Способ получения средства, обладающего противовоспалительной активностью

Способ получения средства, обладающего противовоспалительной активностью

Реферат

Изобретение относится к области фармации и касается способа получения средства из растительного сырья (условное название «Профем»), обладающего противовоспалительной активностью.

В настоящее время уделяется большое внимание изучению, разработке и внедрению в практику лекарственных препаратов для лечения и профилактики воспалительных заболеваний, поскольку воспалительные заболевания широко распространены, страдают ими лица различною возраста, нередко они сопровождаются тяжелыми клиническими проявлениями и являются причиной частичной или полной утраты трудоспособности больших контингентов населения.

Несмотря на то, что современный арсенал противовоспалительных лекарственных препаратов насчитывает значительное число, вопрос изыскания новых высокоэффективных противовоспалительных средств, не оказывающих побочного действия, остается весьма актуальным. Это связано с тем, что нет "идеальных" лекарств, не все препараты противовоспалительного действия отвечают высоким требованиям эффективности и безопасности. В качестве прототипа нами был выбран официальный препарат "Алантон" [3]. Однако фармакотерапевтическая эффективность его не обеспечивает желаемого результата.

Целью изобретения является повышение противовоспалительной активности средства за счет более высокого содержания действующих веществ (сумма флавоноидов).

Для достижения указанной цели растительный материал (сырье): надземную часть панцерины шерстистой (50%), побеги курильского чая кустарникового (25%), корни сабельника болотного (25%) экстрагируют 50-60% этиловым спиртом в соотношении сырье - экстрагент, равном 1:(14-16) (с учетом коэффициента водопоглощения), при температуре 55-65°С и постоянном перемешивании. Процесс повторяют трижды. Время экстракции при 1-м и 2-м контактах фаз - 60 мин, при 3-м контакте фаз - 30 мин. Извлечения фильтруют через серошинельное сукно, объединяют, упаривают до 1/3 первоначального объема и очищают сепарированием. Очищенный экстракт доупаривают до 1/5 первоначального объема, высушивают в вакуумной сушилке и измельчают на мельнице пропеллерного типа. Выход готового продукта составляет 27.0±0.5% от массы растительного сырья.

Предложенный способ позволяет получить конечный продукт, представляющий собой мелкодисперсный порошок коричневого цвета с приятным запахом и горьковатым вяжущим вкусом, с содержанием влаги не более 5%.

Способ иллюстрируется нижеследующими примерами:

Пример 1

500 г Надземной части панцерины шерстистой измельчают на мельнице до размера частиц диаметром 1 мм (сито №10 ГОСТ 214-83), 250 г побегов курильского чая кустарникового и 250 г корней сабельника болотного измельчают до размера частиц диаметром 5 мм (сито №50 ГОСТ 214-83). Измельченное сырье загружают в экстракционный аппарат с мешалкой и внешним паровым обогревом. Заливают 14 л 50% этилового спирт к соотношении сырье - экстрагент, равном 1:14, с учетом коэффициента водопоглощения сырья. Экстрагируют при температуре 60°С и постоянном перемешивании в течение 60 мин. Извлечение фильтруют через серошинельное сукно в сборник. Проводят еще две экстракции в течение 60 и 30 мин, подавая каждый раз в экстрактор 50% спирт в количестве, равном объему слитого извлечения (1-й слив - 10.85 л, 2-й слив - 11.05 л, 3-й слив - 9.87 л.). Объединенные извлечения упаривают до 1/3 первоначального объема и очищают сепарированием. Очищенный экстракт доупаривают до 1/5 первоначального объема, высушивают в вакуумной сушилке при температуре 60°С в течение 8 ч и измельчают на мельнице пропеллерною типа. Получают 270.3 г готового продукта, что составляет 27.3% от веса исходного сырья. Сухой экстракт представляет собой мелкодисперсный порошок коричневого цвета с приятным запахом и горьковатым вяжущим вкусом, комкуется, содержание влаги - 4.05%.

Острая токсичность сухого экстракта определялась на белых беспородных мышах-самцах с исходной массой 20.0±1.0 г. при внутрибрюшинном и внутрижелудочном введениях растворенного в воде экстракта. Каждую дозу экстракта испытывали на 10 животных. Наблюдение за животными вели в течение 14 дней. Регистрировали наблюдаемые признаки интоксикации, проводили вскрытие и осмотр погибших животных. Результаты исследований показали, что при внутрибрюшинном введении больших доз сухого экстракта «Профем» белым мышам наблюдаются признаки интоксикации, выражающиеся в замедлении ориентировочной реакции, резких движениях, появлении тонических, а затем тонико-клонических судорог. Животные погибали при явлениях остановки дыхания преимущественно в течение первых суток с начала введения экстракта. LD50 по Керберу при внутрибрюшинном введении полиэкстракта «профем» 4545.0±390.0 мг/кг. При внутрижелудочном введении данного средства в максимально возможной дозе гибели животных не наступало и не наблюдали явных признаков интоксикации. Эти данные позволяют отнести испытуемый полиэкстракт к группе малотоксичных веществ по классификации Сидорова [6].

В дальнейшем было исследовано влияние сухого полиэкстракта «Профем» на основные фазы воспалительного процесса.

Влияние сухого полиэкстракта «Профем» на альтернативную стадию воспаления

Исследования проведены на 55 белых крысах линии Вистар обоего пола с исходной массой 160-180 г, содержащихся на стандартном рационе вивария.

Деструкцию ткани в области спинки крыс вызывали подкожным введением 0,5 мл 9% уксусной кислоты с одновременным внутрибрюшинным введением 0,4 мл раствора декстрана в дозе 300 мг/кг [5].

Планиметрию зоны деструкции ткани проводили на 7, 14 и 21 сутки от начала эксперимента. Одним опытным группам подопытных животных водный раствор полиэкстракта вводили внутрижелудочно в дозах 100, 200, 300 мг/кг по 1 мл/100 г один раз в сутки в течение 21 дня. В качестве препарата сравнения использовали алантон в дозе 40 мг/кг. Лабораторным животным контрольной группы по той же схеме к эквивалентном объеме вводили внутрижелудочно дистиллированную воду.

Полученные результаты представлены в таблице 1. Таким образом, все испытуемые средства в той или иной степени оказывают стимулирующее влияние на восстановительные процессы в очаге воспаления. Сухой полиэкстракт в дозе 200 мг/кг уменьшает площадь деструкции ткани на 7 сутки на 12,3% и 11,6%, на 14 сутки - на 26,0% и 24.6% и на 21 сутки - на 38,3% и 36,2% соответственно по сравнению с контролем. Фитоэкстракт в дозах 100 и 300 мг/кг уменьшает площадь деструкции ткани. По эффективности указанный фитоэкстракт не уступает препарату сравнения алантону, у которого уменьшение площади деструкции ткани по сравнению с контролем составляет 13,6% на 7 сутки, 28,9% на 14 сутки и 41% на 21 сутки опыта.

Таблица 1
Влияние отвара, сухого полиэкстракта «профем» на альтеративную фазу воспалительной реакции у белых крыс
Группы животных	Доза	Средняя площадь деструкции ткани, см
7 сутки	14 сутки	21 сутки
Контрольная (n=5)		3,9±0,10	2,8±0,20	1,9±0,20
Полиэкстракт (n=5)	100 мг/кг	3,5±0,07*	2,1±0,09*	1,2±0,10*
Полиэкстракт (n=5)	200 мг/кг	3,4±0,10*	2,1±0,15*	1,1±0,16*
Полиэкстракт (n=5)	300 мг/кг	3,4±0,09*	2,1±0,10*	1,2±0,10*
Алантон (n=5)	40 мг/кг	3,4±0,30	2,0±0,25*	1,1±0,13*
Примечание: * здесь и далее различия достоверны по сравнению с данными животных контрольной группы при Р≤0,05; n - количество крыс в группе.

Пример 2

500 г Надземной части панцерины шерстистой измельчают на мельнице до размера частиц диаметром 1 мм (сито №10 ГОСТ 214-83), 250 г побегов курильского чая кустарникового и 250 г корней сабельника болотного измельчают до размера частиц диаметром 5 мм (сито №50 ГОСТ 214-83). Измельченное сырье загружают в экстракционный аппарат с мешалкой и внешним паровым обогревом. Заливают 14 л 60% этиловою спирта в соотношении сырье - экстрагент, равном 1:15, с учетом коэффициента водопоглощения сырья. Экстрагируют при температуре 60°С и постоянном перемешивании в течение 60 мин. Извлечение фильтруют через серошинельное сукно в сборник. Проводят еще две экстракции в течение 60 и 30 мин, подавая каждый раз в экстрактор 60% спирт в количестве, равном объему слитого извлечения (1-й слив - 10.95 л, 2-й слив - 11.35 л, 3-й слив - 9.95 л). Объединенные извлечения упаривают до 1/3 первоначального объема и очищают сепарированием. Очищенный экстракт доупаривают до 1/5 первоначального объема, высушивают в вакуумной сушилке при температуре 60°С в течение 8 ч и измельчают на мельнице пропеллерного типа. Получают 27.1 г готового продукта, что составляет 27.1% от веса исходного сырья. Сухой экстракт представляет собой мелкодисперсный порошок коричневого цвета с приятным запахом и горьковатым вяжущим вкусом, комкуется, содержание влаги - 4.12%.

Влияние отвара, сухого полиэкстракта «Профем» на экссудативную стадию воспаления

Опыты проведены на 62 белых крысах линии Вистар обоего пола с исходной массой 160-180 г, у которых воспроизводили острое асептическое воспаление путем субплантарного введения в правую заднюю лапку 0,1 мл 2% раствора формалина [4].

Опытным группам животных испытуемые средства вводили внутрижелудочно в тех же дозах, как и в предыдущем эксперименте, за 2 ч до начала введения формалина, а затем через 5 и 18 ч после него. В качестве препарата сравнения использовали алантон в дозе 40 мг/кг по аналогичной схеме. Животным контрольной группы вводили впутрижелудочно дистиллированную воду по соответствующей схеме [7].

Оценку антиэкссудативного действия фитосредств осуществляли онкометрическим методом через 24 ч после введения формалина. Результаты исследований представлены в таблице 2.

Из данных, приведенных в таблице 2, видно, что курсовое введение сухого полиэкстракта «Профем» в указанных дозах при развитии воспалительного процесса, вызванного введением формалина, оказывает выраженное антиэкссудативное действие, способствуя снижению отека лапок у животных. Наиболее выраженное антиэкссудативное действие фитоэкстракт оказывает в дозе 200 мг/кг, угнетая развитие отека лапок на 35,3% по сравнению с данными у животных контрольной группы. Кроме того, фитоэкстракт по антиэкссудативной активности в указанной дозе немного превосходит препарат сравнения алантон. У животных, получавших сухой полиэстракт в дозах 100 мг/кг и 300 мг/кг массы крысы, угнетение развития отека лапок составляло соответственно 27,1% и 29,5%.

Таблица 2
Влияние отвара, сухого полиэкстракта «профем» на экссудативную фазу воспалительной реакции у белых крыс
Группы животных	Доза	Разность объема лапок с отеком и без отека (мм3)	% угнетения отека
Контрольная (n=6)	-	8,5±0,3	0,0
Полиэкстракт (n=6)	100 мг/кг	6,2±0,2*	27,1
Полиэкстракт (n=6)	200 мг/кг	5,5±0,5**	35,3
Полиэкстракт (n=6)	300 мг/кг	6,0±0,3*	29,5
Алантон (n=6)	1 мл/100 г	5,7±0,2*	32,9

Таким образом, на основании проведенных исследований можно заключить, что самой эффективной терапевтической дозой водного полиэкстракта «Профем», оказывающей выраженное влияние на альтеративную и на экссудативную фазы воспаления, является доза 200 мг/кг.

Пример 3

500 г Надземной части панцерины шерстистой измельчают на мельнице до размера частиц диаметром 1 мм (сито №10 ГОСТ 214-83), 250 г побегов курильского чая кустарникового и 250 г корней сабельника болотного измельчают до размера частиц диаметром 5 мм (сито №50 ГОСТ 214-83). Измельченное сырье загружают в экстракционный аппарат с мешалкой и внешним паровым обогревом. Заливают 16 л 65% этилового спирта в соотношении сырье - экстрагент, равном 1:16, с учетом коэффициента водопоглощения сырья. Экстрагируют при температуре 60°С и постоянном перемешивании в течение 60 мин. Извлечение фильтруют через серошинельное сукно в сборник. Проводят еще две экстракции в течение 60 и 30 мин, подавая каждый раз в экстрактор 65% спирт в количестве, равном объему слитого извлечения (1-й слив - 11.85 л, 2-й слив - 11.65 л, 3-й слив - 10.00 л.). Объединенные извлечения упаривают до 1/3 первоначального объема и очищают сепарированием. Очищенный экстракт доупаривают до 1/5 первоначального объема, высушивают в вакуумной сушилке при температуре 60°С в течение 8 ч и измельчают на мельнице пропеллерною типа. Получают 26.6. г готового продукта, что составляет 26.6% от веса исходного сырья. Сухой экстракт представляет собой мелкодисперсный порошок коричневого цвета с приятным запахом и горьковатым вяжущим вкусом, комкуется, содержание влаги - 4.05%.

Влияние сухого полиэкстракта «Профем» на пролиферативную стадию воспаления.

Исследования проведены на 48 белых крысах линии Вистар обоего пола с исходной массой 180-200 г, путем подкожной имплантации в oбласть спинки стерильных ватных шариков массой 15 мг в асептических условиях по методу Ф.И.Тринуса [8].

Исследуемые средства вводили в таких же дозах, как и в предыдущих опытах, внутрижелудочно, один раз в сутки в течение 7 дней. На 8 сутки животных эвтаназировали методом декапитации и осторожно извлекали ватные шарики с гранулемами и сразу же взвешивали их в сыром виде и после высушивания их при температуре 60°С в течение 24 ч (до постоянной массы). О влиянии исследуемых средств на процессы пролиферации судили по разности масс гранулем у крыс опытной и контрольной групп, таблица 3.

Таблица 3
Влияние сухого полиэкстракта «профем» на пролиферативную фазу воспалительной реакции у белых крыс
Группы животных	Доза	Масса влажных ватных шариков с гранулемами, мг	Масса cухих ватных шариков с гранулемами, мг
Контрольная (n=6)	-	115,5±4,58	29,0±0,65
Полиэкстракт (n=6)	200 мг/кг	104,3±2,55	32,3±1,08*
Алантон (n=6)	40 мг/кг	96,0±4,48	32,5±1,02*

Из данных, приведенных в таблице 3, видно, что все исследуемые средства не оказывают существенного влияния на пролиферативиую стадию воспаления. Сухой полиэкстракт «Профем» стимулирует образование фиброзно-грануляционной ткани на 11,21%, а препарат сравнения алантон - на 12,07%. Из данных, приведенных в таблице 3, видно, что все исследуемые средства не оказывают существенного влияния на пролиферативную стадию воспаления. Сухой полиэкстракт стимулирует образование фиброзно-грануляционной ткани на 11,21%, а препарат сравнения алантон - на 12,07%.

В целом на основании проведенных исследований можно заключить, что курсовое введение водного раствора полиэкстракта «Профем» в указанной дозе оказывает выраженное противовоспалительное действие, снижая выраженность процессов альтерации на 38,3% и экссудации на 35,3%. По активности он практически не уступает действию препаpaтa сравнения - алантону, который снижает выраженность воспалительных реакций этих же фаз воспаления соответственно на 41,0% и 32,9%.

На основании качественного фитохимического анализа в полученном сухом экстракте установлено наличие:

1. Дубильных веществ

0.05 г экстракта растворяют в 5 мл воды дистиллированной. К 2 мл полученною раствора прибавляют 2-3 капли раствора железо-аммониевых квасцов, появляется черно-зеленое окрашивание (дубильные вещества).

2. Фенолкарбоновых кислот

Двумерной восходящей хроматографией на бумаге марки FN-12 в системах растворителей:

А. н-Бутанол - уксусная кислота - вода (4:1:2);

Б. 15% уксусная кислота;

При просмотре хроматограммы в УФ-свете, после обработки парами аммиака идентифицированы со стандартными образцами:

кофейная кислота - R_f=0.80(A), 0.42(Б);

хлорогеновая кислота - R_f=0.67(A), 0.70(Б).

3. Иридоидов.

Одномерной восходящей хроматографией на пластинке "Силуфол УФ-254", в системе растворителей этилацетат - изопропанол - вода (65:12:5,5). При просматривании хроматограммы в УФ-свете при длине волны 254 нм идентифицирован со стандартным образцом гарпагида, R_f=0.4.

4. Флавоноидов

1.1. 0.1 г экстракта растворяют в 50 мл 50% этилового спирта. К 5 мл полученного раствора прибавляют 3 мл 2% спиртового раствора алюминия хлорида, появляется желто-зеленое окрашивание (флавоноиды).

1.2. Двумерной восходящей хроматографией на бумаге марки FN-12 к системах растворителей:

А. 15% раствор уксусной кислоты;

В. н-Бутанол - уксусная кислота - вода (40:12:28).

При просмотре хроматограммы в УФ-свете до и после проявления 5% спиртовым раствором алюминия хлорида обнаружены девять веществ флавоноидной природы с Rf₁ 0.03 (А) и 0.87(Б); Rf₂ 0.05 и 0.92; Rf₃ 0.04 и 0.73: Rf₄ 0.27 и 0.84; Rf₅ 0.33 и 0.62; Rf₆ 0.40 и 0.38; Rf₇ 0.52 и 0.16; Rf₈ 0.50 и 0.52; Rf₉ 0.59 и 0.54. Доказано наличие рутина, кверцетина, изорамнетина, кемпферола и их гликозидов. Идентификацию проводили со стандартными образцами.

2. Количественное определение

Около 0.05 г (точная навеска) экстракта растворяют в мерной колбе вместимостью 25 мл в 10 мл теплой воды (40-60°С), прибавляют 5.2 мл 96% спирта, доводят объем раствора до метки водой (раствор А). 3 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 2 мл 2% раствора алюминия хлорида в 96% спирте, доводят объем раствора 20% спиртом до метки. Через 40 мин измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 405 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 3 мл раствора А, 1 капли разведенной уксусной кислоты и доведенный 20% спиртом до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл. Параллельно измеряют оптическую плотность государственного стандартного образца (ГСО) цинарозида. 1 мл приготовленного раствора ГСО цинарозида помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1 мл 2% раствора алюминия хлорида в 95% спирте и доводят объем раствора 20% спиртом до метки. Раствором сравнения является раствор, состоящий из 1 мл ГСО цинарозида, 1 капли разведенной уксусной кислоты и доведенным 20% спиртом до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид абсолютно сухой экстракт в процентах (X) рассчитывают по формуле:

где D - оптическая плотность испытуемого раствора;

D_о - оптическая плотность раствора ГСО цинарозида;

m - масса экстракта в граммах;

m_o - масса ГСО цинарозида в граммах;

W - потеря в массе при высушивании экстракта в процентах.

Примечание. Приготовление раствора ГСО цинарозида: около 0.05 г (точная навеска) ГСО цинарозида, предварительно высушенного при температуре 130-135°С в течение 3 ч, растворяют в 85 мл 95% спирта в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждают, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивают.

Найдено: 10.72±0.18%.

Предложенный способ получения достаточно прост, не требует сложной схемы очистки, позволяет получать продукт постоянного состава. Технология может быть внедрена на предприятиях, выпускающих лекарственные препараты.

Для выявления оптимальных технологических режимов нами были изучены основные факторы, влияющие на процесс экстрагирования растительного сырья: природа экстрагента, его соотношение с сырьем, температурный режим, степень измельчения сырья, продолжительность и количество экстракций.

Таблица 4
Метрологические характеристики определения экстрактивных веществ и суммы флавоноидов
	f		S	P	t
Содержание экстрактивных веществ	9	27.9	0.9447	95	2.26	0.6752	2.42
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид	9	4.31	0.0783	95	2.26	0.0559	4.27

Количественная оценка проводилась по выходу экстрактивных веществ [1, 2] и суммы флавоноидов. Метрологические характеристики представлены в таблице 4.

В качестве экстрагентов были использованы вода и этиловый спирт различных концентраций (20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 96%).

Как видно из таблицы 5, 50-55% спирт является оптимальным экстрагентом, так как позволяет добиться максимального выхода суммы флавоноидов с учетом выхода экстрактивных веществ.

Выявление оптимальной степени измельчения сырья проводили отдельно для каждого вида сырья. Количественную оценку проводили по выходу экстрактивных веществ. На основании полученных данных (таблица 6) и с учетом того, что слишком мелкое измельчение растительного материала ведет к загрязнению извлечения труднофильтруемыми высокомолекулярными соединениями, измельчение каждого вида сырья следует проводить отдельно до размера частиц: для корней сабельника болотного и побегов курильского чая кустарниково - не более 3 мм, для надземных частей панцерии шерстистой - не более 5 мм.

Таблица 5
Выход экстрактивных веществ и суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид-стандарт в зависимости от типа и концентрации экстрагента
Экстрагент	Выход экстрактивных веществ, %	Выход суммы флавоноидов, %
Вода	17.23	0.74
Спирт этиловый: 20%	18.71	0.75
30%	19.33	1.77
40%	20.92	2.80
50%	21.46	3.08
60%	23.48	3.07
70%	22.63	2.91
80%	19.30	2.57
90%	17.02	1.85
96%	16.29	1.83

Таблица 6
Выход флавоноидов и экстрактивных веществ в зависимости от pазмера частиц сырья
Наименование сырья	Диаметр частиц, мм	Выход экстрактивных веществ, %	Выход флавоноидов, %
1. Панцерина шерстистая (надземная часть)	0.5	17.8	1.25
1.0	17.0	1.12
3.0	15.6	0.87
5.0	12.3	0.63
7.0	10.8	0.52
10.0	8.90	0.46
2. Курильский чай (побеги)	0.5	17.6	2,12
1.0	17.8	2.07
3.0	17.4	2.05
5.0	17.3	2.03
7.0	16.5	1.08
10.0	12.8	1.05
3. Сабельник болотный (корни)	0.5	16.02	1.15
1.0	15.87	1.03
3.0	15.65	0.95
5.0	15.54	0.91
7.0	15.41	0.83
10.0	15.37	0.75

В связи с тем, что в исходном растительном сырье содержатся термолабильные вещества (витамины, иридоиды), изучение влияния температуры на процесс экстракции проводили в интервале температур oт 20 до 60°С. Данные представлены в таблице 7, оптимальная температура 60+5°C.

Таблица 7
Выход экстрактивных веществ и суммы флавоноидов в зависимости от температуры экстракции
Температура экстракции, °С	Выход экстрактивных веществ, %	Выход суммы флавоноидов, %
20	16.52	1.87
30	18.04	2.96
40	21.63	4.03
50	25.41	4.14
60	28.27	4.18

При изучении влияния соотношения сырье - экстрагент на процесс экстракции установлено (таблица 8), что с увеличением количества экстрагента возрастает выход экстрактивных веществ и суммы флавоноидов, но рост этот для соотношений 1:16 и выше незначителен, поэтому для предотвращения дополнительного расхода экстрагента выбрано соотношение, равное 1:(14-16) (с учетом коэффициента водопоглощения).

Таблица 8
Выход экстрактивных веществ и суммы флавоноидов в зависимости от соотношения сырье: экстрагент
Соотношение сырье:экстрагент	Выход экстрактивных веществ, %	Выход суммы флавоноидов, %
1:8	не смачивается
10	22.23	2.12
12	25.86	3.19
14	26.11	4.21
16	27.15	4.21
18	27.32	4 22
1:20	27.51	4.23
1:25	27.62	4.25

Для определения продолжительности и необходимого количества экстракций установлено время достижения равновесных концентраций экстрактивных веществ и флавоноидов в системе сырье - экстрагент в ходе трехкратной экстракции. Для этого проводили экстракцию измельченного сырья 40% этиловым спиртом в соотношении 1:14 на водяной бане при температуре 60°С и постоянном перемешивании в колбе с обратным холодильником. Извлечения, полученные через определенные промежутки времени (15, 30, 45, 60, 75, 90 мин) в процессе трех экстракций, анализировали на содержание экстрактивных веществ и флавоноидов. Установлено, что равновесные концентрации устанавливаются при 1-м и 2-м контактах фаз через 60 мин, при 3-м контакте фаз через 30 мин (таблица 9). Трехкратная экстракция обеспечивает достаточно полное истощение сырья - извлекается до 96% действующих веществ.

Таблица 9
Выход экстрактивных веществ и суммы флавоноидов в зависимости от времени экстрагирования
Время, мин	Выход экстрактивных веществ, %	Выход суммы флавоноидов %
	контакт фаз
	I	II	III	I	II	III
15	16.43	5.27	3.03	0.47	0.19	0.11
30	19.32	7.80	3.65	0.62	0.27	0.1 2
45	21.08	7.56	3.58	0.56	0.25	0.12
60	25.82	9.74	3.76	0.82	0.32	0.11
75	26.05	9.67	3.52	0.83	0.31	0.12
90	25.78	9.75	3.64	082	0.31	0.12

Предлагаемый способ по сравнению с известным позволяет получить препарат постоянного состава с более высокой гепатозащитной активностью за счет более высокого содержания действующих веществ (флавоноидов).

Посчитать экономическую эффективность предлагаемого способа в настоящее время не представляется возможным, однако вышеуказанные преимущества в сочетании с простой схемой получения способствуют рациональному использованию лекарственного растительного сырья и открывают перспективу внедрения данного способа в фармацевтическую промышленность.

Источники информации

1. Государственная Фармакопея СССР. Вып.1. Общие методы анализа /МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1987. - 336 с.

2. Государственная Фармакопея СССР: Вып.2. Общие методы анализа Лекарственное растительное сырье /МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1989. - 400 с.

3. Машковский М.Д. Лекарственные средства: В 2-х томах. Т.1. - 11-е изд. Стер. - М.: Медицина, 1988. - 624 с. прототип.

4. Монцевичюте-Эрингене Е.В. Упрощенные математико-статические методы в медицинской исследовательской работе // Патол. физиол. и экспер. Терапия

5. Ойвин И.А., Шетель С.Л. Методика изучения местных нарушений капиллярной проницаемости // Материалы по патогенезу воспаления и патологии белков крови. - Душанбе. 1961. - №5. - С.167-173/.

6. Сидоров К.К. О классификации токсичности ядов при парентеральных способах ведения // Токсикология новых промышленных химических веществ. - М. - 1973. - Вып.13. - С.47-51.

7. Стрельников Ю.Е. Сравнительная характеристика противовоспалительного действия некоторых пиримидиновых производных // Фармакол. и токсикол. - 1960. - №6. - С.526-531.

8. Тринус Ф.П., Мохорт Н.А., Клебанов Б.М. Нестероидные противовоспалительные средства. - Киев. - 1975. - 56 с.

Способ получения средства, обладающего противовоспалительной активностью путем экстрагирования растительного материала, отличающийся тем, что в качестве растительного материала используют сбор лекарственных растений, состоящий из надземной части панцерины шерстистой - 50%; побегов курильского чая кустарникового - 25%; корней сабельника болотного - 25%, который экстрагируют 50-60% этиловым спиртом в соотношении растительный материал-экстрагент, равном 1:(14-16), два раза по 60 мин, а третий раз - 30 мин при температуре 55-65°С.