Способ предоперационного резервирования аутоэритроцитной массы

Способ предоперационного резервирования аутоэритроцитной массы

Реферат

Изобретение относится к области медицины, в частности гематологии и переливания крови, и может быть использовано для заготовки высококачественных аутоэритроцитосодержащих гемокомпонентов.

Известен способ заготовки аутоэритроцитной массы без применения лейкоцитарных фильтров (Вильянинов В.Н. Предоперационное резервирование аутологичных гемокомпонентов у больных при эндопротезировании крупных суставов / В.Н.Вильянинов, А.В.Чечеткин, Р.М.Тихилов // Хирургия. - 2005. - №2. - С.54-57).

Недостатком указанного способа является то, что длительное хранение аутологичных эритроцитов при положительной температуре негативно сказывается на морфофункциональных свойствах красных кровяных клеток. Этот факт значительно ограничивает внедрение метода аутодонорства в хирургических стационарах в большей степени там, где нет технических возможностей для разделения крови на компоненты и невозможно в амбулаторно-поликлинических условиях организовать заготовку аутокрови.

Цель изобретения - обеспечить сохранение качества аутоэритроцитной массы при ее заготовке и длительном хранении.

Цель достигается тем, что проводят эксфузию крови пациента не позднее чем за 4 суток до хирургического вмешательства, фракционируют компоненты крови центрифугированием с последующим отделением плазмы, маркировкой и хранением эритроцитарной массы при температуре от +2°С до +6°С, причем у больного эксфузируют кровь в первый гемоконтейнер с консервантом CPDA-1, перемешивают и самотеком переводят через встроенный лейкофильтр Leukotap Al (Pall) во второй из сдвоенных гемоконтейнеров, полученную обедненную лейкоцитами кровь центрифугируют при +20°С, 900 g в течение 15 мин, отделяют плазму в одинарный полимерный контейнер, оставшуюся в гемоконтейнере аутоэритроцитарную массу с консервантом хранят до момента хирургического вмешательства не более 10-14 суток.

Способ реализуется следующим образом.

Проводят эксфузию крови пациента не позднее чем за 4 суток до хирургического вмешательства, фракционируют компоненты крови центрифугированием с последующим отделением плазмы, маркировкой и хранением эритроцитарной массы при температуре от +2°С до +6°С, причем у больного эксфузируют кровь в первый гемоконтейнер с консервантом CPDA-1, перемешивают и самотеком переводят через встроенный лейкофильтр Leukotap Al (Pall) во второй из сдвоенных гемоконтейнеров, полученную обедненную лейкоцитами кровь центрифугируют при +20°С, 900g в течение 15 мин, отделяют плазму в одинарный полимерный контейнер, оставшуюся в гемоконтейнере аутоэритроцитарную массу с консервантом хранят до момента хирургического вмешательства не более 10-14 суток.

Для фильтрации применяют лейкофильтры Leukotrap Al (Pall), представляющие собой сдвоенные пластиковые гемоконтейнеры с интегрированным лейкофильтром. У больных эксфузировали 450 мл аутокрови в первый гемоконтейнер с CPDA-1. Перемешанную кровь самотеком переводили через встроенный лейкофильтр во второй из сдвоенных гемоконтейнеров. Обедненную лейкоцитами консервированную аутокровь центрифугировали с использованием рефрижераторной центрифуги РС-6 при температуре +20°С, g=900 в течение 15 мин. К отводу контейнера с аутокровью с соблюдением правил асептики подсоединяли одинарный полимерный контейнер типа «Компопласт-300», в который с помощью ручного плазмоэкстрактора переводили плазму. Оставшуюся в гемоконтейнере лейкофильтрованную аутоэритроцитную массу (АЭМ), консервированную на CPDA-1, маркировали установленным порядком, помещали в медицинский холодильник и хранили при температуре от +2°С до +6°С до момента хирургической операции не более 35 суток.

Аутокровь консервируют;

Аутокровь пропускают через лейкофильтр;

Центрифугируют;

Эритроцитарную массу пропускают через лейкофильтр;

Полученную после фильтрации массу хранят при температуре от +2°С до +6°C до момента использования до 35 суток.

Практическая реализация способа. Предоперационное резервирование компонентов аутокрови осуществили у 37 больных ортопедического профиля по методике «селективной эксфузии-аутогемотрансфузии» (Вильянинов В.Н. и соавт., 2005). Показанием к заготовке компонентов аутокрови явилась прогнозируемая величина интраоперационной кровопотери выше 10% объема циркулирующей крови. На основании данных клинического обследования больного, а также гематологических и биохимических показателей принимали решение о возможности заготовки у пациента определенного вида и объема аутологичных гемокомпонентов. Безопасность предоперационного резервирования обеспечивали тщательной оценкой противопоказаний к аутодонации. Гемоэксфузии выполняли не позднее чем за 4 суток до хирургического вмешательства. Общий объем накопления аутологичных гемокомпонентов устанавливали в зависимости от прогнозируемой величины интраоперационной кровопотери, предоперационного временного резерва и физиологического состояния организма пациента, которое оценивали по комплексу клинических, инструментальных и лабораторных показателей.

Было проведено сравнительное изучение качественных и количественных характеристик лейкофильтрованной АЭМ (I группа) и АЭМ, полученной по стандартной методике (II группа), на различных сроках хранения. Образцы сред исследовали сразу после заготовки, на 5-7 сутки и 10-14 сутки хранения гемокомпонентов.

Таблица 1
Динамика показателей реологических свойств эритроцитов в аутологичной эритроцитной массе
Показатели	Исходные значения	5-7 сутки хранения	10-14 сутки хранения
I группа	II группа	I группа	II группа	I группа	II группа
КВэ, у.е.	1,74±0,06	1,82±0,03	1,86±0,05	1,97±0,02	1,93±0,05*	2,20±0,03
ИДэ, у.е.	1,47±0,01	1,51±0,02	1,58±0,01	1,61±0,01	2,25±0,02*	1,74±0,02
Примечание: * достоверность различий между группами (р<0,05).

КВ_э - коэффициент вязкости эритроцитов;

ИД_э - индекс деформируемости эритроцитов.

Примечание: *достоверность различий между группами (р<0,05).

Из данных табл.1 видно, что реологические свойства эритроцитов исследуемых групп в исходном состоянии существенно не различались. При хранении отмечено достоверное снижение коэффициента вязкости эритроцитов (КВ_э) на 10-14 сутки хранения в I группе на 14% по сравнению с контрольной группой. При хранении АЭМ на 5-7 сутки КВ_э в I группе повысился на 6,9%, а во II группе на 8,2%, на 10-14 сутки хранения в I группе КВ_э повысился на 11%, а во II группе на 20% по сравнению с исходными значениями. Зарегистрировано повышение индекса деформируемости эритроцитов (ИД_э) на 5-7 в I группе на 7%, во II группе - на 6%, на 10-14 сутки в I группе - на 47%, а во II группе на 15% по сравнению с исходными значениями. На 10-14 сутки хранения ИД_э лейкофильтрованной АЭМ был на 22,6% выше по сравнению со стандартной АЭМ.

При анализе спонтанного уровня малонового диальдегида (МДА) в исследованных образцах АЭМ выявили достоверное повышение его на 10-14 сутки хранения во второй (контрольной) группе на 46% (табл.2). В лейкофильтрованной АЭМ на 10-14 сутки в I группе уровень МДА снизился на 12%, в то время как в контрольной группе наблюдался рост по сравнению с исходными значениями на 33%. При анализе стимулированного уровня МДА в исходных значениях достоверных различий между группами не было. В то же время на 5-7 сутки в лейкофильтрованной АЭМ содержание МДА снизилось на 6%, а в контрольной группе возросло на 33% по сравнению с исходными значениями. На 10-14 сутки хранения содержание МДА в I группе увеличилось на 7%, а во II группе на 40% по сравнению с 5-7 сутками хранения. На 5-7 сутки стимулированный уровень МДА в лейкофильтрованной АЭМ был ниже на 30%, на 10-14 - на 40% по сравнению со стандартной АЭМ. Следовательно, лейкофильтрация положительно влияла на качество АЭМ, снижая интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) в гемокомпонентах.

Таблица 2
Динамика содержания МДА (мкмоль/л) в аутологичной эритроцитной массе при хранении
	Группы наблюдения	Исходные значения	5-7 сутки	10-14 сутки
Спонтанный уровень	I группа	2,21±0,18	2,40±0,18	1,94±0,08*
II группа	2,17±0,28	2,10±0,13	2,90±0,19
Стимулированный уровень	I группа	0,94±0,10	0,88±0,07*	0,97±0,02*
II группа	0,86±0,05	1,15±0,01	1,60±0,18
Примечание: * достоверность различий между группами (р<0,05).

Примечание: * достоверность различий между группами (р<0,05).

Элиминация лейкоцитов из аутологичной эритроцитной массы способствует снижению интенсивности гемолиза, перекисного окисления липидов, накопления провоспалительных цитокинов, повышению устойчивости мембран эритроцитов в условиях хранения при температуре +4°С в течение 14 суток.

Способ предоперационного резервирования аутоэритроцитной массы путем эксфузии крови пациента не позднее чем за 4 суток до хирургического вмешательства, фракционирования компонентов крови центрифугированием с последующим отделением плазмы, маркировкой и хранением эритроцитарной массы при температуре от +2 до +6°С, отличающийся тем, что у больного эксфузируют кровь в первый гемоконтейнер с консервантом CPDA-1, перемешивают и самотеком переводят через встроенный лейкофильтр Leukotrap Al (Pall) во второй из сдвоенных гемоконтейнеров, полученную обедненную лейкоцитами кровь центрифугируют при +20°С, 900 g в течение 15 мин, отделяют плазму в одинарный полимерный контейнер, оставшуюся в гемоконтейнере аутоэритроцитную массу с консервантом хранят до момента хирургического вмешательства не более 10-14 суток.