Сбор лекарственных растений для профилактики и лечения нарушений мозгового кровообращения

Сбор лекарственных растений для профилактики и лечения нарушений мозгового кровообращения

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к фитотерапии, и может быть использовано для профилактики и лечения нарушений мозгового кровообращения (НМК).

В Государственный Реестр лекарственных средств и изделий медицинского назначения входит более 200 видов лекарственных растений, из которых только препараты барвинка малого (винкамин, винпоцетин) и гинкго двулопастного (гинкго билоба, билобил) используются для лечения нарушений мозгового кровообращения, их действие направлено на исчезновение субъективных симптомов заболевания (улучшающее мозговое кровообращение, гипотензивное, спазмолитическое, сосудорасширяющее и т.д.) [Государственный реестр лекарственных средств/гл. редактор Р.У.Хабриев. - М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения МЗ России, 2004. - T.1. -1405 с.]. Прототипом является барвинок малый. Однако у используемых препаратов имеется ряд недостатков: недостаточная сырьевая база, влияние только на отдельные звенья НМК.

Задачей изобретения является расширение арсенала лекарственных средств растительного происхождения различной направленности фармакологического действия для профилактики и лечения НМК.

Достигаемый при использовании изобретений технический результат - получение растительного сбора с выраженным терапевтическим эффектом для лечения НМК.

Предлагаемый сбор для профилактики и лечения НМК содержит листья барвинка малого, листья мяты перечной, листья подорожника большого, плоды боярышника, плоды шиповника, плоды рябины, траву полыни обыкновенной, траву донника, траву сушеницы топяной, цветки ромашки, корни солодки при соотношении компонентов в частях соответственно 1:1:1:1:1:1:1:2:1:1:1.

В состав сбора входят лекарственные растения, разрешенные к применению в медицинской практике [Государственная фармакопея СССР, Одиннадцатое издание. Вып.2 - М, 1990, ВФС 42-1728-87, ФС 42-2094-83, ФСП 42-0296-2339-02, ФСП 42-0330168301].

Технология приготовления сбора заключается в том, что каждый вид лекарственного сырья, удовлетворяющего требованиям Государственной фармакопеи Х и XI издания, измельчают до размера частиц не более 7 мм. Затем лекарственное сырье взвешивают и тщательно смешивают в равных частях до равномерной смеси и отсеивают от пыли сквозь сито с диаметром отверстий 0,18 мм. Для приготовления водного извлечения по 4,0 г сбора заливают 200 мл воды очищенной комнатной температуры, настаивают в инфундирном аппарате в течение 15 мин, затем охлаждают при комнатной температуре в течение 45 мин, процеживают, отжимая растительное сырье, и прибавляют воду до требуемого объема извлечения.

Антигипоксическое действие сбора изучали на белых беспородных мышах по увеличению продолжительности жизни при нормобарической гипоксии.

Изучение острой токсичности сбора проводили путем введения 10% настоя в дозах 1500-15000 мг/кг массы животных (белых беспородных мышей обоего пола, массой 18-20 г) в пересчете на сухой вес сбора внутрибрюшинно и перорально. Параметры токсичности вычисляли методом пробит-анализа по Литчфильду-Уилкоксону.

Антиагрегантную активность сбора определяли по модифицированному методу Борна с помощью анализатора тромбоцитов АТ-02, подключенного к компьютеру с помощью последовательного СОМ-порта с интерфейсом АСОМ и оснащенного оригинальной программой производителя АТ-02.ЕХЕ для регистрации результатов.

Антикоагулянтную активность сбора определяли путем подсчета времени свертывания приготовленной плазмы до образования фибрина. Аналогично определяли протромбиновое время в образцах плазмы с исследуемым сбором.

Об антиоксидантной активности исследуемого сбора судили по его способности ингибировать аутоокисление адреналина in vitro и тем самым предотвращать образование активных форм кислорода (методика 1) и использовали экспресс-метод на культуре клеток путем фиксирования концентрации, вызывающей лизис (методика 2).

На фиг.1 изображено влияние предлагаемого сбора на агрегацию тромбоцитов, вызываемую АДФ, коллагеном и адреналином; на фиг.2 - влияние предлагаемого сбора на факторы протромбинового комплекса; на фиг.3 - сравнительные данные методов 1-2 антиоксидантной активности сбора.

Пример 1. Влияние сбора для профилактики и лечения НМК на гипоксию

Берут сбор, который содержит: плоды боярышника - 1 ч., плоды шиповника - 1 ч., плоды рябины - 1 ч., траву полыни обыкновенной - 1 ч., листья мяты перечной - 1 ч., листья барвинка малого - 1 ч., траву сушеницы топяной - 1 ч., листья подорожника большого - 1 ч., цветки ромашки - 1 ч., корни солодки - 1 ч., траву донника - 2 ч.; по 10 г смесей сбора заливают 100 мл водой очищенной и настаивают в течение 15 мин в инфундирном аппарате, охлаждают при комнатной температуре в течение 45 мин. Сбор вводили внутрижелудочно в виде 10% свежеприготовленного настоя с расчетом 1,5 мл/кг, за 1 час до начала эксперимента с учетом пика его действия. Помещали по одному животному в герметически закрываемые банки объемом 500 мл. За животными вели наблюдение до прекращения дыхания.

Установлено, что сбор увеличивает устойчивость к нормобарической гипоксии, гибель животных уменьшается на 44%.

Пример 2. Острая токсичность сбора

Сбор вводили в виде 10% настоя в дозах 1500-15000 мг/кг массы животных в пересчете на сухой вес сбора внутрибрюшинно и перорально. За животными вели наблюдения в течение 14 дней; отмечали клиническую картину отравления, устанавливали взаимосвязь между количеством выживших животных и дозой.

По классификации Измерова Н.Ф. сбор при внутрибрюшинном введении относятся к 5 классу - практически нетоксическим веществам (LD₅₀=10050 (6281÷16080)).

Пример 3. Антиагрегантная активность сбора

Процесс агрегации индуцировали добавлением к богатой тромбоцитами исследуемой плазме человека стандартного количества агониста агрегации тромбоцитов (АДФ, коллагена, адреналина) и регистрировали фотометрически по падению ее оптической плотности (540 нм).

Таким образом, из представленных данных следует, что сбор при НМК обладает антиагрегантной активностью, при агрегации тромбоцитов, вызванной АДФ, коллагеном и адреналином (фиг.1).

Пример 4. Антикоагулянтная активность сбора

Для проведения исследования использовали кровь из локтевой вены, к которой добавляли 3,8% раствор цитрата натрия (9:1). Кровь центрифугировали непосредственно после взятия крови при 3000 об/мин в течение 15 мин, отбор плазмы на исследование проводили сразу же после центрифугирования.

При определении контрольных показателей в пробирку вносили 0,1 мл контрольной плазмы, инкубировали при температуре +37°С 1 мин, добавляли 0,2 мл разведенного «Техпластина», имеющего температуру +37°С, и начинали отсчет времени свертывания до образования фибрина.

Аналогично определяли протромбиновое время (ПВ) в образцах плазмы с исследуемым сбором:

На основании полученных данных сбор при НМК обладает высокой антикоагулянтной активностью (фиг.2).

Пример 5. Антиоксидантная активность сбора

Для проведения исследования к 2 мл бикарбонатного буфера (рН=10,65) добавляли 0,1 мл 0,1% раствора гидрохлорида адреналина и определяли оптическую плотность через 20 минут при длине волны 347 нм в кювете толщиной 10 мм на спектрофотометре СФ-46 (ОД₁). Далее к 2 мл бикарбонатного буфера (рН=10,65) добавляли 0,01 мл исследуемого настоя из растительного сырья или композиций и 0,1 мл 0,1% гидрохлорида адреналина и определяли оптическую плотность через 20 минут при длине волны 347 нм в кювете толщиной 10 мм на спектрофотометре СФ-46 (ОД₂).

Антиоксидантную активность (АОА) рассчитывали по формуле:

Сбор, состоящий из 11 видов лекарственного растительного сырья, обладает наибольшей антиоксидантной активностью (АОА - 77%).

Для подтверждения антиоксидантной активности сбора использовали метод 2.

Инфузории вида Parametium caudatum культивировали в лабораторных условиях на среде Лозина-Лозинского, содержащей 0,1 г хлорида натрия, по 0,01 г хлорида калия, хлорида кальция, хлорида магния и 0,02 г гидрокарбоната натрия, при температуре 22-25°С, естественном освещении, избегая попадания прямых солнечных лучей. Для питания инфузорий использовали настой зерен овса (1-3 зерна на 10 мл культуры). Культивирование парамеций проводили в колбах емкостью 30-50 мл. Высота культурного слоя не более 3 см для свободного проникновения кислорода, среда нейтральная.

К культуре парамеций добавляли испытуемый настой и выдерживали в хроническом опыте 24-72 часа, т.е. период, когда формируются защитные механизмы, затем создавали патологическую модель повреждения мембран парамеций 14% раствором этилового спирта и 3% раствором пероксида водорода, засекая время полной их остановки. Повышая далее процентное содержание ядов, фиксировали концентрацию, вызывающую лизис. Обе методики дают объективные результаты, согласно которым исследуемая пропись сбора обладает достаточно высокой антиоксидантной активностью (фиг.3).

Таким образом, предлагаемый сбор позволяет расширить арсенал лекарственных средств растительного происхождения поливалентного действия для профилактики и лечения нарушений мозгового кровообращения, так как обладает выраженным антикоагулянтным, антиагрегантным, антиоксидантным действием, повышает устойчивость к нормобарической гипоксии.

Средство для профилактики и лечения мозгового кровообращения, содержащее листья барвинка малого, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит листья мяты перечной, листья подорожника большого, плоды боярышника, плоды шиповника, плоды рябины, траву полыни обыкновенной, траву донника, траву сушеницы топяной, цветки ромашки, корни солодки при соотношении компонентов в частях соответственно 1:1:1:1:1:1:1:2:1:1:1.