Набор, включающий субстрат, содержащий биоцеллюлозу, и порошковая косметическая композиция для приведения в контакт с субстратом

Иллюстрации

Показать все

Изобретение относится к косметологии и представляет собой набор, включающий в одной упаковке субстрат, содержащий биоцеллюлозу; порошковую косметическую композицию, которая является, по меньшей мере, частично растворимой в воде, для приведения в контакт с субстратом. Изобретение обеспечивает получение таких композиций, которые не вызывают недостатки, вызванные содержанием консервантов в относительно высоких концентрациях, где субстраты не склонны к микробному загрязнению, не вызывают побочных реакций на коже. 3 н. и 31 з.п. ф-лы, 6 ил.

Реферат

Настоящее изобретение относится к способам получения косметической композиции и к наборам, позволяющим получать и наносить косметическую композицию.

Иногда необходимо увеличить время контакта между областью нанесения и косметической композицией, чтобы оптимизировать ее эффективность.

С этой целью были разработаны различные субстраты для импрегнирования их композицией и последующего нанесения на участок, подлежащий обработке. Композиция, импрегнированная таким образом в субстрат, медленнее диффундирует к месту приложения действия по сравнению с композицией без субстрата. В публикациях ЕР-А-1095589, ЕР-А-1338264, US-A-6702792 и WO-A-06/053332 раскрыты маски для обработки лица с нетканым субстратом, импрегнированным косметическими композициями эмульсионного типа, оказывающими косметическое отбеливающее действие или действие, предотвращающее старение кожи.

Подобные продукты для проведения подтяжки тела также недавно появились на рынке (антицеллюлитные обертывания, Body Sculptess, Lancome).

Для получения импрегнированных изделий могут также применяться другие субстраты, например, натуральные полисахаридные гели, как раскрыто в публикации US-2003/0113356.

Такие косметические изделия, хотя они и практичны в применении, могут иметь недостатки, вызванные содержанием консервантов в относительно высоких концентрациях; различные применяемые субстраты склонны к микробному загрязнению.

Далее, их производство требует стадии импрегнирования субстрата косметической композицией. Такое импрегнирование иногда трудно осуществить равномерно, и, в частности, оно может измениться со временем и привести к выпадению осадка в косметической рецептуре.

В следующих публикациях: US 2001/0028894, US-A-6730317 и WO-A-03/075820 - раскрыты другие системы для длительного применения косметических веществ, например, пластыри. В этом случае активные компоненты включаются непосредственно в матрицу пластыря, который затем помещают на место приложения действия.

Выбор матрицы определяет адгезионную способность пластыря. Применение химически поперечно связанных полимеров, например акриловых полимеров, может вызывать нежелательные реакции на коже и не позволяет получать изделия, соответствующие экологическим требованиям.

Кроме того, такие системы имеют основные недостатки, заключающиеся в трудной совместимости со всеми типами активных компонентов и при высоких концентрациях, а также в наличии низкой скорости диффузии активных компонентов к месту приложения действия, потому что кинетика является относительно медленной.

Наконец, такие пластыри не очень привлекательны с косметической точки зрения и не оказывают никакого немедленного эффекта.

Цель изобретения состоит в том, чтобы предложить новый способ получения и/или нанесения косметической композиции, устраняющий некоторые или все вышеперечисленные недостатки.

В одном аспекте изобретение представляет набор, включающий:

- субстрат, содержащий биоцеллюлозу;

- порошковую косметическую композицию, которая, по меньшей мере, частично является растворимой в воде, которую следует приводить в контакт с субстратом.

Вышеупомянутый набор можно предлагать потребителю в одной упаковке, например, коробке, блистерной упаковке, наборе, пакетике или контейнере с несколькими отделениями.

Субстрат может быть влажным, или, как вариант, он может быть сухим и предназначенным для регидратации, в частности, непосредственно перед применением. В таком случае набор может включать водный раствор для регидратации субстрата. Как вариант, субстрат регидратируют с помощью воды.

Водный раствор может произвольно включать по меньшей мере один активный компонент, который является несовместимым по меньшей мере с одним активным компонентом, содержащимся в композиции.

Водный раствор среди прочего может содержать минеральную или термальную воду или воду, содержащую планктон. В случае с планктоном порошковая косметическая композиция может содержать планктон, например в лиофилизированной форме.

Порошковая косметическая композиция может иметь средний размер гранул от 5 до 1000 мкм или даже от 50 до 500 мкм.

Порошковая косметическая композиция может содержать не больше, чем 10 мас.%, воды или даже не больше, чем 5 мас.%, воды, или она даже может быть полностью безводной.

Изобретение позволяет по меньшей мере частично применять воду, содержащуюся во влажной биоцеллюлозе, для быстрого, чистого и занимательного растворения косметической композиции.

Порошковая форма с низким содержанием воды или даже полностью безводная может способствовать сохранению композиции даже в отсутствие консервантов.

Субстрат может преимущественно содержаться в стерильной упаковке, особенно во влажном виде. Когда он сухой, это может способствовать сохранению субстрата.

Порошковая косметическая композиция может находиться в любой подходящей упаковке, которая пригодна для однократного или многократного применения и которая может произвольно помещаться в герметичную упаковку, например пакетик или флакон, необязательно снабженные средствами для дозировки и/или распределения, например, ситом.

При наличии водного раствора для регидратации субстрата он может также содержаться в любой соответствующей упаковке, которая пригодна для однократного или многократного применения и которая может необязательно помещаться в герметичную упаковку, например пакетик, или флакон, или ампулу, необязательно снабженные средствами для дозировки и/или распределения.

Если это целесообразно, порошковая композиция и водный раствор могут содержаться в двух отделениях одной и той же упаковки.

В другом аспекте изобретение представляет способ получения косметической композиции, в частности, непосредственно перед применением, включающий стадии, состоящие из приведения влажного субстрата, содержащего биоцеллюлозу, в контакт с порошковой косметической композицией, которая является по меньшей мере частично растворимой в воде, для того чтобы заставить раствориться указанную порошковую косметическую композицию по меньшей мере частично при контакте с субстратом.

Субстрат может быть сухим и может регидратироваться непосредственно перед применением. Как вариант, субстрат является уже влажным.

Изобретение также обеспечивает способ нетерапевтической косметической обработки с использованием композиции, полученной, как указано выше.

Порошковую косметическую композицию можно наносить на субстрат, и в таком случае ее можно наносить на ороговевший материал. Как вариант, порошковую косметическую композицию можно наносить на ороговевший материал и затем покрывать субстратом.

Основание можно оставлять на месте на ороговевшем материале, например, на период времени от 5 минут до 12 часов.

Субстрат

Субстрат включает биоцеллюлозу.

Биоцеллюлоза представляет собой материал, полученный в водной питательной среде аэробным брожением бактерий рода Acetobacter (также известных как Gluconacetobacter) (Z.Gromet-Elhanan, S.Hestrin, Synthesis of cellulose by Acetobacter Xylinum, J.Bacteriol 85, 284-292, 1963; патент US 5962277).

Основным применяемым видом является Acetobacter Xylinum, хотя биоцеллюлозу могут производить также другие виды, например, Acetobacter Pasteurianus.

Условия выращивания этих бактерий для получения биоцеллюлозы известны, в частности, из публикации Factors affecting the yield and properties of bacterial cellulose, A.Krystynowicz et al., J Indus Microbiol Biotech 29, 189-195, 2002.

Биоцеллюлозу можно применять в чистом виде или в форме, которая объединена с другими типами волокон, например, волокнами естественного происхождения, например, волокнами зерновых (кукуруза), конопли, льна, хлопка, джута, кенафа, рафии, рами, панамской пальмы, сизаля, тростника, люцерны, формиума, кокоса, шерсти, шелка, сои, манильской конопли, кумазасы, хурма, капока, лопуха, злаков или бамбука.

Волокна биоцеллюлозы могут быть свободными или связанными вместе и/или связанными с другими волокнами.

Биоцеллюлозу можно применять в получаемой форме листа, например, путем уплотнения культуры волокон биоцеллюлозы после их промывки. Толщина листа находится, например, в диапазоне от 50 до 4000 мкм.

Предпочтительно, перед добавлением порошковой композиции субстрат содержит по меньшей мере 10 мас.% биоцеллюлозы относительно всей массы субстрата.

По меньшей мере в момент применения биоцеллюлоза субстрат может также содержать от 10 до 99% воды, предпочтительно от 40 до 90%.

Субстрат необязательно может быть связан с подложкой, в частности подложкой, которая позволяет помещать его на место на коже.

Субстрат в виде сухого или влажного листа может находиться в виде маски или пластыря, приспособленного, среди прочего, для нанесения на лицо, глаза, контур глаз, щеки, губы, руки или ногти.

С другой стороны, субстрат в виде пленки может быть связан с гибкой подложкой, чтобы делать возможным легкое нанесение композиции на кожу, ногти и волосы, например, в виде пластыря, маски, пояса для тела или детали одежды.

В предпочтительном воплощении биоцеллюлозу на субстрате стерилизуют и упаковывают в упаковку для однократного применения. Стерилизация может быть осуществлена с использованием средств, известных специалисту, например, стерилизация с использованием влажного тепла или ионизирующего излучения. В результате в этом воплощении не требуется никакого консерванта.

Субстрат может быть упакован в сухом состоянии для регидратации непосредственно перед применением с помощью воды или водного раствора. В качестве примера, раствор может представлять собой термальную или минеральную воду, воду, содержащую планктон, или раствор, содержащий по меньшей мере один активный компонент, например активный компонент, который является несовместимым с активным компонентом, содержащимся в порошковой композиции, то есть раствор, который не может в течение продолжительного периода времени храниться в контакте с ним без распада.

Порошковая косметическая композиция

Порошковая косметическая композиция может быть сухой, то есть содержащей меньше, чем 10 мас.%, предпочтительно меньше, чем 5 мас.%, воды.

Композиция может быть в виде свободного гидрофильного порошка, который непосредственно перед применением наносят на субстрат на основе влажной биоцеллюлозы.

В примерах к изобретению частицы порошка могут растворяться меньше, чем через 5 минут, предпочтительно меньше, чем через 2 минуты, во влажном субстрате. Растворение порошка определяется визуально по отсутствию каких-либо остаточных твердых частиц.

Средний диаметр частиц, составляющих порошок, может, например, находиться в диапазоне от 5 до 1000 мкм, предпочтительно в диапазоне от 50 до 500 мкм.

Композиция может содержать один или более чем один активный косметический компонент, выбранный из:

- активных компонентов в порошкообразной форме, например, аскорбиновой кислоты, аскорбилфосфата натрия, аскорбилфосфата магния, аскорбилглюкозида, гиалуроновой кислоты, салициловой кислоты и ее производных, лимонной кислоты, эллаговой кислоты, койевой кислоты, фелуровой кислоты, растительных экстрактов в виде порошка, дигидроксиацетона; и

- активных компонентов в растворенной форме, адсорбированных на твердых частицах.

В предпочтительном воплощении изобретения композиция содержит активный компонент, который может легко распадаться в жидкой среде и обладает оптимальной физико-химической стабильностью в виде порошка.

Предпочтительные активные компоненты, которые можно упомянуть, представляют собой витамины, дигидроксиацетон, фелуровую кислоту, полифенолы, растительные экстракты и гидролизаты, экстракты штаммов микробов, белки, пептиды, аминокислоты, пуриновые и пиримидиновые основания, нуклеиновые кислоты, олигонуклеотиды.

Кроме того, композиция может содержать минеральные или органические наполнители, например, оксиды кремния, глины, тальки или гидратированные силикаты магния, слюды или алюмосиликаты, глины, глины, каолин или гидратированный силикат алюминия, нитриды бора, минеральные оксиды, например, оксид цинка, полимеры и сополимеры акриловой или метакриловой кислоты, например, продукты, продающиеся под торговой маркой "Polytrap", производимые DOW CORNING, или порошки полиамида (Nylon®).

Композиция может содержать растворимые или диспергируемые в воде полимеры, выбранные из (1) полимеров белкового типа, например, белков сои или пшеницы; кератина, например, гидролизатов кератина и сульфированных производных кератинов; казеина; альбумина; коллагена; глютелина; глюкагона; глютена; зеина; желатин и их производных; (2) полимеров, полученных из хитина или хитозана, например, анионных, катионных, амфотерных или неионных полимеров хитина или хитозана; (3) полисахаридных полимеров, в частности, (i) полимеров целлюлозы, например, гидроксиэтилцеллюлозы, гидроксипропилцеллюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы, метилцеллюлозы, этилгидроксиэтилцеллюлозы, карбоксиметилцеллюлозы, и кватернизованных производных целлюлозы; а также (ii) крахмалов и их производных; (4) акриловых полимеров или сополимеров, например, полиакрилатов, полиметакрилатов и их сополимеров; (5) винильных полимеров, например, поливинилпирролидонов, сополимеров метилвинилового эфира и малеинового ангидрида, сополимера винилацетата и кретоновой кислоты, сополимеров винилпирролидона и винилацетата, сополимеров винилпирролидона и капролактама, поливиниловых спиртов; (6) полимеров природного происхождения, которые могут быть модифицированы, например, гуммиарабика, гуаровой смолы, ксантановых производных, смолы карайя; альгинатов, каррагена, водорастворимых сахаридов, выделяемых из растений рода Ulva, а также других коллоидов из водорослей; гликозаминогликанов, гиалуроновой кислоты и их производных; шеллака, смолы сандарака, даммаровой смолы, смолы элеми, камеди; дезоксирибонуклеиновой кислоты; мукополисахаридов, например, гиалуроновой кислоты, хондроитин сульфата; и смесей указанных полимеров.

Композиция также может содержать одну или более чем одну соль, выбранную из солей кальция, магния, натрия, калия и их смесей и более подробно хлорида магния, хлорида калия, хлорида натрия, хлорида кальция, бромида магния, бикарбоната натрия, фосфата магния, фосфата натрия, фосфата калия, сульфата кальция, сульфата магния и их смесей.

Композиция, которую наносят на влажный субстрат на основе биоцеллюлозы, может представлять собой шипучий порошок.

Композиция может быть получена с использованием одного или более чем одного способа, известного специалисту, например, размола, распыления, просеивания, смешивания, сухого или влажного гранулирования, пульверизации или лиофилизации.

Способы представления

Композиция может быть представлена в виде пакетика или содержаться в контейнере R, который допускает легкое и равномерное распределение во влажном субстрате, в то время как субстрат может содержаться в стерильных условиях в пакетике S, как показано на Фиг.1, с получением набора 1 по изобретению.

В случае необходимости субстрат и композиция могут быть упакованы в двух отдельных отделениях 2 и 3 пакетика, как показано на Фиг.2.

Несколько пакетиков S, причем каждый включает субстрат для однократного применения, можно предложить потребителю в коробке 4 по меньшей мере с одним контейнером R, содержащим композицию, как показано на Фиг.3.

Субстрат может быть получен в любой форме, соответствующей обрабатываемой области, например, прямоугольной, как показано на Фиг.4, или овальной, как показано на Фиг.5, например, для обработки области контура глаза.

Потребителю можно предложить набор с субстратом в сухом состоянии, порошковой композицией и водным раствором для регидратации субстрата.

Этот водный раствор содержится, например, в контейнере R', как показано на Фиг.6, причем контейнер R' предлагается потребителю в той же самой упаковке, что и субстрат и порошковая композиция.

ПРИМЕРЫ

Сравнительные примеры

Лист биоцеллюлозы получали путем брожения в статических условиях в аэробной среде штамма Acetobacter Xylinum (штамм АТСС 23767), с использованием метода, описанного в публикации "Factors affecting the yield and properties of bacterial cellulose", A Krystynowicz et at., J Indus Microbiol Biotech 29, 189-195, 2002.

Слой биоцеллюлозы, полученный после брожения, промывали дистиллированной водой, разбавленным раствором гидроокида натрия, затем нейтрализовывали раствором уксусной кислоты. После промывки дистиллированной водой слой биоцеллюлозы представлял собой лист толщиной приблизительно 2 мм. Затем биоцеллюлозу подвергали влажной тепловой стерилизации в автоклаве при 121°С в течение 20 минут.

5 г порошка, состоящего из альгината натрия, сульфата кальция, фосфата калия и кремния диоксида, наносили на поверхность листа биоцеллюлозы или гидрогеля на основе полиакриловой кислоты.

Отмечали скорость, с которой порошок смачивался, и время, после которого частицы порошка больше не были видны.

Были получены следующие результаты:

Время смачивания порошка Время, после которого частицы порошка больше не видны
Биоцеллюлоза немедленно 45 секунд
Акриловый гидрогель >2 минут >2 минут

Таким образом, можно заметить, что биоцеллюлоза может растворять порошок почти мгновенно, намного быстрее, чем гидрогель.

Пример 1: Маска для обработки лица для очищающего (скраб) и осветляющего эффекта

Биоцеллюлозную маску получали путем вырезания из листа биоцеллюлозы с помощью штампа. Порошок, состоящий из 0,05 г салициловой кислоты, 0,5 г аскорбиновой кислоты, 4 г моногидрата лимонной кислоты и 5 г бикарбоната натрия, распределяли непосредственно перед применением и равномерно по маске, и маску наносили на лицо на 15 минут.

Пример 2: Очищающая горячая маска из глины

Биоцеллюлозную маску получали путем вырезания из листа биоцеллюлозы с помощью штампа.

Порошок, состоящий из 4 г зеленой глины, 0,5 г каолина и 2 г безводного сульфата магния, распределяли непосредственно перед применением и равномерно по маске.

Маску немедленно наносили на лицо на 15 минут.

Пример 3: Пластырь против морщин

15 см2 слоя биоцеллюлозы, полученной брожением Acetobacter Xylinum, высушивали в течение 24 часов при 40°С с получением сухого листа.

Затем штамм теплового планктона Vitreoscilla Filiformis выращивали при 26°С в течение 48 ч в условиях, описанных в публикации WO-A-94/02158.

Биомассу отделяли от культуральной среды путем центрифугирования, как описано в публикации US-A-6242229.

Культуральную среду (А), также известную как вода, содержащая планктон, стерилизовали при 121°С в течение 20 минут. Биомассу (Б) после замораживания и сублимации преобразовывали в лиофилизированный порошок.

Сухой лист биоцеллюлозы гидратировали непосредственно перед применением с помощью 2 мл стерильной культуральной среды (А), затем 0,1 г лиофилизированной биомассы (Б) наносили на гидратированный лист биоцеллюлозы.

Пластырь биоцеллюлозы, содержащий тепловой планктон, восстановленный непосредственно перед применением, наносили на лицо в качестве средства, предотвращающего появление морщин.

Очевидно, что изобретение не ограничивается приведенными примерами.

Выражение "включающий" следует понимать как синоним выражения "включающий по меньшей мере один", если не оговорено особо.

1. Набор, включающий в одной упаковке:субстрат, содержащий биоцеллюлозу;порошковую косметическую композицию, которая является, по меньшей мере, частично растворимой в воде, для приведения в контакт с субстратом.

2. Набор по п.1, где субстрат является влажным.

3. Набор по п.1, включающий водный раствор для регидратации субстрата и где субстрат является сухим и предназначен для регидратации.

4. Набор по п.3, где водный раствор включает, по меньшей мере, один активный компонент, который является несовместимым с, по меньшей мере, одним активным компонентом, содержащимся в композиции.

5. Набор по п.3, где водный раствор включает минеральную или термальную воду или воду, содержащую планктон.

6. Набор по п.1, где порошковая косметическая композиция имеет средний размер зерна от 5 до 1000 мкм.

7. Набор по п.6, где порошковая косметическая композиция имеет средний размер зерна от 50 до 500 мкм.

8. Набор по п.1, где порошковая косметическая композиция содержит не более 10 мас.% воды.

9. Набор по п.8, где порошковая косметическая композиция содержит не более 5 мас.% воды.

10. Набор по п.1, где субстрат помещают в стерильную упаковку.

11. Набор по п.1, где порошковая косметическая композиция содержит, по меньшей мере, один активный компонент, выбранный из активных компонентов в порошкообразной форме, таких, как витамины, аскорбиновая кислота, аскорбилфосфат натрия, аскорбилфосфат магния, аскорбилглюкозид, гиалуроновая кислота, салициловая кислота и их производные, лимонная кислота, эллаговая кислота, койевая кислота, феруловая кислота, растительные экстракты и гидролизаты в форме порошка, дигидроксиацетон, полифенолы, экстракты штаммов микробов, протеины, пептиды, аминокислоты, пуриновые и пиримидиновые основания, нуклеиновые кислоты, олигонуклеотиды, и их смесей.

12. Набор по п.1, где порошковая косметическая композиция содержит, по меньшей мере, один активный компонент в растворенном и абсорбированном на твердых частицах виде.

13. Набор по п.1, где порошковая косметическая композиция содержит, по меньшей мере, один минеральный или органический наполнитель.

14. Набор по п.13, где наполнитель выбран из диоксидов кремния, глин, тальков или гидратированных силикатов магния, слюд или алюмосиликатов, каолина или гидратированного силиката алюминия, нитратов бора, минеральных оксидов, например оксида цинка, полимеров и сополимеров акриловой или метакриловой кислоты и порошков полиамида и их смесей.

15. Набор по п.1, где порошковая косметическая композиция содержит, по меньшей мере, один растворимый или диспергируемый в воде полимер.

16. Набор по п.15, где полимер выбран из полимеров белкового типа, например белков сои или пшеницы; кератина, например гидролизатов кератина и сульфированных производных кератинов; казеина; альбумина; коллагена; глютелина; глюкагона; глютена; зеина; желатинов и их производных; полимеров, полученных из хитина или хитозана, например, анионных, катионных, амфотерных или неионных полимеров хитина или хитозана; полисахаридных полимеров, в частности полимеров целлюлозы, например гидроксиэтилцеллюлозы, гидроксипропилцеллюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы, метилцеллюлозы, этилгидроксиэтилцеллюлозы, карбоксиметилцеллюлозы и кватернизованных производных целлюлозы, а также крахмалов и их производных; акриловых полимеров или сополимеров, например полиакрилатов, полиметакрилатов и их сополимеров; винильных полимеров, например поливинилпирролидонов, сополимеров метилвинилового эфира и малеинового ангидрида, сополимера винилацетата и кротоновой кислоты, сополимеров винилпирролидона и винилацетата, сополимеров винилпирролидона и капролактама, поливиниловых спиртов; полимеров природного происхождения, которые могут быть модифицированы, например гуммиарабика, гуаровой смолы, ксантановых производных, смолы карайя; альгинатов, каррагена, водорастворимых сахаридов, выделяемых из растений рода Ulva, а также других коллоидов из водорослей; гликозаминогликанов, гиалуроновой кислоты и их производных; шеллака, смолы сандарака, даммаровой смолы, смолы элеми, камеди; дезоксирибонуклеиновой кислоты; мукополисахаридов, например гиалуроновой кислоты, хондроитинсульфата; и смесей указанных полимеров.

17. Набор по п.1, где порошковая косметическая композиция содержит, по меньшей мере, одну соль.

18. Набор по п.17, где соль выбрана из солей кальция, магния, натрия, калия и их смесей.

19. Набор по п.1, где порошковая косметическая композиция такая, что при контакте ее с биоцеллюлозой происходит выделение пузырьков газа.

20. Набор по п.1, где порошковая косметическая композиция находится в пакетике.

21. Набор по п.1, где порошковая косметическая композиция находится во флаконе.

22. Набор по п.1, где порошковая косметическая композиция не содержит консервантов.

23. Набор по п.1, где субстрат упакован стерильно.

24. Набор по п.1, где субстрат включает, по меньшей мере, 10 мас.% биоцеллюлозы.

25. Набор по п.1, где субстрат состоит из влажной биоцеллюлозы.

26. Набор по п.1, где субстрат включает, по меньшей мере, 10 мас.% воды.

27. Набор по п.26, где субстрат включает воду от 10 до 99 мас.%.

28. Способ получения косметической композиции с использованием набора по п.1, включающий:приведение влажного субстрата, содержащего биоцеллюлозу, в контакт с порошковой косметической композицией, которая является, по меньшей мере, частично растворимой в воде, чтобы вызвать, по меньшей мере, частичное растворение указанной порошковой косметической композиции при контакте с субстратом.

29. Способ по п.28, при котором контакт осуществляют непосредственно перед применением.

30. Способ по п.28, при котором субстрат непосредственно перед применением смачивают с помощью воды или водного раствора.

31. Способ косметической обработки с применением композиции, полученной способом по п.28, при котором косметическую композицию наносят на ороговевший материал.

32. Способ по п.31, при котором композицию перед нанесением на ороговевший материал сначала наносят в виде порошка на субстрат.

33. Способ по п.31, при котором порошковую косметическую композицию сначала наносят на ороговевший материал, а затем покрывают субстратом.

34. Способ по п.31, при котором субстрат оставляют на месте на ороговевшем материале в течение от 5 мин до 12 ч.