение исследований на наркотизированных животных нецелесообразно из-за изменения физиологических реакций, что может привести к неправильной трактовке результатов.

Наиболее близким аналогом к заявляемому способу является техническое решение, включающее помещение животного в измерительную камеру, снабженную электродами, соединенными с измерителем электропроводности (SU 1659022 А1, 1991.06.30).

Основным недостатком аналога-прототипа является то, что при проведении исследований животное забивается или наркотизируется, т.е. функциональное состояние нарушается или вообще отсутствует в случае забивания животного, в связи с чем оценка физиологического состояния животного по параметрам электропроводности его тела крайне недостоверна.

Задачей настоящего изобретения является повышение достоверности оценки функционального состояния лабораторного животного при экспериментальном воздействии на него физических, токсических и фармакологических агентов за счет устранения артефактов связанных с наркозом и стрессом, в том числе болевым.

Согласно изобретению поставленная задача решается тем, что в известном способе, включающем помещение животного в измерительную камеру, снабженную электродами, соединенными с измерителем электропроводности, и регистрацию изменений электропроводности тела животного вследствие произведенного воздействия, животное в измерительной камере фиксируют в естественной позе, обеспечивая электрический контакт подушечек стоп всех четырех лап с электродом в виде электропроводящей площадки, имеющим электрическое соединение с антенной и измерителем электропроводности, второй измерительный электрод которого, например, в виде щупа вводят в контакт с телом животного в зоне проксимальной области хвоста и по показаниям измерителя электропроводности производят электропунктурную оценку физиологического состояния животного до и после исследуемого воздействия, причем воздействие в зависимости от его вида производят либо непосредственно на животное, либо на антенну.

Сущность изобретения поясняется чертежами фиг.1 и фиг.2.

На фиг.1 приведена функциональная схема заявляемого технического решения, на фиг.2 - вид детали (съемной заслонки) измерительной камеры.

На чертеже (фиг.1) обозначены: 1 - лабораторное животное (крыса, мышь), 2 - измерительная камера, выполненная из диэлектрического материала, например, оргстекла, 3 - съемная заслонка измерительной камеры (оргстекло), 4 - арочная выборка в съемной заслонке, 5 - опорный элемент, 6 - электрод в виде электропроводящей площадки, 7 - антенна, 8 - измеритель электропроводности, 9 - измерительный электрод, например, в виде щупа, 10 - контрольная зона в проксимальной части хвоста, 11 - емкость с исследуемым веществом.

На фиг.2 показаны: 3 - съемная заслонка измерительной камеры, 4 - арочная выборка в съемной заслонке (на фиг.1 и фиг.2 общие обозначения элементов).

Способ осуществляется следующим образом.

Лабораторное животное 1 (белая крыса или мышь) помещают в измерительную камеру 2, в которой оно находится в естественной позе без наркоза. Положение животного фиксируется стенками камеры 2, размеры которой выбирают соответственно размерам животного. Для крыс и мышей изготовляют соответственно различные по размерам измерительные камеры. Сзади животное поджимают в камеру съемной заслонкой 3, имеющей жесткое крепление к измерительной камере. Хвост животного располагают в арочной выборке 4 съемной заслонки 3 и закрепляют на опорном элементе 5, например, лейкопластырем. В измерительной камере 2 обеспечивают электрический контакт подушечек стоп всех четырех лап животного с электродом 6, выполненным в виде электропроводящей площадки, служащей полом камеры 2. Для лучшего контакта электрод 6 может быть смочен электропроводящим раствором, например, физиологическим. Электрод 6 имеет электрическое соединение с антенной 7, выполненной из электропроводного материала, например латуни или дюралюминия в форме пластины. Возможны другие любые формы антенны 7 в зависимости от задач исследования. Электрод 6 соединяют с одним из входов измерителя электропроводности 8, к другому его входу подсоединяют измерительный электрод 9, например, в виде щупа. Измерительный электрод 9 вводят в контакт с телом животного в контрольной зоне 10 проксимальной области хвоста (величина зоны 10 находится в пределах до 1/3 длины хвоста от его основания, причем наиболее информативным является участок этой зоны в пределах 15 мм от основания хвоста) и по показаниям измерителя электропроводности 8 производят электропунктурную оценку физиологического состояния животного. Электропунктурная оценка производится в соответствии с инструкцией по эксплуатации используемого измерительного аппарата. В качестве такового может быть использован, например, аппарат «ИМЕДИС-ТЕСТ», реализующий метод электропунктурной диагностики с применением вегетативного резонансного теста или другие аппараты подобного типа (см., например: Готовский Ю.В. и др. Электропунктурная диагностика и терапия с применением вегетативного резонансного теста «ИМЕДИС-ТЕСТ». Методические рекомендации. - М.: ИМЕДИС, 2000. - 151 с.). Расположение хвоста животного на опорном элементе 5 обеспечивает удобство измерений при нажатии измерительным электродом - щупом 9 на точки в контрольной зоне 10. После этого производят воздействие исследуемым физическим, токсическим или фармакологическим агентом на животное 1 непосредственно или опосредованно через антенну 7 в выбранной дозе или экспозиции и повторяют измерение электропроводности в той же точке зоны 10, как и до воздействия. В случае воздействия токсическим или фармакологическим агентом через антенну 7 исследуемое вещество размещают, например, в емкости 11 на антенне 7, как это показано на фиг.1. Различного рода излучатели физических полей также могут быть размещены на антенне 7. По сопоставлению результатов электропунктурной оценки физиологического состояния животного до и после исследуемого воздействия судят о его биологической активности и направленности воздействия. При проведении измерений электропроводности по заявляемому способу для электропунктурной оценки реакции физиологического состояния животного на исследуемое воздействие или определения вида и степени патологии при моделировании патологических процессов в зависимости от задач исследования используют известные вегето-резонансные тесты, например, фотонный индекс, индекс электромагнитной нагрузки, индекс радиационной нагрузки, различного рода нозоды и др., обеспечиваемые, например, аппаратом «ИМЕДИС-ТЕСТ».

Пример 1 реализации заявляемого способа.

В качестве объекта для электропунктурной оценки были взяты лабораторные белые мыши с развившейся карциномой молочной железы. Исследование проведено в соответствии с заявляемым способом. В качестве измерителя электропроводности использовали аппарат для электропунктурной диагностики «ИМЕДИС-ТЕСТ» согласно инструкции по его применению. Результаты измерений представлены на графике фиг.3. На графике (фиг.3) представлены показатели электропроводности в условных единицах (условн. ед.) двух мышей (1 и 2) при тестировании стадии развития карциномы (1-2-3), состояния иммунной системы и наличия холецистита в качестве контроля. В соответствии с методикой применения аппарата «ИМЕДИС-ТЕСТ» норма уровня измеряемой электропроводности должна составлять 80 условн. ед. Из графика наглядно видно, что наибольшие отклонения от нормы (80 условн. ед.) получены при тесте на карциному 3-й степени, т.е. при наиболее выраженном опухолевом процессе, что соответствовало реальному состоянию животных, причем визуально более выраженному у мыши-2 (ее показатели имели и большее отклонение на графике). Оценка состояния на тест иммунной системы показала снижение ее активности у обоих животных. В то же время контрольный тест на наличие холецистита, наличие которого вряд ли предполагалось в данном случае, по измерениям также подтвердило его отсутствие. Таким образом, приведенный пример наглядно демонстрирует эффективность применения заявляемого способа и достоверность результатов оценки с его помощью развития моделируемого патологического процесса.

Пример 2 реализации заявляемого способа.

Лабораторное животное (белая крыса) помещали в измерительную камеру в соответствии с заявляемым способом. Производили измерение исходной величины электропроводности в зоне у основания хвоста с помощью аппарата электропунктурной диагностики «Стелла-2 (01)». На антенне поочередно располагали тестируемые вещества: препараты нитроглицерина и сенаде таблетированной формы, раствор аммиака 10% во флаконе. Кроме того, испытывали один из вариантов исследуемого электромагнитного излучения «X» МГц-диапазона при воздействии непосредственно на животное. После каждого воздействия повторяли электропунктурную оценку физиологического состояния животного. В соответствии с методикой применения аппарата «Стелла-2 (01)» норма уровня измеряемой электропроводности должна составлять 55-65 условн. ед. Результаты измерений приведены в таблице.

Вид воздействия	Исходный показатель	Нитроглицерин	Сенаде	Аммиак 10%	Излучение «X»
Электропроводность (условн. ед.)	55	62	65	67	83

Полученные результаты показывают, что воздействие оцениваемых фармакологических препаратов повышало электропунктурный показатель в пределах нормы (55-65 условн. ед.), тогда как воздействие оцениваемого излучения «X» дало значительное увеличение показателей относительно диапазона нормы, что свидетельствует о его биологической неадекватности для животного.

Положительный эффект заявляемого изобретения состоит в обеспечении с его помощью возможности использования информативного метода электропунктурной диагностики для исследований на лабораторных животных в экспериментальной медицине, токсикологии, фармакологии и других направлениях медико-биологической области. Преимущества заявляемого способа состоят в его безболезненности, возможности многократного повторения, быстроте выполнения измерений и отсутствии необходимости наркоза, стрессовых состояний, т.е. в устранении методических артефактов при исследовании функционального состояния, вида и степени патологии у лабораторного животного.

Способ электропунктурной оценки воздействия физических, токсических и фармакологических агентов на физиологическое состояние лабораторных крыс и мышей, включающий помещение животного в измерительную камеру, снабженную электродами, соединенными с измерителем электропроводности, и регистрацию изменений электропроводности тела животного вследствие произведенного воздействия, отличающийся тем, что животное в измерительной камере фиксируют в естественной позе, обеспечивая электрический контакт подушечек всех четырех лап с электродом в виде электропроводящей площадки, имеющим электрическое соединение с антенной, выполненной из электропроводного материала в форме пластины и измерителем электропроводности, второй электрод в виде щупа вводят в контакт с телом животного в зоне проксимальной области хвоста и по показаниям измерителя электропроводности производят электропунктурную оценку физиологического состояния животного до и после исследуемого воздействия, причем воздействие производят либо непосредственно на животное, либо на антенну.