Способ диагностики псориаза
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в дерматологии для диагностики псориаза. Для осуществления способа диагностики определяют клинические признаки псориаза и в качестве дополнительного лабораторного критерия проводят оценку хемилюминесценции (ХЛ) суспензии липопротеидов высокой плотности (ЛПВП), выделенных из сыворотки крови пациентов. Для чего измеряют показатели светосуммы (S) и интенсивности быстрой вспышки (I) и рассчитывают коэффициент Н, равный отношению S и I. Если Н больше 5,2, диагностируют наличие псориаза у обследуемого пациента. Использование изобретения позволяет провести объективную диагностику псориаза. 2 табл.
Реферат
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в дерматологии для выявления псориаза.
В клинической практике для постановки диагноза псориаз и псориатическая артропатия учитываются следующие критерии (Mathies Н, 1974; Хобейшн М.М. и соавт.1999, Институт Ревматологии РАМН):
псориатические высыпания на коже с триадой характерных признаков (феномен стеаринового пятна; феномен терминальной пленки, феномен точечного кровотечения), изоморфная реакция Кебнера, псориаз ногтевых пластинок, псориаз у близких родственников (указание на наличие больных серонегативным артритом и псориазом среди родственников).
1. Артрит дистальных межфаланговых суставов кистей.
2. Артрит трех суставов одного и того же пальца кистей (осевое поражение).
3. Разнонаправленное поражение (подвывих пальцев рук).
4. Асимметричный хронический артрит.
5. Параартикулярные явления.
6. Сосискообразная конфигурация пальцев стоп.
7. Параллелизм течения кожного и суставного синдромов.
8. Боль и утренняя скованность в позвоночнике, которые сохраняются в течение не менее 3-х месяцев.
9. Серонегативность по ревмофактору.
10. Акральный остеолиз.
11. Анкилоз дистальных межфаланговых суставов кистей и/или межфаланговых суставов стоп.
12. Рентгенологические признаки определенного сакроилеита.
13. Синдесмофиты или паравертебральные оссификаты.
Диагноз может считаться правомочным, если проявления заболевания совпадают с тремя из приведенных выше критериев, из которых обязательно должен быть один из приведенных в пунктах 1, 11. При обнаружении РФ необходимо совпадение по 5 критериям, из них обязательны два - кожные псориатические высыпания и остеолизис (из книги Беляев Г.М., Рыжко П.П. Псориаз. Псориатическая артропатия. - М.: МЕДпресс-ииформ, 2000).
Существующий метод не количественный, и диагностика наличия псориаза является субъективной.
Задачей изобретения является объективизация способа диагностики псориаза с целью выработки лабораторного критерия псориаза.
Сущность предложенного способа заключается в том, что наряду с определением клинических признаков проводят оценку хемилюминесценции (ХЛ) суспензии липопротеидов высокой плотности (ЛПВП), выделенных из сыворотки крови пациентов, измеряют показатели светосуммы (S) и интенсивности быстрой вспышки (Ι), после чего рассчитывают коэффициент H, равный отношению S к I, и если Н больше 5,2, предполагают наличие псориаза у обследуемого пациента.
Патогенез псориаза связан с гиперсекрецией провоспалительных медиаторов, что в свою очередь приводит к цитолизу, и активацией системы мононуклеарных фагоцитов. Все эти процессы стимулируют перекисное окисление липидов, что приводит к их молекулярной трансформации. Поэтому при псориазе изменяется характер хемилюминесценции липопротеидов сыворотки крови, что стало основой данного диагностического метода.
ПРИМЕР
Пациентка 3., 51 год. Клинический диагноз: псориаз обыкновенный, бляшечный. Артропатия. Сопутствующий диагноз: СД 2 типа, средней степени тяжести, инсулиннезависимый. АГ 3 стадия, риск 4. Диабетическая макроангиопатия. Нефропатия 2 ст. Полинейропатия. МКБ. Диагноз поставлен на основании:
- жалоб пациентки на зуд, чувство стянутости кожи, сухость, шелушение, появление трещин, боли в коленных, локтевых суставах;
- данных анамнеза заболевания: больной себя считает в течение 20 лет, когда впервые появились высыпания в области коленных суставов. Обострение 1 раз в год (весной). Последнее - май 2008 г. Во время последнего обострения появились обильные высыпания на теле, верхних, нижних конечностях. Лечилась самостоятельно: синафлановая мазь, белосалик. В связи с прогрессированием патологического процесса направлена в ЖДБ;
- данных объективного осмотра: кожный процесс распространенный, на верхних, нижних конечностях, волосистой части головы, вокруг пупка. Представлен крупными бляшками, папулами ярко-красного цвета, покрытыми серебристо-белыми чешуйками. Псориатическая триада положительная. В складках под молочными железами эритематозные очаги. Также отмечается отечность, болезненность коленных суставов.
Кровь из локтевой вены забирали утром натощак. Сыворотку крови получали путем центрифугирования в течение 15 мин при 2400 g.
Липопротеиды сыворотки крови выделяли осаждением в присутствии гепарина и CaCl2. К 2 мл 15 мМ раствора CaCl2 добавляли 0,2 мл сыворотки крови и 0,04 мл 1% раствора кристаллического гепарина. Пробирку осторожно встряхивали. Образовавшуюся суспензию через 5 мин инкубации при комнатной температуре центрифугировали в течение 5 мин при 200 g. Надосадочную жидкость, состоящую из ЛПВП и белков, удаляли пипеткой в отдельную пробирку. Осадок представлял собой суммарную фракцию ЛПНП и ЛПОНП (Лопухин Ю.М., Владимиров Ю.А., Молоденков М.Н., Клебанов Г.И., Сергиенко В.И., Наумов А.В., Максимов В А., Шерстнев М.П. Регистрация хемилюминесценции составных частей сыворотки крови в присутствии двухвалентного железа // Бюллетень экспериментальной биологии и клинической медицины. - №5. - 1982. - С.61-63).
Надосадочную жидкость, состоящую из ЛПВП и белков в количестве 200 мкл, помещали в кювету хемилюминесцентной установки, добавляли 200 мкл фосфатного буфера (20мМ KH2PO4, 10мМ KCl, pH 7,4). Для инициации ХЛ вводили 50 мкл FeSO4·7H2O, на 7 цикле вводили 100 мкл 3%H2O2 (Климкина Е.И. Влияние производных 3-оксипиридина и 4-тиосульфокислоты на функциональное состояние печени при ее токсическом поражении. Автореферат дисс. канд.мед.наук. - Смоленск, 2005. - С.59-60).
Регистрировали ХЛ в течение 20 циклов и рассчитывали высоту быстрой вспышки I=14428 у.е. и светосумму S=86739 у.е. После чего определяли коэффициент Н, равный отношению S к I, H=86739/14428=6,0. Так как 6,0 больше 5,2, то пациент страдает псориазом.
Провели хемилюминесцентный анализ суспензии ЛПВП, выделенной из сыворотки у 14 пациентов с псориазом и 13 практически здоровых доноров по описанной выше методике. Данные исследования сведены в табл.1.
У всех пациентов с псориазом значение коэффициента Н больше 5,2, в группе здоровых доноров меньше 5,2. Среднегрупповое значение коэффициента Н у пациентов с псориазом и здоровых доноров соответственно было равным 6,0±0,21 и 4,82±0,06 (р<0,001) (табл.2).
Таким образом, предложенный способ диагностики псориаза является простым, объективным, надежным, может быть широко использован в клинике как дополнительный лабораторный критерий в постановке диагноза.
Таблица 1Способ диагностики псориаза | ||||||
№ | Пациенты с псориазом | Здоровые доноры | ||||
I | S | H | I | S | H | |
1 | 9868 | 80961 | 8,204398 | 20404 | 97056 | 4,756714 |
2 | 10693 | 75969 | 7,104554 | 15426 | 79008 | 5,121743 |
3 | 16848 | 99474 | 5,904202 | 19965 | 92745 | 4,645379 |
4 | 14877 | 99951 | 6,718492 | 22705 | 103842 | 4,57353 |
5 | 19235 | 100785 | 5,239667 | 19868 | 91263 | 4,593467 |
6 | 14428 | 86739 | 6,011852 | 23508 | 107733 | 4,582823 |
7 | 20982 | 112431 | 5.35845 | 22361 | 112956 | 5,051474 |
8 | 19096 | 108270 | 5,669774 | 25605 | 129543 | 5.059285 |
9 | 19102 | 100578 | 5,265313 | 22613 | 109056 | 4,822713 |
10 | 22110 | 121893 | 5,513026 | 17524 | 87195 | 4,975748 |
11 | 17982 | 107481 | 5,977144 | 25663 | 118986 | 4,636481 |
12 | 21450 | 124590 | 5,808392 | 17367 | 83340 | 4,798756 |
13 | 20747 | 115920 | 5,587314 | 17501 | 87276 | 4,986915 |
14 | 23162 | 131967 | 5,697565 |
Таблица 2 | |
Группа | Н |
(М±m) | |
Пациенты с псориазом | 6,0±0,21 |
Здоровые доноры | 4,82±0,06 |
Способ диагностики псориаза, включающий определение клинических признаков, отличающийся тем, что дополнительно проводят оценку хемилюминесценции (ХЛ) суспензии липопротеидов высокой плотности (ЛПВП), выделенных из сыворотки крови пациентов, измеряют показатели светосуммы (S) и интенсивности быстрой вспышки (I), после чего рассчитывают коэффициент Н, равный отношению S к I, и если Н больше 5,2, предполагают наличие псориаза у обследуемого пациента.