Способ выделения рибомононук-пеотидов

Способ выделения рибомононук-пеотидов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

%ОС>с с ю я н а н ттйтОнтнО-ток- Снуем

,>с JGA, с(,)т(> ну MF h

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕ ТЕ Н И Я

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Со>оз Советских

Социалис(ических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства ¹

Кл. 12р, 7/01

Заявлено 04.1.1968 (№ 1209048/23-4) с присосдинсииеч заявки . и (1П!(С 1!7 !

Приоритс)

Опмбликовг!г!(> 12.11.1989, Б>оллстсч!ь № 8

Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров

СССР

У,1К 547.903:32,07 (088.8) Дата опуоликоваиия оиисаш(я 30. (I,!969

Лв(оры изобретения В. Ж. Цыренов, В. Д. Аксельрод, Р. И. Татарская и М. А. Гайлу!>т

Заявитель

СПОСОБ ВЫДЕЛ EH ИЯ РИ БОМОНОН УКЛ ЕОТИДОВ

Изобретение относится к обляс!и выделения рибомононуклеотндов путем крочат;>графического разделения на иоиообмсииике, Известные способы xðo)13òîãð3ôiÿåcêîãо разделcíLiÿ рибомононуклеоTèäîâ )3зли 1аются выбором элюиру(ощи:(систем. !-lапример, известно ступенчатое разделение щелочцогo или ферментативного гидролизата РНК, сорбированного иа аниоиообменникс, эiloi«leI со.ч >1 и О Й к l I c,л От О Й.

Для одновременного разделения pl!00)ioiioиуклеотидов, обеспечения высокои !истоты и повышения iihIY0.13 целевого ироду сга llj)p;L— ложено применять в качсстьц элюир Iolll(и систсчы уксусную кислоту.

Фермснтативиый или щелочной i li,iðo II!33

РН К II BIIOCSIT и Я 3HIIOI3000)ICIIII I I I< в ЯцеТаlТиой форме. Хроматографическое разделение рибомононуклеотидов производят путем последовательного пропускания уксуспои кислоты нарастающей концентрации со скоростьк)

30 л1/ч иа 1 сл- поперечного сече;(ия коло»ки.

П р ii м е р 1. 5 .i щелочного гil„ ðîëíçàò3

РНК (рН 7 — 8,5), содержащего 10 !5 г гидролизоваиной PI II(при ионной силе раствора не выше 0,05 наносят на колонку (1: 10) с аниоиитом (200 — 400 леи() в аиетатиой форме со скоростью 110 !ьт/час на 1 сл- поперечного сечения колонки. Оптимальная нагрузка»а!

000 лл влажного аиионитя 25 35 г гидролизованиои Pl-! К.

3,3IoLLiIIo (2 ) 3 -pll00)IOIIOII (1(л(.Отидов llpol30g Я Т С Т П Е Н 3 Т О l(С C I О И К И С Л О Т 0 И С Л C Д У 10щilx коицснтрац:Ié 0 скоростью 30 зььча(НЯ

1 сл- иопсре шо>о ссчси!и колонки.

1 ст пень, Элюцию пити (IIH- (2 ):) -монофосфорно!1 кислоты проводят 1 í. СН;СООН.

II ступень. 31IoillIIO адеио3IIkl-2 -и ядеиозинХ-монофосфорны); кислот проводят 1,25 II.

С I;;COOI I.

I I I ступень, 3 Iloliiiio гм(111031111- (2 ) 3 -монофосфориой кисло гы проводят i),6 и (..11,(.0011.

1 > сгуи(иь..() 1101!Illo уpll lilll-(2 ) Х-моно(1>осфор>ои кислоты проводят 6,0 и. (.II (:0011.

Зл к>и рч(т(я ();) 98 >, „o(>11 fcго к >ли11(с П33 и i l(3(. О) ll 108> СOp() i I pOBÇIIII I>I. (и 3 1 0 IOII I() . OTдельные фраки:(и упаривают досу.;я в вакууме I!pl! температуре 30 — 40 С. Су.;ой остаток ря створ я !От в воде и снов я (п яр и 13 3 ю г досу. ((1.

Такую Обработку повторяют 3 — -l раза. Сукой остаток растворяют в минимальном козичсствс воды, нейтрализуют 0,2 и. Х3011 I!3!I KOII до рl l 7 7,2., 11юфилизиру>от получсниун)

2б натриевую )II калиевую соль соо!!)етству!Ощег0 31()HOIIX l(,ICOTII1,3. Содсржаии(OC110131101

1)сщсств(1 в готовом продукте 95 — 100", (>.

П р м с р 2. 4,5 .1 фсрмситатиг(ого гидролизатя, содержащего 10 — 15 г гидролизоваи30 I!011 PI II(наносят иа аниоиит в условия, 237155

COCT313ttiс,1h И. ГOJIOBHHKOBR

Редактор Л. Г. Герасимова Техред Л. Я. Левина Корректор Л. В. Юшина

Заказ 1301!7 TIIp2>K 480 Подписное

ЦНИИПИ Колппета по делам изооретснпй и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр. Сапунова, 2

3 аналогичных примеру 1. Элюци1о 5 -рибомoнонуклеотидов проводят ступенчато уксусной кислотой следующих концентрации.

I с т у п е ti ь. Ццтидин-5 -монофосфорную кислоту элюирует 0,8 п. СНаСООН, II с т у п е и ь. Лденозин-5 -монофосфорную кислоту элюирует 1,5 н. СНаСООН.

III с т у п е н ь. Гуанозин-5 -монофосфорную кислоту элюирует 4,4 н. СНзСООН.

IV ступ ен ь. Уридин-5 -монофосфорную кислоту элюирует 5 н. СН„СООН, Отдельные фракции упаривают и переводят в натриевые и другие соли (как в примере1).

Содержание основного вещества в готовом продукте 95 — 100в/в.

Предмет изобретения

Способ выделения рибомононуклеотидов путем ступенчатого хроматографического разделения щелочного или ферментативного гидролизата РНК на анионите в элюирующей системс, отличаюи ийся тем, ITo, с целью одновременного разделения рибомононуклеотидов, обеспечения высокой чистоты и повышения выхода целевого продукта, в качестве элюирующей системы используют уксусную кислоту.