Белок ifnab-bpi, его предшественник, молекула днк, экспрессирующий вектор, способ продуцирования, фармацевтическая композиция для ингибирования активности ifn- или ifn-
Патент 2336279
Авторы
Правообладатели
Классы МПК
- C07K19 - Общие способы получения пептидов
- A61K38/21 - интерфероны
- C07K14/715 - для цитокинов; для лимфокинов; для интерферонов
- C12N5/10 - клетки, модифицированные введением чужеродного генетического материала, например клетки, трансформированные вирусом
- C12N15/12 - гены, кодирующие животные белки
- C12N15/62 - ДНК последовательности, кодирующие белки при слиянии
- C12N15/63 - введение чужеродного генетического материала с использованием векторов; векторы; использование их хозяев; регулирование экспрессии
Белок ifnab-bpi, его предшественник, молекула днк, экспрессирующий вектор, способ продуцирования, фармацевтическая композиция для ингибирования активности ifn- или ifn-
Иллюстрации
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к генной инженерии. Получены новые интерферон связывающие белки, которые модулируют активность различных подтипов интерферона-α, а также активность интерферона-β. Описано клонирование фрагмента ДНК, кодирующего интерферон α/β связывающий белок IFNAB-BPI, и экспрессия полученного фрагмента ДНК в клетках-хозяевах как с образованием соответствующего полипептида, так и в форме слитых белков. Предложено практическое использование полученных белков в составе фармкомпозиций для ингибирования активности IFN-α или IFN-β. Использование изобретения может найти применение в медицине для подавления нежелательного воздействия IFN-α или IFN-β. 12 н. и 1 з.п. ф-лы, 10 ил., 6 табл.
Реферат
Текст описания приведен в факсимильном виде.
1. Белок IFNAB-BPI, обладающий способностью связывать интерферон-α/β, характеризующийся аминокислотной последовательностью
ISYDSPDYTDESCTFKISLRNFRSILSWELKNHSIVPTHYTLLYTIMSKPED LKVVKNCANTTRSFCDLTDEWRSTHEAYVTVLEGFSGNTTLFSCSHNF WLAIDMSFEPPEFEIVGFTNHINVMVKFPSIVEEELQFDLSLVIEEQSEGIV KKHKPEIKGNMSGNFTYIIDKLIPNTNYCVSVYLEHSDEQAVIKSPLKCT LLPPGQESESAESAKIGGIITVFLIALVLTSTIVTLKWIGYICLRNSLPKVLR QGLTKGWNAVAIHRCSHNALQSETPELKQSSCLSFPSSWDYKRASLCPS D, или его функционально активный мутеин, полученный путем консервативных замен в указанной последовательности, или его функционально активный фрагмент.
2. Предшественник IFNAB-BPI, характеризующийся аминокислотной последовательностью
MLLSQNAFIVRSLNLVLMVYISLVFGISYDSPDYTDESCTFKISLRNFRSIL
SWELKNHSIVPTHYTLLYTIMSKPEDLKVVKNCANTTRSFCDLTDEWRS
THEAYVTVLEGFSGNTTLFSCSHNFWLAIDMSFEPPEFEIVGFTNHINVM
VKFPSIVEEELQFDLSLVIEEQSEGIVKKHKPEIKGNMSGNFTYIIDKLIPN
TNYCVSVYLEHSDEQAVIKSPLKCTLLPPGQESESAESAKIGGIITVFLIAL
VLTSTIVTLKWIGYICLRNSLPKVLRQGLTKGWNAVAIHRCSHNALQSE
TPELKQSSCLSFPSSWDYKRASLCPSD, или его функционально активный мутеин, полученный путем консервативных замен в указанной последовательности, или его функционально активный фрагмент.
3. Слитый белок, обладающий способностью связывать интерферон-α/β и состоящий из (а) аминокислотной последовательности белка IFNAB-BPI или его функционально активного мутеина или фрагмента по п.1 и (b) аминокислотной последовательности иммуноглобулина или его фрагмента.
4. Слитый белок, обладающий способностью связывать интерферон-α/β и состоящий из (а) аминокислотной последовательности белка IFNAB-BPI или его функционально активного мутеина или фрагмента по п.1 и (b) аминокислотной последовательности внеклеточной части рецептора α-интерферона (IFNAR) или ее фрагмента.
5. Слитый белок, обладающий способностью связывать интерферон-α/β и состоящий из (а) аминокислотной последовательности белка IFNAB-BPI или его функционально активного мутеина или фрагмента по п.1 и (b) аминокислотной последовательности иммуноглобулина, его фрагмента или комбинации любого из них с внеклеточной частью рецептора α-интерферона (IFNAR).
6. Изолированная молекула ДНК, имеющая нуклеотидную последовательность, которая кодирует белок IFNAB-BPI по п.1 или 2.
7. Молекула ДНК по п.6, которая транскрибируется в молекулу мРНК размером приблизительно 1,5 т.п.н.
8. Гибридная молекула ДНК, кодирующая слитый белок по п.3 и состоящая из (а) нуклеотидной последовательности, в соответствии с генетическим кодом определяющей аминокислотную последовательность белка IFNAB-BPI или его функционально активного мутеина или фрагмента по п.1, и (b) нуклеотидной последовательности, в соответствии с генетическим кодом определяющей аминокислотную последовательность иммуноглобулина или его фрагмента.
9. Гибридная молекула ДНК, кодирующая слитый белок по п.4 и состоящая из (а) нуклеотидной последовательности, в соответствии с генетическим кодом определяющей аминокислотную последовательность белка IFNAB-BPI или его функционально активного мутеина или фрагмента по п.1, и (b) нуклеотидной последовательности, в соответствии с генетическим кодом определяющей аминокислотную последовательность внеклеточной части рецептора α-интерферона (IFNAR) или ее фрагмента.
10. Гибридная молекула ДНК, кодирующая слитый белок по п.5 и состоящая из (а) нуклеотидной последовательности, в соответствии с генетическим кодом определяющей аминокислотную последовательность белка IFNAB-BPI или его функционально активного мутеина или фрагмента по п.1, и (b) нуклеотидной последовательности, в соответствии с генетическим кодом определяющей аминокислотную последовательность иммуноглобулина, его фрагмента или комбинации любого из них с внеклеточной частью рецептора α-интерферона (IFNAR).
11. Реплицируемый экспрессирующий вектор, содержащий молекулу ДНК по любому из пп.6-10 и регуляторные элементы, оперативно связанные с указанной молекулой ДНК и обеспечивающие ее экспрессию в трансформированной клетке млекопитающего.
12. Фармацевтическая композиция для ингибирования активности IFN-α или IFN-β, содержащая белок IFNAB-BPI по любому из пп.1 и 3-5 в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем.
13. Способ продукции белка IFNAB-BPI, предусматривающий культивирование культуры клеток млекопитающего, трансформированных экспрессирующим вектором по п.11, и выделение указанного белка.
Приоритет по пунктам:
07.02.1994 по пп.1-13.