Способ моделирования воспалительного поражения суставов в эксперименте

Способ моделирования воспалительного поражения суставов в эксперименте

Реферат

Известен способ моделирования воспалительного поражения суставов в эксперименте (источник) путем инъецирования подопытным животным под кожу в области этих суставов адъюванта, например - вакцины БЦЖ, в составе вазелиново-ланолиновой эмульсии (Гринзайд Ю.М., Кривобоков Н.Г., Тер-Габриэльянц Г.Г. «Первичный профилактический эффект пелоидов при адъювантном артрите у крыс и его иммунологические механизмы. // Иммунологические концепции в курортологии: Сборник научных трудов. - Пятигорск, 1987. - С.8-14). Данный способ не достаточно адекватен основным сторонам патогенеза воспалительной суставной патологии (ВСП). В частности, не учитывается такой элемент патогенеза, как переохлаждение. Это не позволяет считать данную модель достаточно соответствующей клинической ситуации.

Предлагаемый способ лишен указанного недостатка. Сущность его заключается в том, что инициацию адъювантного артрита производят на фоне предварительного переохлаждения суставов. Вначале подопытных животных, например крыс, помещают в лоток, наполненный водой со льдом, сроком на 13-15 минут, ежедневно в течение 3 дней. Через 1-2 часа после последнего охлаждения проводят инъекции адъюванта в подушечки задних лап. Через 35-40 дней после введения адъюванта на фоне хронизации процесса начинают производить требуемые исследования.

Таким образом, технологическая последовательность способа включает предварительное охлаждение конечностей в лотке со смесью льда и воды при температуре 2-6°С в течение 13-15 минут, ежедневно в течение 3 дней. Через 1-2 часа после последнего охлаждения проводят инъекции адъюванта в подушечки задних лап. Через 35-40 дней после введения адъюванта на фоне хронизации процесса начинают производить необходимые эксперименты.

Для изучения адекватности и тяжести предлагаемой модели изучено 60 крыс-самцов линии Вистар массой тела 200-250 г, разделенные на 5 групп. Первую группу представляли 11 интактных животных. 11 крысам (группа 2) в течение 3 дней производили охлаждение конечностей при температуре 2-6°С и экспозиции 13-15 минут. 12 крысам третьей группы инициировался адъювантный артрит по способу прототипа. 12 крыс 4 группы подвергались разовому однодневному переохлаждению конечностей по описанной выше технологии, после завершения которого через 1-2 часа производилась инициация адъювантного артрита. 14 крыс 5 группы подвергались разовому трехдневному переохлаждению конечностей по описанной выше технологии (см. гр.2), после завершения которого через 1-2 часа производилась инициация адъювантного артрита. На 35 день производилось исследование прижизненных лабораторных тестов, после чего животные иммунизировались внутрибрюшинно 2,5 мл 10% взвеси эритроцитов барана, на 40-вой день забивались с исследованием внутренних органов. Данные исследований приведены в таблице.

Таблица
Влияние охлаждения в комбинации с адъювантным артритом на реакции иммунокомпетентных органов
Показатель	N	группа	n	M	м		Р
Масса тимуса Мг	1	Интактная	11	314,7	22,4	1-2>0,2	2-3>0,2	4-5>0,4
2	3 охл	11	271,2	29,8	1-3<0,01	2-4>0,2	-
3	БЦЖ	12	225,2	22,1	1-4<0,01	2-5>0,05	-
4	1 охл + БЦЖ	12	228,1	19,3	1-5<0,001	3-4>0,9	-
5	3 охл + БЦЖ	14	206,3	17,8	-	3-5>0,5	-
К селезенки *106 л/100 мг	1	Интактная	11	854	8,89	1-2<0,01	2-3>0,5	4-50,05
2	3 охл	11	49,2	5,96	1-3<0,05	2-4>0,05	-
3	БЦЖ	12	55,1	8,05	1-4>0,7	2-5>0,8	-
4	1 охл + БЦЖ	12	78,6	15,3	1-5<0,001	3-4>0,1	-
5	3 охл + БЦЖ	14	47,2	5,18	-	3-5>0,4	-
ФИЛ Ед.	1	Интактная	11	2,00	0,12	1-2<0,001	2-3 1,0	4-5>0,6
2	3 охл	11	1,11	0,04	1-3<0,001	2-4>0,1
3	БЦЖ	12	1,11	0,10	1-4<0,001	2-5<0,05
4	1 охл + БЦЖ	12	1,23	0,06	1-5<0,001	3-4>0,3
5	3 охл + БЦЖ	14	1,27	0,07		3-5>0,1

Примечание:

3 охл - 3 сеанса охлаждения

1 охл - 1 сеанс охлаждения

БЦЖ - инициация адъювантной болезни

3 охл + БЦЖ - 3 сеанса охлаждения с последующей инициацией адъюванта

1 охл + БЦЖ - 1 сеанс охлаждения с последующей инициацией адъюванта

Для адекватной оценки полученных моделей изучены параметры - масса тимуса, клеточность селезенки и фагоцитарный индекс лейкоцитов. Именно эти параметры свидетельствовали как о генеральной реакции имунокомпетентных органов на воспаление, так и о фагоцитарном эффекте.

Полученные результаты свидетельствуют о четкой общеорганизменной реакции как на повреждающие факторы - переохлаждение и воспалительный процесс в суставах, так и о взаимно потенцирующем патогенетическом действии указанных факторов.

Способ может быть проиллюстрирован следующими примерами.

1. Интактная крыса-самец линии Вистар №32, масса тела - 222 г. Дополнительных воздействий не получала. Исследование животного осуществлено одновременно с животными опытной группы (на 39-40 день после инициации адъювантного артрита). Масса тимуса - 300 мг, клеточность селезенки - 107,4·10⁶ л/100 мг, ФИЛ - 2,16 бед.

2. Крыса-самец линии Вистар №2, масса тела - 220 г подвергались разовому трехдневному переохлаждению конечностей по описанной выше технологии (см. гр.2), после завершения которого через 1-2 часа производилась инициация адъювантного артрита. Исследование животного осуществлено на 39-40 день после инициации адъювантного артрита. Масса тимуса - 189 мг, клеточность селезенки - 61,0·10⁶ л/100 мг, ФИЛ - 1,02 ед.

3. Крыса-самец линии Вистар №5, масса тела - 190 г подвергались разовому трехдневному переохлаждению конечностей по описанной выше технологии (см. гр.2), после завершения которого через 1-2 часа производилась инициация адъювантного артрита. Исследование животного осуществлено на 39-40 день после инициации адъювантного артрита. Масса тимуса - 181 мг, клеточность селезенки - 44,0·10⁶ л/100 мг, ФИЛ - 1,36 ед.

4. Крыса-самец линии Вистар №1, масса тела - 170 г подвергались разовому трехдневному переохлаждению конечностей по описанной выше технологии (см. гр.2), после завершения которого через 1-2 часа производилась инициация адъювантного артрита. Исследование животного осуществлено но 39-40 день после инициации адъювантного артрита. Масса тимуса - 256 мг, клеточность селезенки - 93,0·10⁶ л/100 мг, ФИЛ - 1,02 ед.

Способ моделирования воспалительного поражения суставов в эксперименте путем подкожного введения в область суставов нижних конечностей адъюванта, отличающийся тем, что вначале осуществляют предварительное охлаждение конечностей в лотке со смесью льда и воды при температуре 2-6°С в течение 13-15 мин, ежедневно в течение 1-3 дней, затем через 1-2 ч после последнего охлаждения проводят инъекции адъюванта в подушечки задних лап, а через 35-40 дней после введения адъюванта на фоне хронизации процесса начинают производить необходимые эксперименты.