Lactobacillus fermentum ess-1, dsm17851, и его применение для лечения и/или профилактики кандидоза и инфекций мочевых путей

Lactobacillus fermentum ess-1, dsm17851, и его применение для лечения и/или профилактики кандидоза и инфекций мочевых путей

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к области пробиотических бактерий, обладающих благоприятным воздействием на дрожжевые грибковые инфекции Candida, то есть кандидоз, и на бактериальные инфекции. Изобретение также относится к фармацевтическим композициям и продуктам для личной гигиены, содержащим такие бактерии, и к медицинскому применению таких бактерий.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Обычная флора мочеполовой области представлена сложной экосистемой, содержащей более 50 различных видов бактерий (Hill et al., Scand. J. Urol. Nephrol. 1984(86 (suppl.)):23-29). В нормальной флоре доминируют бактерии, принадлежащие к роду Lactobacillus (LB), являющиеся грамположительными палочками, приспособленными к окружающей среде влагалища фертильной женщины. Эти бактерии также способствуют поддержанию специфической микросреды и экологического баланса во влагалище. pH в среде влагалища составляет менее 4,5. Дрожжевые грибки и энтеробактерии присутствуют в ограниченном количестве или отсутствуют (Redondo-Lopez et al, Rev. Inf. Dis. 1987(12):856-872).

Некоторые штаммы LB подавляют рост потенциально патогенных бактерий посредством различных механизмов. В результате метаболизма LB образуются органические кислоты, в частности молочная кислота и уксусная кислота, которые способствуют низкому pH во влагалищной жидкости, что является неблагоприятным для многих других видов микробов. LB также могут продуцировать растворимые вещества, которые напрямую подавляют рост потенциально патогенных бактерий и дрожжевых грибков. Также они могут продуцировать пероксид водорода, который является токсичным для бактерий и грибков. Такие характеристики подавления могут значительно отличаться у разных штаммов LB (Hooton et al., JAMA 1990(265):64-69).

Так же, как и мочеполовая область, кожа заселена группой микроорганизмов, образующих ее нормальную флору. Количество и особенности микроорганизмов различаются для различных участков кожи, при этом во влажных и липидных областях кожи присутствует больше микроорганизмов на единицу площади. Это вместе со структурным барьером кожи предоставляет организму отличную защиту против вторжения микробов. Число бактерий на коже варьирует в диапазоне от нескольких сотен на см² на сухих поверхностях предплечья и спины до десятков тысяч на см² во влажных областях, таких как подмышки и пах. Нормальная флора играет важную роль в предотвращении заселения кожи «чужеродными» организмами, но ее необходимо контролировать в целях предотвращения кожных инфекций.

Желудочно-кишечный (ЖК) тракт, от рта до ануса, содержит богатую флору из более чем 500 различных видов бактерий, некоторые из которых имеют важные для здоровья функции. ЖК флора состоит из около 10¹⁴ бактерий и небольшого числа дрожжевых грибков-комменсалистов. Вследствие изменения обычного состояния здоровья вид Candida может чрезмерно разрастаться и вызывать поверхностные инфекции. Кроме того, чрезмерное разрастание вида Candida среди пациентов с ослабленным иммунитетом может привести к системной инфекции, которая является очень серьезным состоянием.

Ослабление или дисбаланс естественной защитной системы может позволить потенциально патогенным микроорганизмам вызвать клиническую инфекцию, например, в связи с лекарственной терапией, недостаточной личной гигиеной или миграциями в микрофлоре или в слизистых оболочках. Миграции в микрофлоре могут быть также выявлены в связи с различными патогенными состояниями.

Дрожжевые организмы всегда присутствуют в организме человека, но их чрезмерное разрастание обычно предотвращается местной микробной флорой. Кандидоз представляет собой инфекцию, вызываемую дрожжевыми организмами Candida, которая влияет на широкий спектр систем органов. Чаще всего инфекция вызывается Candida albicans, и C. glabrata. Менее часто инфекция вызывается C.tropicalis, C. parapsilosis и C. krusen, и реже возбудителями болезни являются другие виды Candida. Кандидоз часто инициируется гормональными изменениями, например, имеющими место во время беременности, менструации и применения противозачаточных таблеток. Другими распространенными причинами являются дисбалансы pH во влагалище, сахарный диабет и лечение антибиотиками, вызывающие нарушение хрупкого микробиологического равновесия организма. Естественная природная защита против инфекций Candida включает механические барьеры, неспецифичные противомикробные вещества (полипептиды, щелочные протеазы), фагоцитоз и специфический иммунный ответ (T- и B-лимфоциты), гиперчувствительность замедленного типа.

У иммунокомпетентных индивидуумов любая теплая, влажная часть тела, подверженная воздействию окружающей среды, является восприимчивой к инфекциям, вызывающим вагинит; влагалищные высыпания; кандидозный стоматит; конъюнктивит; эндофтальмит; опрелости; и инфекции на ногтях, прямой кишке и других кожных складках. У пациентов с иммунной недостаточностью могут появляться системные заболевания, такие как миокардит, абсцесс печени, легочная инфекция, инфекция ЦНС и хроническое заболевание. Кандидоз может распространяться из локальной инфекции и вызывать системную инфекцию с серьезными осложнениями, такими как миокардит, эндофтальмит и абсцесс печени. Таким образом, очень важным является нахождение эффективных средств лечения и средств профилактического лечения кандидоза с целью предотвращения развития серьезных состояний у объектов.

Кандидозный стоматит - это стандартное название инфекции полости рта, вызываемой грибками Candida albicans, которая поражает влажные поверхности вокруг губ, внутри щек, а также на языке и небе. Кандидозный стоматит распространен среди лиц с диабетом или раздражением от зубных протезов. Также кандидозом часто поражаются лица с такими заболеваниями, как рак или СПИД, каждое из которых подавляет иммунную систему.

Инфекция Candida ротовой полоти может распространиться на пищевод, вызывая эзофагит. Данная инфекция часто встречается у лиц со СПИДом и лиц, подвергающихся противораковой химиотерапии.

Инфекции Candida также часто встречаются на влажных участках кожи, таких как области кожи, покрытые подгузниками, руки людей, регулярно носящих резиновые перчатки, края кожи в основании ногтей пальцев рук, особенно на руках, подвергающихся воздействию влаги, паховая область и область вокруг бороздки ягодиц, и кожные складки под большими грудями.

Вагинит представляет собой воспаление слизистой оболочки влагалища, вызываемое бактериями или грибками. Вагинит сам по себе безвреден на ранней стадии, но может вызывать преждевременные роды у беременных женщин или приводить к бесплодию.

Вагинальный кандидоз вызывает зуд и раздражение влагалища с белесыми вязкими выделениями, напоминающими творог. Женщины, имеющие такие симптомы, испытывают сильный дискомфорт, и, кроме того, они подвергаются ограничениям в повседневной жизнедеятельности, например, это касается занятий спортом и сексуальной активности.

Вагинальный кандидоз обычно лечится средствами для местного применения, такими как кремы, суппозитории, желатиновые капсулы, вагинальные таблетки и мази, содержащие противогрибковые препараты. Также существуют лекарственные средства для орального введения. Одна из проблем противогрибковых препаратов состоит в повышении устойчивости грибков к препарату при многократном применении. Кроме того, такие лекарства часто неэффективны и для них требуется рецепт врача.

Для лечения кандидоза также применяются домашние средства, такие как нанесение йогурта, ацидофильные таблетки или промывание уксусом. Однако эффективность такого лечения достаточно низкая. Хотя йогурт содержит молочнокислые бактерии, они не предназначены именно для уничтожения или снижения роста грибков. Как ясно квалифицированному специалисту в данной области техники, такое лечение может быть эффективным только для смягчения симптомов незначительных инфекций. Также предлагалось, чтобы бактерии, продуцирующие молочную кислоту, могли доставляться с помощью впитывающих прокладок, таких как подгузники, гигиенические прокладки, ежедневные прокладки и тампоны, согласно описанному, например, в W097/02846, WO99117813, WO99/45099 и WO00/35502.

Имеется возрастающая заинтересованность в нахождении пробиотических микроорганизмов, способных к восстановлению здоровой микробной флоры и/или к предотвращению неконтролируемого роста нежелательных микроорганизмов. Введение таких пробиотических бактерий не имеет негативных побочных эффектов противомикробных препаратов и, предпочтительно, является более эффективным для лечения и/или профилактики грибковых инфекций. Предыдущие попытки выявления таких микроорганизмов имели, однако, различную степень успешности по причине таких проблем, как низкая степень связывания и выживаемости пробиотиков во влагалище, ограниченная эффективность в предотвращении роста грибков, низкая выживаемость при хранении препаратов и т.д. Другими важными характеристиками выбранного пробиотика являются способность к росту в присутствии кислорода и выживаемость при сублимационной сушке. Тем не менее, самым важным для выбранной пробиотической бактерии является эффективность уничтожения и/или предотвращения роста нежелательных грибков и/или бактерий. Ранее была доказана эффективность пробиотических молочнокислых бактерий при лечении и профилактике бактериального вагинита. Однако успешность профилактики и/или лечения вагинального кандидоза была очень ограниченной. Следовательно, все еще существует потребность в разработке эффективных пробиотиков для лечения кандидоза, включая вагинальный кандидоз, которые также могут быть эффективными против бактериальных инфекций, таких как инфекции мочевых путей.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Цель изобретения состоит в предоставлении пробиотической бактерии для лечения и/или профилактики кандидоза и/или бактериальных инфекций, таких как инфекции мочевых путей.

Вышеуказанная цель в первом аспекте изобретения достигается путем предоставления нового штамма Lactobacillus fermentum, обозначаемого Ess-1, который депонирован в Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH и которому был присвоен инвентарный номер DSM17851.

В другом аспекте изобретение относится к применению Lactobacillus fermentum, штамм Ess-1, для использования в качестве лекарственного средства.

В другом аспекте изобретение относится к применению Lactobacillus fermentum, штамм Ess-1, для приготовления фармацевтической композиции для профилактики и/или лечения кандидоза.

В другом аспекте изобретение относится к применению Lactobacillus fermentum, штамм Ess-1, для приготовления фармацевтической композиции для профилактики и/или лечения бактериальных инфекций, таких как инфекции мочевых путей.

В других аспектах изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей Lactobacillus fermentum, штамм Ess-1, в качестве варианта, с фармацевтически приемлемым переносчиком, наполнителем и/или разбавителем.

В еще одном аспекте изобретение относится к гигиеническому изделию, содержащему Lactobacillus fermentum, штамм Ess-1.

Изобретение также относится к способу приготовления фармацевтической композиции для лечения и/или профилактики кандидоза, включающему добавление Lactobacillus fermentum, штамм Ess-1, к вышеупомянутой фармацевтической композиции.

Кроме того, изобретение относится к способу приготовления гигиенического изделия для лечения и/или профилактики кандидоза, включающему добавление Lactobacillus fermentum, штамм Ess-1, в гигиеническое изделие.

Поскольку было показано, что новый штамм Lactobacillus fermentum, штамм Ess-1, обеспечивает отличное подавление роста грибков Candida, то, следовательно, этот новый бактериальный штамм продемонстрировал ценные свойства для применения в приготовлении медикаментов для лечения и/или профилактики кандидоза. Кроме того, изобретение решает задачу предоставления продуктов и изделий для доставки нового бактериального штамма в подходящие для такого лечения и/или профилактики области организма.

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

В контексте данного описания «противомикробный препарат» представляет собой лекарство, применяемое для лечения грибковых инфекций, при этом данное лекарство не является пробиотиком согласно приведенному ниже определению.

«Пробиотик/пробиотики» в контексте данного описания относится к живым микроорганизмам, которые дают пользу для здоровья при введении в адекватных количествах в организм хозяина.

«Кандидоз» в контексте данного описания относится к инфекции, вызываемой грибками Candida, имеющей место в или на любой части тела, например, на коже, в мочеполовой области, в ротовой полости, пищеводе или кишечнике.

«Оральная добавка» в контексте данного описания относится к композиции, которая вводится орально, например, аэрозоль, таблетка, жевательная резинка и т.д.

«Биологически чистая» в контексте данного описания относится к культуре бактерии, которая содержит только один конкретный бактериальный штамм.

Термин «гигиеническое изделие» относится к продуктам, помещаемым рядом с кожей носителя с целью впитывания и удержания выделений организма, таких как моча, фекалии и менструальная жидкость, а также к продуктам, используемым для очищения и ухода за кожей и мочеполовой областью, и которые также могут применяться для доставки пробиотических бактерий в эти области. Изобретение в основном относится к одноразовым гигиеническим изделиям, что означает, что изделия не предназначены для стирки или восстановления другим способом и повторного использования в качестве гигиенического изделия после однократного использования. Примеры одноразовых гигиенических изделий включают влажные салфетки, сухие салфетки, гигиенические товары для женщин, такие как гигиенические салфетки, ежедневные прокладки, гигиенические трусы и тампоны; вкладки для женщин; подгузники и трусы-подгузники для детей и страдающих недержанием взрослых; урологические пакеты; вкладки-подгузники и т.п.

Термин «впитывающая прокладка» относится к продуктам, помещаемым рядом с кожей носителя с целью впитывания и удержания выделений организма, таких как моча, фекалии и менструальная жидкость. Примеры впитывающих прокладок включат гигиенические товары для женщин, такие как гигиенические салфетки, ежедневные прокладки, гигиенические трусы и тампоны; вкладки для женщин; подгузники и трусы-подгузники для детей и страдающих недержанием взрослых; урологические пакеты; вкладки-подгузники и т.п.

Под «гигиенической тканью» понимается любое приспособление для протирки кожи, например, мочалка, тряпка, туалетная бумага, салфетка, влажная салфетка, сухая салфетка и т.п.

Под «липидами» в контексте настоящего изобретения понимаются вещества, которые являются нерастворимыми в воде, но растворимыми в органическом растворителе.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На Фиг. 1 показано среднее подавление роста для трех штаммов, каждый из которых - C. albicans и C. glabrata. ■=C. albicans, □=C. glabrata. *pH dMRSs приведен к самому низкому зарегистрированному pH для всех фильтратов (pH 3,7). 0 означает отсутствие наблюдаемого роста, 5 означает очень хороший рост.

На Фиг. 2 показано подавление роста для C. albicans в 50 мМ аскорбиновой кислоте (Фиг. 2a) и 50 мМ пропионовой кислоте (Фиг. 2b), в фильтрате Ess-1 и в фильтрате Ess-1 с добавлением 50 мМ аскорбиновой кислоты (Фиг. 2a) и 50 мМ пропионовой кислоты (Фиг. 2b). 0 означает отсутствие наблюдаемого роста, 5 означает очень хороший рост.

Фиг. 3 показывает продуцирование янтарной кислоты, уксусной кислоты и пропионовой кислоты в пяти различных штаммах Lactobacillus, включая Ess-1. Штаммы были выращены в питательной среде MRS, и продуцирование кислоты регистрировалось в питательной среде после стерильной фильтрации надосадочной жидкости.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к новому штамму Lactobacillus fermentum, далее в данном документе называемому Ess-1, депонированному согласно Будапештскому соглашению в Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (Mascheroder Weg 1b, D-38124 Braunschweig), с присвоением инвентарного номера DSM17851 (депозитор Essum AB, Box 3160, SE 90304 Umea, Sweden, депонировано 6 января 2006). Штамм продемонстрировал уникальные свойства в лечении и/или профилактике инфекций Candida, то есть кандидоза, благодаря своим свойствам подавления роста дрожжевых грибков Candida. Также штамм Ess-1 продемонстрировал ценные свойства при лечении и/или профилактике бактериальных инфекций, таких как инфекции мочевых путей. Кроме того, Ess-1 остается жизнеспособным в течение длительных периодов хранения, что является важным при эксплуатации продуктов, содержащих бактерии. Кроме того, Ess-1 не является строго анаэробным и может расти в присутствии кислорода и демонстрировать хорошую выживаемость при сублимационной сушке. Штамм Ess-1 Lactobacillus fermentum изобретения является биологически чистым.

Как показано в Примере 1, Ess-1 демонстрирует уникальное подавление роста различных штаммов дрожжевых грибков Candida. В этом эксперименте были проверены свойства большого количества штаммов Lactobacilli по подавлению роста Candida. 23 лучших штамма были отобраны для дальнейшего изучения. Подавление роста для Ess-1 более чем в два раза превышает показанное лучшим из 23 различных штаммов Lactobacillus, использованных для сравнения. Также было продемонстрировано, что Ess-1 подавляет рост ряда бактериальных штаммов, о которых известно, что они вызывают инфекцию мочевых путей. Кроме того, было продемонстрировано, что Ess-1 может заселять влагалище и выживать в нем после введения во влагалище. Важно, что Ess-1 выживает во влагалище также и во время менструации. Заселение и выживание in vivo после введения объекту является важным фактором успешного выполнения пробиотиком задач, для которых он предназначен. При этом отсутствие колонизации и заселения или их ограниченность in vivo часто ограничивает практическую применимость пробиотических бактерий, продуцирующих молочную кислоту. Кроме того, ограниченная выживаемость при хранении и обработке продуктов, содержащих продуцирующие молочную кислоту бактерии, часто приводит к применению неэффективных продуктов.

В первом аспекте настоящее изобретение относится к новому штамму Lactobacillus fermentum, обозначенному «штамм Ess-1», который был депонирован в Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH и которому был присвоен инвентарный номер DSM17851.

Поскольку штамм Ess-l обладает свойствами подавления роста Candida и бактерий, вызывающих инфекции мочевых путей, то настоящее изобретение также относится к медицинскому применению этого штамма. В частности, изобретение относится к применению штамма Ess-1 для приготовления фармацевтической композиции для профилактики и/или лечения кандидоза, предпочтительно, у объекта-млекопитающего, более предпочтительно, у объекта-человека. В другом предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к применению штамма Ess-1 для приготовления фармацевтической композиции для профилактики и/или лечения кандидоза в мочеполовой области, например, вагинального кандидоза. В другом предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению штамма Ess-1 для приготовления фармацевтической композиции для профилактики и/или лечения эзофагита. Другой предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения относится к применению штамма Ess-1 для приготовления фармацевтической композиции для лечения кандидозного стоматита.

Поскольку было экспериментально продемонстрировано (см. «Экспериментальный раздел»), что штамм Ess-1 подавляет рост ряда различных бактерий, вызывающих инфекцию, такую как инфекцию мочевых путей, то другой аспект изобретения относится к применению штамма Ess-1 для приготовления фармацевтической композиции для профилактики и/или лечения бактериальных инфекций, таких как инфекция мочевых путей.

В одном из аспектов настоящее изобретение относится применению Lactobacillus fermentum, штамм Ess-1, который был депонирован в Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH и которому был присвоен инвентарный номер DSM17851, для приготовления фармацевтической композиции для орального введения.

В одном из предпочтительных вариантов осуществления фармацевтическая композиция, содержащая Lactobacillus fermentum, штамм Ess-1, также содержит один или более фармацевтически приемлемых переносчиков, наполнителей и/или разбавителей. Как правило, такие вещества должны быть нетоксичными для реципиентов в используемых концентрациях и дозировках. Примерами таких веществ являются буферы, загущающие агенты формирующих гель агентов, такие как глицерин, полиэтиленгликоль, антиоксиданты (например, аскорбиновая кислота), полипептиды с низкой молекулярной массой (менее чем около 10 остатков), белки, углеводы, включая глюкозу, сукрозу и декстрины. Примеры переносчиков включают сахара, такие как лактоза, глюкоза и сукроза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, такие как натриевая карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетаты целлюлозы; трегалозу; порошкообразный трагант, солод; желатин; тальк; стеариновые кислоты; стеарат магния; сульфат кальция; полиолы, такие как пропиленгликоль, глицерин, сорбитол, маннитол и полиэтиленгликоль; агар; альгиновые кислоты; апирогенную воду; изотонический раствор; и раствор фосфатного буфера. В одном из предпочтительных вариантов осуществления изобретения в качестве переносчика для пробиотических бактерий используется безводная среда. Такая безводная среда продлевает выживаемость бактерий во время производства, транспортировки и хранения. Одним из примеров таких переносчиков являются липидные переносчики, включающие липиды, являющиеся нефтяными производными, такие как парафинум ликвидум (минеральные масла, парафиновые масла и другие масла), петролатум (вазелин и нефтяной вазелин), микрокристаллический воск, озокерит, церезин и парафины. В качестве альтернативы могут использоваться синтетические липиды, такие как диметикон, циклометикон и силиконовые эфиры, такие как цетиариловый метикон. Третья альтернатива состоит в использовании липидов животного или растительного происхождения, которые обычно представляют собой триглицериды. Липиды животного и растительного происхождения часто представляют собой смесь моно-, ди- и триглицеридов и свободных жирных кислот. Липиды могут быть рафинированными, гидрогенизированными, очищенными, модифицированными и могут использоваться по отдельности или в различных смесях. Примеры подходящих естественных липидов животного происхождения включают пчелиный воск, жир эму, молочко пчелы-каменщицы, ланолин, жир печени акулы и таловый жир. Примеры подходящих естественных липидов растительного происхождения включают масло из косточек абрикоса, арахидное масло, масло/воск авокадо, воск восковницы, масло из семян черной смородины, масло из семян бурачника, масло бразильского ореха, масло камелии китайской, канделильский воск, масло канолы, карнаубский воск, касторовое масло, какао-масло, кокосовое масло, кукурузное масло, хлопковое масло, масло дикого шиповника, масло из семян энотеры, масло из семян винограда, масло ореха бассия, жасминовый воск, воск жожоба, лавандовый воск, масло из льняного семени, масло из семян манго, оливковое масло, апельсиновый воск, пальмовое масло, пальмоядровое масло, арахисовое масло, рисовый воск, сафлоровое масло, масло из кунжутного семени, масло масляного дерева, соевое масло, воск из семян подсолнечника, масло сладкого миндаля, масло теобромы и масло пшеничных зародышей. Использование липидных переносчиков дает дополнительное преимущество, заключающееся в увеличении передачи бактерий пользователю, например, когда фармацевтическая композиция вводится с помощью гигиенического продукта, такого как впитывающий продукт или гигиеническая ткань (см., например, WO 04/060416). Примеры предпочтительных липидов включают петролатум и силиконовый воск. Также могут присутствовать смачивающие компоненты и смазочные материалы, такие как лаурилсульфат натрия, и окрашивающие добавки, смазочные материалы, таблетирующие агенты, стабилизаторы и консерванты. Предпочтительными фармацевтически приемлемыми переносчиками являются трегалоза или фактор роста молочнокислых бактерий, например, инулин и/или олигофруктоза, полидекстроза, лактитол или резистентный крахмал в форме порошка или в другой форме. Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению может в одном из предпочтительных вариантов осуществления также содержать в дополнение к клеткам Lactobacillus fermentum Ess-1 органическую кислоту и/или ее соль, такую как уксусная кислота, пропионовая кислота, молочная кислота, аскорбиновая кислота, фенилаланин, лимонная кислота, масляная кислота, валериановая кислота, капроновая кислота, янтарная кислота и/или соли вышеперечисленного; предпочтительно, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, молочную кислоту, аскорбиновую кислоту, фенилаланин, лимонную кислоту или янтарную кислоту и/или соли вышеперечисленного; наиболее предпочтительно аскорбиновую кислоту, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, янтарную кислоту и/или соли вышеперечисленного. Эффект взаимного усиления может быть достигнут путем объединения пробиотика Ess-1 с органическими кислотами и/или их солями, при этом органические кислоты должны иметь значение pKa, не превышающее 5,5. Органические кислоты или соответствующие соли должны иметь такую природу, что при нанесении на гигиеническое изделие они не должны вызывать раздражение кожи носителя гигиенического изделия, таким образом, значение pKa органической кислоты, при измерении в воде при 25°C, предпочтительно, должно быть меньше 2. Если значения pKa являются, наоборот, большими, то органические кислоты или их соли могут в основном быть в своих кислотных формах. Это означает, что добавка не будет достаточным образом диссоциировать на ионы водорода и его депротонированную анионную форму, что считается предпосылкой для вышеупомянутого эффекта с пробиотическими бактериями или их внеклеточными продуктами. Следовательно, по меньшей мере одно из значений pKa для органической кислоты, подходящей для настоящего изобретения, должно быть меньше 5,5, предпочтительно, меньше 5. Кроме того, в фармацевтическую композицию также могут быть добавлены, по отдельности или в различных комбинациях, питательные вещества для размножения бактерий, такие как аминокислоты, пептиды, производные нуклеиновых кислот, витамины, соли, жирные кислоты, глюкоза, фруктоза, рибоза, мальтоза и лактоза.

Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению предпочтительно вводится в форме аэрозоля, крема, порошка, суппозитория, жидкости для орального введения, капсулы, таблетки, влагалищной вставки или оральной добавки. Композиции для лечения кожи могут быть приготовлены, например, согласно US 2006/0171936.

Другими примерами продуктов, содержащих штамм Ess-1, являются порошок в перчатке, пастилки, жевательная резинка, жидкость для полоскания рта или средство для ароматизации рта в аэрозольной упаковке.

Кроме того, фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению может также содержать вещество, которое уменьшает запахи, такое как цеолиты, кремний, циклодекстрин и активированный уголь. Также в фармацевтическую композицию согласно изобретению могут включаться вещества, которые обладают способностью к усилению прикрепления молочнокислых бактерий и/или веществ, которые снижают прикрепление патогенных микроорганизмов.

Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению может вводиться посредством единичной дозы, но предпочтительным является введение в нескольких дозах. Фармацевтическая композиция также может быть, предпочтительно, введена вместе с введением противомикробного(ых) препарат(ов).

В одном из предпочтительных вариантов осуществления фармацевтическая композиция согласно изобретению содержит высушенные бактериальные клетки, такие как высушенные сублимацией клетки, высушенные распылением клетки или высушенные воздухом клетки. Такие клетки обладают хорошими способностями к выживанию в течение хранения (см. экспериментальный раздел изучения выживаемости высушенных сублимацией клеток).

Фармацевтическая композиция согласно изобретению, предпочтительно, содержит от 10⁴ до 10¹¹ колониеобразующих единиц (КОЕ), более предпочтительно, от 10⁶ до 10¹⁰ КОЕ, даже более предпочтительно, от 10⁸ до 10¹⁰ КОЕ Lactobacillus fermentum, штамм Ess-1, на одну дозу.

Фармацевтическая композиция или продукт согласно изобретению может в дополнение к Ess-1 содержать другие бактерии, обладающие пробиотическими свойствами, с целью достижения более обширного клинического эффекта. Предпочтительные бактерии такого типа для цели настоящего изобретения включают продуцирующие молочную кислоту бактерии, например, из родов Lactobacillus, Lactococcus, Pediococcus, непатогенных членов рода Bacillus genus, всех членов рода Bifidobacterium genus и Pseudomonas limbergii. Предпочтительные члены рода Lactobacillus включают Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus casei, Lactobacillus cereale, Lactobacillus delbrukeii, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus gaserii, Lactobacillus jensenii, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus thermophilus, Lactobacillus papacasai sp. paracasai, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus lactis и т.п. Более предпочтительным является выбор используемой бактерии из видов Lactococcus lactis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus curvatus или Lactobacillus plantarum. Другие предпочтительные примеры включают непатогенные виды Coccus, такие как S. nalivarius, S. oralis и S. mitis. Один из даже более предпочтительных примеров такой продуцирующей молочную кислоту бактерии включает Lactobacillus plantarum, штамм LB931 (EP 1060240, инвентарный номер DSM 11918 в Deutsche Sammlung von Mikroorganismen), но не ограничивается вышеуказанным.

Фармацевтическая композиция согласно изобретению может быть внедрена в ряд различных продуктов. Например, порошок, содержащий Ess-1, может поставляться в различных типах защитных перчаток. Такие перчатки часто создают влажную окружающую среду для рук, что может способствовать росту грибков, приводящему к грибковым инфекциям кожи и ногтей рук.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к гигиеническому изделию, содержащему Lactobacillus fermentum штамм Ess-1, который был депонирован в Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH и которому был присвоен инвентарный номер DSM17851. Такое гигиеническое изделие может представлять собой впитывающую прокладку, такую как гигиенические товары для женщин, такие как гигиенические салфетки, ежедневные прокладки, гигиенические трусы и тампоны; вкладки для женщин; подгузники и трусы-подгузники для детей и страдающих недержанием взрослых; урологические пакеты; или вкладку-подгузник. Также гигиеническое изделие может представлять собой гигиеническую ткань, такую как мочалка, тряпка, туалетная бумага, салфетка, влажная салфетка или сухая салфетка. Гигиеническая ткань, подходящая для настоящего изобретения, была описана ранее в WO 04/060416. Продуцирующие молочную кислоту бактерии были «инкапсулированы» в липид в не содержащей воды среде с целью защиты бактерий от влаги во время хранения и способствования их передачи пользователю гигиенической ткани. Такая гигиеническая ткань также может факультативно содержать одну или более очищающих добавок, таких как смягчающие вещества, эмульгаторы, увлажнители, pH-регулирующие агенты, хелатообразующие вещества, модификаторы вязкости, противомикробные вещества, консерванты и отдушки согласно описанному в WO 04/060416. Дополнительные сведения о подходящих веществах, обычно добавляемых в продукты для очищения кожи, приведены в Woodruff's Ingredients and Formulary Handbook, John Woodruff, First ed., 1997, Miller Freeman fJK Ltd. Впитывающий продукт или гигиеническая ткань согласно изобретению также может содержать кислоты, соли, подавители запахов, вещества, влияющие на адгезию пробиотиков и нежелательных микроорганизмов, согласно обсуждаемому выше. Такой впитывающий продукт может включать проницаемый внешний слой, который предназначен для нахождения в тесном контакте с кожей носителя, предпочтительно непроницаемый для жидкости нижний слой, который предназначен для нахождения на удалении от носителя в процессе использования, и впитывающую структуру, размещенную между внешним слоем и нижним слоем. В некоторых случаях между внешним слоем и впитывающей структурой может помещаться дополнительный слой в форме, например, ваты или подобного материала. Нижний слой предпочтительно является воздухопроницаемым. Пробиотические бактерии могут быть размещены в различных частях впитывающей прокладки, например, во внешнем слое, во впитывающей структуре, между двумя слоями впитывающей прокладки, в продукте-вставке во впитывающем продукте, или некоторым другим способом. Впитывающий продукт согласно настоящему изобретению также может, предпочтительно, содержать сверхпоглощающий полимер (SAP).

Гигиеническое изделие согласно изобретению может в дополнение к клеткам Lactobacillus fermentum Ess-1 дополнительно содержать органическую кислоту и/или ее соль, такую как уксусная кислота, пропионовая кислота, молочная кислота, аскорбиновая кислота, фенилаланин, лимонная кислота, масляная кислота, валериановая кислота, капроновая кислота, янтарная кислота и/или соли вышеперечисленного; предпочтительно, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, молочную кислоту, аскорбиновую кислоту, фенилаланин, лимонную кислоту или янтарную кислоту и/или соли вышеперечисленного; наиболее предпочтительно, аскорбиновую кислоту, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, янтарную кислоту и/или соли вышеперечисленного, при этом значение pKa для такой кислоты не превышает 5,5. Эффект взаимного усиления может быть достигнут путем объединения пробиотических клеток Ess-1 с органическими кислотами и/или их солями.

Гигиеническое изделие согласно изобретению предпочтительно содержит от 10⁴ до 10¹¹ колониеобразующих единиц (КОЕ), более предпочтительно, от 10⁶ до 10¹⁰ КОЕ, даже более предпочтительно, от 10⁸ до 10¹⁰ КОЕ Lactobacillus fermentum, штамм Ess-1, на одно гигиеническое изделие.

Пробиотические бактерии настоящего изобретения могут напрямую наноситься на гигиеническое изделие согласно изобретению или поставляться в фармацевтической композиции, наносимой на продукт, согласно изложенному в данном документе. В одном из предпочтительных вариантов осуществления бактерии представляют собой обезвоженные бактерии согласно описанному выше, и они наносятся на гигиеническое изделие, отдельно или в фармацевтической композиции согласно вышеописанному. В другом предпочтительном варианте осуществления бактерии могут сначала наноситься на гигиеническое изделие, например, в виде содержащей бактерии суспензии, после чего гигиенический продукт высушивается, в результате чего продукт снабжается бактериями, высушенными в нем, факультативно, в комбинации с дополнительными фармацевтическими агентами согласно описанному выше. В другом предпочтительном варианте осуществления высушенный бактериальный порошок поставляется в липиде, добавленном в гигиеническое изделие. С целью сокращения воздействия влаги на бактерии во время производства, транспортировки и хранения изделий, содержащих пробиотик Ess-1, в одном из предпочтительных вариантов осуществления гигиеническое изделие упаковано в непроницаемую для воды упаковку.

В другом аспекте изобретение относится к применению Lactobacillus fermentum, штамм Ess-1, депонированного в Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH и которому был присвоен инвентарный номер DSM17851, для производства гигиенического изделия, такого как влажная салфетка, сухая салфетка, гигиенические товары для женщин, такие как гигиенические салфетки, ежедневные прокладки, гигиенические трусы и тампоны; вкладки для женщин; подгузники и трусы-подгузники для детей и страдающих недержанием взрослых; урологические пакеты; или вкладки-подгузники. Гигиеническое изделие предпочтительно представляет собой гигиенический продукт для женщин, такой как гигиенические салфетки, ежедневные прокладки, гигиенические трусы и тампоны; вкладки для женщин; подгузники и трусы-подгузники для детей и страдающих недержанием взрослых; урологичес