Способы и устройства для двухэтапного латерального проточного анализа

Способы и устройства для двухэтапного латерального проточного анализа

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Область, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к способам и устройствам для двухэтапного горизонтального проточного анализа для определения в образце первого элемента специфической связующей пары. Эти способы и устройства особенно успешно могут применяться для определения первого элемента специфической связующей пары в образце, который содержит множество неспецифичных связующих парных элементов. В особых воплощениях эти способы и устройства обладают преимуществами при определении в образце специфических антител IgE.

Уровень техники

В данной области известны многие способы и устройства для латерального проточного анализа. Обычно эти устройства и способы предполагают нанесение пробы на латеральный проточный матрикс. Эта проба течет вдоль латерального проточного матрикса, и один или несколько компонентов-аналитов, подлежащих детектированию в этой пробе, взаимодействуют, по меньшей мере, с одним реагентом, который находится в этом латеральном проточном матриксе или добавляется в латеральный проточный матрикс. По меньшей мере, один реагент обычно иммобилизуют в этом устройстве для реакции с подлежащим детектированию компонентом-аналитом или его реагентом и обычно используют метки для измерения степени реакции с иммобилизованным реагентом.

Например, Dafforn et al. в US 4,981,786 раскрывают устройство для анализа, предназначенное для захвата первого члена пары специфического связывания в некоторой зоне и для предоставления возможности переноса жидкости под действием капиллярных сил из этой зоны. Добавляют жидкий реагент для проведения этого анализа, например, содержащий член пары специфического связывания, члены продуцирующей сигнал системы, вспомогательные реагенты или т.п. Dafforn et al. раскрывают конкретное применение их устройства для анализа и способа для детектирования присутствия хорионического гонадотропина человека (HCG).

Для облегчения применения устройств для латерального проточного анализа лабораторным персоналом и нелабораторным медицинским персоналом и потребителями, например в применениях в "пунктах первой помощи", и для получения более быстрых способов детектирования, много внимания уделялось совершенствованию устройств и способов для одноэтапного анализа. Например, May et al. в патентах США 5602040; 5622871; 5656503; 6187598 и 6228660 раскрывают устройства, наборы и способы, которые облегчают способы одноэтапного латерального проточного анализа. Обеспечена тест-полоска (тест-стрип) с высушенным меченым реагентом, который высвобождается в мобильную форму жидкой биологической пробой. Меченый реагент специфически связывается с подлежащим детектированию аналитом с образованием комплекса, и миграция этой жидкой пробы вдоль латерального проточного матрикса переносит этот комплекс под действием капиллярных сил в зону детектирования.

Патент US 6,528,325 Hubscher et al. описывает более конкретное устройство и способ для детектирования антител в сыворотке человека с использованием латерального проточного анализа, который облегчает одноэтапные способы. Тест-проба, полученная из биологических жидкостей, реагирует с меченным золотом антигеном, и полученный комплекс перемещается через мембрану и вдоль латеральной проточной полоски. Окрашенные в красный цвет линии, образованные в специфических местоположениях вдоль тест-полоски, указывают на наличие класс-специфических антител (антител, специфических для определенного класса) в тест-пробе. В более конкретном варианте осуществления изобретения, раскрытом Hubscher et al., латеральный проточный анализ используют в качестве иммунохроматографического скрининг-теста для детектирования аллергенспецифических антител IgE в сыворотке человека. Тест-проба взаимодействует с меченным золотом анти-IgE-антителом, и полученный комплекс перемещается через мембрану, где иммобилизованные аллергены захватывают аллергенспецифический IgE-комплекс. Окрашенные линии появляются в тест-зонах, указывая на присутствие аллергенспецифических антител IgE.

Детектирование специфических аллергий у индивидуума является важным для того, чтобы медицинский персонал мог прописать безопасное и эффективное лечение против аллергии. Обычные способы детектирования аллергии, как правило, включают в себя тестирование на основе прокалывания кожи для подвергания индивидуума действию различных аллергенов и/или сложное и дорогостоящее лабораторное тестирование. Вследствие травмы, высокой стоимости и/или неудобства обычно используемых способов, во многих случаях медицинский персонал прописывает лечение аллергии только на основе симптомов индивидуума без проведения тестов для определения, какие специфические аллергии может иметь этот индивидуум. Очевидно, что такие предписания могут быть опасными, приводящими к пустым затратам и/или неэффективными, так как индивидуумам могут прописываться лекарства, которые не являются правильными для их аллергических состояний. В связи с этим было бы более предпочтительно использовать способы латерального проточного анализа для детектирования антител IgE индивидуума для точной диагностики аллергии в индивидууме. Однако часто детектирование специфических антител IgE является затруднительным. А именно биологические пробы, такие как кровь, содержат множество членов неспецифического связывания, которые препятствуют реакциям, необходимым для точного мечения и детектирования специфических антител IgE.

Более конкретно, определение специфической аллергии требует идентификации антитела IgE, имеющего вариабельную область, которая связывается со специфическим эпитопом аллергена. Биологические жидкости обычно содержат тысячи антител с различными специфичностями вариабельных областей IgE, и, следовательно, определение специфической аллергии при помощи анализа требует селективной реакции единственного типа антитела из этих тысяч специфичностей антител IgE. Конъюгаты детектирования легко связываются с константными областями таких антител IgE, т.е. конъюгаты детектирования обычно не дифференцируют между различными специфичностями IgE, и идентификация конкретного антитела IgE является трудной при использовании общепринятых способов анализа и мечения. На практике было трудно проводить латеральные анализы с использованием способов, описанных в известном уровне техники, для надежной идентификации IgE индивидуума для диагностики аллергии. Обычно иммуноанализ на основе аллергенов, связанных на твердой фазе, использующий конъюгат детектирования, связывающийся с невариабельной областью антител к IgE в этом анализе, будет чувствительным к неспецифическому связыванию IgE в этом анализе. Таким образом, существует потребность в усовершенствованных устройствах и способах анализа, в частности, для облегчения детектирования специфических антител IgE.

Осуществление изобретения

Таким образом, целью данного изобретения является создание усовершенствованных устройств и способов латерального проточного анализа. Связанной с этим целью является обеспечение устройств и способов латерального проточного анализа, которые являются предпочтительными для детектирования специфических антител IgE и которые, следовательно, могут способствовать диагностике аллергии у индивидуума.

Эти цели, а также дополнительные цели решаются данным изобретением. В одном варианте осуществления изобретение относится к способу двухэтапного латерального проточного анализа для идентификации антител IgE в пробе. Этот способ предусматривает внесение пробы, например, цельной крови или сыворотки в отверстие для пробы устройства, которое приспособлено для доставки этой пробы в латеральный проточный матрикс, имеющий множество разновидностей антигенов IgE, иммобилизованных в соответствующих положениях в первом местоположении. Устройство дополнительно приспособлено для фильтрования пробы для доставки отфильтрованной пробы, например, по существу не содержащей эритроцитов, в проточный матрикс. Этот способ дополнительно предусматривает предоставление возможности пробе для перемещения вдоль латерального проточного матрикса через иммобилизованное множество разновидностей антигенов IgE во второе местоположение ниже по потоку от первого местоположения, внесение жидкого буфера в латеральный проточный матрикс для мобилизации меченого реагента, который приспособлен для связывания антитела IgE и который высушен на латеральном проточном матриксе в местоположении выше по потоку от внесения пробы в латеральный проточный матрикс, и предоставление возможности меченому реагенту, мобилизованному жидким буфером, для перемещения вдоль латерального проточного матрикса через иммобилизованное множество разновидностей антигенов IgE в местоположение ниже по потоку от этого первого местоположения.

Изобретение относится также к устройству для латерального проточного иммуноанализа для идентификации антител IgE в пробе. Устройство содержит корпус, имеющий отверстие для пробы, отверстие для буфера выше по потоку от отверстия для пробы, окно результатов ниже по потоку от отверстия для пробы и, необязательно, окно контроля ниже по потоку от окна результатов. Устройство также содержит резервуар для буфера выше по потоку от отверстия для пробы, приспособленный для получения некоторого количества жидкого буфера, вносимого через отверстие для буфера, латеральный проточный проход внутри корпуса, простирающийся от резервуара для буфера до местоположения ниже по потоку, например до окна контроля, если оно выполнено, и содержащий латеральный проточный матрикс, высушенный меченый реагент, приспособленный для связывания антитела IgE, размещенный в латеральном проточном матриксе ниже по потоку от резервуара для буфера и выше по потоку от отверстия для пробы, причем этот меченый реагент приспособлен для мобилизации в латеральном проточном матриксе жидким буфером, протекающим от резервуара для буфера вдоль латерального проточного матрикса, и множество разновидностей антигенов IgE, иммобилизованных в соответствующих положениях в латеральном проточном матриксе в первом местоположении, видимом через окно результатов. Это устройство может необязательно дополнительно содержать немеченое IgE или антитело к антителу мыши (вторичное антитело), иммобилизованное на латеральном проточном матриксе во втором местоположении отдельно и ниже по потоку от первого местоположения и видимое через окно контроля, если оно выполнено в этом корпусе.

В альтернативном варианте осуществления устройство содержит корпус, обеспеченный, по меньшей мере, одним отверстием для пробы, по меньшей мере, одним отверстием для буфера выше по потоку от отверстия для пробы, по меньшей мере, одним окном результатов ниже по потоку от отверстия для пробы и, необязательно, по меньшей мере, одним окном контроля ниже по потоку от окна результатов, резервуаром для буфера выше по потоку от отверстия для пробы, приспособленным для помещения некоторого количества жидкого буфера, вносимого через отверстие для буфера, и, по меньшей мере, двумя латеральными проточными проходами внутри корпуса, причем каждый простирается от резервуара для буфера до местоположения ниже по потоку, например, по меньшей мере, до одного из окон контроля, если они имеются, и содержит латеральный проточный матрикс. Устройство также содержит высушенный меченый реагент, приспособленный для связывания с антителом IgE, расположенный на каждом латеральном проточном матриксе ниже по потоку от резервуара для буфера и выше по потоку от отверстия для пробы, причем этот меченый реагент может мобилизоваться в латеральном проточном матриксе жидким буфером, протекающим из резервуара для буфера вдоль латерального проточного матрикса, и множество разновидностей антигенов IgE, иммобилизованных в соответствующих положениях на каждом латеральном проточном матриксе в первом местоположении, видимом, по меньшей мере, через одно из окон результатов. Устройство может необязательно содержать немеченое IgE или вторичное антитело к мышиному антителу, иммобилизованное на каждом латеральном проточном матриксе во втором местоположении отдельно и ниже по потоку от первого местоположения и видимое, по меньшей мере, через одно из окон контроля, если они выполнены в корпусе.

В других дополнительных вариантах осуществления данное изобретение относится к устройствам для латерального проточного анализа и способам детектирования первого члена пары специфического связывания в пробе, которая содержит множество членов пар неспецифического связывания. Устройство содержит корпус, обеспеченный одним отверстием для пробы, одним отверстием для буфера выше по потоку от отверстия для пробы, по меньшей мере, одним окном результатов ниже по потоку от отверстия для пробы и, необязательно, по меньшей мере, одним окном контроля ниже по потоку от окна результатов, резервуаром для буфера выше по потоку от отверстия для пробы, приспособленным для получения некоторого количества жидкого буфера, вносимого через отверстие для буфера, и, по меньшей мере, двумя латеральными проточными проходами внутри корпуса, причем каждый простирается от резервуара для буфера до положения ниже по потоку, например, по меньшей мере, до одного из окон контроля, и содержит латеральный проточный матрикс. Это устройство также содержит высушенный меченый реагент, способный связываться с первым членом пары специфического связывания, причем меченый реагент размещен на каждом латеральном проточном матриксе ниже по потоку от резервуара для буфера и выше по потоку от отверстия для пробы, причем этот меченый реагент может мобилизоваться в латеральном проточном матриксе жидким буфером, протекающим из резервуара для буфера вдоль латерального проточного матрикса, и второй член пары специфического связывания, иммобилизованный на каждом латеральном проточном матриксе в первом местоположении, видимом, по меньшей мере, через одно из окон результатов. Это устройство может необязательно содержать некоторое количество первого члена пары специфического связывания, немеченого и иммобилизованного на каждом латеральном проточном матриксе во втором местоположении отдельно и ниже по потоку от первого местоположения и видимого, по меньшей мере, через одно из окон контроля.

В другом варианте осуществления способ двухэтапного латерального проточного анализа в соответствии с изобретением для детектирования первого члена пары специфического связывания в пробе, которая содержит множество членов пар неспецифического связывания, предусматривает внесение пробы в латеральный проточный матрикс, имеющий второй член пары специфического связывания, иммобилизованный в первом местоположении, предоставление возможности пробе для перемещения вдоль латерального проточного матрикса через иммобилизованный второй член пары специфического связывания во второе местоположение ниже по потоку от первого местоположения, внесение жидкого буфера в латеральный проточный матрикс для мобилизации меченого реагента, высушенного на латеральном проточном матриксе в местоположении выше по потоку от доставки пробы в латеральный проточный матрикс, причем этот меченый реагент способен связываться с первым членом пары специфического связывания, и предоставление возможности меченому реагенту, мобилизованному жидким буфером, для перемещения вдоль латерального проточного матрикса через иммобилизованный второй член пары специфического связывания в местоположение ниже по потоку от первого местоположения. Изобретение относится также к устройству для латерального проточного анализа для проведения такого способа.

Устройства и способы в соответствии с данным изобретением являются предпочтительными во многих отношениях. Например, когда проба контактирует с иммобилизованным реагентом до ее контакта с меченым реагентом, этот меченый реагент не препятствует реакциям между аналитом пробы и иммобилизованным реагентом. Неожиданно было обнаружено, что это обстоятельство является особенно важным, когда аналит пробы содержит множество членов пар неспецифического связывания, например когда проба содержит антитела IgE и желательно детектирование индивидуальных типов антител IgE. Способы и устройства в соответствии с изобретением обеспечивают значительно улучшенное детектирование IgE. Кроме того, эти устройства и способы делают возможным удобное и эффективное детектирование множества аналитов в пробе с использованием единственного устройства, и устройства и способы данного изобретения могут легко и точно использоваться медицинским персоналом в тестировании в центрах первой помощи.

Эти и дополнительные цели и преимущества будут более очевидными ввиду следующего подробного описания.

Краткое описание чертежей

Следующее подробное описание изобретения будет более понятным при ссылках на следующие чертежи, в которых:

фиг.1 представляет собой схематический вид сверху корпуса в одном варианте осуществления устройства в соответствии с данным изобретением, содержащего два латеральных проточных матрикса;

фиг.2 представляет собой схематический вид сверху латерального проточного матрикса устройства в соответствии с фиг.1 в комбинации с системой разделения крови другого варианта осуществления в соответствии с данным изобретением;

фиг.3 представляет собой вид в поперечном разрезе вдоль линии 3-3 на фиг.2;

фиг.4 представляет собой схематический вид сбоку устройства в разобранном виде в соответствии с данным изобретением;

фиг.5 представляет собой вид в поперечном разрезе вдоль линии 5-5 на фиг.4 устройства в соответствии с данным изобретением в собранном виде;

фиг.6 представляет собой схематический вид сверху корпуса другого варианта осуществления устройства в соответствии с данным изобретением, содержащего один латеральный проточный матрикс;

фиг.7 представляет собой схематический вид сверху латерального проточного матрикса устройства фиг.6 в соответствии с данным изобретением, содержащего один латеральный проточный матрикс;

фиг.8 представляет собой схематический вид сбоку латерального проточного матрикса устройства фиг.7.

Варианты осуществления, представленные в этих чертежах, являются иллюстративными и не предназначены для ограничения изобретения, объем которого определяется формулой изобретения. Кроме того, отдельные признаки изобретения, представленные на чертежах, и изобретение в целом будут более очевидными и понятными в свете подробного описания.

Осуществление изобретения

Данное изобретение относится к устройствам и способам двухэтапного латерального проточного анализа. Эти способы и устройства являются особенно предпочтительными для проведения иммунологических анализов для определения, качественного или количественного, содержит ли проба первый член пары специфического связывания. Хотя описанные здесь конкретные устройства и способы указываются как применимые и предпочтительные для идентификации IgE антител в пробе, например, цельной крови или компонента крови, эти устройства и способы данного изобретения равным образом могут использоваться для детектирования других аналитов в различных пробах биологических жидкостей, включающих в себя плазму, сыворотку, мочу, слюну или т.п. Примеры других аналитов, которые могут детектироваться в соответствии с данными устройствами и способами, включают в себя, но не ограничиваются ими, различные белки, в том числе, но не только, белки, имеющие конкретные биологические функции, такие как антитела и другие белки, обнаруживаемые в плазме человека, белки, относящиеся к конкретным микроорганизмам, в частности к болезнетворным микроорганизмам, белки гормонов, и т.п.

В одном варианте осуществления устройство данного изобретения содержит корпус, обеспеченный отверстием для пробы, отверстием для буфера выше по потоку от отверстия для пробы, окном результатов ниже по потоку от отверстия для пробы и необязательно контрольным окном ниже по потоку от окна результатов, резервуаром для буфера выше по потоку от отверстия для пробы, приспособленным для получения некоторого количества жидкого буфера, вводимого через отверстие для буфера, и латеральным проточным проходом внутри корпуса, простирающимся от резервуара для буфера до местоположения ниже по потоку, например до окна контроля, и содержащим латеральный проточный матрикс. Это устройство содержит также высушенный меченый реагент, например меченое анти-IgE-антитело, способное связываться с первым членом пары специфического связывания, например антителами IgE, причем этот меченый реагент расположен на латеральном проточном матриксе ниже по потоку от резервуара для буфера и выше по потоку от отверстия для пробы, причем этот меченый реагент может мобилизоваться в латеральном проточном матриксе жидким буфером, протекающим из резервуара для буфера вдоль латерального проточного матрикса, и второй член этой пары специфического связывания, например множество антигенов IgE, иммобилизованный на латеральном проточном матриксе в первом местоположении, видимом через окно результатов. Устройство может необязательно содержать некоторое количество немеченого реагента, способного связываться с меченым реагентом, предпочтительно немеченого первого члена пары специфического связывания, например немеченого антитела IgE, иммобилизованного на латеральном проточном матриксе во втором местоположении отдельно и ниже по потоку от первого местоположения и видимом через окно контроля, если они выполнено.

В конкретном варианте осуществления это устройство содержит множество разновидностей антигенов IgE, иммобилизованных в соответствующих положениях на латеральном проточном матриксе в первом местоположении, и обеспечивает тестирование в центре первой помощи для детектирования антител IgE против диапазона потенциальных аллергенов IgE из пробы крови. Проба крови может содержать цельную кровь или отдельные компоненты крови, например сыворотку или плазму.

Фиг.1 показывает схематический вид сверху корпуса устройства 10 в соответствии с одним вариантом осуществления изобретения. Корпус может быть выполнен из любого подходящего материала, примером которого является литьевой пластик, и является предпочтительно достаточно жестким для обеспечения поддержания и стабильности для латерального проточного прохода или проходов, размещенных в этом корпусе. Единственное отверстие 12 овальной формы для пробы выполнено в верхней части 13 корпуса вместе с единственным отверстием 14 овальной формы для буфера выше по потоку от отверстия 12 для пробы. Хотя могут создаваться дополнительные отверстия для пробы и/или буфера, предпочтительно корпус содержит только по одному из этих отверстий для обеспечения простого и удобного использования устройства. В варианте осуществления по фиг.1 в верхней части корпуса выполнены два окна 16 и 18 результатов ниже по потоку от отверстия 12 для пробы и над соответствующими зонами 20 и 22 детектирования в соответствующих латеральных проточных проходах, и два окна 24 и 26 контроля выполнены в верхней части 13 корпуса ниже по потоку от окон 16 и 18 результатов и над соответствующими зонами 28 и 30 контроля в соответствующих латеральных проточных проходах. Окна 16 и 18 результатов и окна 24 и 26 контроля могут представлять собой просто отверстия в верхней части корпуса, или, альтернативно, одно или несколько отверстий могут иметь прозрачное покрытие. Хотя устройство, показанное на фиг.1, имеет два окна 16 и 18 результатов и два окна 24 и 26 контроля, должно быть понятно, что может использоваться единственное окно результатов и/или единственное окно контроля или, альтернативно, могут быть обеспечены, необязательно, дополнительные окна результатов и/или окна контроля. В варианте осуществления по фиг.1 латеральный проточный проход ассоциирован с одним окном результатов и одним окном контроля, хотя такое "один к одному" соответствие не является обязательным. В рамках настоящего изобретения равным образом можно не выполнять окна контроля 24 и 26 в корпусе и зоны контроля 28 и 30 в соответствующих латеральных проточных проходах, если в устройстве не является желательным обеспечение сигнала визуального контроля.

Верхняя часть 13 корпуса, описанная выше, пригнана к нижней части для заключения внутрь двух латеральных проточных проходов. Как представлено выше, это устройство может альтернативно содержать один проточный проход или три или более проточных проходов, если желательно. Фиг.2 изображает вид сверху двух латеральных проточных проходов, находящихся в корпусе устройства, в комбинации с системой разделения крови. Фиг.3 показывает вид в разрезе по линии 3-3 фиг.2 и показывает эту комбинацию в дополнительных деталях. Как показано на фиг.2 и 3, параллельные латеральные проточные проходы 32 и 34 включают в себя выше по потоку части 32а и 34а, которые находятся выше по потоку от системы 36 разделения крови, и части 32b и 34b, которые находятся ниже по потоку от системы разделения крови 36.

Система 36 разделения крови выполнена таким образом, что она находится под отверстием 12 для пробы в верхней части корпуса и простирается между отверстием для пробы и латеральными проточными проходами. Система разделения крови может включать в себя, по меньшей мере, один слой материала, приспособленного для агрегации в нем эритроцитов, так что проба, которая проходит в латеральные проточные проходы, по существу не содержит эритроцитов. Система 36 разделения крови содержит верхний слой 38 стекловолоконной фильтровальной бумаги, средний слой стекловолоконной 40 фильтровальной бумаги и нижний слой 42 стекловолоконной фильтровальной бумаги. По меньшей мере, один, и предпочтительно оба из них, верхний и средний слои 38 и 40 фильтровальной бумаги содержат в них агрегирующий агент. Многочисленные агрегирующие агенты известны в данной области и могут быть подходящими для применения здесь. Например, агрегирующий агент может содержать, но не ограничивается ими, сахар, такой как маннит, сорбит или инозит, одно или несколько связывающих эритроциты антител, лектины или т.п. В собранном устройстве для латерального проточного анализа слои 38 и 40 расположены под отверстием 12 для пробы и являются достаточно большими для получения пробы из отверстия для пробы, но не простираются латерально до латеральных проточных проходов 32 и 34. Нижний слой 42 расположен ниже слоя 40 и простирается латерально для контакта с каждой из двух латеральных проточных полос. Если требуется, нижний слой 42 фильтровальной бумаги может также содержать агент, агрегирующий эритроциты. Этот слой может также содержать одну или несколько добавок для облегчения протекания профильтрованной пробы, получаемой из слоев 38 и 40, к латеральным проточным проходам 32 и 34. Например, в одном варианте осуществления слой 42 содержит поливиниловый спирт, связанный со стеклянными волокнами. Для облегчения протекания вдоль латерального проточного матрикса в направлении вниз по потоку контакт между нижним слоем 42 и латеральными проточными проходами ограничивают на стороне выше по потоку помещением тонких непроницаемых для жидкости слоев 44 и 46 между слоем 42 и латеральными проточными проходами 32 и 34 соответственно. Например, слои 44 и 46 могут быть выполнены из слоистой ленты или т.п. Край ниже по потоку каждого из слоев 44 и 46 показан пунктирной линией 48 на фиг.2 для иллюстрации зоны ниже по потоку от краев 48, где слой 42 контактирует с латеральными проточными проходами 32 и 34.

Система 36 разделения крови может быть включена в устройство по изобретению, когда желательно использование пробы, которая является предпочтительно отфильтрованной для удаления компонентов, которые могут препятствовать визуальному сигналу, т.е. пробы цельной крови, в которой желательно удаление эритроцитов. С другой стороны, система разделения крови может отсутствовать, если предполагаемая проба не требует фильтрации для удаления из нее каких-либо компонентов, т.е. проба сыворотки. Альтернативно, другие системы разделения крови или пробы могут быть включены, если это необходимо, в устройства по данному изобретению.

Фиг.4 показывает вид сбоку в разобранном виде устройства в соответствии с изобретением, тогда как фиг.5 показывает вид устройства в поперечном разрезе по линии 5-5 после сборки этого устройства в корпусе. Как видно на фиг.4, описан латеральный проточный проход 32. Однако латеральный проточный проход 34 обладает такими же признаками, которые описаны в отношении латерального проточного прохода 32, хотя латеральный проточный проход 34 не показан на виде сбоку на фиг.4. Каждый латеральный проточный проход устройства этого иллюстрированного варианта осуществления включает в себя латеральный проточный матрикс 50, который является пористым или гигроскопичным и ускоряет латеральный поток жидкостей, внесенных в него под действием капиллярных сил. Латеральный проточный матрикс 50, показанный на фиг.4, содержит основную полосу 52, которая простирается от положения выше по потоку от отверстия 12 для пробы и системы 36 разделения крови до положения ниже по потоку от соответствующего окна 16, 18 результатов. Основная полоса 52 может быть выполнена из любого желаемого материала, в том числе, но не только, из целлюлозных материалов и материалов, произведенных из целлюлозы, таких как бумага, нитроцеллюлоза и ацетат целлюлозы или полимер, в том числе, но не только, нейлон, силикон или подобные вещества. Поры этого материала должны быть достаточно большими для возможности прохождения через них пробы и меченого реагента, описанных более подробно ниже. Подходящие размеры пор находятся обычно в диапазоне приблизительно 0,4 - приблизительно 1000 микрон, причем размеры пор в диапазоне приблизительно 0,4 - приблизительно 100 микрон являются во многих случаях подходящими. В конкретном варианте осуществления основные полосы 52 выполнены из нитроцеллюлозы. Каждая основная полоса 52 находится в жидкостной связи с системой 36 разделения крови через часть нижнего слоя 42 стекловолоконного фильтра, хотя контакт между ними ограничивается, например, слоем 44 слоистой ленты.

Каждая основная полоса 52 латеральных проточных проходов 32 и 34 включает в себя в первом местоположении соответствующие зоны 20 и 22 детектирования, которые видны через соответствующие окна 16 и 18 результатов. Каждая зона детектирования имеет иммобилизованный на ней, по меньшей мере, один второй член пары специфического связывания для реакции с первым членом и иммобилизации первого члена пары специфического связывания, содержащегося в пробе. В конкретном варианте осуществления, описанном здесь, зона детектирования каждой основной полосы содержит ряд аллергенов IgE, специфических для ряда антител IgE, которые подлежат детектированию. Антигены наносят таким образом, что каждый тип антигена иммобилизуется в отдельном положении в зоне детектирования. Могут использоваться различные комбинации антигенов IgE в зависимости от необходимости. Например, антигены IgE, подходящие для иммобилизации в зонах детектирования, включают в себя, но не ограничиваются ими, пыльцу, например, тимофеевки луговой, культивируемой ржи, березы, ольхи, лещины, полыни обыкновенной, подорожника перистого (английского), амброзии высокой и/или крапивы, аллергены пыли, например D. farinae, D. pteronyssinus, и/или домашнюю пыль, плесени, например Alternaria tenuis, Aspergillus fum., Cladosporium, и/или Penicillium not, эпителий животных, например перхоть кошек, перхоть собак, перхоть лошадей и/или перья гусей, пищевые продукты, например молочные продукты, злаки, орехи, морепродукты и/или бобовые, вдыхаемые смеси, например пыльцу I (травы), пыльцу II (сорняки/деревья), смеси-продукты животных, смеси пыли и/или смеси плесеней, и т.п. Эти аллергены IgE или другой второй член (члены) пары специфического связывания наносят на основную тест-полосу в зоне детектирования любым способом, известным в данной области, который обеспечивает иммобилизацию этого члена (членов) в проточном матриксе и поддержание этой иммобилизации в условиях анализа.

В одном варианте осуществления аллергены IgE иммобилизуют в латеральном проточном матриксе присоединением соответствующих аллергенов к частицам, которые, в свою очередь, иммобилизуют в порах проточного матрикса. Такие иммобилизующие частицы известны в данной области и включают в себя, например, частицы диоксида кремния и частицы органических полимеров, таких как синтетические полимеры, полученные ступенчатой полимеризацией, синтетические конденсированные полимеры и биополимеры, необязательно синтетически сшитые. Эти частицы предпочтительно имеют размер, при котором они могут входить в поры проточного матрикса и удерживаться в них. В одном варианте осуществления иммобилизующие частицы имеют диаметр, который меньше наименьшего внутреннего размера проточных каналов латеральных проточных матриксов в первом местоположении зон детектирования. Примеры соответствующих частиц включают в себя частицы, описанные в опубликованной Pharmacia Diagnostics АВ заявке РСТ WO 99/367803, которая включена здесь в качестве ссылки. В одном варианте осуществления иммобилизующие частицы образуют из синтетического полимерного латекса, например, частицы полистирольного гомополимера или сополимера, и их обрабатывали гидрофильными группами, такими как спиртовые гидроксильные группы, для улучшения иммобилизации и реакции антигенов или других вторых членов пар специфического связывания, как также описано в вышеуказанной заявке РСТ WO 99/367803, опубликованной Pharmacia Diagnostics АВ.

Как показано на фиг.1, наружная поверхность верхней части 13 корпуса может содержать указатели 15 рядом с каждым окном результатов для различения местоположений соответствующих разновидностей антигенов IgE, которые иммобилизованы в соответствующих зонах детектирования. Эти указатели могут содержать текст, графические изображения, пиктограммы или их любые комбинации. Эти указатели могут в дальнейшем помогать медицинскому персоналу при считывании полученных положительных результатов, которые предоставляются после использования устройства для проведения анализа.

Каждый латеральный проточный матрикс 50 дополнительно включает в себя верхний по потоку нижний тампон 54, который находится в жидкостной связи с верхним по потоку концом основной полосы 52, и нижний по потоку верхний тампон 56, который находится в жидкостной связи с нижним по потоку концом основной полосы 52. Когда корпус обеспечен окном (окнами) контроля, верхний тампон может быть расположен под соответствующим окном контроля. Таким образом, как показано на фиг.4, каждый верхний тампон 56 расположен под соответствующим контрольным окном 24, 26. Верхний и нижний тампоны 54 и 56 выполнены из любого желаемого проточного материала, в том числе, но не только, целлюлозных материалов и материалов, произведенных из целлюлозы, таких как бумага, нитроцеллюлоза, ацетат целлюлозы, нейлон и подобные вещества. В одном варианте осуществления тампоны выполняют из стекловолоконной фильтровальной бумаги.

В местоположении выше по потоку от его точки контакта с основной полосой 52 каждый нижний тампон 54 включает в себя высушенный меченый реагент 58. Меченый реагент приспособлен для мобилизации для протекания через латеральный проточный матрикс при введении жидкого буфера в устройство, как будет описано более подробно ниже. Меченый реагент должен быть способен реагировать с первым членом пары специфического связывания в сайте связывания, отличающемся от сайта связывания, с которым первый член пары специфического связывания взаимодействует с иммобилизованным вторым членом пары специфического связывания. Кроме того, этот меченый реагент либо включает в себя визуально детектируемую метку либо может взаимодействовать с визуально детектируемой меткой. В конкретном варианте осуществления этот меченый реагент включает в себя визуально детектируемую метку. Такие метки хорошо известны в данной области и включают в себя, но не ограничиваются ими, хромофоры, флуорофоры, радиоактивные соединения, ферменты и т.п., и любая из таких меток может быть использована на этом меченом реагенте. Меченый реагент может содержать частицы для облегчения его использо