Защитное средство для нейронных клеток сетчатки, содержащее в качестве активного ингредиента производные индазола

Защитное средство для нейронных клеток сетчатки, содержащее в качестве активного ингредиента производные индазола

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к защитному средству для нейронных клеток сетчатки, содержащему в качестве активного ингредиента производные индазола.

Уровень техники

Сетчатка является тканью толщиной от 0,1 до 0,5 мм, состоящая из десяти слоев внутренней оболочки, слоя нервных волокон, слоя ганглионарных клеток, слоя внутренних сетевидных клеток, внутреннего нуклеарного слоя, слоя внешних сетевидных клеток, внешнего нуклеарного слоя, внешней оболочки, слоя фоторецепторных клеток и слоя пигментного эпителия сетчатки, и в ней присутствуют группы нейронных клеток сетчатки, включающих фоторецепторные клетки, биполярные клетки, ганглионарные клетки, горизонтальные клетки, безаксонные клетки и клетки Мюллера (Muller).

Нейронные клетки сетчатки играют важную роль в получении и передаче визуальной информации, например, превращением светового раздражения в электрический сигнал и передачей сигнала в мозг.

Более точное описание механизма такой передачи состоит в превращении визуальной информации из глаз в электрический сигнал через фоторецепторные клетки и передаче к ганглионарным клеткам посредством горизонтальных, биполярных и/или безаксонных клеток. Затем электрический сигнал передается в мозг по зрительному нерву, который представляет собой пучок волокон зрительных нервов, включающих аксоны ганглионарных клеток.

При повреждении указанных нейронных клеток сетчатки по различным причинам гомеостаз (функция снабжения кислородом или питания нейронных клеток сетчатки путем кровообращения сетчатки и т.п.) нейронных клеток сетчатки не сохраняется и передача визуальной информации в мозг подавляется (ингибируется). Например, широко известно, что дисфункция нейронных клеток сетчатки вызывается различными болезнями сетчатки, такими как закупорка сосудов сетчатки, диабетическая ретинопатия, ишемическая зрительная невропатия, глаукома, дегенерация желтого пятна, пигментная дегенерация сетчатки и болезнь Лебера (Leber) (Brain Res. Bull., 62(6), 447-453 (2004)).

Ранее было установлено, что гибель нейронных клеток сетчатки из-за ишемии сетчатки является одной из причин поражения нейронных клеток сетчатки и были опубликованы следующие случаи и им подобные, касающиеся гибели нейронных клеток сетчатки из-за ишемии сетчатки (JP-A-2003-146904 и Nature Rev., 2, 448-459 (2003)).

1. Механизм гибели нейронных клеток сетчатки из-за ишемии сетчатки подобен механизму гибели церебральных нейронных клеток во время церебральной ишемии.

2. Вкратце ишемия сетчатки наступает при селективном поражении внутреннего слоя сетчатки (внутренний сетчатый слой).

3. Может наблюдаться избыточное выделение глутамата при ишемии сетчатки.

4. Гибель нейронных клеток сетчатки вызывается инъекцией возбуждающих аминокислот, например глутамата, в стекловидное тело.

5. Сверхраздражение, передаваемое N-метил-D-аспартат(NMDA) рецепторами сетчатки, способствует притоку кальция (Са) в клетки, что приводит к повреждению клеток путем индуцирования монооксида азота (NО).

Исходя из этого, полагают, что лекарственное средство, например ингибитор нейротоксичности глутамата, антагонист NMDA рецепторов или ингибитор синтеза NO применимо для лечения глазных болезней, вызванных поражением нейронных клеток сетчатки, и проведены различные исследования.

Например, JP-A-2001-072591 раскрывает защитное средство для нейронных клеток сетчатки, включая нипрадиол, который является одним из β-блокаторов в качестве активного ингредиента. WO 01/056606 раскрывает защитное средство для зрительных ганглионарных клеток, включающее рецепторы белков антагонистов интерлейкина-1 в качестве активного ингредиента. WO 03/004058 раскрывает защитное средство для зрительных ганглионарных клеток, включающее антагонист α₁ рецепторов, таких как гидрохлорид буназозина в качестве активного ингредиента. Experimental Eye Res., 72, 479-486 (2001) раскрывает защитный эффект нейронных клеток латанопроста, который является одним из производных простагландина и т.д.

С другой стороны, WO 2005/035506 раскрывает производные индазола в качестве ингибитора Rho киназы.

Однако указанная публикация совсем не раскрывает защитного эффекта производных индазола по отношению к нейронным клеткам сетчатки.

Краткое описание чертежей

Чертеж представляет график, представляющий отношения выживаемости групп тестируемых соединений, когда выживаемость среды дополнительной группы после добавления глутамата принята за 100%.

Раскрытие изобретения

Цели изобретения

Представляется весьма интересным найти новое медицинское применение производных индазола.

Средства достижения целей

Соответственно настоящее изобретение включает интенсивные исследования с целью нахождения новых применений производного индазола. В результате было установлено, что производное индазола ингибирует гибель нейронных клеток сетчатки, вызываемую глутаматом, в эмбриональных нейронных клетках сетчатки крыс, другими словами производное индазола воздействует непосредственно на нейронные клетки сетчатки, демонстрируя защитный эффект по отношению к нейронным клеткам, что позволило создать настоящее изобретение.

"Производное индазола" в описании обозначает соединение, представленное следующей общей формулой (1) или его солью, и настоящее изобретение направлено на создание защитного средства для нейронных клеток сетчатки, включающего соединение или его соль в качестве активного ингредиента.

[Кольцо Х представляет бензольное или пиридиновое кольцо;

R¹ и R² являются одинаковыми или различными и представляют атомы водорода или алкильную группу;

R¹ и R² могут быть соединены и образовывать циклоалкановое кольцо;

R³ представляет гидроксидную группу, алкоксигруппу, арилоксигруппу, циклоалкильную группу, алкиламиногруппу, ариламиногруппу, нитрогруппу, цианогруппу или моноциклический гетероцикл; и

циклическая часть бензольного кольца, пиридинового кольца, циклоалканового кольца, алкоксигруппа, арилоксигруппа, циклоалкильную группа, ариламиногруппа или гетероцикл с одним кольцом, определенные выше, могут иметь один или более заместитель, выбранный из атомов галогена, алкоксигруппы и алкильной группы и алкильной частью алкильной группы, алкоксигруппы или алкиламиногруппы, определенных выше, могут иметь один или более заместитель, выбранный из атомов галогена и алкоксигруппы.

Здесь и далее будут применяться те же самые определения.

Соответствующие кольца, атомы и группы, определенные в настоящем описании, будут описаны в деталях далее.

"Циклоалкановое кольцо" относится к циклоалкановому кольцу с 3-8 атомами углерода. Отдельные примеры указанных колец включают циклопропан, циклобутан, циклопентан, циклогексан, циклогептан, циклооктан и т.п.

"Моноциклический гетероцикл" относится к насыщенному или ненасыщенному моноциклическому гетероциклу, имеющему один или более гетероатом, выбранный из атомов азота, атомов кислорода и атомов серы в кольце с 2-6 атомами углерода.

Отдельные примеры "насыщенного моноциклического гетероцикла" включают пирролидин, пиразолидин, имидазолидин, триазолидин, пиперидин, гексагидропиридазин, гексагридропиримидин, пиперазин, гомопиперидин, гомопиперазин и т.п., каждый из которых содержит атом азота в кольце; тетрагидрофуран, тетрагидропиран и т.п., каждый из которых содержит атом кислорода в кольце; тетрагидротиофен, тетрагидропиран и т.п., каждый из которых содержит атом серы в кольце; оксазолидин, изоксалидин, морфолин и т.п., каждый из которых содержит атом азота и атом кислорода в кольце; тиазолидин, изотиазолидин, тиоморфолин и т.п., каждый из которых содержит атом азота и атом серы в кольце и т.п.

Отдельные примеры "ненасыщенного моноциклического гетероцикла" включают дигидропиррол, пиррол, дигидропиразол, пиразол, дигадроимидазол, имидазол, дигидротриазол, триазол, тетрагидропиридин, дигидропиридин, пиридин, тетрагидропиридазин, дигидропиридазин, пиридазин, тетрагидропиримидин, дигидропиримидин, пиримидин, тетрагидропиразин, дигидропиразин, пиразин и т.п., каждый из которых содержит атом азота в кольце; дигидрофуран, фуран, дигидропиран, пиран и т.п., каждый из которых содержит атом кислорода в кольце; дигидротиофен, тиофен, дигидротиопиран, тиопиран и т.п., каждый из которых содержит атом серы в кольце; дигидрооксазол, оксазол, дигидроизоксазол, изоксазол, дигидрооксазин, оксазин и т.п., каждый из которых содержит атом азота и атом кислорода в кольце; дигидротиазол, тиазол, дигидроизотиазол, изотиазол, дигидротиазин, тиазин и т.п., каждый из которых содержит атом азота и атом серы в кольце и т.п.

"Атом галогена" относится к фтору, хлору, брому или йоду.

"Алкил" относится к неразветвленному или разветвленному алкилу с 1-6 атомами углерода. Отдельные примеры включают метил, этил, н-пропил, н-бутил, н-пентил, н-гексил, изопропил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, изопентил и т.п.

"Алкокси" относится к неразветвленной или разветвленной алкоксигруппе с 1-6 атомами углерода. Его отдельные примеры включают метокси, этокси, н-пропокси, н-бутокси, н-пентокси, н-гексилокси, изопропокси, изобутоксил, втор-бутокси, трет-бутокси, изопентокси и т.п.

"Арилокси" относится к моноциклической ароматической углеводородоксигруппе или бициклической или трициклической конденсированной углеводородоксигруппе с 6-14 атомами углерода. Отдельные примеры включают фенокси, нафтилокси, антрилокси, фенантрилокси и т.п.

"Циклоалкил" относится к циклоалкилу с 3-8 атомами углерода. Отдельные примеры включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил и т.п.

"Алкиламино" относится к моноалкиламино или диалкиламиногруппам с 1-12 атомами углерода. Отдельные примеры включают метиламино, этиламино, этилметиламино, диметиламино, диэтиламино, дигексиламино и т.п.

"Ариламино" относится к моноариламино или диариламино группам с 6-28 атомами углерода. Отдельные примеры включают фениламино, нафтиламино, метилфениламино, этилфениламино, дифениламино и т.п.

В случае когда "производное индазола" имеет "свободную гидроксигруппу", "свободную аминогруппу", "свободную алкиламино группу", "свободную ариламино группу" или "моноцикличный гетероцикл со свободным атомом азота" в качестве заместителя, указанные группы могут быть защищены защитной группой.

Защитная группа для "свободной гидрокси группы" относится к группе общеизвестной в качестве защитной группы для "свободной гидрокси группы", включая замещенную или незамещенную алкильную группу или незамещенную алкенильную группу, например метоксиметильную группу, бензильную группу, тритильную* (трифенилметильную) группу, 4-метоксифенилметильную группу, бензоилоксиметильную группу, метальную группу или аллильную группу; замещенную или незамещенную гетероциклическую группу, например 3-бромтетрагидропиранильную группу, тетрагидропиранильную группу или тетрагидрофуранильную группу; замещенную или незамещенную алкилкарбонильную группу или замещенную или незамещенную арилкарбонильную группу, например, трифторацетильную группу, ацетильную группу, 4-хлорбензоильную группу или бензоильную группу; замещенную или незамещенную алкилоксикарбонильную группу, незамещенную алкенилоксикарбонильную или замещенную или незамещенную арилоксикарбонильную группу, например бензилоксикарбонильную группу, 4-метоксибензилоксикарбонильную группу 9-флуоренилметоксикарбонильную группу, метоксикарбонильную группу, этоксикарбонильную группу, изобутоксикарбонильную группу, трет-бутоксикарбонильную группу, винилоксикарбонильную группу, аллилоксикарбонильную группу, 4-нитрофенилоксикарбонильную группу или фенилоксикарбонильную группу; замещенную силильную группу, например триметилсилильную группу, триэтилсилильную группу, триизопропилсилильную группу, трет-бутилдиметилсилильную группу, трет-бутилдифенилсилильную группу и т.п.

Защитная группа для "свободной аминогруппы" "свободной алкиламиногруппы", "свободной ариламиногруппы", или "моноциклического гетероцикла со свободным атомом азота" относится к группе, общеизвестной в качестве защитной группы для "свободной аминогруппы" "свободной алкиламиногруппы", "свободной ариламиногруппы", или "моноциклического гетероцикла со свободным атомом азота", включая замещенную алкильную группу или незамещенную алкенильную группу, например бензильную группу, тритильную группу, дифенилметильную группу, (4-метоксифенил)дифенилметильную группу или аллильную группу; гидрокарбонильную группу, например формильную группу; замещенную или незамещенную алкилкарбонильную группу, замещенную или незамещенную арилкарбонильную группу или незамещенную гетероциклическую карбонильную группу, например трихлорацетильную группу, трифторацетильную группу, ацетильную группу, 4-хлорбензоильную группу, бензоильную группу или пиконоильную группу; замещенную или незамещенную алкоксикарбонильную группу или замещенную или незамещенную арилоксикарбонильную группу, например, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонильную группу, бензилоксикарбонильную группу, дифенилметоксикарбонильную группу, метоксикарбонильную группу, изобутоксикарбонильную группу, трет-бутоксикарбонильную группу, 3-нитрофеноксикарбонильную группу или феноксикарбонильную группу; замещенную или незамещенную алкилсульфонильную группу или замещенную или незамещенную арилсульфонильную группу, например, бензилсульфонильную группу, толилсульфонильную группу, метилсульфонильную группу, 4-хлорфенилсульфонильную группу, 2,4,6-триметилфенилсульфонильную группу или фенилсульфонильную группу и т.п.

Кроме того, "атом азота индазольного кольца" "производного индазола" может быть защищен защитной группой.

Защитная группа для атома азота индазольного кольца относится к группе, общеизвестной в качестве защитной группы для "атома азота индазольного кольца", включая замещенную или незамещенную алкильную группу или незамещенную алкенильную группу, например бензильную группу, тритильную группу, дифенилметильную группу, 4-метоксифенилметильную или аллильную группу; гидрокарбонильную группу, например формильную группу; замещенную или незамещенную алкилкарбонильную группу, замещенную или незамещенную арилкарбонильную группу или незамещенную гетероциклическую карбонильную группу, например трихлорацетильную группу, трифторацетильную группу, ацетильную группу, 4-хлорбензоильную группу, бензоильную группу или пиконоильную группу; замещенную или незамещенную алкилоксикарбонильную группу или замещенную или незамещенную арилоксикарбонильную группу, например, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонильную группу, бензилоксикарбонильную группу, дифенилметоксикарбонильную группу, метоксикарбонильную группу, изобутоксикарбонильную группу, трет-бутоксикарбонильную группу, феноксикарбонильную группу или 3-нитрофеноксикарбонильную группу; замещенную или незамещенную алкилсульфонильную группу, замещенную или незамещенную арилсульфонильную группу, например, бензилсульфонильную или толилсульфонильную метилсульфонильную группу, 4-хлорфенилсульфонильную группу, 2,4,6-триметилфенилсульфонильную группу или фенилсульфонильную группу; замещенную или незамещенную гетероциклическую группу, например, 3-бромтетрагидропиранильную группу, тетрагидропиранильную группу или тетрагидрофуранильную группу и т.п.

Что касается "более групп" в настоящем изобретении, соответствующие группы могут быть одинаковыми или отличатся друг от друга. Кроме того, "группа", как использовано в описании, также включает соответствующие атомы и кольца. "Более", как использовано в описании, относится к максимальному числу возможных заместителей в группе или кольце и предпочтительно относится к 2 или 3.

"Соль" в настоящем изобретении особо не ограничена, если только она является фармацевтически приемлемой солью. Отдельные примеры включают соли неорганических кислот, например соляной кислоты, бромистоводородной кислоты, йодистоводородной кислоты, азотной кислоты, серной кислоты или фосфорной кислоты; соли органической кислоты, например уксусной кислоты, фумолевой кислоты, малеиновой кислоты, янтарной кислоты, лимонной кислоты, винной кислоты, адипиновой кислоты, молочной кислоты, метансульфоновой кислоты, трифторметансульфоновой кислоты или р-толуолсульфоновой кислоты; соли щелочных металлов, например лития, натрия или калия; соли щелочноземельных металлов, например кальция или магния; соли четвертичного аммония, метилйодид и т.п. и указанные соли также включены в настоящее изобретение.

В случае наличия геометрических или оптических изомеров в "производном индазола", указанные изомеры также включены в настоящее изобретение.

"Производное индазола" может быть в форме гидрата или сольвата.

Кроме того, в случае наличия протонной таутомерии в "производном индазола", указанные таутомерные изомеры также включены в настоящее изобретение.

(a) Предпочтительные примеры "производного индазола" настоящего изобретения включают соединения, в которых соответствующие группы являются группами, описанными ниже, в соединениях, представленных общей формулой (1) и их солями:

(а1) кольцо Х представляет бензольное кольцо или пиридиновое кольцо; и/или

(а2) R¹ и R² являются одинаковыми или различными и представляют алкильную; и/или

(а3) R³ представляет алкоксигруппу, циклоалкильную группу, алкиламиногруппу, нитрогруппу, цианогруппу или моноциклический гетероцикл; и/или

(а4) алкильная часть алкоксигруппы, определенной выше в (а3), может быть замещена одним или несколькими атомами галогена.

То есть предпочтительные примеры включают в соединениях, представленных общей формулой (1), соединения, которые соответствуют одному или комбинации двух или более пунктов, выбранных из вышеуказанных (а1), (а2), (а3) и (а4) и их солей.

(b) более предпочтительные примеры "производного индазола" настоящего изобретения включают соединения, в которых соответствующие группы являются группами, представленными ниже, в соединениях общей формулы (1) и их солей:

(b1) кольцо Х представляет бензольное кольцо или пиридиновое кольцо; и/или

(b2) R¹ и R² представляют метальную группу; и/или

(b3) R³ представляют метоксигруппу, дифторметоксигруппу, циклопропильную группу, дифениламиногруппу, нитрогруппу, цианогруппу, пирролидиновое кольцо или изоксазольное кольцо.

То есть более предпочтительные примеры включают в соединениях, представленных общей формулой (1), соединения, которые соответствуют требованиям одного или комбинации двух или более пунктов, выбранных из вышеуказанных (b1), (b2) and (b3) и их солей.

(c) Кроме того, в соединениях общей формулы (1) "производное индазола", которое соответствует требованиям вышеуказанных пунктов (а) или (b) и в которых кольцо Х находится в положении 5 индазольного кольца, еще более предпочтительно.

(d) Кроме того, в соединениях общей формулы (1) "производное индазола", которое соответствует требованиям вышеуказанного пункта (с), и в котором, в случае когда кольцо X, связанное с индазольным кольцом, находится в положении 1, заместитель, представленный следующей общей формулой (2), замещает положение 4 кольца Х, особенно предпочтительно.

(е) Особенно предпочтительные примеры "производного индазола" настоящего изобретения включают следующие соединения и их соли.

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-нитро-1Н-индазол

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-диметиламино-1Н-индазол

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-(пирролидин-1-ил)-1Н-индазол

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-метокси-1Н-индазол

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-циано-1Н-инадзол

5-[5-(1-амино-1-метилэтил)пиридин-2-ил]-4-дифторметокси-1Н-инадзол

5-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-4-(изоксазол-5-ил)-1Н-инадзол

5-[5-(1-амино-1-метилэтил)пиридин-2-ил]-4-циклопропил-1Н-инадзол

"Нейронные клетки сетчатки" в настоящем изобретении означают нейронные клетки, вовлеченные в передачу визуального сигнала в мозг. В частности, это означает фоторецепторные клетки, горизонтальные клетки, биполярные клетки, оптические ганглионарные клетки, безаксонные клетки и т.п.

"Болезнь глаза" в настоящем изобретении означает болезнь глаза, связанную с повреждением нейронных клеток сетчатки или повреждением сетчатки. В частности, это означает дефект поля зрения, закупорку сосудов сетчатки, диабетическую ретинопатию, ишемическую зрительную невропатию, глаукому, дегенерацию желтого пятна, пигментную дегенерацию сетчатки и болезнь Лебера (Leber) и т.п., и предпочтительно это означает дефект поля зрения, закупорку сосудов сетчатки, диабетическую ретинопатию, ишемическую зрительную невропатию, глаукому, дегенерацию желтого пятна, пигментную дегенерацию сетчатки и болезнь Лебера. Настоящее изобретение пригодно для предотвращения или лечения указанных болезней.

"Производное индазола" в настоящем изобретении может быть получено способом, описанным в WO 2005/035506 (PCT/JP2004/015663).

Кроме того, типичный способ получения "производного индазола" в настоящем изобретении будет представлен ниже. К тому же, отдельные способы получения каждого из "производных индазола" будут описаны в деталях в разделе "примеры получения" в примерах, которые будут приведены далее.

Метод синтеза 1

Метод синтеза 2

Метод синтеза 1 или метод синтеза 2: соединение А подвергают реакции сочетания с соединением В или соединение С подвергают реакции сочетания с соединением D в органическом растворителе в присутствии металлического катализатора и/или основания, в результате чего может быть получено "производное индазола".

В случае когда защитная группа применяется для удобства получения в вышеуказанных методах, защитная группа может быть удалена широко известным способом.

Что касается заместителя в кольце Х и/или кольце индазола, необходимый заместитель может быть введен на начальной стадии или также приемлемо, чтобы после получения основного каркаса вышеуказанными способами, необходимый заместитель мог быть введен в основной каркас с применением окисления, восстановления, алкилирования, этерификации, амидирования, оксимирования, реакции дегидратации, реакции снятия защиты, ацетилирования, гидролиза, трифлирирования, реакции сочетания, реакции циклизации и/или широко применяемых синтетических способов, в которых объединяются вышеуказанные реакции.

Способ получения синтетического промежуточного продукта "производного индазола" будет описан в деталях в разделе "примеров получения" в примерах, которые будут приведены далее.

"Производное индазола" настоящего изобретения может применяться орально или парентерально. Примеры лекарственной формы для применения включают таблетки, капсулы, гранулы, порошки, инъекционный раствор, глазные капли и т.п., и они могут быть приготовлены комбинацией широко применяемых способов получения.

Например, формы для орального применения, такие как таблетки, капсулы, гранулы или порошки, могут быть приготовлены сочетанием производного индазола и при необходимости с формообразователем, таким как лактоза, маннит, крахмал, кристаллическая целлюлоза, безводная кремневая кислота, карбонат кальция или гидрофосфат кальция, смазывающее вещество, например стеариновая кислота, стеарат магния или тальк, связующее, например крахмал, гидроксипропилцеллюлоза и поливинилпирролидин, дезинтегрирующий агент, например карбоксиметилцеллюлоза, малозамещенная гидроксипропилметилцеллюлоза или цитрат кальция, глазировочное средство, например гирдоксипропилметилцеллюлоза, макрогол** или силиконовая смола, стабилизатор, например этил p-гидроксибензоат или бензиловый спирт, модификатор лекарственных веществ, например подсластитель, кислый агент или отдушка или тому подобное.

Парентеральные формы, такие как инъекционный раствор или глазные капли могут быть получены сочетанием производного индазола при необходимости вместе с тоническим агентом, например, глицерином, пропиленгликолем, хлоридом натрия, хлоридом калия, сорбитом, маннитом, буфером, например, фосфорной кислотой, фосфатом, лимонной кислотой, ледяной уксусной кислотой, ε-аминокапроновой кислотой или трометамолом***; средством доведения рН, например, соляной кислотой, фосфорной кислотой, ледяной уксусной кислотой, гидроксидом натрия, гидроксидом калия, карбонатом или бикарбонатом натрия, солюбилизатором или дисперсантом, например полисорбатом 80, полиоксиэтилен гидрированным касторовым маслом 60, макроголом 4000, очищенным соевым лецитином или полиоксиэтиленом (160) полиоксипропиленом (30) гликолем, полимерами на основе целлюлозы, например гидроксипропилметилцеллюлозой или гидроксипропилцеллюлозой, регулятором вязкости, например поливиниловым спиртом или поливинилпирролидоном, стабилизатором, например этилендиаминтетрауксусной кислотой или этилендиаминтетраацетатом натрия обычно, применяемыми консервантами или антисептиком, например сорбиновой кислотой, сорбатом калия, хлоридом бензаколиния, хлоридом бензетония, метил n-гидроксибензоатом, пропил n-гидроксибензоатом или хлорбутанолом, успокаивающим средством, например хлорбутанолом, бензиловым спиртом или лидокаином и т.п.

В случае инъекционного раствора или глазных капель желательно, чтобы рН доводился от 4,0 до 8,0 и отношение осмотического давления доводилось до значения около 1,0.

Настоящее изобретение также относится к способу защиты нейронных клеток сетчатки, включающему введение пациенту эффективного количества вышеуказанного соединения или его соли, способ предотвращения или лечения повреждения нейронных клеток сетчатки, включающий введение пациенту эффективного количества вышеуказанного соединения или его соли.

Доза "производного индазола" может быть соответственно выбрана для применения в зависимости от симптомов, возраста, лекарственной формы и т.п. Например, в случае лекарственной формы для перорального приема обычно 0,01-1000 мг в день, предпочтительно 1-100 мг в день могут назначаться для разового приема или разделены на несколько приемов в день.

Кроме того, в случае глазных капель, обычно глазных капель, содержащих производное индазола с концентрацией от 0,0001 до 10% (мас./об.), предпочтительно 0,01% до 5% (мас./об.), могут быть назначены для разового приема или разделены на несколько приемов в день.

Преимущество настоящего изобретения

Как будет детально описано в разделе «Фармакологические тесты» далее, эффект воздействия производного индазола на гибель нейронных клеток сетчатки, вызванную глутаматом, был проверен с применением эмбриональных нейронных клеток сетчатки крысы. В результате производное индазола действует непосредственно на нейронные клетки сетчатки и ингибирует гибель нейронных клеток сетчатки, вызванную глутаматом.

То есть производное индазола обладает защитным эффектом по отношению к нейронным клеткам сетчатки и полезно для предотвращения и лечения глазных болезней, связанных с повреждением нейронных клеток сетчатки или повреждением сетчатки.

Наилучший способ осуществления настоящего изобретения

Далее будут описаны примеры получения "производного индазола" (примеры 1-15) в соответствии с настоящим изобретением и его синтетических промежуточных продуктов (сравнительные примеры 1-27), примеры приготовления и результаты фармакологических тестов. Однако указанные примеры описаны для обеспечения лучшего понимания настоящего изобретения и не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения. Кроме того, значения Rf в физических характеристиках примеров представлены значениями, измеренными с применением тонкослойной хроматографии (TLC пластины с силикагелем 60F₂₅₄ (торговая марка), произведенные Merck Ltd.), и в химических структурных формулах Me представляет метальную группу, Вn представляет бензильную группу. Ас представляет ацетильную группу. Воc представляет трет-бутоксикарбонильную группу, Tf представляет трифторметансульфоновую группу, TBS представляет трет-бутилдиметилсилильную группу и ТНР представляет тетрагидропиранильную группу, если не оговорено иначе.

[Примеры получения]

(Сравнительный пример 1)

Синтез 1-бром-4-(1-циано-1-метилэтил)бензола (Сравнительное соединение 1-1)

45 г (1100 ммоль) гидрида натрия (60% дисперсия в минеральном масле) добавляют порциями к раствору 100 г (510 ммоль) 4-бромфенилацетонитрила в 1500 мл N,N-диметилформамида при 0°С в токе аргона при перемешивании. Затем 95 мл (1500 ммоль) метилйодида добавляют по каплям при 0°С с перемешиванием, и смесь перемешивают при 10°С в течение 1 часа.

После завершения реакции реакционный раствор постепенно вливают в 900 г насыщенного водного раствора хлорида аммония, затем к нему добавляют 500 мл воды и смесь экстрагируют 2000 мл этилацетата. Органический слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении, в результате чего получают 110 г названного соединения в виде темного коричневого масла (выход: 96%).

Значение Rf: 0,78 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 224,226 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, δ ч./млн): 1,71 (s, 6H), 7,32-7,38 (m, 2H), 7,49-7,54 (m, 2H)

Далее сравнительное соединение 1-2 получают в соответствии со способом получения сравнительного соединения 1-1.

2-Бром-5-(1-циано-1-метилэтил)пиридин (Сравнительное соединение 1-2)

Значение Rf: 0,32 (н-гексан:этилацетат=4:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 225, 227 (M⁺+1)

ИК спектр (КВr, см^-1): 2243

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, δ ч./млн): 1,76 (s, 6H), 7,52 (d, J=8,3 Гц, 1H), 7,67 (dd, J1=8,3 Гц, J2=2,7 Гц, 1H), 8,50 (d, J=2,7 Гц, 1Н)

(Сравнительный пример 2)

Синтез 4-(1-аминокарбонил-1-метилэтил)-1-бромбензола (Сравнительное соединение 2)

250 г (1800 ммоль) триметилсиланолата калия (чистота: 90%) добавляют к раствору 100 г (450 ммоль) 1-бром-4-(1-циано-1-метилэтил)бензола (сравнительное соединение 1-1) в 1000 мл толуола при комнатной температуре в токе аргона при перемешивании и смесь перемешивают в течение 4,5 часов при кипячении с обратным холодильником.

После завершения реакции реакционный раствор охлаждают до комнатной температуры и к нему добавляют по каплям 500 мл воды. Смешанный раствор перемешивают 25 минут при комнатной температуре и образующееся твердое вещество отфильтровывают и промывают 400 мл воды, в результате чего получают 99 г названного соединения в виде белого порошка (выход: 92%).

Точка плавления: 139-141°С

Значение Rf: 0,23 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 242, 244 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, δ ч./млн): 1,56 (s, 6H), 5,18 (brs, 1H), 5,52 (brs, 1H), 7,25-7,30 (m, 2H), 7,46-7,51 (m, 2H)

(Сравнительный пример 3)

Синтез 5-(1-аминокарбонил-1-метилэтил)-2-бромпиридина (Сравнительное соединение 3)

9,60 мл (93,3 ммоль) 35% водного раствора перекиси водорода и 1,86 г (13,5 ммоль) карбоната калия добавляют к раствору 1,50 г (6,66 ммоль) 2-бром-5-(1-циано-1-метилэтил)пиридина (Сравнительное соединение 1-2) в 15 мл диметилсульфоксида при 0°С и смесь перемешивают в течение 15 минут. Затем охлаждение прекращают, и смесь перемешивают на водяной бане в течение 2 часов.

После завершения реакции реакционный раствор выливают в 200 мл воды, и смесь экстрагируют 500 мл 1,2-дихлорэтана. Органический слой последовательно промывают водой и насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении, в результате чего получают 1,63 г названного соединения в виде белого порошка (выход: количественный).

Значение Rf: 0,17 (н-гексан:этилацетат=1:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 243, 245 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, δ ч./млн): 1,61 (s, 6H), 5,36 (brs, 2H), 7,47 (dd, J1=8,Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 7,59 (dd, J1=8,3 Гц, J2=2,7 Гц, 1H), 8,42 (dd, J1=2,7 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н)

(Сравнительный пример 4)

Синтез 1-бром-4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)бензола (Сравнительное соединение 4-1)

260 г (600 ммоль) [бис(трифторацетокси)йодо]бензола добавляют к раствору 99 г (410 ммоль) 4-(1-аминокарбонил-1-метилэтил)-1-бромбензола (Сравнительное соединение 2) в 1000 мл трет-бутанола при комнатной температуре в токе аргона при перемешивании и смесь перемешивают в течение 30 минут при кипячении с обратным холодильником. Затем добавляют 100 мл (1200 ммоль) пиридина и смесь перемешивают в течение 1 часа при кипячении с обратным холодильником.

После завершения реакции реакционный раствор концентрируют при пониженном давлении и 500 г водного раствора 10% мас. лимонной кислоты добавляют к полученному остатку и затем смесь экстрагируют 2000 мл толуола. Органический слой последовательно промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. 200 мл н-гексана добавляют к полученному остатку и получаемое вещество отфильтровывают и промывают 400 мл холодного н-гексана, в результате чего получают 77 г названного соединения в виде светло-коричневого порошка (выход: 60%).

Точка плавления: 92-93°С

Значение Rf: 0,56 (н-гексан:этилацетат=4:1 (об./об.))

Спектр масс (EI, m/z): 313, 315 (M⁺)

¹H-ЯМР спектр (CDCl₃, δ ч./млн): 1,36 (brs, 9H), 1,59 (s, 6H), 4,90 (brs, 1H), 7,24-7,29 (m, 2H), 7,39-7,45 (m, 2H)

Далее сравнительное соединение 4-2 получают в соответствии со способом получения сравнительного соединения 4-1.

2-Бром-5-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)пиридин (Сравнительное соединение 4-2)

Точка плавления: 100-103°С

Значение Rf: 0,53 (н-гексан:этилацетат =2:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 315, 317 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₂, δ ч./млн): 1,37 (brs, 9H), 1,61 (s, 6H), 4,95 (brs, 1H), 7,41 (dd, J1=8,3 Гц, J2=0,7 Гц, 1H), 7,56 (dd, J1=8,3 Гц, J2=2,7 Гц, 1H), 8,40 (dd, J1=2,7 Гц, J2=0,7 Гц, 1Н)

(Сравнительный пример 5)

Синтез 4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)-1-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксабороланил)бензола (Сравнительное соединение 5)

370 мл (350 ммоль) 0,95 М раствора втор-бутиллития в н-гексане добавляют по каплям раствору 50 г (160 ммоль) 1-бром-4-(1-трет-бутоксикарбониламино-1-метилэтил)бензола (сравнительное соединение 4-1) в 800 мл диэтилового эфира при -78°С в токе аргона при перемешивании и смесь перемешивают в течение 30 минут. Затем 97 мл (480 ммоль) 2-изопропокси-4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолана добавляют по каплям при -78°С и смесь перемешивают при -50°С 2 часа.

После завершения реакции 300 г насыщенного водного раствора хлорида аммония добавляют к получаемому раствору и 450 мл воды вливают в раствор для разделения смеси на два слоя. Водный слой дважды экстрагируют 300 мл этилацетата и органические слои объединяют, промывают насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. 100 мл н-гексана добавляют к полученному остатку и полученное твердое вещество отделяют фильтрацией последовательно промывают 100 мл смешанного растворителя (н-гексан:этилацетат =4:1 (об./об.)) и 100 мл н-гексана в результате получают 33 г названного соединения в виде белого порошка (выход: 58%).

Точка плавления: 142-144°С

Значение Rf: 0,38 (н-гексан:этилацетат=4:1 (об./об.))

Спектр масс (CI, m/z): 362 (M⁺+1)

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃, δ ч./млн): 1,10-1,50 (m, 21H), 1,61 (s, 6H), 4,93 (brs, 1Н), 7,37-7,42 (m, 2H), 7,74-7,79 (m, 2H)

(Сравнительный пример 6)

Синтез 5-йод-1Н-индазол (Сравнительное соединение 6)

95 мл (570 ммоль) 6 N соляной кислоты добавляют по каплям к раствору 25,0 г (188 ммоль) 5-амино-1Н-индазол в 320 мл N,N-диметилформамиде при 0°С и смесь перемешивают в течение 20 минут. Затем раствор 13,6 г (197 ммоль) нитрата натрия в 75 мл воды добавляют по каплям, сохраняя при этом температуру реакционного раствора не выше 10°С. После перемешивания смеси в течение 30 минут добавляют 32,8 г (198 ммоль) йодида калия отдельными порциями, затем убирают охлаждение для постепенного нагревания смеси до комнатной температуры.

После завершения реакции реакционный раствор вливают