Способ лечения и профилактики смешанных заболеваний медоносных пчел

Способ лечения и профилактики смешанных заболеваний медоносных пчел

Реферат

Изобретение относится к пчеловодству, в частности к способам лечения и профилактики смешанных заболеваний медоносных пчел препаратами на основе терпеноидов.

Пчелиные семьи подвержены, как правило, смешанным заболеваниям - гнильцовым, аскосферозум, варроатозум, аспергиллезум, что вызывает необходимость проведения их санитарно-ветеринарных обработок различными препаратами. Однако это сокращает продолжительность жизни пчел, задерживает развитие их семей, вызывает гибель маток, загрязняет продукцию и повышает ее себестоимость. Устранить эти нежелательные эффекты можно используя ветеринарный препарат комплексного действия, не нарушающий природные биологические коммуникации медоносных пчел, стимулирующий сохранение и развитие экосистемы пчелиного гнезда.

Известен способ борьбы с варроатозом пчел, включающий обработку насекомых препаратом, содержащим эфирное масло копетдагской полыни, α-пинен, β-пинен, лимонен, 20%-ный цинеол, 35%-ную камфару, борнеол, 15%-ный терпинеол-4. При лечении паразитарных заболеваний пчел препарат не проявляет комплексного действия, его эффективность против варроатоза при обработке в рекомендуемой дозе составляет 85,63% (см. RU 2058731, МПК 6, А01К 51/00, опубл. 27.04.1996).

Недостатком данного способа лечения является то, что данный способ не позволяет проводить комплексную обработку медоносных пчел, так как используемый препарат (содержащий эфирное масло копетдагской полыни, α-пинен, β-пинен, лимонен, 20%-ный цинеол, 35%-ную камфару, борнеол, 15%-ный терпинеол-4) не обладает комплексным действием (акарицидным, фунгицидным, простоцидным, стимулирующим).

Наиболее близким решением, принятым за прототип, является известный способ борьбы с нозематозом пчел, включающий скармливание препарата, содержащего фумагиллиновую кислоту или ее соль с алифатическим амином, аскорбиновую кислоту, натрий сернистокислый, поливинилпирролидон и в качестве наполнителя глюкозу, или лактозу, или фруктозу, или сахарозу, или крахмал (см. RU 2081572, МПК 6, А01К 51/00, 20.06.1997).

Недостатком данного способа является низкая эффективность использования препарата при скармливании и фумигированием, узкая направленность действия, отсутствие лечебно-профилактического действия на расплоде и загрязнение экосистемы пчелиного гнезда.

Технической задачей предлагаемого изобретения разработка экологически чистого биологического способа комплексного действия, исключающего токсичное воздействие на организм пчел, продукты пчеловодства и окружающую среду, применимого для профилактики и лечения смешанных и ассоциативных заболеваний медоносных пчел - варроатоза, аскосфероза, аспергиллеза, обеспечивающего повышение резистентности пчел и профилактику заболеваний.

Техническая задача достигается тем, что в известном способе лечения и профилактики смешанных заболевания медоносных пчел, включающем обработку медоносных пчел препаратом «Апистат» на основе терпеноидов, согласно изобретению обработку осуществляют при орошении на расплоде раствором, полученным смешиванием 100 мл препарата с 1000 мл теплого сахарного сиропа, до 3 раз с интервалом 2-3 дня; или скармливают раствор, полученный смешиванием 0,5-1,0 мл препарата с 1000 мл теплого сахарного сиропа, который заливают в 1/3 ячеек нижней части соторамок, трехкратно с интервалом 3-5 дней, сахарный сироп приготавливают при использовании орошения на расплоде в соотношении 1:5, а при скармливании в соотношении 1:1.

Применяемый в заявляемом способе биологический препарат - «Апистат» содержит в качестве действующего вещества терпеноид - лилалоол 65% и вспомогательные компоненты. Препарат представляет собой легко подвижную прозрачную бесцветную или светло-желтого цвета жидкость с приятным ароматическим запахом. Его качество определяется методами газожидкостной хроматографии, спектрометрическими, значениями показателя преломления и плотности.

«Апистат» представляет собой концентрат эмульсии. В состав препарата входят: масло эфирное кориандровое - ОСТ 10-57-87- 35%; ректифицированный спирт ГОСТ 18300-87 или спирт изопропиловый ТУ 6-09-402-87 - 55%; эмульгатор ОП-7 или ОП-10-10%.

«Апистат» является действующим веществом и содержит в своем составе в %: d-линалол - 67; α-пинен - 9; β-пинен - 0,7; мирцен - 1; лимонен - 1,5; α-терпинен - 0,6; β-терпинен - 2; терпинолен - 0,5; n-цимол - 1,5; камфара - 4,5; борнеол; ацетат борнеола; гераниол - 5,5; геранилацетат - 2.

В состав эфирного «Апистата» также входят: терпинеол, цитренеллол, 1-борнеол, β-фелландрен, h-дециловый альдегид, дециловая кислота, d1-камфен.

Агрегатное состояние препарата - жидкость бледно-желтого цвета с запахом зрелых плодов кориандра, плотность этой жидкости - около 553 г/см³.

Биологическая активность «Апистата» определяется совокупностью компонентов состава, наиболее активными из которых является d-линалол, терпинеол и метилгептеон (табл.1).

Таблица 1
Содержание компонентов в терпеновой фракции Апистата по данным ГЖХ
Компонент	Содержание, %
Терпеновая фракция
1	2
Пинен	3,6
Камфен	13,8
Пинен	17,3
Мирцен	1,4
Лимонен	9,7
Терпинен	6,3
П-цимол	1,7
Терпинены	2,1
Линалоол	26,4
Камфара	-
Линалилацетат	1,1
Борнеол	-
Геранилацетат	-
Гераниол	-
Терпинеол	*

Аналог заявленному изобретению - препарат, содержащий эфирное масло копетдагской полыни. Его состав - α-пинен, β-пинен, лимонен, 20% цинеол, 35% камфара, борнеол, 15% терпинеол-4. При лечении паразитарных заболеваний пчел препарат не проявляет комплексного действия, его эффективность против варроатоза при обработке в рекомендуемой дозе составляет 85,63% (патент RU 2058731, опубл. 27.04.96).

В опытах концентрация препарата составляла от 0,01 до 1%.

По результатам проведенных исследований было установлено, препарат в концентрации 0,05-0,1% (опыт 2, 3) достоверно увеличивал продолжительность жизни опытных пчел (Р<0,001), по сравнению с контролем (сахарный сироп и масло копетдагской полыни) (табл.2).

Таблица 2
Наименование препарата	Концентрация препаратов в корме, %	Продолжительность жизни пчел (дни)
Опыт 1	1,0	24,86±3,26
Опыт 2	0,1	38,53±1,57
Опыт 3	0,05	36,35±1,75
Опыт 4	0,01	30,54±2,53
Опыт 5	0,001	28,92±1,37
Сахарный сироп	100%	22,35±3,30
Кандисил (контроль)	0,20	28,19±3,03
Масло копетдагской полыни (контроль)	1	22,63±4,31
ВЭСП	0,1	24,63±0,78
Срок жизни опытных пчел других групп не отличаются от контрольных насекомых

Опыт 1 проводили в лабораторных условиях в термоэнтологическом шкафу при температуре 25°С, влажности 67%, размещали в десяти садках по 50 пчел и скармливали сахарный сироп {(теплого (35-40°С) сахарного сиропа, приготовленного 1:1 (1 кг сахара на 1 кг воды)} с концентрацией 1,0% препарата «Апистат» в течение 27 суток. В контроле использовали 5 садков с пчелами по 50 штук и скармливали сахарный сироп {теплого (35-40°С) сахарного сиропа, приготовленного 1:1 (1 кг сахара на 1 кг воды)}. Повторность опыта трехкратная, учет проводился в течение 28 дней. Продолжительность жизни пчел в этих опытах составил 24,86±3,26 дней, соответственно в контроле 22,35±3,30 дней.

Опыт 2 проводили в лабораторных условиях в термоэнтологическом шкафу при температуре 25°С, влажности 67%, размещали в десяти садках по 50 пчел и скармливали сахарный сироп {(теплого (35-40°С) сахарного сиропа, приготовленного 1:1 (1 кг сахара на 1 кг воды)} с концентрацией 0,1% препарата «Апистат» в течение 27 суток. В контроле использовали 5 садков с пчелами по 50 штук и скармливали сахарный сироп {теплого (35-40°С) сахарного сиропа, приготовленного 1:1 (1 кг сахара на 1 кг воды)}. Повторность опыта трехкратная, учет проводился в течение 40 дней. Продолжительность жизни пчел в этих опытах составил 38,53=1,57 дней, соответственно в контроле 22,35±3,30 дней.

Опыт 3 проводили в лабораторных условиях в термоэнтологическом шкафу при температуре 25°С, влажности 67%, размещали в десяти садках по 50 пчел и скармливали сахарный сироп {(теплого (35-40°С) сахарного сиропа, приготовленного 1:1 (1 кг сахара на 1 кг воды)} с концентрацией 0,05% препарата «Апистат» в течение 40 суток. В контроле использовали 5 садков с пчелами по 50 штук и скармливали сахарный сироп {теплого (35-40°С) сахарного сиропа, приготовленного 1:1 (1 кг сахара на 1 кг воды)}. Повторность опыта трехкратная, учет проводился в течение 40 дней. Продолжительность жизни пчел в этих опытах составил 36,35±1,75, соответственно в контроле 22,35±3,30 дней.

Опыт 4 проводили в лабораторных условиях в термоэнтологическом шкафу при температуре 25°С, влажности 67%, размещали в десяти садках по 50 пчел и скармливали сахарный сироп {(теплого (35-40°С) сахарного сиропа, приготовленного 1:1 (1 кг сахара на 1 кг воды)} с концентрацией 0,01% препарата «Апистат» в течение 39 суток. В контроле использовали 5 садков с пчелами по 50 штук и скармливали сахарный сироп {теплого (35-40°С) сахарного сиропа, приготовленного 1:1 (1 кг сахара на 1 кг воды)}. Повторность опыта трехкратная, учет проводился в течение 38 дней. Продолжительность жизни пчел в этих опытах составила 30,54±2,53, соответственно в контроле 22,35±3,30 дней.

Опыт 5 проводили в лабораторных условиях в термоэнтологическом шкафу при температуре 25°С, влажности 67%, размещали в десяти садках по 50 пчел и скармливали сахарный сироп {(теплого (35-40°С) сахарного сиропа, приготовленного 1:1 (1 кг сахара на 1 кг воды)} с концентрацией 0,001% препарата "Апистат" в течение 34 суток. В контроле использовали 5 садков с пчелами по 50 штук и скармливали сахарный сироп {теплого (35-40°С) сахарного сиропа, приготовленного 1:1 (1 кг сахара на 1 кг воды)}. Повторность опыта трехкратная, учет проводился в течение 33 дней. Продолжительность жизни пчел в этих опытах составил 28,92±1,37, соответственно в контроле 22,35±3,30 дней.

Опыт 6 (контроль) - проводили в лабораторных условиях в термоэнтологическом шкафу при температуре 25°С, влажности 67%, размещали в десяти садках по 50 пчел и скармливали сахарный сироп {(теплого (35-40°С) сахарного сиропа, приготовленного 1:1 (1 кг сахара на 1 кг воды)} с концентрацией 0,20% препарата Кандисил в течение 31 суток. Повторность опыта трехкратная, учет проводился в течение 30 дней. Продолжительность жизни пчел в этих опытах составил 28,19±3,03, соответственно в контроле 22,35±3,30 дней.

Опыт 7 (контроль) - проводили в лабораторных условиях в термоэнтологическом шкафу при температуре 25°С, влажности 67%, размещали в десяти садках по 50 пчел и скармливали сахарный сироп {(теплого (35-40°С) сахарного сиропа, приготовленного 1:1 (1 кг сахара на 1 кг воды)} с концентрацией 1% препарата Масло копетдагской полыни (контроль) в течение 27 суток. Повторность опыта трехкратная, учет проводился в течение 26 дней. Продолжительность жизни пчел в этих опытах составил 22,63±4,31, соответственно в контроле 22,35±3,30 дней.

Опыт 8 (контроль) - проводили в лабораторных условиях в термоэнтологическом шкафу при температуре 25°С, влажности 67%, размещали в десяти садках по 50 пчел и скармливали сахарный сироп {(теплого (35-40°С) сахарного сиропа, приготовленного 1:1 (1 кг сахара на 1 кг воды)} с концентрацией 0,1% препарата ВЭСП (контроль) в течение 27 суток. Повторность опыта трехкратная, учет проводился в течение 26 дней. Продолжительность жизни пчел в этих опытах составил 24,63±0,78, соответственно в контроле 22,35±3,30 дней.

Производственно-пасечные обработки проводили в 13 пчелохозяйствах с численностью 2000-5000 пчелиных семей. На одной пасеке размещалось по 100-200 пчелиных семей.

Обработка пасек проводилась во время весенних обработок в третьей декаде апреля и первой декаде мая. Кратность обработок и эффективность препарата представлена в таблице 2.

Обработка пасек проводилась во время осенних обработок в третьей декаде августа и первой декаде сентября. Кратность обработок и эффективность препарата представлена в таблице 3.

Таблица 3
Показатели	Кратность обработок
1	2	3	4	5
Эффективность при заболеваниях: %
весенняя обработка	88,3	92,9	97,8	96,8	97,6
варроатоз	86,6	93,4	99,5	99,3	99,4
расплод	84,2	92,6	99,8	99,4	99,6
пчелы
аскосфероз
осенняя обработка
пчелиные семьи
варроатоз	92,4	96,8	99,6	99,6	99,4
аскосфероз	94,6	95,9	99,8	99,7	99,6

В результате проведенных исследований было установлено, "Апистат" в концентрации 0,05-0,1% достоверно увеличивал продолжительность жизни опытных пчел (Р<0,001), по сравнению с контролем (сахарный сироп и масло копетдагской полыни).

Причинно-следственная связь выбранной концентрации и кратность применения препарата прослеживается продолжительностью жизни пчел и оптимальностью применения препарата.

Способ осуществляли следующим образом.

Перед лечением пчел рамки с сильно пораженным расплодом удаляли, больные семьи перегоняли в чистые дезинфицированные ульи. Гнезда больных семей сокращали и утепляли, заменяли пчелиных маток на здоровых плодных.

В весенний и ранний летний периоды (при отсутствии расплода) «Апистат» применяли путем скармливания с сахарным сиропом. С этой целью 0,5-1 мл препарата смешивали с 1000 мл теплого (35-40°С) сахарного сиропа, приготовленного 1:1 (1 кг сахара на 1 кг воды).

Лечебный корм из расчета 250-300 мм на семью (60-70 мм на соторамку) помещали в верхние кормушки и заливали в 1/3 ячеек нижней части соторамок и скармливали пчелам трехкратно с интервалом 3-5 дней.

В летний и осенний периоды «Апистат» применяли путем опрыскивания пчел на соторамках теплым сахарным раствором. С этой целью 0,5-1,0 мл «Апистата» смешивали с 1000 мл теплого сахарного раствора, приготовленного 1:5 (1 кг сахара на 5 кг воды). Соторамки с пчелами опрыскивали с обеих сторон из мелкодисперсного опрыскивателя с нормой расхода 10-12 мл на одну соторамку. Одновременно обрабатывали стенки ульев. Обработки проводили в зависимости от тяжести заболевания 3-5 раз с интервалом 2-3 дня до исчезновения признаков болезни.

Одновременно проводили дезинфекцию освободившихся ульев, соторамок и пчелоинвентаря одним из разрешенных к применению дезинфектантов. Подмор и ульевый мусор собирают и сжигают.

Эффективность использования способа после весенней обработки медоносных пчел против варроатоза составила: на расплоде - 97,8%. На пчелах - 99,5%. Соответственно против аскосфероза - 99,8%. В осенних обработках против варроатоза эффективность составила 99,6%; против аскосфероза - 99,8%.

После трехкратной обработки пасек «Апистатом» методом орошения расплода заклещеванность составила 0,1%, на пчелах - 0,5% (для контрольных пчелиных семей - до 3%). В образцах опытной серии не обнаружены грибки аспергиллеза. Отмечалось отсутствие реакции раздражения пчел при обработке пасек.

Мед, полученный от пчелиных семей, обработанных препаратом, использовали в пищу на общих основаниях.

Определение протоцидных свойств препарата.

Установлена протоцидная активность химических, растительных, полимерных препаратов при нозематозе пчел. Изучены патоморфические изменения среднего отдела кишечника пчел, вызываемые паразитированием N. apis.

Как показали исследования, все испытанные препараты обладали протоцидной активностью в отношении N. apis. Результаты опыта представлены в таблице 4.

Таблица 4
Препарат	До обработки	После обработки	Эффективность
ИО, млн.спор	ЭИ, %	ИО, млн.спор	ЭИ, %	ИО, млн.спор	ЭИ, %
Апистат	65,9±5,7	56,2±4,8	23,4±1,5	21,3±1,7	86,7	85,6
Нозедин	67,4±8,3	58,8±5,2	29,4±4,7	34,6±3,1	78	73,9
Эвкалиптовое масло	73,5±4,7	55,3±4,3	37,7±2,7	35,6±2,7	71,4	62,4
Масло копетдагской полыни	63,69±5,2	59,7±3,4	46,8±4,6	49,4±2,3	62,6	58,7
Контроль	б4,3±7,3	51±4,3	129±8,9	84,7±6,8	-	-

В наших исследованиях препарат «Апистат» оказался высокоэффективны против возбудителя Европейского гнильцового заболевания, состоящего из нескольких видов микробов: бацилла альвей (Вас.alvei), стрептококк апис (Streptococcus apis). ЭИ у «Апистата» составила 85,6%, соответственно у «Масла копетдагской полыни» оказалась - 58,7%.

Таким образом, предлагаемый способ является высокоэффективным, экологически чистым, биологическим средством комплексного действия при лечении и профилактике болезней медоносных пчел - варроатоза, аскосфероза и аспергиллеза.

Способ удобен в работе, это делает его доступным для массового применения.

Способ лечения и профилактики смешанных заболеваний медоносных пчел, включающий обработку пчел препаратом «Апистат» на основе терпеноидов, отличающийся тем, что обработку осуществляют при орошении на расплоде раствором, полученным смешиванием 100 мл препарата с 1000 мл теплого сахарного сиропа трехкратно с интервалом 2-3 дня; или скармливают раствор, полученный смешиванием 0,5-1,0 мл препарата с 1000 мл теплого сахарного сиропа, который заливают в 1/3 ячеек нижней части соторамок, трехкратно с интервалом 3-5 дней, сахарный сироп приготавливают при использовании орошения на расплоде в соотношении 1:5, а при скармливании в соотношении 1:1.