Способы и композиции для лечения ожирения, инсулинзависимых заболеваний и гиперхолестеринемии

Способы и композиции для лечения ожирения, инсулинзависимых заболеваний и гиперхолестеринемии

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ПЕРЕКРЕСТНЫЕ ССЫЛКИ НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет согласно предварительной патентной заявке США No. 60/591806 от 29 июля 2000 г.

ГОСУДАРСТВЕННЫЕ ПРАВА

[0002] Настоящее изобретение было финансировано грантом USDA No. 2003-35504-13618. Правительство США имеет определенные права на это изобретение.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

(1) ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

[0003] Настоящее изобретение относится к лечению инсулинозависимых заболеваний, ожирения, сахарного диабета, гипергликемии, липоидных нарушений, гиперлипедемии или низкого показателя липопротеида высокой плотности (ЛВП, HDL), гиперхолестеринемии, гиперглициридемии, дислипедимии и атеросклероза. В частности, настоящее изобретение относится к способу применения антоцианинов, антоцианидинов, урсоловой кислоты и бетулиновой кислоты. В частности, настоящее изобретение относится к экстрактам плодов Cornus spp. (вид кизила), а также к другим плодам, содержащим указанные соединения, таким как вишня и ягоды, или их смесям, применяемым с целью усиления выработки инсулина клетками in vivo. В частности, настоящее изобретение также относится к композициям, применяемым согласно указанному способу, с целью усиления выработки инсулина in vivo при лечении связанных с выработкой инсулина заболеваний. В частности, настоящее изобретение также относится к композициям, применяемым для предотвращения развития ожирения и снижения холестерина и массы тела.

(2) УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0004] Функция инсулина состоит в поддержании нормальных уровней глюкозы в крови либо за счет подавления выработки глюкозы печенью, либо за счет стимуляции потребления глюкозы и ее метаболизма (Ross, S.A.; Gulve, E.А.; Wang, M. Chemistry and Biochemistry of diabetes. Chem. Rev. 2004, 104, 1255-1282). Недостаточная выработка инсулина или отсутствие воздействия инсулина на целевые ткани вызывает нарушение метаболизма глюкозы и липидного метаболизма. Это приводит к повышению уровня глюкозы в крови, что является признаком диабета (Jovanovic, L; Gondos, В. Type-2 diabetes: The epidemic of new millennium. Ann. Clin. Lab. Sci. 1999, 29, 33-42). Существуют два типа диабета: диабет I типа (инсулинозависимый диабет), диабет II типа (неинсулинозависимый диабет). Диабет I типа возникает из-за аутоиммунной деструкции или ингибирования β-клеток поджелудочной железы, клеток, вырабатывающих инсулин, что приводит к инсулиновой недостаточности. Диабет II типа имеет большее распространение и вызывается неспособностью β-клеток выделять количества инсулина, достаточные для преодоления резистентности к инсулину, вызванной генетическими факторами или воздействием окружающей среды (Henquin, J.С. Triggering and amplifying pathways of regulation of insulin secretion by glucose. Diabetes 2000, 49, 1751-1760). Резистентность к инсулину представляет собой нарушение, при котором инсулин недостаточно стимулирует транспорт глюкозы к скелетным мускулам и жиру и недостаточно подавляет выработку глюкозы в печени. Механизм, предотвращающий выработку β-клетками количеств инсулина, достаточных для преодоления периферийной резистентности к инсулину, все еще не установлен.

[0005] Однако применение гипогликемических агентов, принимаемых перорально, которые непосредственно стимулируют высвобождение инсулина из β-клеток (например, медикаментов на основе сульфонилмочевины, описанных в патенте США No. 6852738, Jones et al., включенном в настоящее описание в качестве ссылки), показало, что у пациентов, страдающих диабетом II типа, секреция инсулина островковыми клетками может быть повышена в достаточной степени для преодоления периферийной резистентности к инсулину и нормализации уровня глюкозы в крови. Одним из недостатков применения медикаментов на основе сульфонилмочевины является то, что они не могут регулировать нормальный уровень глюкозы крови (Pfeiffer, A.F.H. Oral hypoglycemic agents: Sulfonylureas and meglitinides. In B.J.Goldstein, D.Müller-Wieland (Eds.), Text book of Type-2 Diabetes. Martin Dunitz Ltd., London, 2003, pp.77-85). Эти медикаменты также отрицательно влияют на способность β-клеток вырабатывать инсулин и вызывают увеличение массы тела (Pfeiffer, A.F.H. Oral hypoglycemic agents: Sulfonylureas and meglitinides. In B.J.Goldstein, D.Müller-Wieland (Eds.), Text book of Type-2 Diabetes. Martin Dunitz Ltd., London, 2003, pp.77-85). Следовательно, существует необходимость в пищевых составляющих, способных, наряду с традиционным лечением медикаментами, отпускаемыми только по рецепту врача, регулировать уровень глюкозы в крови или индуцировать выработку инсулина β-клетками поджелудочной железы.

[0006] Опубликованные данные указывают на то, что потребление плодов и овощей, особенно богатых полифенолами, снижает частоту заболеваемости диабетом II типа (Anderson, R.A.; Polansky, M.M., Tea Enhanced Insulin Activity. J. Agric. Food Chem. 2002, 50, 7182-7186; Anderson, R.A.; Broadhurst, C.L.; Polansky, M.M.; Schmidt, W.F.; Khan, A.; Flanagan, V.P., Schoene, N.W.; Graves, D.J. Isolation and Characterization of Polyphenol Type-A Polymers from Cinnamon with Insulin-like Biological Activity. J. Agric. Food Chem. 2004, 52, 65-70; Landrault, N.; Poucheret, P.; Azay, J.; Krosniak, M.; Gasc, F.; Jenin, C.; Cros, G., Teissedre, P. Effect of a Polyphenols-Enriched Chardonnay White Wine in Diabetic Rats. J. Agric. Food Chem. 2003, 51, 311-318). Также хорошо известно, что пищевые антиоксиданты защищают β-клетки поджелудочной железы от индуцированного глюкозой окислительного стресса. Большое количество антоцианинов находится в плодах, овощах и обработанных пищевых продуктах, таких как вино, сидр и чай. Однако об их способности снижать или предотвращать диабет известно мало.

[0007] Кроме того, антоцианины нетоксичны и, как сообщалось, обладают антиоксидантной, противовоспалительной и противораковой активностью (Wang, H., Nair, M.G., Strasburg, G.M., Chang, Y., Booren, A.M. Gray, J.I., DeWitt, D.L. (1999) Antioxidant and anti-inflammatory activities of anthocyanins and their aglycon, cyanidin, from tart cherries. J. Nat. Prod. 62, 294-296; Tall, J.M., Seeram, N.P., Zhao, C, Nair, M.G., Meyer, R.A., Raja, S.N. (2004) Tart cherry anthocyanins suppress inflammation-induced pain behavior in rat. Behav. Brain Res. 153, 181-188; Kang, S., Seeram, N.P., Nair, M.G., Bourquin, L.D. (2003) Tart cherry anthocyanins inhibit tumor development in ApcMin mice and reduce proliferation of human colon cancer cells. Cane. Lett. 194, 13-19; Zhang, Y., Vareed, S.K., and Nair, M.G. (2005) Human tumor cell growth inhibition by nontoxic anthocyanidins, the pigments in fruits and vegetables. Life Sci. 16, 1465-1472).

[0008] Способность природных биоактивных продуктов, присутствующих в овощах, плодах и травах, предотвращать и излечивать дегенеративные нарушения здоровья человека, такие как рак, диабет и сердечно-сосудистые заболевания, вызывает значительный интерес. Например, орехи, цельные зерна, плоды и овощи являются мощным источником антиоксидантов, таких как полифенолы, терпеноиды и пигменты, а действие указанных соединений давно связывали с уменьшением интенсивности симптомов некоторых заболеваний. Также известно, что фитохимические соединения, содержащиеся в чесноке, соевых бобах, капусте, имбире, лакрице и овощах семейства зонтичных, обладают противораковой активностью (Rui, H.L. (2004) Potential synergy of phytochemicals in cancer prevention: mechanism of action. J. Nutr. 134, 3479S-3485S). Также сообщали, что полифенолы, содержащиеся в чае, обладают противодиабетическими свойствами (Vanessa, С., Gary, W. (2004) A review of the health effects of green tea catechins in in-vivo animal models. J. Nutr. 134, 3431S-3440S; Mary E.W., Xiaohui, L.W., Brian, K.L., Robert K.H., Masao, N., Daryl K.G. (2002) Epigallocatechin gallate, a constituent of green tea, represses hepatic glucose production. J. Biol. Chem. 277, 34933-34940).

[0009] Соблюдение диеты с пониженным содержанием жиров, обогащенной антиоксидантами, снижает риск возникновения ожирения и резистентности к инсулину (Blakely, S.; Herbert, A.; Collins, M.; Jenkins, M.; Mitchell, G.; Grundel, E.; O′Neill, K.R.; Khachik, F. Lutein interacts with ascorbic acid more frequently than with α-tocopherol to alter biomarkers of oxidative stress in female Zucker obese rats. J. Nutr. 2003, 133, 2838-2844).

[0010] Антоцианины входят в группу полифенолов-антиоксидантов и содержатся в пище и напитках различных видов. Потребление антоцианинов связывают с пониженным риском возникновения некоторых дегенеративных заболеваний, таких как атеросклероз, сердечно-сосудистые заболевания, рак и диабет (Jayaprakasam, В.; Strasburg, G.A.; Nair, M.G. Potent lipid peroxidation inhibitors from Withania somnifera. Tetrahedron 2004, 60, 3109-3121). Эти соединения являются хорошо известными акцепторами свободных радикалов и, как сообщалось, потенциальными химиопрофилактическими агентами (Duthie, G.G.; Duthie, S.J.; Kyle, J.A.M. Plant polyphenols in cancer and heart disease: implications as nutritional antioxidants. Nutr. Res. Rev. 2000, 13, 79-106). Например, при потреблении земляники, вишни и красного вина повышается антиоксидантная способность сыворотки крови (Kang, S.Y.; Seeram, N.Р.; Nair, M.G.; Bourquin, L.D. Tart cherry anthocyanins inhibit tumor development in ApcMin mice and reduce proliferation of human colon cancer cells. Cane. Lett. 2003, 194, 13-19; Van Velden, D.P.; Mansvelt, E.P.G.; Fourie, E.; Rossouw, M.; Marais, A.D. The cardioprotective effect of wine on human blood chemistry. Ann. New York Acad. Sci. 2002, 957, 337-340; Wang, H.; Nair, M.G.; Strasburg, G.M.; Chang, Y.C; Booren, A.M.; Gray, I.J.; DeWitt, D.L. Antioxidant and anti-inflammatory - activities of anthocyanins and their aglycone, cyanidin, from tart cherries. J. Nat. Prod. 1999, 62, 294-296). Недавние исследования показали, что антоцианин, цианидин-3-глюкозид, снижает ожирение, вызванное употреблением пищи с повышенным содержанием жиров, у мышей (Espin, J.С; Soler-Rivas, С; Wichers, H.J.; Garcia-Viguera, С. Anthocyanin-based natural colorants. A new source of antiradical activity for foodstuff. J. Agri. Food Chem. 2000, 48, 1588-1592). Таким образом, природные красители, находящиеся в пище, привлекают потребителей своей безопасностью, а также пищевой и терапевтической ценностью (Millspaugh, С.F. In American Medicinal Plants; Dover Publications: New York, 1974; стр.282). Так как потребление антоцианинов достаточно распространено, исследование дополнительной биологической активности указанных соединений представляет собой огромный интерес.

[0011] Некоторые исследования показывают, что употребление пищи, обогащенной жирами и обедненной волокнистым материалом, приводит к возникновению ожирения. Ожирение приводит к изменению липидного обмена (метаболизма), что, в свою очередь, приводит к резистентности к инсулину. В этих условиях жировая ткань производит огромное количество свободных жирных кислот (СЖК). Затем СЖК ингибируют усвоение глюкозы, синтез гликогена и окисление глюкозы (Saltiel, A.R. and Kahn, С.R. (2001) Insulin signaling and the regulation of glucose and lipid metabolism. Nature 414, 799-806) и приводит к возникновению гипергликемии и диабета II типа. Диабет II типа является обычным заболеванием, частота возникновения которого постоянно растет и которым страдают приблизительно от 150 до 300 миллионов людей во всем мире; ожидается, что в течение последующих 25 лет эта цифра удвоится (King, H., Aubert, R.E., and Herman, W.H. (1998) Global burden of diabetes, 1995-2025: prevalence, numerical estimates, and projections. Diabetes Care 21, 1414-1431). В недавнее время особое внимание было уделено пище, которая может оказаться полезной для снижения накоплений жира, образуемого в результате питания, и для снижения потенциального риска возникновения диабета и сердечных заболеваний.

[0012] Усвоение пищи контролируется несколькими биохимическими процессами. В ответ на прием питательных веществ в эндокринных клетках синтезируются глюкагоноподобные пептид-1 и пептид-2 (GLP-1 и -2), которые высвобождаются в кровь. GLP-2 усиливает поглощение за счет расширения эпителия слизистой оболочки (Ahren, В. (1998) Glucagon-like peptide-1 (GLP-I): a gut hormone of potential interest in the treatment of diabetes. BioEssays 20, 642-651 and Drucker, D.J. (2002) Biological action and therapeutic potential of glucagons like peptides. Gastroenterology 122, 531-544). GLP-1 в основном вырабатывается в кишечных L-клетках; он ингибирует выработку глюкагона печенью и опорожнение желудка, что, в свою очередь, замедляет усвоение пищи и стимулирует биосинтез инсулина и его секрецию β-клетками поджелудочной железы (Ahren, В. (1998) Glucagon-like peptide-1 (GLP-I): a gut hormone of potential interest in the treatment of diabetes. BioEssays 20, 642-651 and Drucker, D.J. (2002) Biological action and therapeutic potential of glucagons like peptides. Gastroenterology 122, 531-544). Первичная функция β-клеток поджелудочной железы состоит в выработке биоактивного инсулина в ответ на появление питательных веществ, гормонов и нервных раздражителей, с целью поддержания нормальных физиологических концентраций глюкозы в организме (Rohit, N.К. (2004) The islet β-cell. The Int. J. Biochem. Cell Biol. 36, 365-371). Прогрессирующая потеря β-клетками поджелудочной железы их функций в ответ на повышенные уровни глюкозы в крови создает дефицит инсулина, который приводит к возникновению диабета II типа (Pinget, M.; Boullu-Sanchis, S. (2002) Physiological basis of insulin secretion abnormalities. Diabet. Met. 28 (6, Suppl.), 4S21-4S32). Как дефицит инсулина, так и резистентность к инсулину приводят к возникновению проблем со здоровьем, таким как гиперлипидемия, атеросклероз и повышенное давление (Saltiel, A.R.; Kahn, С.R. (2001) Insulin signaling and the regulation of glucose and lipid metabolism. Nature 414, 799-806), и они часто взаимосвязаны с нарушениями углеводного и липидного обмена (Brosche, Т. (2001) Plasmalogen levels in serum from patients with impaired carbohydrate or lipid metabolism and in elderly subjects with normal metabolic values. Arch. Gerontol. Geriatrics 32, 283-294). Взаимодействие указанных систем контроля происходит в соответствии со сложной схемой, и любое изменение генетических факторов, окружающей среды или социальных условий может вызывать ожирение и диабет (Ross, S.A., Gulve, E.A., Wang, M. (2004) Chemistry and biochemistry of type 2 diabetes. Chem. Rev. 104, 1255-1282). Однако развитие некоторых осложнений, возникающих из-за воздействия социальных факторов и окружающей среды, может быть задержано или вовсе устранено при помощи физических нагрузок и правильного питания (Christian, К.R., Barnard, R.J. (2005) Effects of exercise and diet on chronic disease. J. Appl. Physiol. 98, 3-30). Эпидемиологические исследования показали, что питание, обогащенное плодами и овощами, снижает заболеваемость раком, сердечно-сосудистыми заболеваниями, диабетом, катарактой и воспалительными заболеваниями (World Cancer Research Fund/American Institute for Cancer Research (1997) Food, nutrition and the prevention of cancer: A global perspective 1997, American Institute for Cancer Research Washington, DC; U.S. Department of Agriculture, U.S. Department of Health and Human Services (1995) Nutrition and Your Health: Dietary Guidelines for Americans 1995, U.S. Government Printing Office Washington, DC; American Heart Association (1996) Dietary guidelines for healthy American adults: A statement for health professionals from the nutrition committee, American Heart Association. Circulation 94, 1795-1800; American Cancer Society (1996) Guidelines on diet, nutrition, and cancer prevention: reducing the risk of cancer with healthy food choices and physical activity. Cancer J. Clin. 46, 325-341; World Health Organization (1990) Diet, Nutrition and the prevention of chronic diseases: Report of a WHO study group, Technical Report Series 797, WHO Geneva, Switzerland; Willett, W.C. (1999) Goals for nutrition in the year 2000. Cancer J. Clin. 49, 331-352 and Willett, W.C. (1998) Nutritional Epidemiology 1998, Press: Oxford University, New York, NY, USA).

[0013] В последнее время все возрастающий интерес вызывают природные гипогликемические соединения, полученные из растений, плодов и овощей, которые обычно считают безопасными (generally regarded as safe - GRAS), поскольку они, как полагают, являются менее токсичными и обладают меньшим количеством побочных эффектов. Эти биоактивные соединения, присутствующие в пище, могут изменять экспрессию генов и клеточные реакции (Milner, J. А. (2004) Molecular targets for bioactive food components. J. Nutr. 134, 2492S-2498S), что приводит к модификации белков и их функций. Несмотря на то, что результаты нескольких исследований позволяют предположить, что фитохимические соединения, присутствующие в плодах и овощах, полезны для снижения риска возникновения ухудшения здоровья, их защитные воздействия не были систематически изучены.

[0014] Плоды кизила применяют в составе традиционных китайских медикаментов, отпускаемых по рецепту, таких как "Hachimi-Gan" (Yamahara, J.; Mibu, H.; Sawada, Т.; Fujimura, H.; Takino, S.; Yoshikawa, M.; Kitagawa, I. Biologically active principles of crude drugs. Anti-diabetic principles of corni fructus in experimental diabetes induced by streptozotocin. Yakugaku Zasshi 1981, 101, 86-90). Ранее мы опубликовали количественный анализ антоцианинов в плодах кизила (Cornus spp.) (Seeram, N.Р.; Schutzki, R.; Chandra, A.; Nair, M.G. Characterization, Quantification, and Bioactivities of Anthocyanins in Cornus Species. J. Agri. Food Chem. 2002, 50, 2519-2523).

[0015] Плоды кизила являются богатым источником антоцианинов. Плоды кизила мужского (Cornus mas L.), также известные под названием европейского и азиатского кизила настоящего (Cornelian cherry), в Европе используют для приготовления напитков (Kirn, D.К.; Kwak, J.H. A Furan derivative from Cornus officinalis. Arch. Pharm. Res. 1998, 21, 787-789). В традиционной медицине известно анальгетическое и диуретическое действие плодов кизила лекарственного (Cornus officinalis) (Yamahara, J.; Mibu, H.; Sawada, Т.; Fujimura, H.; Takino, S.; Yoshikawa, M.; Kitagawa, I. Biologically active principles of crude drugs. Anti-diabetic principles of corni fructus in experimental diabetes induced by streptozotocin. Yakugaku Zasshi 1981, 101, 86-90). В азиатских странах плоды кизила также являются одним из главных составляющих нескольких противодиабетических растительных препаратов (Seeram, N.Р.; Schutzki, R.; Chandra, A.; Nair, M.G. Characterization, Quantification, and Bioactivities of Anthocyanins in Cornus Species. J. Agri. Food Chem. 2002, 50, 2519-2523). Более ранние исследования плодов кизила мужского и кизила лекарствнного показали, что в обоих видах содержатся высокие концентрации антоцианинов (Beckwith, A.G.; Zhang, Y.; Seeram, N.Р.; Cameron, А.С; Nair, M.G. Relationship of Light Quantity and Anthocyanin Production in Pennisetum setaceum Cvs. Rubrum and Red Riding Hood. J. Agric. Food Chem. 2004, 52, 456-461).

[0016] Плоды растения кизила мужского похожи на плоды кислой вишни (Р.cerasus). Он принадлежит к семейству кизиловых (Cornaceae) и является лиственным деревом, произрастающим в Европе и Восточной Азии (Millspaugh, С.F. American Medicinal Plants; Dover Publications: New York, 1974; стр.282). В Турции плоды растений этого вида применяли для получения некоторых отваров. Более ранние исследования показали, что спиртовой экстракт кизила лекарственного увеличивает экспрессию GLUT 4 mRNA, переносчика глюкозы 4 матричной РНК, у крыс, страдающих неинсулинозависимым сахарным диабетом (non-insulin dependent diabetes mellitus (NIDDM)) (Qian, D., Zhu, Y., and Zhu, Q. (2001) Effect of alcohol extract of Cornus officinalis Sieb. et Zucc on GLUT4 expression in skeletal muscle in type 2 (non-insulin-dependent) diabetes mellitus rats. Zhongguo Zhongyao Zazhi 26, 859-862). Плоды кизила также хорошо известны в китайской медицине, и в Китае эти плоды также использовали для лечения диабета. Однако активные соединения, проявляющие противодиабетическую активность, так и не были охарактеризованы. Более ранние исследования плодов некоторых Cornus spp., выращенных в Мичигане, показали, что кизил мужской содержит большие количества антоцианинов (Seeram, N.Р., Schutzki, R., Chandra, A., and Nair, M. G. (2002) Characterization, quantification, and bioactivities of anthocyanins in Cornus species. J. Agric. Food Chem. 50, 2519-2523).

ЦЕЛИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0017] Целью настоящего изобретения является предоставление композиций и способов, пригодных для лечения нарушений, связанных с выработкой инсулина, высокой концентрацией холестерина и большой массой тела. В частности, целью настоящего изобретения является предоставление способа и композиций для повышения выработки инсулина in vivo. Другие цели настоящего изобретения будут пояснены последующим описанием и чертежами.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0018] Настоящее изобретение относится к способу контролирования ожирения у млекопитающего пациента, который нуждается в таком лечении, который включает введение пациенту терапевтически эффективного количества композиции, включающей соединение, выбираемое из группы, состоящей из антоцианина, антоцианидина, урсоловой кислоты, бетулиновой кислоты или их смесей. В частности, настоящее изобретение относится к добавкам из плодов кизила и других плодов, которые по существу не содержат кислот и сахаров, обычно присутствующих в плодах.

[0019] Настоящее изобретение также относится к способу лечения ожирения у людей, страдающих диабетом и принимающих медикамент для лечения диабета, отпускаемый по рецепту, который включает введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества композиции, включающей соединение, выбираемое из группы, состоящей из антоцианина, антоцианидина, урсоловой кислоты, бетулиновой кислоты или их смесей в сочетании с медикаментом, отпускаемым по рецепту. Предпочтительно указанная композиция представляет собой добавку или фармацевтический состав.

[0020] Предпочтительно антоцианин, антоцианидин, урсоловую кислоту или бетулиновую кислоту выделяют из плодов, овощей или цветов. Предпочтительно антоцианин выбирают из группы, состоящей из цианидин-3-гликозида, делфинидин-3-гликозида, пеларгонидин-3-гликозида или их смесей. «Гликозид» представляет собой любое соединение, которое содержит молекулу углевода (сахара), в частности любой такой натуральный продукт, содержащийся в растениях, который при помощи гидролитического расщепления может быть превращен в сахар и несахарный компонент (агликон), и специально названный в соответствии с содержащимся в нем сахаром, например, гликозидом (глюкоза), пентозидом (пентоза), фруктозидом (фруктоза) и т.д. Предпочтительно, антоцианин, урсоловую кислоту или бетулиновую кислоту извлекают из кизила мужского. Предпочтительно антоцианидин или антоцианин, урсоловую кислоту, бетулиновую кислоту или их смеси выделяют и очищают.

[0021] Настоящее изобретение также относится к способу лечения сахарного диабета у млекопитающего пациента, который нуждается в таком лечении, с целью контролирования сахарного диабета, который включает введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества композиции, включающей соединение, выбираемое из группы, состоящей из антоцианина, антоцианидина, урсоловой кислоты, бетулиновой кислоты или их смесей.

[0022] Предпочтительно антоцианин, урсоловую кислоту или бетулиновую кислоту выделяют из плодов, овощей или цветов. Предпочтительно антоцианин выбирают из группы, состоящей из цианидин-3-гликозида, делфинидин-3-гликозида, пеларгонидин-3-гликозида или их смесей. Предпочтительно антоцианин, урсоловую кислоту или бетулиновую кислоту извлекают из плодов кизила мужского. Однако антоцианины могут быть выделены из других плодов, таких как плоды вишни и ягоды.

[0023] Настоящее изобретение также относится к способу лечения или контролирования гипергликемии у млекопитающего пациента, который нуждается в таком лечении, который включает введение терапевтически эффективного количества композиции, включающей соединение, выбираемое из группы, состоящей из антоцианина, урсоловой кислоты, бетулиновой кислоты или их смесей, применяемой, в частности, в виде добавки.

[0024] Предпочтительно антоцианин, антоцианидин, урсоловую кислоту или бетулиновую кислоту извлекают из плодов, овощей или цветов. Предпочтительно антоцианин выбирают из группы, состоящей из цианидин-3-гликозида, делфинидин-3-гликозида, пеларгонидин-3-гликозида или их смесей. Предпочтительно антоцианин, урсоловую кислоту или бетулиновую кислоту извлекают из кизила мужского. Предпочтительно антоцианин, антоцианидин, урсоловую кислоту, бетулиновую кислоту или их смеси выделяют и очищают.

[0025] Настоящее изобретение также относится к композиции, применяемой для лечения таких заболеваний, как ожирение, диабет или гипергликемия, включающей антоцианин, антоцианидин, урсоловую кислоту, бетулиновую кислоту или их смеси в виде стандартной суточной лекарственной формы для лечения заболевания в течение некоторого периода времени, и фармацевтический носитель.

[0026] Наиболее предпочтительно антоцианин выбирают из группы, состоящей из цианидин-3-гликозида, делфинидин-3-гликозида, пеларгонидин-3-гликозида или их смесей. Предпочтительно антоцианин, антоцианидин, урсоловую кислоту или бетулиновую кислоту выделяют из плодов, овощей или цветов. Предпочтительно антоцианин, урсоловую кислоту или бетулиновую кислоту извлекают из кизила мужского.

[0027] Настоящее изобретение также относится к способу лечения или контролирования липидных нарушений, гиперлипидемии или низкого показателя ЛВП у млекопитающего пациента, который нуждается в таком лечении, включающему введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества композиции, содержащей соединение, выбираемое из группы, состоящей из антоцианина, антоцианидина, урсоловой кислоты, бетулиновой кислоты или их смесей, применяемой, в частности, в виде добавки.

[0028] Настоящее изобретение также относится к способу лечения или контролирования гиперхолестеринемии у млекопитающего пациента, который нуждается в таком лечении, включающему введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества композиции, содержащей соединение, выбираемое из группы, состоящей из выделенных антоцианина, антоцианидина, урсоловой кислоты, бетулиновой кислоты или их смесей, применяемой, в частности, в виде добавки.

[0029] Настоящее изобретение также относится к способу лечения или контролирования гиперглициридемии у млекопитающего пациента, который нуждается в таком лечении, включающему введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества композиции, включающей соединение, выбираемое из группы, состоящей из выделенных антоцианина, антоцианидина, урсоловой кислоты, бетулиновой кислоты или их смесей, применяемой, в частности, в виде добавки.

[0030] Настоящее изобретение также относится к способу лечения или контролирования дислипедимии и/или низкого ЛВП холестерина у млекопитающего пациента, который нуждается в таком лечении, включающему введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества композиции, включающей соединение, выбираемое из группы, состоящей из выделенного антоцианина, антоцианидина, урсоловой кислоты, бетулиновой кислоты или их смесей, применяемой, в частности, в виде добавки.

[0031] Настоящее изобретение также относится к способу лечения атеросклероза у млекопитающего пациента, который нуждается в таком лечении, включающему введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества композиции, включающей соединение, выбираемое из группы, состоящей из выделенных антоцианина, антоцианидина, урсоловой кислоты, бетулиновой кислоты или их смесей, применяемой, в частности, в виде добавки.

[0032] Наиболее предпочтительно, соединение выделяют из кизила мужского. Предпочтительно антоцианин, антоцианидин, урсоловую кислоту, бетулиновую кислоту или их смеси извлекают из плодов указанного растения или других плодов и очищают.

[0033] Терапевтически активные метаболиты соединений, предлагаемых согласно настоящему изобретению, также попадают в область, защищаемую настоящим изобретением, как и заявляемые исходные соединения. Пролекарства, которые представляют собой соединения, превращаемые в заявляемые соединения в том виде, в котором их вводят пациенту или после того, как они были введены пациенту, также попадают в область, защищаемую настоящим изобретением, как и заявляемые активные соединения.

СПОСОБЫ ВВЕДЕНИЯ И ИНТЕРВАЛ ДОЗ

[0034] Для обеспечения млекопитающего, в частности человека, эффективной дозой соединения, предлагаемого согласно настоящему изобретению, может быть применен любой подходящий для этого способ введения. Например, может быть применен пероральный, перректальный, топический, парентеральный, глазной, пульмональный, назальный и подобные им способы введения. Лекарственные формы включают таблетки, драже, дисперсии, суспензии, растворы, капсулы, кремы, мази, аэрозоли и подобные им формы. Предпочтительно соединения вводят перорально.

[0035] Эффективную дозу применяемого активного ингредиента можно варьировать в зависимости от конкретного применяемого соединения, способа введения, состояния пациента и тяжести состояния пациента, которого подвергают лечению. Указанная доза может быть легко определена специалистом в данной области техники.

[0036] При лечении или предотвращении ожирения, сахарного диабета и/или гипергликемии или гипертриглицеридимии или других заболеваний, в общем удовлетворительные результаты были получены, если суточная доза вводимого соединения, предлагаемого в соответствии с настоящим изобретением, составляла от приблизительно 0.1 миллиграмма до 100 миллиграммов на килограмм живой массы; предпочтительно соединение вводят в виде единичной суточной дозы или отдельных доз, принимаемых от двух до шести раз в сутки, или в виде лекарственной формы с замедленным высвобождением.

Для большинства крупных млекопитающих полная суточная доза составляет приблизительно от 1.0 миллиграмма до 1000 миллиграммов, предпочтительно от 1 миллиграмма до 50 миллиграммов. В случае взрослого человека с массой тела 70 кг полная суточная доза составляет приблизительно от 7 миллиграммов до 350 миллиграммов. Указанная схема приема может быть изменена с целью получения оптимальной терапевтической реакции.

[0037] В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтические композиции, предлагаемые согласно настоящему изобретению, включают в качестве активного ингредиента заявляемые соединения или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства, а также фармацевтически приемлемый носитель и, возможно, другие терапевтические ингредиенты. Термин «фармацевтически приемлемые соли» относится к солям, приготовленным из фармацевтически приемлемых нетоксичных оснований или кислот, включающих неорганические основания или кислоты и органические основания или кислоты.

[0038] Указанные композиции включают композиции, пригодные для перорального, перректального, топического, парентерального (включая подкожное, внутримышечное и внутривенное введение) глазного (офтальмологического введения), пульмонального (назальной или внутриротовой ингаляции) или назального введения; однако наиболее подходящий способ в каждом случае зависит от природы и тяжести состояния пациента, подвергаемого лечению, и от природы активного ингредиента. Композиции могут быть подходящим образом представлены в виде стандартных лекарственных форм и приготовлены любым способом, известным в области фармакологии.

[0039] На практике соединения, применяемые в качестве активного ингредиента, могут быть смешаны с фармацевтическим носителем до однородной смеси в соответствии с традиционными методиками составления фармацевтических композиций. Носитель может принимать разнообразные формы, в зависимости от формы препарата, требуемой для введения, например, пероральной или парентеральной (включая внутривенную). При приготовлении композиций для пероральных лекарственных форм может быть применена любая из обычных фармацевтических сред, например вода, гликоли, масла, спирты, вкусовые вещества, консерванты, красители и подобные им вещества могут быть применены в случае жидких препаратов для перорального введения; например, суспензии, эликсиры и растворы или носители, такие как крахмалы, сахара, микрокристаллическая целлюлоза, разбавители, гранулирующие агенты, скользящие вещества, связующие вещества, дезинтегрирующие агенты и подобные им вещества могут быть применены в случае твердых пероральных препаратов, таких как, например, порошки, твердые и мягкие капсулы и таблетки; при этом твердые пероральные препараты предпочтительнее, чем жидкие пероральные препараты.

[0040] По способу введения таблетки и капсулы представляют собой наиболее удобную пероральную стандартную лекарственную форму, в которой, как очевидно, применяют твердые фармацевтические носители. При необходимости на таблетки при помощи стандартных водных и неводных методик может быть нанесено покрытие. Такие композиции и препараты должны содержать по меньшей мере 0.1% активного соединения. Разумеется, процентное содержание активного соединения в указанных композициях может быть изменено; удобно, если оно составляет приблизительно от 2 до 60 мас.% от стандартной формы. Количество активного соединения в таких терапевтически применимых композициях таково, что оно составляет эффективную дозу. Активные соединения также могут быть введены интраназальным способом, например, в виде жидких капель или спрея.

[0041] Таблетки, пилюли, капсулы и подобные им формы также могут содержать связывающее вещество, такое как трагакантовая камедь, гуммиарабик, кукурузный крахмал или желатин; наполнители, такие как дикальция фосфат; дезинтегрирующие агенты, такие как кукурузный крахмал, картофельный крахмал, альгиновая кислота; скользящее вещество, такое как стеарат магния; и подсластитель, такой как мальтодекстрин, лактоза или сахарин. В случае, если стандартная лекарственная форма представляет собой капсулу, то кроме материалов вышеуказанного типа она может содержать жидкий носитель, такой как жирное масло.

[0042] В качестве покрытий или для модификации физической формы стандартной лекарственной формы могут быть применены и другие различные материалы. Например, таблетки могут быть покрыты шеллаком, сахаром или и тем и другим. Кроме активного ингредиента сироп или эликсир может содержать в качестве подсластителя сахарозу, в качестве консервантов - метил- и пропилпарабены, краситель и вкусовую добавку, такую как вишневая или апельсиновая вкусовая добавка.

[0043] Соединения также могут быть введены парентерально. В воде могут быть приготовлены растворы или суспензии указанных активных ингредиентов, которые могут быть подходящим образом смешаны с поверхностно-активным веществом, таким как гидроксилпропилцеллюлоза. Также могут быть приготовлены дисперсии в глицерине, жидких полиэтиленгликолях и их смесях в маслах. Для предотвращения роста микроорганизмов в обычных условиях использования и хранения эти препараты содержат консерванты.

[0044] Фармацевтические формы, пригодные для инъекционного введения, включают стерильные водные растворы или дисперсии и стерильные порошки, предназначенные для приготовления стерильных инъекционных растворов или дисперсий для немедленного приема. Во всех случаях форма должна быть стерильной и должна быть достаточно текучей для вывода жидкости из шприца. Она должна быть устойчива в условиях изготовления и хранения и должна выдерживать загрязняющее действие микроорганизмов, таких как бактерии и грибки. Носитель может представлять собой растворитель или дисперсионную среду, содержащую, например, воду, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль), подходящие смеси указанных веществ и растительные масла.

[0045] Соединения могут быть использованы в сочетании с другими медикаментами, которые могут применяться для лечения, предотвращения, подавления или снижения интенсивности симптомов заболеваний или состояний. Указанные другие медикаменты могут быть введены обычным для них способом в обычном количестве одновременно или последовательно с соединением. Если соединение применяют одновременно с одним или несколькими другими медикаментами, предпочтительно применять стандартную лекарственную форму, содержащую фармацевтическую композицию, включающую указанные другие медикаменты и соединение. Однако комбинированная терапия также включает терапии, при которых соединение Формулы I и один или несколько медикаментов вводят в соответствии с различными перекрывающимися схемами. Также следует понимать, что при использовании в сочетании с одним или несколькими другими активными ингредиентами, соединение, предлагаемое согласно настоящему изобретению, и другие активные ингредиенты могут быть использованы в меньших дозах, чем при использовании их по отдельности. Соответственно, фармацевтические композиции, предлагаемые согласно настоящему изобретению, включают композиции, которые кроме соединения содержат один или несколько других активных ингредиентов.

ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

[0046] На Фиг.1 представлены структуры антоцианинов 1-4 и антоцианидинов 5-9.

[0047] На Фиг.2А изображен график, показывающий количество инсулина, выделенного на миллиграмм белка при воздействии соединений 1 и 2, а на Фиг.2В - под действием соединений 5 и 6 в присутствии 4 и 10 мМ глюкозы. Конечная концентрация диметилсульфоксида (ДМСО) в лунках для анализа (assay wells) составляла 0.1%. В качестве результата брали среднее значение трех или пяти независимых экспериментов, и каждый образец анализировали дважды. Как было определено при помощи наименьшей квадратичной разности (LSD, least square difference) с использованием t-теста (проверки по критерию Стьюдента), выработка инсулина при воздействии соединений 1, 2, 5 и 6 была значительной при * (95% или p≤0.05) или ** (99% или p≤0.01).

[0048] На Фиг.3 изображен график, показывающий количество инсулина, выделенного при воздействии соединений 3, 7-9 при концентрациях глюкозы 4 и 10 мМ. Количество выделенного инсулина нормализовали на 1 миллиграмм белка. Конечная концентрация ДМСО в лунках для анализа составляла 0.1%. В качестве результата брали среднее значение трех независимых экспериментов, и каждый образец анализировали дважды. Как было определено при помощи LSD с использованием проверки по критерию Стьюдента, выработка инсулина под действием соединений 3, 7-9 имела значимость * (95% или p≤0.05).

[0049] На Фиг.4 изображен график, показывающий потребление пищи (в г) животными в течение 12-недельного исследования ожирения. Цифры представляют собой средние значения ± SEM (standard error of the mean - стандартная ошибка среднего), n=8. Потребление пищи измеряли каждый день и усредняли значение за неделю. Значительного различия между питанием с высоким содержанием жиров (HF, 60% килокалорий жира) у контрольной и испытуемой групп не было. Испытуемая группа получала питание с высоким содержанием жиров в течение 4 недель, а затем ее переводили на пищу с высоким содержанием жиров, смешанную с испытуемыми соединениями, антоцианинами (1.0 г/кг), бетулиновой и урсоловой кислотами (по 0.5 г/кг каждой). Нормальная пища содержала 10% килокалорий.

[0050] На Фиг.5А, 5В и 5С изображены графики, показывающие изменение массы тела мышей группы C57BL/6J при исследовании ожирения в течение 12 недель питания. В течение всего эксперимента питание нормальной контрольной группы мышей и питание группы с высоким содержанием жиров в пище содержали 10% и 60% ккал соответственно. Антоцианины, бетулиновую и урсоловую кислоту отдельно смешивали при питании с высо