Способ дифференциальной диагностики нарушений сперматогенеза

Способ дифференциальной диагностики нарушений сперматогенеза

Реферат

Предлагаемый способ относится к области медицины, а именно к урологии, и может быть использован в диагностике нарушений сперматогенеза при азооспермии.

При азооспермии принципиально важно выяснить, идет ли сперматогенез в яичках с образованием сперматозоидов или сперматогенеза нет. Ответ на этот вопрос определяет дальнейшую тактику ведения пациентов. Если в яичках идет сперматогенез с образованием сперматозоидов (чаще при экскреторной азооспермии), то пациент может иметь генетическое потомство с использованием единичных сперматозоидов по программе ЭКО/ИКСИ (эктракорпоральное оплодотворение методом интрацитоплазматической инъекции сперматозоида). При отсутствии сперматогенеза в яичках лечение таких пациентов бесперспективно и им показано ОСД (оплодотворение сперматозоидами донора).

Таким образом, пациентов с азооспермией принципиально делят на 2 группы:

1) первая группа - это пациенты, у которых сперматогенез проходит все стадии с образованием сперматозоидов;

2) вторая группа - это пациенты, у которых сперматогенез отсутствует.

Прототипом диагностики нарушений сперматогенеза при азооспермии является «Способ дифференциальной диагностики обструктивной и тестикулярной аспермии» (Авторское свидетельство SU 1725131 А1 от 29.06.1989), предложенный Л.П.Имшинецкой и И.Ф.Юндой, который основан на соотношении количественных величин фолликулостимулирующего гормона к тестостерону (ФСГ/Т), измеренных радиоиммунологическим методом. Недостатком раннее предложенного способа следует считать определение количественного уровня гормонов в различных единицах измерения, колебание этих уровней у исследуемых в течение суток, трудоемкость определения, обязательное наличие радиоизотопной лаборатории и дорогостоящих наборов для их определения.

Целью предлагаемого изобретения является использование предложенного способа дифференциальной диагностики нарушений сперматогенеза, а именно определение отсутствия или наличия образования сперматозоидов в яичках, как малотравматичного, экономичного и высокоточного.

Поставленная цель достигается ИК-спектроскопией сыворотки крови в области 1200-1000 см^-1, так как в этом диапазоне спектра наиболее достоверны различия для проведении дифференциальной диагностики нарушений сперматогенеза при азооспермии.

Предлагаемый способ осуществляется следующим образом: у больного утром натощак производят забор венозной крови, отделяют сыворотку методом центрифугирования, высушивают. Сухой остаток сыворотки растирают и суспензируют с вазелиновым маслом. Спектроскопический анализ полученного образца выполняют в области 1200-1000 см^-1. Затем производят определение отношения высот пиков полос поглощения при частотах, которые наиболее информативными для диагностики нарушений сперматогенеза при азооспермии оказались: 1170 см^-1, 1160 см^-1, 1150 см^-1, 1050 см^-1, 1040 см^-1.

Координатами x, y, z стали соотношения частот: для x - 1160/1150, y - 1050/1040, z - 1170/1150. Для проведения дифференциальной диагностики изучаемых заболеваний наилучшее разделение множества точек в пространстве было получено при повороте осей x, y, z на -9°, -28° и -10° соответственно.

Полученное трехмерное распределение точек этой группы проецируют во фронтальную плоскость для получения двумерных координат и соотносят с границами плоских эталонных диагностических многогранников (см. чертеж), соответствующих азооспермии, как с образованием сперматозоидов, так и с отсутствием образования сперматозоидов.

Границы многогранников имеют следующие значения (x; y): 0,4713 и 1,2185; 0,3639 и 1,1148; 0,3861 и 1,0556; 0,4602 и 1,0852 для азооспермии с отсутствием сперматогенеза; 0,4787 и 1,237; 0,4713 и 1,0815; 0,3528 и 1,0000; 0,6343 и 1,2407; 0,4046 и 0,9222 для азооспермии с наличием сперматогенеза.

На чертеже представлено изображение двух плоских многогранников, соответствующих азооспермии, где знаком [•] обозначены точки, соответствующие азооспермии с отсутствием сперматогенеза, и знаком [○] - для азооспермии с наличием сперматогенеза.

Дифференциальную диагностику азооспермии проводят в зависимости от расположения точки внутри диагностических эталонных плоских многогранников.

Математическую обработку полученных данных в предлагаемом способе производят с помощью авторской компьютерной программы. Данная программа позволяет однозначно идентифицировать положение точки, отражающей параметры крови больного, определять принадлежность к тому или иному виду заболевания, кроме этого, не требует больших временных затрат.

В результате осуществления предлагаемого изобретения врач получает объективные данные для постановки диагноза и назначения адекватного лечения.

Преимуществами способа являются точность диагностики, низкая себестоимость, использование стандартной аппаратуры, позволяющей проводить данное исследование на базе биохимических лабораторий медицинских стационаров, быстрое получение итогового результата. Для проведения исследования не требуется специальной подготовки.

Предлагаемым способом на базе Нижегородской областной больницы им.Н.А.Семашко было обследовано 12 больных экскреторной азооспермией (с наличием сперматогенеза и образованием сперматозоидов) и 9 больных секреторной азооспермией (с отсутствием сперматогенеза и образованием сперматозоидов). Диагнозы верифицированы на основании клинических и гистологических (биопсия) данных. Полученные результаты были верифицированы «слепым» методом, подтвержденным впоследствии клинически.

Предлагаемый способ может быть иллюстрирован примерами из клинической практики.

Пример 1

Больной Д., 32 года. Женат 8 лет в первом браке. Детей и беременностей у жены не было. В анамнезе эпидемический паротит и гонорея. В анализах спермы - азооспермия. Лечился в течение 8 лет в различных учреждениях без эффекта по поводу секреторной азооспермии (гонадотропины, вазопротекторы, витаминотерапия). Проведены исследования: ФСГ - 6.4 МЕД/л (норма 1,5-9), ЛГ - 6.8 МЕД/л (норма 1,5-9), тестостерон - 25 нмоль/л (норма 5-32). В анализе ИКС сыворотки крови выявлена азооспермия с наличием сперматогенеза. 6.05.05 выполнена биопсия яичек: гистологическое исследование №44880/4 - изменения в яичках симметричны, идет вялый сперматогенез с образованием сперматозоидов. Больной направлен в Центр планирования семьи и репродукции для проведения экстракорпорального оплодотворения с интрацитоплазматической инъекцией сперматозоида (ЭКО/ИКСИ).

Пример 2

Больной Р., 40 лет. В браке 1 год. Ранее беременности у жены не было. Анализ спермы - азооспермия. Проведено обследование: пролактин - 1,9 нг/мл, ЛГ - 2,4 МЕ/л (норма 1,5-9), ФСГ - 4,1 МЕ/л (норма 2-10). При биопсии яичек выявлено: гистология №46460/4 - тотальный склероз канальцев, нет сперматогенного эпителия. По ИКС сыворотки крови - азооспермия с наличием сперматогенеза и сперматозоидов. При микроскопическом исследовании придатков выявлены сперматозоиды. Больной направлен в Центр планирования семьи и репродукции для проведения экстракорпорального оплодотворения с интрацитоплазматической инъекцией сперматозоида (ЭКО/ИКСИ).

Пример 3

Больной С, 26 лет. Женат 3 года, беременностей у жены не было 3 года. При ревизии органов мошонки выявлена аплазия семявыносящих протоков хвоста и тела обоих придатков. При биопсии гистологически (84705/8) выявлен вялый сперматогенез в обоих яичках. При микроскопическом исследовании содержимого придатков выявлены живые сперматозоиды. По данным ИКС - азооспермия с наличием сперматогенеза. Больной направлен в Центр планирования семьи и репродукции для проведения экстракорпорального оплодотворения с интрацитоплазматической инъекцией сперматозоида (ЭКО/ИКСИ).

Приведенные примеры показывают, что предлагаемый способ диагностики может применяться в практике лечебных учреждений.

Способ дифференциальной диагностики нарушений сперматогенеза, включающий исследование крови инфракрасной спектроскопией и математическую обработку полученных данных, отличающийся тем, что исследуют высушенную сыворотку крови в виде суспензии в вазелиновом масле методом инфракрасной спектроскопии в области полос излучения 1200-1000 см^-1, при этом определяют высоты пиков полос поглощения с максимумами 1170 см^-1, 1160 см^-1, 1150 см^-1, 1050 см^-1, 1040 см^-1, затем вычисляют значение величин отношений высоты пика с максимумом для x - 1160/1150, для y - 1050/1040, для z - 1170/1150, полученное трехмерное распределение точек этой группы при повороте осей x, y и z соответственно на -9°, -28° и -10° проецируют во фронтальную плоскость для получения двухмерных координат (x; y), после чего дифференциальную диагностику азооспермии проводят в зависимости от расположения точки внутри диагностических эталонных плоских многогранников, границы которых составляют следующие значения (x; y): (0,4713; 1,2185) / (0,3639; 1,1148) / (0,3861; 1,0556) / (0,4602; 1,0852) для азооспермии с отсутствием сперматогенеза; (0,4787; 1,237) / (0,4713; 1,0815) / (0,3528; 1,0000) / (0,6343; 1,2407) / (0,4046; 0,9222) - для азооспермии с наличием сперматогенеза.