Способ коррекции эндотелиальной дисфункции тадалафилом при l-name индуцированном дефиците оксида азота

Способ коррекции эндотелиальной дисфункции тадалафилом при l-name индуцированном дефиците оксида азота

Реферат

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии.

Наиболее близким к заявленному решению является способ коррекции эндотелиальной дисфункции с помощью силденафила, относящегося к селективным ингибиторам фосфодиэстеразы (ФДЭ5) недлительного действия, описанный G. Rossoni, В. Manfredi и соавт.в статье «Sildenafil reduces L-NAME-induced severe hypertension and worsening of myocardial ischaemia-reperfusion damage in the rat», British Journal of Pharmacology, 2007, V.150, P.567-576», который заключается в использовании силденафила для восстановлении вазорелаксирующей функции на фоне блокады эндотелиальной NO-синтазы.

Основным недостатком способа является то, что сиденафил является более короткодействующим препаратом, менее селективным и менее безопасным, чем препарат этой же группы тадалафил. Поэтому результаты коррекции эндотелиальной дисфункции при повреждении в системе L-аргининNO, которое связано в основном с недостаточностью эндотелиальной NO-синтазы, с помощью силденафила неудовлетворительны.

Техническим результатом изобретения является способ коррекции эндотелиальной дисфункции при L-NAME-индуцированном дефиците оксида азота, включающий использование тадалафила, относящегося к селективным ингибиторам ФДЭ5 с большей продолжительностью действия.

Технический результат достигается тем, что на фоне моделирования эндотелиальной дисфункции в эксперименте внутрибрюшинным введением лабораторному животному в течение 7 суток блокатора синтеза NO L-нитро-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг, проводится ее коррекция внутрижелудочным введением тадалафила в дозе 0,9 мг/кг однократно в сутки.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Опыты проводят на белых крысах самцах линии Wistar массой 250-300 г. N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут, одновременно внутрижелудочно вводится тадалафил в дозе 0,9 мг/кг/сут. На 8 день от начала эксперимента под наркозом (этаминал-натрия 50 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика и компьютерной программы "Bioshell". Функциональные пробы: эндотелийзависимая вазодилатация (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелийнезависимая вазодилатация (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропрусеида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг.

При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при р<0,05.

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ

Болюсное внутривенное введение АХ в течение 3-5 с приводило к резкому падению артериального давления достигающего пика у интактных животных для систолического давления (САД) 84,3±4,4, для диастолического давления (ДАД) - 38,7±2,8 и для среднего артериального давления (СрАД) 53,9±2,7 мм рт.ст., при этом в течение первых 2-3 с развивалась резкая брадикардия до 130-150 ударов в минуту. Восстановление АД происходило в среднем за 42,2±0,8 с после нормализации сердечного ритма. ЭНЗВ также характеризовалась снижением САД до 83,0±3,7, ДАД до 42,1±4,4 и СрАД до 55,7±3,5 мм рт.ст. с последующим полным восстановлением в среднем в течение 45,1±1,0 с. Блокада NO-синтазы с помощью длительного, ежедневного, в течение 7-суток внутрибрюшинного введения L-NAME (N-нитро-L-аргинин метиловый эфир в дозе 25 мг/кг) вызывало артериальную гипертензию (САД - 190,3±6,7, ДАД - 145,0±3,9, СрАД - 160,1±4,6 мм рт.ст.) и приводила к меньшему снижению показателей АД после введения АХ (САД до 110,6±5,2, ДАД до 82,8±6,6, СрАД до 92,1±6,1 мм рт.ст.) и НП (САД до 88,7±4,7, ДАД до 50,8±4,2 и СрАД до 63,4±4,1 мм рт.ст.) по сравнению с интактными животными.

Одновременное введение L-NAME и тадалафила (0,9 мг/кг внутрижелудочно) не приводило к снижению показателей исходных значений АД (САД - 208,7±10,2, ДАД - 155,0±9,6 мм рт.ст.) (таблица 1).

Таблица 1.
Динамика показателей АД и ЧСС при моделировании дефицита оксида азота и коррекции эндотелиальной дисфункции тадалафилом.
Группы животных	Функциональные пробы	САД, мм рт.ст.	ДАД, мм рт.ст.	ЧСС, уд. в мин.
Интактные	Исходные	137,7±3,7	101,9±4,3	420,0±9,0
ЭЗВ с АХ	84,3±4,5	38,7±2,8	416,0±14,0
ЭНЗВ с НП	83,0±3,7	42,1±4,4	415,0±10,0
Получавшие L-NAME (25 мг/кг)	Исходные	190,3±6,7*	145,0±3,9*	428,0±11
ЭЗВ с АХ	110,6±5,2*	82,8±6,6*	426,0±14,0
ЭНЗВ с НП	88,7±4,7	50,8±4,2	426,0±13,0
L-NAME (25 мг/кг)+тадалафил (0,9 мг/кг)	Исходные	208,7±10,2	155,±9,6	398,0±10,0**
ЭЗВ с АХ	99,8±6,5**	61,9±5,5**	373,0±7,7**
ЭНЗВ с НП	96,8±9,3	55,9±5,4	400,0±11,0
* - р<0,05 в сравнении с группой интактных, ** - р<0,05 в сравнении с группой L- NAME

Принципиальная разница в ЭЗВ и ЭНЗВ у интактных животных и животных с введением ингибитора NO-синтазы L-NAME закономерно привело нас к необходимости выведения специального показателя, характеризующего степень эндотелиальной дисфункции, являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение НП к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение АХ.

Мы рассчитывали это отношение у каждого животного интактной группы и крыс после моделирования блокады NO-синтазы и получили разницу данного показателя в 5 раз - соответственно 1,1 у интактных и 5,4 у животных, получавших L-NAME.

Таким образом, для дальнейшей оценки влияния АХ и НП при ЭЗВ и ЭНЗВ нами использовано это отношение как показатель коррекции эндотелиальной дисфункции. Так, в группе, где на фоне введения ингибитора N0-синтазы L-NAME вводился тадалафил, это отношение соответствовало значению 1,9±0,3 (таблица 2).

Таблица 2
Показатели, отражающие коррекцию эндотелиальной дисфункции на фоне введения L-NAME тадалафилом
Группы животных	Функциональные пробы	Прирост падениясосудистой реакции по СрАД (мм рт.ст.)	Время сосудистой реакции (с)	Площадь сосудистой реакции (усл. ед.)	Отношениеплощадей сосудистой реакции АХ кНП
Интактные	АХ	59,9±2,9	42,2±0,8	1268,0±74,8	1,1±0,1
НП	61,0±3,0	45,1±1,0	1375,3±93,7
L-NAME	АХ	68,0±4,1*	20,0±1,4*	695,3±87,6*	5,4±0,6*
НП	98,0±2,0*	67,4±1,4*	3322,7±116,7*
L-NAME +тадалафил (0,9 мг/кг)	АХ	97,7±6,8**	41,1±6,0**	1923,5±202,0**	1,9±0,3**
НП	104,0±7,8	66,6±5,5	3457,7±382,1
* - р<0,05 в сравнении с группой интактных, ** - р<0,05 в сравнении с группой L- NAME

Таким образом, полученные результаты позволяют констатировать коррекцию эндотелиальной дисфункции тадалафилом, возникающую при L-NAME-индуцированном дефиците оксида азота.

Способ коррекции эндотелиальной дисфункции, отличающийся тем, что в эксперименте белым крысам самцам линии Wistar с эндотелиальной дисфункцией, на фоне ее моделирования внутрибрюшинным введением ингибитора эндотелиальной синтазы N-нитро-L-аргинин метилового эфира в дозе 25 мг/кг ежедневно, в течение 7 сут, оценивая степень развития дисфункции по отношению показателей эндотелийнезависимой и эндотелийзависимой вазодилатации, внутрижелудочно вводят тадалафил 0,9 мг/кг ежедневно, в течение 7 сут.