Инсектоакарицидное средство "инсектал-плюс"

Инсектоакарицидное средство "инсектал-плюс"

Реферат

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается создания средства для борьбы с кровососущими насекомыми и болезнями, которые они вызывают.

Арахноэнтомозы домашних и плотоядных животных - чесоточные и зудневые клещи, кожееды, власоеды, блохи, вши создают множество проблем животным и их хозяевам. Чесоточные, зудневые клещи, кожееды поражают кожу животных, вызывают зуд и дерматиты. Энтомозные болезни, возбудителями которых являются насекомые: власоеды, блохи, вши, вызывают дерматиты и выпадение волос.

Ведущее место в системе борьбы с этими паразитами занимают инсектоакарицидные средство. Для более эффективной борьбы и предотвращения негативных сторон применения перед учеными и практическими работниками стоит задача изыскания эффективных средств, с тем чтобы иметь их достаточный ассортимент. В последнее время внимание исследователей направлено на создание инсектоакарицидных препаратов, содержащих в качестве основного действующего вещества синтетические пиретроиды (перметрин, циперметрин, дельтаметрин и т.д.) (RU 2027365, 1995).

На основе этой группы соединений изготовляется значительное количество препаративных форм: шампуни, лосьоны, линименты, капли и т.д., в которых пиретроиды используются как индивидуальные вещества, так и в сочетании с другими препаратами. Пиретроиды легко проникают через кутикулу и дыхательные аппараты, быстро действуют на нервные клетки насекомых, вызывают возбуждение, судороги, паралич и гибель. Пиретроиды практически безопасны для окружающей среды и организма животных, т.к. они легко подвергаются гидролизу в организме животного, слабо накапливаются в окружающей среде, не опасны для живых организмов, за исключением рыб и полезных насекомых (RU 2146090, 2000).

Другой известной группой акарицидных средств является фипронил. По данным ряда исследований препарат обладает широким спектром инсектоакарицидного действия, активен в отношении чесоточных клещей и насекомых.

Для борьбы с нелетающими насекомыми плотоядных животных чаще используют купочные растворы, шампуни, спреи и т.д. В последнее время за рубежом широко используется способ stop-on для обработки больных животных препаратом с нанесением его на ограниченные участки тела.

Исследования, сделанные по развитию препаратов stop-on, показали, что достаточная эффективность этих форм препаратов достигается при нанесении необходимого количества препарата на ограниченную область поверхности тела, обычно в области шеи, корня хвоста и т.д. Поэтому форма stop-on имеет преимущество перед «купкой», т.к. полное покрытие животного препаратом не требуется. Особенностью stop-on - инсектицидов является то, что даже при нанесении на ограниченную поверхность тела гематрофные паразиты (клещи) поражаются в местах, удаленных от обработанной поверхности.

Недостатком известных средств является непродолжительность действия.

Задачей настоящего изобретения является увеличение срока инсектоакарицидной активности.

Для решения поставленной задачи предложено инсектоакарицидное средство, содержащее перметрин, фипронил и вспомогательные вещества, выбранные из группы изопропиловый спирт, диметилсульфоксид, полиэтиленгликоль-400, глицерин, ПАВ, поливинилпирролидон, вода, триэтилгликоль, при этом содержание активных веществ составляет перметрин 0,2-25,0% и фипронил 2,0-15,0%.

Средство может быть выполнено в форме раствора и используется в виде капель на кожу животного, при этом содержание перметрина составляет 1,0%, фипронила 5,0%.

Средство может быть выполнено в форме шампуня и содержит перметрина от 0,2 до 15,0% и фипронила от 2,0 до 15,0%.

Средство может быть выполнено в форме спрея и содержит перметрин от 1,0 до 25,0% и фипронила от 2,0 до 15,0%.

Средство может быть выполнено в форме концентрата для нанесения на ошейник и содержит перметрина от 1,0% до 15,0 и фипронила от 2,0 до 15,0%.

Средство условно названо - «Инсектал-плюс».

«Инсектал-плюс» представляет собой комплексное средство, предназначенное для лечения и профилактики арахноэнтомозов у собак и кошек.

Средство может быть выполнено в форме спрея, шампуня или концентрата для нанесения на ошейник.

Примеры приготовления заявленных лекарственных форм.

ЗООСПРЕЙ

Фипронил от 2% до 15%

Перметрин от 1% до 25%

Растворители до 100%

ОШЕЙНИК

Фипронил от 2% до 15%

Перметрин от 1% до 15%

ПВХ до 100%

ЗООШАМПУНЬ

Фипронил от 2% до 15%

Перметрин от 0,2% до 15%

ПАВ+Вода до 100%

Примеры, иллюстрирующие изобретение.

Пример 1. «Капли для кошек и собак»

В бак заливают последовательно: триэтиленгликоль, ДМСО. Подогревают до 40-45°С. Засыпают в раствор поливинилпирралидон, фипронил, перметрин. Перемешивают до полного растворения. Охлаждают до комнатной температуры. Разбавляют изоприловым спиртом до нужной концетрации ДВ (5% - фипронил, 1% - перметрин).

Пример 2. «Спрей для кошек и собак»

В бак заливают изоприловый спирт и глицерин и подогревают до 40-45°С. Засыпают в спирт фипронил и перметрин. Перемешивают до полного растворения (5% - фипронил, 1% - перметрин).

Пример 3. «Шампунь для кошек и собак»

В бак заливают необходимое количество воды. Загружают поверхностно-активные вещества (ПАВ). Нагревают смесь до 55-60°С. Перемешивают до полного растворения ПАВ. В полученный раствор добавляем 5% - фипронил, 1% - перметрин. Перемешивают до прозрачного цвета. Добавляют в полученную смесь: соль, лимонную кислоту, краситель, консервант. Перемешивают 15-20 минут.

Пример 4. «На ошейник для кошек и собак»

В смесительный аппарат с подогревом загружают кабельный пластик (гранулят). Готовят спиртовой раствор (10% - фипронил, 2% - перметрин). Заливают в смесительный аппарат раствор ДВ. Перемешивают смесь до 60°С до полного испарения спирта. Полученный концентрат подают на экструдер для изготовления ленты ПВХ ошейника.

Средство представляет собой комплексный препарат, в состав которого входит в качестве действующих веществ перметрин и фипронил, однородную прозрачную жидкость с желтоватым или коричневатым оттенком со слабым специфическим запахом.

Методом ускоренного старения при повышенной температуре изучали стабильность препарата Инсектал-плюс. Растворы были расфасованы в стеклянные флаконы оранжевого цвета вместимостью по 100 мл. Флаконы закрывались утопающими полиэтиленовыми и завинчивающимися сверху пластмассовыми пробками. Растворы хранились в термостате при повышенной температуре 40°С. Основными критериями оценки стабильности растворов были: их внешний вид, величина рН, количественное содержание активнодейтсвующих веществ в препарате Инсектал-плюс в процессе хранения. Внешний вид определяли визуально после помещения их в пробирки вместимостью 10 см³. Величину рН определили потенциометрически при помощи рН-метра. Количественное содержание действующих веществ (массовую долю в %) определяли для пиретроидов - методом газожидкостной хроматографии, а фипронил - методом ВЭЖХ.

Результаты проверки показали, что препарат при таком режиме хранения не изменяет своего внешнего вида в течение 950 часов хранения. Величина рН препаратов в течение всего периода хранения оставалась без изменения.

Результаты количественного определения препаратов в растворах представлены в таблице 1.

Таблица 1Количественное содержание ДВ в препарате Инсектал-плюс в процессе хранения
Инсектал-плюс	Состав	Исходная концентрация ДВ, %	Срок хранения, час
1320	1528
Серия 1	перметринфипронил	1,0±0,15,0±0,2	0,984,96±0,2	0,964,95
Серия 2	перметринфипронил	1,0±0,15,0±0,2	0,974,88	0,954,73

Таким образом, результаты проведенных исследований показали, что обе серии препарата характеризуются высокой стабильностью в процессе хранения.

Изучение акарицидной активности препарата Инсектал-плюс было проведено на изолированных клещах Ps. cuniculi согласно «Методическим указаниям по первоначальному отбору новых акарицидов и сравнительному изучению их активности против саркоптоидных клещей».

С этой целью методом последовательного разведения готовили 6-8 концентраций препарата Инсектал-плюс, обеспечивающих гибель клещей от 0 до 100%. Исследования проводили на клещах, взятых в день опыта. Клещей имаго (по 10 особей) отбирали препаровальной иглой на тканевые салфетки черного цвета размером 12х12 см. Наносить препарат на салфетки начинали с меньшей концентрации по 1 мл. Салфетки сворачивали узелком, завязывали ниткой, снабжали этикеткой, складывали в чашки Петри и помещали в термостат при температуре 27-30°С при относительной влажности 90%. Контроль смачивали дистиллированной водой. С каждой из концентраций препарата Инсектал-плюс ставили опыты в трех повторностях. Оценку акарицидной активности препарата (СК-50) проводили по результатам состояния клещей через 24 часа. Величину СК-50 для клещей рассчитывали по формуле Кербера. СК-50 препарата Инсектал-плюс для имаго клещей Ps. cuniculi составляет 0,003%.

Изучение акарицидной эффективности препарата Инсектал-плюс при псороптозе кроликов.

Для опыта было отобрано 9 спонтанно инвазированных кроликов массой 3-3,5 кг, из которых сформировали три группы. Применяли препарат однократно и двукратно с интервалом трое суток по 0,5 мл на каждое ухо животного.

Первой группе кроликов (3 гол.) пораженные ушные раковины смачивали препаратом Инсектал-плюс. Второй группе кроликов (3 гол.) с препаратом Фронтлайн. Трем животным контрольной группы на внутреннюю поверхность ушных раковин наносили теплый физиологический раствор в тех же дозах. Обработку проводили без удаления корочек и струпьев с пораженных участков кожи.

Эффективность обработки контролировали методом акарологического исследования соскобов кожи на 5-ый день после первой, на 4-ый день после второй обработки. На 5-ый день после лечения в первой группе животных произошли следующие изменения: воспаление ушных раковин спало, наблюдалось отслоение корочек, струпьев и корки легко и безболезненно отслаивались. При их микроскопии были обнаружены отдельные сегменты клещей. На четвертые сутки после второй обработки внутренняя поверхность кожи ушных раковин и слуховых проходов стала эластичной, корочки и струпья полностью отслоились. Акарологическое исследование показало полное отсутствие в соскобах кожи живых клещей.

У животных второй группы, обработанных препаратом Фронтлайн, на 5-ый день после первой обработки воспаления кожных покровов ушных раковин и слуховых проходов под корочками визуально не наблюдалось. Цвет струпьев стал более светлым, часть их легко слущивалась. При микроскопическом исследовании соскобов из ушных раковин у всех опытных кроликов живых клещей обнаружено не было. Через 4 суток второй обработки следов корочек и струпьев на внутренней поверхности ушей и слуховых проходов у кроликов второй опытной группы не обнаружено. Акарологическое исследование показало полное отсутствие живых клещей в соскобах кожи подопытных животных. В течение всего периода наблюдения признаков беспокойства у леченных кроликов, не выявлено. У контрольных кроликов ушные раковины были покрыты струпьями и корками, животные проявляли беспокойство и лапками чесали уши. При микроскопии наблюдали живых клещей разных степеней развития.

Изучение акарицидной эффективности препарата Инсектал-плюс против отодектоза собак

Нами были предварительно осмотрены и отобраны 8 собак различных пород, пораженных отодектозом. Визуально у животных в ушных раковинах наблюдали наличие корочек и струпьев коричневого цвета. Акарологическое исследование соскобов с внутренней поверхности ушных раковин подтвердило наличие живых отодектозных клещей. Под микроскопом при 10-ти кратном увеличении в одном поле зрения находили от 4 до 9 экземпляров.

Для сравнительной оценки лечебной эффективности препаратов животных условно разделили на 3 группы: две опытные (по 3 собаки) и одна контрольная (3 собаки). Степень поражения ушных раковин опытных животных была выражена значительнее, чем в контрольных.

В ходе эксперимента изучали влияние этих препаратов на гематологические показатели крови животных. У собак кровь брали из тарзальной вены до обработки через один час: на 1-ые, 5-ые и 10-ые сутки. Собак обрабатывали дважды. Интервал между первой и второй обработкой составлял трое суток. Трем собакам первой группы препарат Инсектал-плюс вводили в каждое пораженное ухо по 5 мл с последующим массажированием ушной раковины. Аналогичным способом обрабатывали собак второй группы препаратом Фронтлайн. Контрольным животным в каждую поврежденную ушную раковину вводили по 0.5 мл подогретой дистиллированной воды. Обработку ушных раковин животных проводили без удаления корочек и струпьев. Эффективность обработок контролировали методом акарологического исследования соскобов кожи на 5-ый день после первой и через 5 суток после второй обработки. Результаты исследований препаратов показали, то они оказывают сильное акарицидное действие в отношении клещей О. canis. После применения препаратов клещи погибают, некротические корки и струпья размягчаются и отторгаются. При микроскопическом исследовании соскобов ушных раковин животных опытных групп спустя 5 суток после нанесения препаратов живых клещей не обнаружено. В контрольной группе собак при микроскопии наблюдали живых клещей в разных стадиях развития.

Повторные акарологические исследования животных опытных групп спустя 5 суток после второй обработки не выявили живых отодектозных клещей в соскобах ушных раковин. В местах отторгнувшихся струпьев и корочек была заметна эпитализация и рост шерстного покрова. Признаков беспокойств у обработанных животных препаратом Инсектал-плюс не наблюдали. Таким образом, полное клиническое выздоровление животных наступает через 5 дней после повторного применения препаратов. Результаты гематологических исследований крови животных приведены в таблицах 2 и 3.

Таблица 2
Гематологические показатели крови собак, обработанных препаратом Инсектал-плюс двукратно
Сроки наблюдения	Гемоглобин, мг%	Лейкоциты, 10/л	Эритроциты, 10/л	СОЭ, мм/час
до опыта	9,3±0,6	7,3±0,8	6,8±0,9	6,1
1 час	9,1±0,4	7,8±0,6	7,0±0,8	5,8
1 сутки	10,2±0,6	7,2±0,8	6,2±0,8	6,0
5 суток	10,0±0,7	7,1±0,7	7,2±0,9	6,3
10 суток	10,0±0,7	7,3±0,4	6,8±0,5	6,1
Примечание: во всех группах р>0,1

Таблица 3
Гематологические показатели крови собак, обработанных препаратом Фронтлайн двукратно
Сроки наблюдения	Гемоглобин, мг%	Лейкоциты, 10/л	Эритроциты, 10/л	СОЭ, мм/час
до опыта	9,0±0,3	6,8±0,3	6,6±0,7	6,2
1 час	8,8±0,6	7,3±0,7	7,2±0,4	6,0
1 сутки	9,4±0,2	7,2±0,8	7,0±0,8	6,3
5 суток	9,2±0,4	7,0±0,6	7,3±0,6	6,4
10 суток	10,0±0,6	7,2±0,4	7,0±0,8	6,0
Примечание: гематологические показатели крови контрольных животных были в пределах физиологической нормы.

Как видно из таблиц 2 и 3, все показатели находятся в пределах физиологической нормы и достоверно не отличаются от фоновых (р>0,05). Таким образом, можно сделать вывод, что обработка собак препаратом Инсектал-плюс не оказывает влияния на гематологические показатели крови.

Биологические исследования

Острая токсичность

Для определения острой токсичности препарата Инсектал-плюс мышам препарат вводили внутрижелудочно в виде водной эмульсии, однократно при помощи шприца с оливой. Токсичность препаратов изучали на беспородных белых мышах с массой тела 18-20 г.

Экспериментальное определение величины ЛД₅₀ слагалось из двух опытов: ориентировочного и развернутого. Первый обязателен в любом случае: в нем на небольшом числе животных получили необходимую предварительную информацию в диапазоне доз, близких к среднестремительной. В развернутом опыте испытывали 4 различные дозы (каждую не менее чем на 6 животных) при условии, что крайние дозы выступают как ЛД₀-ЛД₁₀₀.

Наблюдение за опытными животными осуществляли в течение 7 суток. В этот период обращали внимание на клиническое состояние и поведение, реакцию на внешние раздражители, возможную динамику развития интоксикации и гибель животных. Параметры острой токсичности (величину ЛД₅₀) рассчитывали по методу Лакина Г. Ф., который основан на учете смертности животных от вводимых доз. Уровень токсичности препарата Инсектал-плюс характеризовали согласно ГОСТ 12.1.007.76 «Вредные вещества, классификация, требования безопасности». У белых мышей при введении им в желудок токсических доз препарата наблюдали угнетенное состояние, учащение дыхания, шерсть была взъерошенной, преобладал матовый оттенок.

При введении смертельных доз препарата белым мышам у них сразу отмечали угнетение: животные были малоподвижны, не реагировали на внешние раздражители и гибли в течение 24 часов после применения лекарственного средства.

При патологоморфологическом исследовании павших животных установлены: кровоизлияния на эпикарде сердечной сумки, отечность легких, дегенеративные изменения в печени и почках.

Проведенные исследования показали, что по Г. Ф. Лакину среднесмертельная доза ЛД₅₀ препарата Инсектал-плюс составила 543 мг/кг массы тела. Согласно классификации ГОСТ 12.1.007.76 препарат относится к умеренно опасным веществам - 3 класс опасности.

Изучение раздражающих свойств препарата Инсектал-плюс

1. Исследование местного действия на слизистую оболочку (глазная проба).

Шести кроликам воздействовали на конъюктиву по методике В. В. Гацура (1974 г.). Клинически здоровых кроликов, прошедших семидневный карантин, содержали на стандартном рационе. В конъюнктивальный мешок правого глаза трем кроликам первой группы пипеткой вносили одну каплю препарата Инсектал-плюс, левый глаз служил контрольным, в него вносили 2 капли дистиллированной воды. Оценку раздражающего действия проводили через 1, 4, 6, 12 и 24 часа визуально по изменению кровенаправления конъюнктивы, наличию лакримации и состоянию роговицы по 10-бальной системе согласно схеме 1.

Схема 1
Интенсивность реакции	Оценка в баллах	Раздражающий эффект
отсутствие реакции	0	отсутствует
слабая реакция	2	слабый
выраженная гиперемия	4	слабо выраженный
наличие лакримации	6	умеренный
наличие выделений	8	выраженный
длительная, ярко выраженная гиперемия, лакримация, отек век	10	сильно выраженный

Таблица 4
Оценка раздражающего действия препарата Инсектал-плюс при воздействии на конъюктиву глаза кролика (по 3 животных в группе)
группа	Введенный препарат	Оценка в баллах (часы)	Раздражающий эффект
1	4	6	12	24
1	Инсектал-плюс	4	4	6	2	0	Слабовыраженныйумеренный
4	4	6	2	0
4	4	6	2	0
2	вода	0	0	0	0	0	отсутствует
0	0	0	0	0
0	0	0	0	0

При внесении препарата Инсектал-плюс в конъюктивный мешок кроликов отмечено скоропреходящая гиперемия и слезотечение. Эти явления полностью исчезли через 24 часа, что свидетельствует о выражении воздействия препарата на слизистую оболочку.

2. Изучение местного действия препарата Инсектал-плюс на кожу, шерсть и на гематологические показатели крови кроликов (количество лейкоцитов, эритроцитов, уровень гемоглобина, СОЭ).

Изучение раздражающего действия препарата Инсектал-плюс на кожу проводили на 12 белых кроликах массой 3-3,5 кг (по 4 животных в опытных группах и 4 в контрольной группе). Для проведения опыта на спине в направлении шерсти к хвосту выстригали два участка размером 5х3 см. Затем 4 кроликам первой группы капельным методом ежедневно вносили и втирали в шерсть и кожу по 1,5 мл препарата Инсектал-плюс в течение 5 дней. 4 другим животным второй группы по такой же методике наносили препарат Фронтлайн. Контрольным животным по вышеуказанной методике втирали физиологический раствор. Визуальную оценку проводили ежесуточно, учитывая поведение животных и состояние кожного покрова и шерсти в местах втирания.

У кроликов кровь брали из ушной краевой вены: до обработки, через 1 час, на 1, 5, 10 сутки после обработок.

Таблица 5
Гематологические показатели крови кроликов, обработанных препаратом Инсектал-плюс
Сроки наблюдения	Гемоглобин, мг%	Лейкоциты, 10/л	Эритроциты, 10/л	СОЭ, мм/час
До опыта	12,3±0,2	6,8±0,7	7,5±0,4	4,0±0,5
1 час	11,8±0,6	6,5±0,8	7,2±0,6	3,6±0,4
1 сутки	12,2±0,3	7,1±0,4	7,3±0,4	4,0±0,6
5 суток	12,4±0,3	6,4±0,7	7,3±0,5	3,4±0,3
10 суток	11,8±0,6	6,9±0,4	7,4±0,7	3,8±0,8

Таблица 6
Гематологические показатели крови кроликов, обработанных препаратом Фронтлайн
Сроки наблюдения	Гемоглобин, мг%	Лейкоциты, 10/л	Эритроциты, 10/л	СОЭ, мм/час
До опыта	10,8±0,5	6,7±0,4	7,3±0,5	3,2±0,4
1 час	11,2±0,3	6,4±0,6	7,2±0,2	3,2±0,3
1 сутки	11,4±0,4	6,2±0,6	7,3±0,4	4,0±0,5
5 суток	11,6±0,3	6,8±0,5	7,0±0,6	3,8±0,6
10 суток	12,2±0,2	6,5±0,7	7,2±0,4	3,6±0,4

Как показали исследования, 5-кратное втирание препаратов в указанной дозе не вызывает изменений в поведении животных, не приводит к их гибели, не отмечено покраснения кожи, расчесов, отека, утолщений кожной складки, изменения цвета шерсти. Болезненная реакция при пальпации отсутствовала. Проведенные исследования гематологических показателей (таблицы 5 и 6) свидетельствуют, что препараты Инсектал-плюс и Фронтлайн являются малотоксичными веществами, не вызывающими никаких морфологических изменений крови, даже при многократном нанесении на кожу животных.

3. Аллергизирующие свойства препарата Инсектал-плюс

Опыты были проведены на 12 морских свинках с помощью гистаминного шока по методу М. Л. Гершковича (1954 г.).

Таблица 7
Аллергические свойства препарата Инсектал-плюс
Группа	Количествоживотных	Препарат,мл	Времявведениягистаминачерез, час	Времянаступлениягибелиживотных отгистаминногошока, мин	Гибельживотных,%
1	44	Инсектал-плюс	1,53	17,±0,417,4±0,5	10075
Контроль	4				100

Как показали исследования (таблица 7), препарат Инсектал-плюс, введенный морским свинкам подкожно в дозе 2 мл/кг, не предотвращал гибели животных от гистаминного шока, но и не ускорял ее по сравнению с контролем. Реакция у контрольных и подопытных животных на введение гистамина была одинаковой и проявлялась беспокойством, учащением дыхания, принятием бокового положения тела, судорогами и заканчивалась смертью.

Показатель достоверности различий во всех случаях был меньше 0,05, т.е. время гибели опытных животных достоверно не отличалось от показателей опытных групп, следовательно, препарат Инсектал-плюс в этих концентрациях не обладает аллергическим действием.

Влияние препарата Инсектал-плюс на антитоксичную функцию печени.

Изучение влияния препаратов на антитоксичную функцию печени проводили по методике, предложенной Е. Л. Щедриным с соав. (1988 г.).

Было сформировано 4 группы мышей по 20 голов в каждой с первоначальной массой тела 19-20 г. Животные 2-х опытных групп в течение 24 дней ежедневно получали испытуемый препарат в возрастающих дозах от 0,045 мл/кг до 0,344 мл/кг. Животные контрольной группы ничего не получали. Через 24 дня опытным и контрольным мышам с интервалом в 30 секунд вводили подкожно по 0,2 см нитрата натрия в дозе ЛД₅₀, равной 350 мг/кг массы тела. В дальнейшем фиксировали время наступления гибели животных. Из каждой группы исключали по 2 определения наименее и наиболее продолжительного периода действия токсина на организм животного и рассчитывали среднее время гибели мышей по группам.

Как показали наши исследования, животные контрольной группы погибали через 20 мин, животные опытных групп через 19 мин 40 сек, т.е. время гибели животных одинаково, даже мгновенное введение препаратов контрольным животным не оказывает влияния на антитоксическую функцию печени.

Изучение эффективности, переносимости и безвредности препарата Инсектал-плюс на собаках, пораженных триходектозом.

Исследования эффективности, переносимости и безвредности препарата проведены на 8 собаках предыдущего опыта. При осмотре наружных покровов собак на голове, на корне хвоста, внутренней поверхности лап нами были обнаружены насекомые. На площади 10 см² поражаемость составляла от 3 до 9 экземпляров. Вид возбудителя паразитов собак - власоед Trichodectes canis.

Собак разделили на 2 группы А и Б (по 4 собаки в каждой). В группе А на 3 собаках применили препарат Инсектал-плюс в дозах 1, 2, 3 мл. Препарат наносили методом stop-on в область затылка собак и к корню хвоста.

В группе Б на таком же количестве животных применили препарат Фронтлайн в дозах по инструкции по применению.

Двух собак (по одной из каждой группы) препаратами не обрабатывали и содержали вместе с обработанными животными.

В группе А: на первую собаку (вес 9 кг) израсходовали 1 мл препарата Инсектал-плюс, на вторую (вес 18 кг) - 2 мл, на третью (вес 20 кг) - 3 мл.

За животными ежедневно в течение первых 5 дней вели клинические наблюдения. За состоянием кожного и шерстного покрова - через день. Акрологические исследования проводили на 5-й и 10-й день после обработки. Нанесение препаратов Инсектал-плюс и Фронтлайн на шерстный покров в испытуемых дозах вызвало заметный интерес у всех животных в первую четверть часа. У двух собак из группы А и у одной из группы Б была попытка лизнуть обработанный участок тела в области спины. В дальнейшем животные вели себя спокойно. Визуальный осмотр и пальпация в области применения препаратов на кожу ни в одной из групп не выявили ее изменений через сутки. Гиперемии, припухлостей, шелушения кожи у всех животных не выявлено и на 5-й день. Результаты акарологического исследования показали, что у собаки, обработанной препаратом Инсектал-плюс в дозе 1 мл на животное, численность власоедов снизилась на всех участках шерстного покрова. На площади 10 см² пораженность составила 1-3 экземпляра. У второй и третьей собаки, обработанной препаратом Инсектал-плюс в объеме 2 и 3 мл на животное, только в области головы, на двух участках размером 5х8 см, были обнаружены живые и мертвые насекомые в небольшом количестве спустя 1,5 часа после нанесения препарата.

Обработка животных группы Б препаратом Фронтлайн показала, что полив испытуемых собак значительно снижает численность насекомых на шерсти животных, но полностью не уничтожает их. Только повторная обработка животных препаратами Инсектал-плюс и Фронтлайн показала, что препараты в дозах 1-3 мл проявляют 100%-ную эффективность против триходектоза собак. Следовательно, под воздействием препаратов Инсектал-плюс и Фронтлайн при однократной обработке гибнут взрослые особи и личинки, однако остаются жизнеспособные яйца. Поэтому животных следует обрабатывать препаратами Инсектал-плюс и Фронтлайн с интервалом 7-10 дней.

Визуальный осмотр кожного покрова не выявил у животных расчесов, утолщений, возможного образования дерматитов, себореи, выпадения волос, отмирания кожи.

Препарат Инсектал-плюс испытывался практикующими ветеринарными врачами при отодектозе и нотоэдрозе кошек, триходектозе собак (влосоедов), сифонаптерозе собак и кошек (блошивость), меногнатозе (вшивость) собак.

Исследования, проведенные в лабораторных и производственных условиях по изучению токсикологических, акарицидных и биологических свойств разработанного препарата, дают основание рекомендовать его для борьбы с саркоптоидозами и энтомозами домашних и плотоядных животных.

Кроме того, были проведены следующие испытания.

Изучение акарицидной эффективности препарата на клещах Ps.cuniculi

Акарицидная активность препарата была изучена на клещах P.cuniculi согласно Методическим указаниям по первичному отбору новых акарицидов (1982).

Клещей отбирали в день исследования. На каждую концентрацию исследуемого препарата отбирали по 10 клещей-имаго на черные салфетки, которые смачивали эмульсией препарата (по 1 мл) с различным содержанием ДВ. Затем клещей помещали в термостат при температуре 30°С и относительной влажности 90% и оценивали их состояние через 1, 4, 6, 24, 48 и 72 часа после нанесения различных концентраций препарата. Опыт проводили в трехкратной повторности. Величину СК₅₀ рассчитывали по результатам опытов через 24 часа. В итоге проведенной работы установлено, что величина СК₅₀ препарата составила 0,028%.

Таблица 8
Акарицидная активность Инсектала-плюс в остром опыте с Psoroptes cuniculi
Показатели	Концентрация препарата, %
	0,1	0,08	0,06	0,04	0,02	0,01	0,005	0,01
Выжило	-	2	4	11	13	17	22	30
Погибло	30	28	26	19	17	13	8	-
Z	29	26	22,5	18	15	10,5
d	0,02	0,02	0,02	0,02	0,01	0,005
Zd	0,58	0,52	0,45	0,36	0,15	0,0525
Примечание: Z - половина общего числа насекомых, павших от двух последних доз;d - разница в величине последующих доз;n=30СК50=0,1 - 2,11/30=0,028% по ДВ

Остаточное акарицидное действие препарата в лабораторных условиях изучали, используя метод принудительного контактирования клещей Ps.cuniculi в течение 15 минут с обработанными водной эмульсией препарата поверхностями при норме расхода 1 мл на 10 см². Контактирование проводили через 5, 7, 10, 15, 20 и 25 суток после обработки. Полученные результаты представлены в таблице 9.

В результате опытов по изучению длительности остаточного акарицидного действия было установлено, что препарат обладает продолжительным остаточным действием: при контактировании клещей Ps. cuniculi с деревянными поверхностями, обработанными 0,1% водной эмульсией, 100% гибель клещей наблюдалась в течение 15 суток, с обработанными 0,025% и 0,05% - в течение 7 и 10 суток соответственно.

Таблица 9
Продолжительность остаточного акарицидного действия Инсектала-плюс в опытах на Р. cuniculi
Концентрация препарата (%)	Кол-воопытов клещей	Смертность клещей (%) через (сутки)
		5	7	10	15	20	25	30
0,025	3	90	100	100	72	54	18	0	0
0,05	3	90	100	100	100	81	54	18	0
0,1	3	90	100	100	100	100	72	18	5,5
вода	3	90	2	2	1	1	0	0	0

Инсектицидную активность препарата исследовали стандартным методом посадки насекомых на обработанную препаратом поверхность на инсектарной культуре блох Ctenophalides canis.

Поверхности размером 10х10 см из неокрашенной фанеры, обработали препаратом с нормой расхода 50 мл/м². Опыты провели в трех поверхностях, используя по 10 насекомых в каждой серии. Время контакта с обработанной поверхностью составляло 5 и 10 минут. После этого блох переносили в чистые сосуды. Учет гибели насекомых проводили через 0,5; 1; 3 и 24 часа.

Контролем служили поверхности, обработанные препаратом без перметрина и водой. Результаты исследований представлены в таблице 10.

Таблица 10
Инсектицидная активность Инсектала-плюс в остром опыте с Ctenophalides canis
Концентрация препарата	Норма расхода, мл/м2	Экспозиция, мин	Гибель (%) насекомых, через
			0,5 ч	1,0 ч	2,0 ч	24 ч
0,5	50	5	100	100	100	100
0,05	50	10	100	100	100	100
0,05	50	5	100	100	100	100
Без ДВ	50	10	16,6	16,6	20	20
вода	50	10	0	3,3	6,6	6,6

Результаты показали, что эмульсия препарата с содержанием 0,5% и 0,05% ДВ обладает выраженной инсектицидной активностью при контакте с обработанной поверхностью в течение 10 и 5 минут, при норме расхода 50 мл/м².

В контроле (препарат без перметрина и фипронила и вода) гибель насекомых составила 20% и 6,6% соответственно.

С целью определения длительности остаточного действия препарата пластины из фанеры обработали препаратом с содержанием 0,05% ДВ с нормой расхода 50 и 100 мл/м² и затем контактировали с ним насекомых с помощью экспозиметра Набокова в течение 15 минут. Опыты провели в трех поверхностях, используя в каждом опыте по 10 блох. Контактирования блох проводили через 3, 5, 10, 20 и 25 суток после обработки поверхности. После контактирования насекомых помещали их в пробирки и проводили учет их гибели. Результаты представлены в таблице 11.

Таблица 11
Длительность инсектицидного действия Инсектала-плюс на поверхностях
Норма расхода,	Гибель блох (%) при контакте через (дней) после обработки
0,05% ДВ, мл/м2	3	5	10	20	25	30
50	100	100	100	96,6	90	50
100	100	100	100	96,6	93,3	53,3

Как показали результаты исследований, препарат в 0,05% концентрации по ДВ обладает длительным остаточным действием на поверхностях. Гибель 100-90% насекомых отмечается в течение 25 дней после обработки.

Изучение инсектоакарицидной эффективности Инсектала-плюс в опытах на животных

Испытания провели на базе клиники «Юниор» (Москва). Объектом исследования служили собаки и кошки разных пород, в том числе короткошерстные и длинношерстные, пораженные блохами Ctenophalides canis и власоедами Trichodectes canis.

Интенсивность инфестации животных определяли путем визуального подсчета насекомых на 3-4 участках тела животного (корень хвоста, внутренняя поверхность бедер, живот) площадью 100 см². Препарат наносили из расчета 0,1 мл/кг массы на кожу в недоступном для слизывания месте (у основания черепа, между лопатками) в контроле применяли инсектицидный зоошампунь с перметрином «Чистюля П». Зоошампунь наносили на увлажненную шерсть животного из расчета 1,0 мл/кг и слегка втирали в кожу массирующими движениями. Через 5 минут шампунь смывали теплой водой (25-30°С) и животных обтирали полотенцем. Затем шерсть расчесывали гребнем.

С согласия владельцев животных было обработано 6 собак и 4 кошки. Численность власоедов до опыта на собаках составила 15-25 экз. на 100 см², численность блох на кошках - 10-20 экз. на 100 см², при обследовании животных через 48 часов после обработки Инсекталом-плюс и зоошампунем живых блох, личинок и имаго-власоедов обнаружено не было.

При обследовании через 7 дней на животных, обработанных Инсекталом-плюс, живых насекомых обнаружено не было, в то время как на животных, обработанных зоошампунем, были обнаружены единичные личинки власоедов (1-3 особи), в связи с этим обработка была проведена повторно.

В результате дальнейшего наблюдения в течение 30 дней за обработанными животными паразитов обнаружено не было.

Таблица 12
Инсектицидная эффективность Инсектала-плюс в опытах на собаках и кошках
Сведения о животном	Дата осмотра	Обнаружено насекомых	Дата обработки
Инсектал-плюс
Кошка Мурка, 3 года, сибирская	20.08.0330.08.03	30 бл