Способ получения хламидийного антигена
Изобретение относится к области медицины и касается способа получения хламидийного антигена и может быть использовано в области производства препаратов для диагностики хламидийных инфекций человека и животных. Сущность изобретения включает введение беспородным белым мышам гидрокортизона в количестве не менее 0,3 мг на 1 г веса, заражение их хламидиями, получение из селезенок и печени 10% суспензии, ее центрифугирование при 2000 об/мин в течение 10 минут и использование надосадочной жидкости в качестве антигенного материала. Преимущество изобретения заключается в повышении выхода антигенного материала. 1 табл.
Реферат
Изобретение относится к области медицины, а именно к медицинской микробиологии, и может найти применение в области производства препаратов для диагностики хламидийных инфекций человека и животных.
Известен способ получения хламидийного антигена из инфицированных желточных мешков эмбрионов кур (патент РФ 2223497, приоритет от 12.07.2002). Оболочка желточных мешков куриных эмбрионов не является универсальной системой для накопления хламидий и хламидофил. Кроме того, данный способ не позволяет получить требуемый выход хламидийного антигена.
Изобретение направлено на создание универсальной системы накопления всех видов хламидий и хламидофил, обеспечивающей повышенный уровень выхода антигена хламидий, что достигается следующим образом.
Заявляемый способ предусматривает заражение биологического материала хламидиями. В отличие от прототипа до заражения в биологический материал вводят гидрокортизон в количестве не менее 0,3 мг на 1 г биологического материала.
Препарат гидрокортизон внесен в Регистр лекарственных средств России (Энциклопедия лекарств, 2004, №11, с.234). Обычно применяется для лечения аллергических реакций, бронхиальной астмы и др. Применение препарата в заявляемом способе обеспечивает выход хламидийного антигена в требуемом количестве. Данное свойство препарата ранее не описано. Доза и сроки введения препарата рассчитаны в соответствии с рекомендуемыми дозами и установленными сроками введения гидрокортизона ацетата.
Изобретение реализуется следующим образом. Беспородным белым мышам массой 16-18 г вводят дозу ацетатной эмульсии гидрокортизона (табл.1) внутримышечно за 3 часа до заражения хламидиями или хламидофилами. Вскрытие животных производят на четвертые сутки после инфицирования при заражении хламидофилами и на пятые сутки при заражении хламидиями. При исследовании мазков отпечатков печени и селезенки отмечается высокая концентрация возбудителя 95-100 в одном поле зрения. Из селезенок и печени готовят 10% суспензию из расчета 3,0 мл фосфатно-буферного раствора на одну селезенку и 6,0 мл фосфатно-буферного раствора на одну печень. Суспензию центрифугируют в холодовой центрифуге при 2000 оборотов в минуту 10 минут. Надосадочную жидкость используют в качестве антигенного материала.
Таблица 1 | |||
Примеры реализации изобретения | |||
№ п/п | Доза гидрокортизона, мг | Выход антигена, мл 10% суспензии | Количество возбудителей в поле зрения при исследовании мазков отпечатков |
1 | 0,2 | 6 | 80 |
2 | 0,3 | 9 | 95 |
3 | 0,4 | 9 | 98 |
4 | 0,5 | 9 | 100 |
5 | 0,6 | 9 | 100 |
Из представленных данных видно, что начиная с дозы гидрокортизона 0,3 мг количество антигена достигает требуемой величины.
Способ получения хламидийного антигена, характеризующийся тем, что беспородным белым мышам вводят гидрокортизон в количестве не менее 0,3 мг на 1 г, заражают их хламидиями, из селезенок и печени получают 10%-ную суспензию, которую центрифугируют при 2000 об/мин в течение 10 мин и надосадочную жидкость используют в качестве антигенного материала.