Механоактивированные аморфные и аморфно-кристаллические кальциевые соли глюконовой кислоты, композиции, способы получения, фармацевтические препараты и способ лечения на их основе

Механоактивированные аморфные и аморфно-кристаллические кальциевые соли глюконовой кислоты, композиции, способы получения, фармацевтические препараты и способ лечения на их основе

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Изобретение относится к способу получения из кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, имеющей торговое фармацевтическое название кальция глюконат, механоактивированных аморфных и аморфно-кристаллических форм кальциевой соли глюконовой кислоты, смесей на их основе, фармацевтических препаратов.

Они могут быть использованы в медицинской промышленности для получения биологически активных веществ, лечебно-профилактических средств и лекарственных препаратов, для лечения тяжелых костных, стоматологических и других заболеваний, связанных с нарушением кальциевого обмена в организме, а также в качестве добавок в лечебно-профилактические и гигиенические средства.

Изобретение может использоваться в различных отраслях пищевой промышленности и в сельском хозяйстве, в частности животноводстве и ветеринарии.

Способов получения терапевтически эффективных и устойчивых композиций с аморфными формами кальция глюконата в литературе не описано.

Твердое кристаллическое вещество с химическим названием кальциевая соль глюконовой кислоты, имеющее торговое фармацевтическое название кальция глюконат, известно как средство фармакологической группы, содержащее макро- и микроэлементы.

Кальция глюконат относится к фармакологической группе веществ, которые, наряду с витаминами и другими биологически активными веществами, являются обязательными элементами, обеспечивающими нормальное течение процессов жизнедеятельности организма человека. Кальций играет многогранную роль в жизнедеятельности организма: участвует в передаче нервных импульсов, в поддержании тонуса скелетной и гладкой мускулатуры, в функционировании миокарда, в процессах свертывания крови и других физиологических процессах, в образовании и сохранении целостности костной ткани. Различные патологические процессы, в том числе тетания, дисфункция скелетной и гладкой мускулатуры, сердечно-сосудистой системы, нарушение свертывания крови, остеопороз, многие тяжелые стоматологические заболевания являются проявлениями недостатка кальция в организме. В связи с этим кальция глюконат применяется в разных областях медицины.

Однако известный кальция глюконат и лекарственные композиции, содержащие активное вещество кальция глюконат, как и все другие известные в настоящее время препараты кальция, обладают недостаточной терапевтической эффективностью для проведения эффективного консервативного лечения заболеваний, обусловленных нарушением обмена кальция в организме, в частности остеопороза и других тяжелых костных и стоматологических заболеваний. В частности, остеопороз, в том числе и в силу малой эффективности имеющихся в арсенале медицины препаратов кальция, признается в настоящее время глобальной и напрямую связанной с продолжительностью жизни проблемой здравоохранения. Задача разработки терапевтически более эффективных форм препаратов кальция и способов их получения является актуальной и имеет глобальное социальное и экономическое значение.

Известны аморфные соединения кальция (аморфный фосфат, фосфатфторид, карбонатфосфат, карбонатфосфатфторид кальция), полученные химическим путем, и способ обработки зубов с использованием аморфных соединений путем нанесения на зубную ткань или внутрь нее [1]. Недостаток способа в том, что нанесение аморфных соединений кальция на зубную ткань не решает проблему нормализации кальциевого обмена организма в целом, направлен лишь на лечение дефектов зубов, а не устранение причин, их вызывающих.

Известен способ лечения гипокальциемий, остеопорозов, переломов [2] с использованием аморфизированных методом механоактивации препаратов кальция. Однако заявленные области применения изобретения не охватывают всего спектра заболеваний, в частности стоматологических, поэтому способ также не решает всех проблем, связанных с нарушением обмена кальция в организме.

Известен рентгеноаморфный нанодисперсный порошок, полученный методом механоактивации официнального, содержащего стандартные эксципиенты, лекарственного препарата - таблетированного кальция глюконата [3]. Однако заявленное рентгеноаморфное состояние является по сути состоянием вещества с неустановленной структурой, для характеристики которого необходимы физико-химические и иные характеристики, позволяющие его идентифицировать.

Задачей данного изобретения является получение механоактивированных аморфных и аморфно-кристаллических соединений и композиций кальциевой соли глюконовой кислоты, создание на их основе терапевтически эффективных фармацевтических препаратов для обеспечения нормального течения процессов жизнедеятельности организма человека и лечения широкого спектра заболеваний, обусловленных нарушением обмена кальция в организме, в том числе тяжелых заболеваний пародонта, расширение арсенала фармацевтических препаратов и создание на их основе биологически активных добавок в пищевые продукты, лечебно-профилактических и гигиенических средств.

Технический результат достигается в заявляемом изобретении путем получения механоактивированной аморфной кальциевой соли глюконовой кислоты при обработке кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты в энергонапряженных измельчительных активаторных устройствах в течение времени, необходимого для подвода удельной энергии не менее 10,5 кДж/г.

Преимущество данной механоактивированной аморфной соли глюконовой кислоты заключается в том, что она получена впервые, впервые определены позволяющие ее идентифицировать физико-химические характеристики и она, в отличие от [3], не содержит эксципиентов, что в случае применения соли для лечения больных с ослабленным иммунитетом или т.п., или в комплексном лечении особо сложных заболеваний (например, хронической почечной недостаточности и гемодиализе) является жизненно важным с точки зрения отсутствия или уменьшения побочных эффектов.

Кроме того, технический результат достигается в заявляемом изобретении также путем получения композиции механоактивированной аморфной кальциевой соли глюконовой кислоты с фармацевтически приемлемыми эксципиентами в следующем соотношении ингредиентов, мас.%:

механоактивированная аморфная кальциевая соль
глюконовой кислоты	94÷97
тальк	2÷1
крахмал	2÷1
стеарат кальция	2÷1

Преимущество данной композиции относительно известной в [3] заключается в том, что эксципиенты в композиции не являются механохимически активированными, не меняют своих физико-химических свойств и являются типичными нейтральными добавками к действующему веществу (механоактивированная аморфная кальциевая соль глюконовой кислоты), что в случае применения композиции в комплексном лечении особо сложных заболеваний (например, хронической почечной недостаточности и гемодиализе) является жизненно важным с точки зрения отсутствия или уменьшения побочных эффектов.

Кроме того, технический результат достигается в заявляемом изобретении также путем смешивания кальциевой соли глюконовой кислоты с фармацевтически приемлемыми эксципиентами в следующем соотношении ингредиентов, мас.%:

кристаллическая кальциевая соль
глюконовой кислоты	94÷97
тальк	2÷1
крахмал	2÷1
стеарат кальция	2÷1

и последующей его обработки в энергонапряженных измельчительных активаторных устройствах в течение времени, необходимого для подвода удельной энергии не менее 10,5 кДж/г.

Преимущество данной композиции относительно известной в [3] заключается в том, что впервые определены позволяющие ее идентифицировать физико-химические характеристики и что в ней содержание стеарата кальция увеличено до 2%. При измельчении композиции порошок становится нанодисперсным и соответственно значительно увеличивается его удельная поверхность и для ее защитного покрытия требуется большее количество вещества. Повышенное содержание стеарата кальция позволило повысить устойчивость наночастиц в жидкой среде пищевода и желудка за счет более надежного формирования из него поверхностного слоя наночастиц ("капсулирования"), что обеспечивает, в случаях когда это необходимо по медицинским показаниям, более эффективную доставку наночастиц в кишечник. Кроме того, увеличение содержания стерата кальция повышает устойчивость композиции к влажности и увеличивает сроки ее хранения, что является важным техническим условием при производстве лекарственных препаратов. Механоактивированная таблетированная форма официнального лекарственного препарата кальция глюконата, которая использовалась нами для механоактивации в опубликованной нами же статье [3], как композиция кальциевой соли глюконовой кислоты содержит талька <2%, крахмала <3% и стеарата кальция <1% (ФСП42-0173654505, ЗАО Ирбитский ХФЗ).

О получении механоактивированной аморфной кальциевой соли глюконовой кислоты и механоактивированной аморфной композиции кальциевой соли глюконовой кислоты судят по

- однородному диффузному гало в спектре порошковой дифракции рентгеновских лучей;

- смещению центра тяжести полосы поглощения 3000-3600 см^-1 в область больших волновых чисел на величину не более 200 см^-1, наличию полос поглощения с частотами 3308±20, 2933±10, 1602±10, 1420±10 с плечом 1260±40, 1085±10, 1044±10, 877±10, 682±10, 577±10 см-¹ и дополнительной полосы поглощения с частотой 947±10 см^-1 в ИК-спектре (KBr);

- уменьшению эндотермических пиков в области температур 125-165°С и увеличению пика в области температур 30-100°С в дифференциальном термическом анализе (ДТА);

- наличию интенсивной одиночной линии электронного парамагнитного резонанса (ЭПР) с фактором Ланде от 2.000 до 2.006 и шириной от 8 до 9 Э;

- появлению неразрешенной широкой линии тонкой структуры в областях 60-90 ppm и 170-190 ppm в ¹³С спектрах ядерного магнитного резонанса (ЯМР);

- смещению резонансных линий их водных растворов в области 62,8-179,2 ppm на величину, не превышающую 0,1 ppm в ¹³С ЯМР-спектрах;

- смещению резонансных линий их водных растворов в области 1,2-4,95 ppm на величину, не превышающую 0,02 ppm в ¹Н ЯМР-спектрах;

- возрастанию интенсивностей линий 160 m/z механоактивированных образцов не менее чем в 2,5 раза и линий 780-1000 m/z их экстрактов растворов в этаноле не менее чем в три раза в масс-спектроскопическом анализе.

Технический результат достигается в заявляемом изобретений также путем получения механоактивированной аморфно-кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты при обработке кальциевой соли глюконовой кислоты в энергонапряженных измельчительных активаторных устройствах в течение времени, необходимого для подвода удельной энергии не более 10,4 кДж/г.

Преимущество данной механоактивированной аморфно-кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты заключается в том, что она получена впервые, впервые определены позволяющие ее идентифицировать физико-химические характеристики и она, в отличие от [3], не содержит эксципиентов, что в случае применения соли для лечения больных с ослабленным иммунитетом или т.п., или в комплексном лечении особо сложных заболеваний (например, хронической почечной недостаточности и гемодиализе) является жизненно важным с точки зрения отсутствия или уменьшения побочных эффектов.

Кроме того, технический результат достигается в заявляемом изобретении также путем получения композиции механоактивированной аморфно-кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты с фармацевтически приемлемыми эксципиентами в следующем соотношении ингредиентов, мас.%:

аморфно-кристаллическая кальциевая соль
глюконовой кислоты	94÷97
тальк	2÷1
крахмал	2÷1
стеарат кальция	2÷1

Преимущество данной композиции относительно известной в [3] заключается в том, что эксципиенты в композиции не являются механохимически активированными, не меняют своих физико-химических свойств и являются типичными нейтральными добавками к действующему веществу (механоактивированная аморфная кальциевая соль глюконовой кислоты), что в случае применения композиции в комплексном лечении особо сложных заболеваний (например, хронической почечной недостаточности и гемодиализе) является жизненно важным с точки зрения отсутствия или уменьшения побочных эффектов.

Кроме того, технический результат достигается в заявляемом изобретении также путем смешивания кальциевой соли глюконовой кислоты с фармацевтически приемлемыми эксципиентами в следующем соотношении ингредиентов, мас.%:

кристаллическая кальциевая соль
глюконовой кислоты	94÷97
тальк	2÷1
крахмал	2÷1
стеарат кальция	2÷1

и последующей обработки в энергонапряженных измельчительных активаторных устройствах в течение времени, необходимого для подвода удельной энергии не более 10,4 кДж/г.

Преимущество данной композиции относительно известной в [3] заключается в том, что впервые определены позволяющие ее идентифицировать физико-химические характеристики и что в ней содержание стеарата кальция увеличено до 2%. При измельчении композиции порошок становится нанодисперсным и соответственно значительно увеличивается его удельная поверхность и для ее защитного покрытия требуется большее количество вещества. Повышенное содержание стеарата кальция позволило повысить устойчивость наночастиц в жидкой среде пищевода и желудка за счет более надежного формирования из него поверхностного слоя наночастиц ("капсулирования"), что обеспечивает, в случаях когда это необходимо по медицинским показаниям, более эффективную доставку наночастиц в кишечник. Кроме того, увеличение содержания стерата кальция повышает устойчивость композиции к влажности и увеличивает сроки ее хранения, что является важным техническим условием при производстве лекарственных препаратов. Механоактивированная таблетированная форма официнального лекарственного препарата кальция глюконата, которая использовалась нами для механоактивации в опубликованной нами же статье [3] как композиция кальциевой соли глюконовой кислоты, содержит талька <2%, крахмала <3% и стеарата кальция <1% (ФСП42-0173654505, ЗАО Ирбитский ХФЗ).

О получении механоактивированной аморфно-кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты и механоактивированной аморфно-кристаллической композиции кальциевой соли глюконовой кислоты судят по

- одновременному наличию диффузного гало и структурных кристаллических рефлексов в спектре порошковой дифракции рентгеновских лучей;

- смещению центра тяжести области поглощения 3000-3600 см^-1 в область больших волновых чисел на величину не более 200 см^-1, наличию полосы поглощения с частотами 3480±10, 3241±30, 2933±10, 2912±10, 1597±10, 1392±20, 1306±10, 1296±10, 1085±10, 1044±10, 973±10, 908±10, 881±10, 699±10, 565±10 см^-1 и дополнительной полосы поглощения с частотой 947±10 см^-1 в ИК-спектре;

- появлению слаборазрешенных широких линий тонкой структуры в областях 60-90 ppm и 170-190 ppm в ¹³С ЯМР-спектрах;

- смещению резонансных линий их водных растворов в области 62,8-179,2 ppm на величину, не превышающую 0,09 ppm в ¹³С ЯМР-спектрах;

- смещению резонансных линий их водных растворов в области 1,2-4,95 ppm на величину, не превышающую 0,015 ppm в ¹Н ЯМР-спектрах;

- возрастанию интенсивностей линий 160 m/z механоактивированных образцов не более чем в 2,5 раза и линий 780-1000 m/z их экстрактов растворов в этаноле не более чем в три раза в масс-спектроскопическом анализе;

- наличию интенсивной одиночной ЭПР-линии с фактором Ланде от 2.000 до 2.006 и шириной от 8 до 9 Э.

На основе аморфных и аморфно-кристаллических соединений и композиций получают фармацевтические препараты для лечения стоматологических или костных заболеваний, обусловленных дефицитом кальция в организме, в форме порошка, таблетки, капсулы и т.п., которые применяют перорально, дозами 0,2-0,4 г или 0,6-6 г, 1-6 раз в день, курсами не менее 1 месяца.

Преимущества способа лечения заключается в том, что в качестве фармацевтических препаратов применяются впервые полученные вещества с впервые определенными, позволяющими идентифицировать эти вещества, физико-химическими характеристиками, обеспечивающими их уникальную, не имеющую мировых аналогов эффективность.

На фиг.1-10 представлены результаты исследования различными методами исходной, механоактивированной аморфной и аморфно-кристаллической композиций кальция глюконата.

Фиг.1: представлены порошковые рентгеновские дифрактограммы (Сu К_α-излучение) следующих образцов:

- исходной кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 1;

- механоактивированной аморфно-кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 2;

- механоактивированной аморфной кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 3.

Порошковые рентгеновские дифрактограммы регистрировались на рентгеновском дифрактометре ДРОН-ЗМ в монохроматизированном Cu К_α-излучении.

Дифрактограмма кальция глюконата, обработанного в измельчителе-активаторе при подведенной удельной энергии 10,8 кДж/г (кривая 3), не содержит структурных кристаллических рефлексов и представляет собой диффузное гало, характерное для аморфного вещества. В порошковой дифрактограмме аморфно-кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, полученной обработкой в измельчителе-активаторе при подведенной удельной энергии 3,6 кДж/г (кривая 2), имеются одновременно аморфное диффузное гало и структурные кристаллические рефлексы, соответствующие содержанию аморфной и кристаллической фазы ≈90 и ≈10 мас.% соответственно. В отличие от упомянутых выше дифрактограмма известного кристаллического соединения, кальциевой соли глюконовой кислоты (кривая 1), содержит характерный для кристаллического состояния набор структурных рефлексов.

Фиг.2: ИК-спектры следующих образцов:

- исходной кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 1;

- механоактивированной аморфно-кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 2;

- механоактивированной аморфной кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 3.

Инфракрасные (ИК) спектры пропускания снимали на ИК Фурье-спектрометре ФСМ-1202. Образцы смешивали с KBr (ИК - степень чистоты) и компактировали в таблетки. Все спектры регистрировали, проводя 64 сканирования (повторных измерений каждого результата) при разрешении 1 см^-1.

В ИК Фурье-спектре механоактивированной аморфно-кристаллической композиции кальциевой соли глюконовой кислоты (кривая 2) полосы поглощения имеют менее разрешенную структуру линий в отличие от хорошо разрешенного спектра кальциевой соли глюконовой кислоты в кристаллическом состоянии (кривая 1). Центр тяжести области поглощения 3000-3600 см^-1 смещен в область больших волновых чисел на величину не более 200 см^-1. Наблюдаются полосы поглощения с частотами 3480±10, 3241±30, 2933±10, 2912±10, 1597±10, 1392±20, 1306±10, 1296±10, 1085±10, 1044±10, 973±10, 908±10, 881±10, 699±10, 565±10 см^-1 и наблюдается дополнительная полоса поглощения с частотой 947±10 см^-1.

В ИК Фурье-спектре механоактивированной аморфной формы (кривая 3) имеются слаборазрешенная структура линий, смещение центра тяжести области поглощения 3000-3600 см^-1 в область больших волновых чисел на величину не более 200 см^-1, полосы поглощения с частотами 3308±20, 2933±10, 1602±10, 1420±10 с плечом 1260±40, 1085±10, 1044±10, 877±10, 682±10, 577±10 см^-1 и наблюдается дополнительная полоса поглощения с частотой 947±10 см^-1.

Приведенные выше данные указывают на изменение колебательного спектра механоактивированных образцов с частичным сохранением химической связи катиона кальция с анионом глюконовой кислоты, уменьшением количества водородных связей (смещение центра тяжести широкой полосы поглощения ОН-групп 3000-3600

см^-1 в область больших волновых чисел) и образованием комплексных соединений и композиций соли глюконовой кислоты с циклическими сахаридами.

Фиг.3: ¹³С ЯМР-спектры образцов в твердом состоянии:

- исходной кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 1;

- механоактивированной аморфно-кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 2;

- механоактивированной аморфной кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 3.

ЯМР-спектры снимали на импульсном ЯМР-спектрометре с Фурье-преобразованием AVANCE-400 Bruker при температуре 295 К.

В ¹³С ЯМР-спектрах аморфной формы (кривая 3) и аморфно-кристаллической соли (кривая 2) в области 60-90 ppm и 170-190 ppm наблюдаются широкие линии неразрешенной тонкой структуры. В ¹³С ЯМР-спектрах кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты в тех же областях наблюдается хорошо разрешенная тонкая структура резонансных ЯМР-спектров поглощения (кривая 1).

Из приведенных данных очевидно, что при механической обработке кристаллического соединения кальциевой соли глюконовой кислоты в энергонапряженных измельчительных устройствах-активаторах происходит изменение локальной молекулярной структуры кальция глюконата, характеризуемое увеличением количества неэквивалентных локальных атомных состояний атомов углерода, характерных для разупорядоченного кристаллического или аморфного состояния вещества.

На фиг.4 и 5 приведены ЯМР-спектры на ядрах ¹³С и ¹Н соответственно для следующих образцов:

- водного раствора исходной кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 1;

- водного раствора механоактивированной аморфно-кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 2;

- водного раствора механоактивированной аморфной кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 3.

ЯМР-спектры снимали на импульсном ЯМР-спектрометре с Фурье-преобразованием AVANCE-400 Bruker при температуре 295 К.

¹³С ЯМР спектры водных растворов аморфной формы (фиг.4, кривые 3) и аморфно-кристаллической композиции (фиг.4, кривые 2) имеют одинаковую со спектрами водных растворов кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты структуру резонансных линий поглощения в области 62,8-179,2 ppm (фиг.4, кривые 1). Спектры аморфной формы и аморфно-кристаллической композиции отличаются лишь в том, что они имеют химический сдвиг на величину, не превышающую 0,1 ppm относительно линий ¹³С ЯМР-спектров водных растворов кристаллического кальция глюконата.

В ¹Н ЯМР-спектрах водных растворов аморфной формы (фиг.5, кривые 3) и аморфно-кристаллической композиции (фиг.5, кривые 2) наблюдается сходная со спектрами водных растворов кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты структура резонансных линий ¹Н ЯМР-спектров (фиг.5, кривые 1) в области 1,2-4,95 ppm. Спектры аморфной формы и аморфно-кристаллической композиции отличаются лишь в том, что они имеют химический сдвиг на величину, не превышающую 0,02 ppm, относительно линий ¹Н ЯМР-спектров водных растворов кристаллического кальция глюконата.

Из приведенных данных очевидно, что при механической обработке в энергонапряженных измельчительных устройствах-активаторах кристаллического кальция глюконата происходит изменение его локальной молекулярной структуры, приводящее к сдвигу линий ЯМР поглощения. При этом следует отметить, что величина и направление смещения различны для разных линий. Такое поведение может быть вызвано несколькими факторами, в частности деструкцией молекул, возникновением парамагнетизма в результате образования стабильных свободных радикалов, а также изменением конформации исходной молекулы после проведения механоактивации.

На фиг.6 представлены ЭПР-спектры механоактивированной аморфной кальциевой соли глюконовой кислоты (кривая 1) и угольного эталона (кривая 2).

На фиг.7 приведена кривая зависимости интенсивности ЭПР сигнала от времени механической обработки кальциевой соли глюконовой кислоты.

ЭПР-спектры снимали на ЭПР-спектрометр VARIAN Е-12 на частоте ~9,5 ГГц при температуре 295 К. Нормировку интенсивности и определение g-фактора ЭПР линий производили по угольному эталону (g=2,0030).

В ЭПР-спектре механоактивированого аморфного кальция глюконата (фиг.6, кривая 1) имеется интенсивная ЭПР линия с g≈2,005. В исходном образце кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты ЭПР сигнал отсутствует. Интенсивность ЭПР сигнала возрастает с ростом содержания аморфной фазы (времени механической обработки кальция глюконата) в аморфно-кристаллической композиции и достигает максимального значения при достижении аморфного состояния. Интенсивность ЭПР сигнала сохраняется в течение времени не менее 6 месяцев. То есть механическая обработка кальциевой соли глюконовой кислоты приводит к образованию стабильных парамагнитных центров как в аморфной фазе, так и в промежуточной аморфно-кристаллической композиции.

Из приведенных данных очевидно, что происходящие изменения локальной атомной структуры при механической обработке в энергонапряженных измельчительных устройствах-активаторах кристаллического соединения кальциевой соли глюконовой кислоты приводят к образованию химически активных стабильных парамагнитных центров, что может приводить к изменению как реакционной способности, так и биологической активности получаемого вещества.

На фиг.8 приведены масс-спектры электронной ионизации (ЭИ) следующих образцов:

- исходной кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 1;

- механоактивированной аморфной кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 2.

Масс-спектрометрические измерения методом масс-спектрометрии электронной ионизации (ЭИ) проводили на приборе MAT-212.

Масс-спектры ЭИ механоактивированных образцов в аморфном и аморфно-кристаллическом состоянии принципиально не отличаются от масс-спектров исходной кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты. Также при механической обработке кальция глюконата не было обнаружено образования новых легколетучих соединений. Основное отличие было обнаружено лишь в том, что в масс-спектрах электронной ионизации механоактивированных аморфной формы и аморфно-кристаллической композиции наблюдается более интенсивный пик с 160 m/z (фиг.8, кривая 2).

На фиг.9 приведены масс-спектры лазерной десорбции с матрицы (MALDI-TOF) экстрактов растворов в этаноле следующих образцов:

- исходной кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 1;

- механоактивированной аморфно-кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 2;

- механоактивированной аморфной кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 3.

Масс-спектрометрические измерения методом масс-спектрометрии лазерной десорбции с матрицы (MALDI-TOF) проводили на приборе DYNAMO. Были исследованы экстракты в воде, этаноле, хлороформе и гексане механоактивированных образцов.

Как видно из фиг.9, в масс-спектре экстракта исходного кристаллического кальция глюконата (кривая 1) имеются высокомолекулярные пики относительно малой интенсивности в области m/z 750-950. В масс-спектре экстракта механоактивированной аморфно-кристаллической композиции аморфного и кристаллического кальция глюконата (кривая 2) относительная интенсивность этих пиков значительно возросла. Еще более высокая интенсивность высокомолекулярных пиков в области m/z 750-950 наблюдается в масс-спектре экстракта механоактивированного аморфного кальция глюконата (кривая 3).

В MALDI-TOF масс-спектрах экстрактов растворов образцов в воде и хлороформе существенных различий не наблюдалось.

В целом, приведенные масс-спектрометрические ЭИ и MALDI-TOF данные показывают, что при механической обработке кальция глюконата аморфный или аморфно-кристаллический композиты и их экстракты состоят из кальциевой соли глюконовой кислоты с m/z=430 и высокомолекулярных соединений кальциевой соли глюконовой кислоты, имеющих m/z от 470 до 950.

На фиг.10 приведены кривые дифференциального термического анализа (ДТА) следующих образцов:

- исходной кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 1;

- механоактивированной аморфно-кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 2;

- механоактивированной аморфной кальциевой соли глюконовой кислоты, кривая 3.

ДТА кривые снимали на приборе Shimazu DSC-60 в атмосфере аргона со скоростью нагрева 10°С/мин. На ДТА кривой аморфной формы существенно нивелированы эндотермические пики в области температур 125-165°С и имеется дополнительный эндотермический пик в области температур 30-100°С (фиг.10, кривая 3). На ДТА кривой аморфно-кристаллической формы наблюдается возрастание эндотермического пика в области температур 30-100°С и уменьшение эндотермического пика в области температур 125-165°С.

Примеры осуществления способа

Пример 1. Способ получения механоактивированной аморфной кальциевой соли глюконовой кислоты реализовали следующим образом.

Кристаллическую кальциевую соль глюконовой кислоты в весовом отношении к измельчающим шарам 1:11 загружали в герметичные сосуды и в условиях инертной атмосферы обрабатывали в энергонапряженном измельчительном устройстве-активаторе с энергонапряженностью 6 Вт/г (6 Дж/с·г) при температуре, не превышающей 60 градусов Цельсия, в течение 30 минут. Величина подведенной удельной энергии составила 10,8 кДж/г.

С учетом того, что для аморфизации кристаллического кальция глюконата в активаторе требуется не менее 10,5 кДж/г подведенной удельной энергии, то время обработки было достаточным для получения аморфного состояния. Следует отметить, что время обработки зависит от энергонапряженности активатора. При энергонапряженности активатора в 3 Вт/г для получения механоактивированной аморфной кальциевой соли глюконовой кислоты из кристаллической соли требуется 1 час обработки, а при энергонапряженности 6 Вт/г время обработки должно составлять 30 минут.

Измельчение также проводили в условиях открытой атмосферы, остаточной атмосферы в изолированном объеме, с добавлением газовой среды в открытый или изолированный объем измельчающего устройства, в условиях вакуума до 10^-4 Па.

Пример 2. Способ получения механоактивированной аморфно-кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты.

Кристаллическую кальциевую соль глюконовой кислоты в весовом отношении к измельчающим шарам 1:11 загружали в герметичные сосуды и в условиях инертной атмосферы обрабатывали в энергонапряженном измельчительном устройстве-активаторе с энергонапряженностью 6 Вт/г при температуре, не превышающей 60 градусов Цельсия, в течение 10 минут. Величина подведенной удельной энергии составила 3,6 кДж/г, что недостаточно для полной аморфизации исходного кристаллического состояния вещества, т.к. величина подведенной удельной энергии составляет не более 10,4 кДж/г, и соответственно в механоактивированном веществе реализовалось двухфазное аморфно-кристаллическое состояние. При этом в механоактивированном продукте содержалось ≈90 мас.% аморфной фазы и ≈10 мас.% кристаллической.

Измельчение также проводили в условиях открытой атмосферы, остаточной атмосферы в изолированном объеме, с добавлением газовой среды в открытый или изолированный объем измельчающего устройства, в условиях вакуума до 10^-4 Па.

Пример 3. Способ получения механоактивированной аморфной композиции кальциевой соли глюконовой кислоты с фармацевтически приемлемыми эксципиентами.

Кристаллическую кальциевую соль глюконовой кислоты в весовом соотношении с фармацевтически приемлемыми эксципиентами (тальк, крахмал, стеарат кальция) 94:2:2:2 загружали в герметичные сосуды при весовом отношении смеси к измельчающим шарам 1:11 и в условиях инертной атмосферы обрабатывали в энергонапряженном измельчительном устройстве-активаторе с энергонапряженностью 6 Вт/г при температуре, не превышающей 60°С, в течение 30 минут. Величина подведенной удельной энергии составила 10,8 кДж/г, что более 10,5 кДж/г и достаточно для формирования аморфного состояния.

Измельчение также проводили в условиях открытой атмосферы, остаточной атмосферы в изолированном объеме, с добавлением газовой среды в открытый или изолированный объем измельчающего устройства, в условиях вакуума до 10^-4 Па.

Пример 4. Способ получения механоактивированной аморфно-кристаллической композиции кальциевой соли глюконовой кислоты с фармацевтически приемлемыми эксципиентами.

Кристаллическую кальциевую соль глюконовой кислоты в весовом отношении с фармацевтически приемлемыми эксципиентами (тальк, крахмал, стеарат кальция) 94:2:2:2 загружали в герметичные сосуды в весовом соотношении смеси к измельчающим шарам 1:11 и в условиях инертной атмосферы обрабатывали в энергонапряженном измельчительном устройстве-активаторе с энергонапряженностью 6 Вт/г при температуре не превышающей 60 градусов Цельсия, в течение 10 минут. Величина подведенной энергии составила 3,6 кДж/г, что недостаточно для полной аморфизации исходного кристаллического состояния вещества, т.к. величина подведенной удельной энергии составила не более 10,4 кДж/г и, соответственно в механоактивированном веществе реализовалось двухфазное аморфно-кристаллическое состояние. При этом в механоактивированном продукте содержалось ≈90 мас.% аморфной фазы и ≈10 мас.% - кристаллической.

Измельчение также проводили в условиях открытой атмосферы, остаточной атмосферы в изолированном объеме, с добавлением газовой среды в открытый или изолированный объем измельчающего устройства, в условиях вакуума до 10^-4 Па.

Пример 5. Способ получения композиции аморфной кальциевой соли глюконовой кислоты с фармацевтически приемлемыми эксципиентами реализовали следующим образом.

Кристаллическую кальциевую соль глюконовой кислоты в весовом отношении к измельчающим шарам 1:11 загружали в герметичные сосуды и в условиях инертной атмосферы обрабатывали в энергонапряженном измельчительном устройстве-активаторе с энергонапряженностью 6 Вт/г (6 Дж/с·г) при температуре, не превышающей 60 градусов Цельсия, в течение 30 минут. Величина подведенной удельной энергии составила 10,8 кДж/г, что достаточно для аморфизации кристаллического кальция глюконата, т.к. величина подведенной удельной энергии превышает 10,5 кДж/г. Затем полученную механоактивированную аморфную кальциевую соль глюконовой кислоты в весовом соотношении 94:2:2:2 смешивали с тальком, крахмалом и стеаратом кальция.

Пример 6. Способ получения композиции аморфно-кристаллической кальциевой соли глюконовой кислоты с фармацевтически приемлемыми эксципиентами.

Кристаллическую кальциевую соль глюконовой кислоты в весовом отношении к измельчающим шарам 1:11 загружали в герметичные сосуды и в условиях инертной атмосферы обрабатывали в энергонапряженном измельчительном устройстве-активаторе с энергонапряженностью 6 Вт/г при температуре, не превышающей 60 градусов Цельсия, в течение 10 минут. Величина подведенной удельной энергии составила 3,6 кДж/г, что недостаточно для полной аморфизации исходного кристаллического состояния вещества, т.к. величина подведенной удельной энергии составляет не более 10,4 кДж/г, и соответственно в механоактивированном веществе реализовалось двухфазное аморфно-кристаллическое состояние. При этом в механоактивированном продукте содержалось ≈90 мас.% аморфной фазы и ≈10 мас.% кристаллической. Затем полученную механоактивированную аморфно-кристаллическую кальциевую соль глюконовой кислоты в весовом соотношении 94:2:2:2 смешивали с тальком, крахмалом и стеаратом кальция.

Преимущества осуществления способов 1-6 заключаются в том, что они упрощают способы получения механоактивированных аморфных и аморфно-кристаллических кальциевых солей глюконовой кислоты и их композиций, определяя необходимое время измельчения не трудоемким опытным путем, а зная лишь необходимую для их получения величину подведенной удельной энергии, характеристики активаторного устройства и удельную энергонапряженность режима измельчения, соответствующего физико-химическим свойствам измельчаемого вещества.

Пример 7. Фармацевтический препарат.

Полученное по любому из примеров 1-6 вещество в виде порошка расфасовывается в пакеты таким образом, чтобы в каждом пакете содержалось по 0