Новый лиганд рецептора цитокина zcytor17
Иллюстрации
Показать всеНастоящее изобретение относится к области биотехнологии. Предложен полипептид и соответствующий полинуклеотид zcytor17lig и молекулы антитела против zcytor17 человека. Zcytor17lig человека является новым цитокином. Настоящее изобретение относится также к способам получения белка, его применению для стимуляции иммунной реакции у млекопитающего. Описан способ получения антитела к указанному белку и соответствующие антитела. Указанные полипептиды можно использовать при осуществлении способов стимуляции иммунной системы, пролиферации и/или развития гемопоэтических клеток in vitro и in vivo. 14 н. и 3 з.п. ф-лы, 3 ил., 21 табл.
Реферат
Текст описания приведен в факсимильном виде.
1. Выделенный полипептид, содержащий последовательность аминокислотных остатков, выбранных из группы(a) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2 от остатка 38 (Val) до остатка 152 (Leu);(b) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2 от остатка 27 (Leu) до остатка 164 (Thr);(c) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2 от остатка 24 (Ser) до остатка 164 (Thr); и(d) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2 от остатка 1 (Met) до остатка 164 (Thr),причем указанный полипептид связывается с рецептором zcytor17 человека.
2. Выделенный полипептид по п.1, где аминокислотные остатки 72, 133 и 147 являются цистеином.
3. Выделенный полипептид по п.1, который связывается с рецептором zcytor17, показанным в SEQ ID NO:5 или SEQ ID NO:71.
4. Экспрессирующий вектор, содержащий следующие функционально связанные элементы:(а) промотор транскрипции;(b) сегмент ДНК, кодирующий полипептид, который связывается с рецептором zcytor17 человека, содержащий аминокислотные остатки с 38 (Val) по 152 (Leu) SEQ ID NO:2; и(c) терминатор транскрипции.
5. Культивируемая клетка, содержащая экспрессирующий вектор по п.4.
6. Способ получения полипептида, который включает в себякультивирование клетки по п.5 в условиях, обеспечивающих экспрессию сегмента ДНК, и выделение полипептида, кодируемого указанным сегментом ДНК.
7. Способ стимуляции иммунной реакции у млекопитающего, предусматривающий стадию введения композиции, содержащей полипептид zcytor17lig, охарактеризованный в п.1, в приемлемом фармацевтическом носителе.
8. Способ обнаружения РНК zcytor17lig человека в биологическом образце, который включает в себя стадии(a) контактирования зонда нуклеиновой кислоты zcytor17lig в условиях гибридизации либо (i) с молекулами испытуемой РНК, выделенными из биологического образца, либо (ii) с молекулами нуклеиновой кислоты, синтезированными из выделенных молекул РНК, при этом указанный зонд имеет нуклеотидную последовательность, содержащую часть нуклеотидной последовательности молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, который связывается с рецептором zcytor17 человека, содержащий аминокислотные остатки с 38 (Val) по 152 (Leu) SEQ ID NO:2, или ее комплемент; и(b) обнаружение образовавшихся гибридов зонда нуклеиновой кислоты и либо молекул испытуемой РНК, либо молекул синтезированной нуклеиновой кислоты;при этом наличие гибридов указывает на присутствие РНК zcytor17lig человека в биологическом образце.
9. Способ обнаружения воспаления у пациента, включающий в себяполучение у пациента тканевого или биологического образца;мечение полинуклеотида, содержащего по меньшей мере 14 смежных нуклеотидов последовательности SEQ ID NO:1 или комплемента последовательности SEQ ID NO:1, где полинуклеотид содержит полинуклеотид, выбранный из группы, состоящей из(a) полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1 от нуклеотида 139 до нуклеотида 483;(b) полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1 от нуклеотида 106 до нуклеотида 519;(c) полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1 от нуклеотида 97 до нуклеотида 519; и(d) полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1 от нуклеотида 28 до нуклеотида 519;инкубацию тканевого или биологического образца в условиях, обеспечивающих гибридизацию полинуклеотида с комплементарной полинуклеотидной последовательностью;визуализацию меченого полинуклеотида в тканевом или биологическом образце; исравнение уровня гибридизации меченого полинуклеотида в тканевом или биологическом образце, взятом у пациента, с нормальным контрольным тканевым или биологическим образцом;при этом увеличение гибридизации меченого полинуклеотида в тканевом или биологическом образце пациента по сравнению с нормальным контрольным тканевым или биологическим образцом указывает на наличие воспаления у пациента.
10. Выделенный полипептид, связывающийся с рецептором zcytor17 человека, с одной или несколькими аминокислотными заменами, аминоконцевым метиониновым остатком, линкерным пептидом или аффинной меткой, содержащий последовательность аминокислотных остатков, выбранных из группы(a) остатков от 38 (Val) до 152 (Leu) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2;(b) остатков от 27 (Leu) до 164 (Thr) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2;(c) остатков от 24 (Ser) до 164 (Thr) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2; и(d) остатков от 1 (Met) до 164 (Thr) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2.
11. Выделенный полипептид, который связывается с рецептором zcytor17 человека, состоящий из последовательности аминокислотных остатков, выбранных из группы, состоящей из(a) остатков от 38 (Val) до 152 (Leu) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2;(b) остатков от 27 (Leu) до 164 (Thr) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2;(c) остатков от 24 (Ser) до 164 (Thr) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2; и(d) остатков от 1 (Met) до 164 (Thr) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2.
12. Выделенная молекула полинуклеотида, кодирующая полипептид по любому из пп.1, 2, 3, 10 или 11.
13. Выделенная молекула полинуклеотида по п.12, в которой нуклеотиды выбраны из группы(a) нуклеотидов от 139 до 483 полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1;(b) нуклеотидов от 106 до 519 полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1;(c) нуклеотидов от 97 до 519 полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1; и(d) нуклеотидов от 28 до 519 полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1;
14. Способ получения антитела против полипептида zcytor17lig, который включает в себяинокуляцию животного адъювантом и полипептидом из группы(a) полипептида, состоящего из аминокислот 38-152 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2;(b) полипептида, состоящего из аминокислот 24-164 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2;(c) полипептида, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:2 от аминокислоты 27 до аминокислоты 164; ивыделение указанного антитела из организма животного.
15. Антитело, полученное способом по п.14, которое связывается с полипептидом zcytor17lig человека, состоящим из аминокислот 38-152 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2.
16. Антитело, полученное способом по п.14, которое связывается с полипептидом zcytor17lig человека, состоящим из аминокислот 24-164 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2.
17. Антитело, полученное способом по п.14, которое связывается с полипептидом zcytor17lig человека, состоящим из аминокислот 27-164 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2.Приоритет по пунктам:
19.12.2002 - 1(а), 1(с), 1(d), 2-12, 13(a), 13(b), 13(d), 14-17;
25.04.2002 - 1(b), 13(с).