Способ оценки качества продуктов убоя животных
Изобретение относится к области ветеринарной экспертизы. Способ заключается в том, что берут биопробу, в качестве которой используют длиннейшую мышцу спины, сердечную мышцу, печень, легкие, селезенку и почки, измельчают, получают вытяжку и помещают в газовый хроматограф. Определяют общую концентрацию карбоновых кислот, альдегидов, сложных эфиров и спиртов. Сравнивают полученные показатели с аналогичными показателями в биопробе продуктов убоя здоровых животных. При изменении показателей общей концентрации карбоновых кислот, альдегидов, сложных эфиров и спиртов в исследуемой биопробе относительно аналогичных показателей в биопробе продуктов убоя здоровых животных, продукты убоя животных считают зараженными гельминтами и оценивают как недоброкачественные. Способ позволяет упростить процесс исследований и снизить трудозатраты при оценке качества продуктов убоя животных. 9 табл.
Реферат
Изобретение относится к области ветеринарной медицины, в частности ветеринарной санитарной экспертизы.
Прекращение жизни животного связано с необратимыми процессами, протекающими в мышечной ткани, и при окислении органических веществ происходит распад промежуточных продуктов.
В связи с этим нами была установлена концентрация промежуточных продуктов при распаде органических веществ в вытяжке органов и тканей (длиннейшая мышца спины, сердечная мышца, печень, легкие, селезенка и почки) при метастронгилезе свиней (Metastrongylus elongates); при дикроцелиозе (Dicrocoelium lanceatum), эхинококкозе (Echinococcus granulosus) у крупного рогатого скота, что позволит установить влияние продуктов их жизнедеятельности на накопление летучих органических веществ.
Известен унифицированный метод определения триглицеридов по реакции с ацетилацетатом после экстракции смесью гептана и изопропилового спирта [см. А.И.Карпищенко и др. Справочник Медицинские лабораторные технологии, под ред. А.И.Карпищенко, в 2-х томах, Т.2 С.92-93], где метод основан на экстрагировании триглицеридов смесью гептана и изопропилового спирта, в которую переходят неполярные липиды; более полярные остаются в водной фазе. Триглицериды гидролизуются щелочью, глицерин окисляется йодной кислотой до формальдегида, который определяется по цветной реакции с ацетилацетоном.
Ход определения включает: экстрагирование триглицеридов смесью гептана и изопропилового спирта. Для окисления глицерина до формальдегида добавляют йодную кислоту и ацетилацетоновый реактив, в результате которого образуется желто-зеленое окрашивание, интенсивность которого измеряют фотометрированием при длине волны 425 нм в кюветах с длиной оптического пути 0,5 см против контрольной пробы, которую ставят так же, как и опытную, но вместо исследуемого материала используют 0,5 мл дистиллированной воды. Калибровочную пробу обрабатывают так же, как и опытную, но вместо исследуемой сыворотки или плазмы крови вносят 0,5 мл калибровочного раствора и 0,5 мл дистиллированной воды. Развивающаяся окраска соответствует окраске опытной пробы, в которую взята плазма с содержанием триглицеридов 2 ммоль/л. Расчет проводят по правилу пропорции или по калибровочному графику. Если используется калибровочный раствор, содержащий воду, то при постановке калибровочного опыта берут 0,5 мл рабочего калибровочного раствора, а воду не добавляют.
Также известно определение свободных жирных кислот качественной реакцией (см. Н.Н.Крылова, Ю.Н.Лясковская. Биохимия мяса. / М.: Пищепромиздат, - 1957, - с.337), где метод основан на способности изменять окраску в зависимости от кислотности среды с помощью индикатора нейтрального красного. Пробу свиного топленого жира (примерно 0,5-1 г) помещают в маленькую фарфоровую ступку, заливают раствором нейтрального красного и после тщательного растирания пестиком сливают раствор нейтрального красного (оставшиеся капли жидкости, если они мешают наблюдению, смывают водой). После такой обработки свиной жир приобретает одну из следующих окрасок: желтая с зеленоватым оттенком или желтая, которая свидетельствует о свежести жира; от желтой до светло-коричневой - старый жир, но пригодный для использования в пищу; от желто-коричневой до коричневой - жир сомнительной пищевой пригодности; от коричневой до красной - испорченный. Для проведения реакции применяют свежеприготовленный 0,01%-ный раствор нейтрального красного на водопроводной воде (рН 7,0-7,2). Реакцию можно проводить и с другими животными жирами, но при этом получаются менее четкие результаты. Окраска жира после обработки зависит от наличия высокомолекулярных и низкомолекулярных жирных кислот; окраска изменяется более резко в присутствии ничтожных количеств низкомолекулярных кислот.
Наиболее близким по технической сущности является способ определения компонентов летучих жирных кислот в рубцовой жидкости в преджелудке у коров с помощью газового хроматографа, которую предварительно подвергали паровой дисцилляции для определения общего количества летучих жирных кислот (Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук, автор Хмельков Я.Т. «Этиологическая структура, патогенез и лечение вторичных застойных дистоний преджелудков у коров», Белград, 2006, с.8).
Недостатками известных способов являются отсутствие возможности определения большого количественного состава летучих органических веществ в вытяжке органов и тканей (длиннейшая мышца спины, сердечная мышца, печень, легкие, селезенка и почки) при метастронгилезе (Metastrongylus elongates) на качество продуктов из мяса свиней и крупного рогатого скота при дикроцелиозе (Dicrocoelium lanceatum) и эхинококкозе (Echinococcus granulosus) на качество продуктов из мяса крупного рогатого скота.
Техническим решением задачи является определение летучих органических веществ с помощью газо-жидкостной хроматографии в котором подвижной фазой служит газ или пар, а неподвижной - жидкость, нанесенная на твердый носитель или на стенки колонки при установлении качества и безопасности продуктов убоя животных при метастронгилезе свиней (Metastrongylus elongates); при дикроцелиозе (Dicrocoelium lanceatum) у крупного рогатого скота; эхинококкозе (Echinococcus granulosus) крупного рогатого скота.
Поставленная задача достигается тем, что в способе оценки качества продуктов убоя животных согласно изобретению берут биопробу, в качестве которой используют длиннейшую мышцу спины, сердечную мышцу, печень, легкие, селезенку и почки, измельчают, получают вытяжку, помещают в газовый хроматограф, определяют общую концентрацию карбоновых кислот, альдегидов, сложных эфиров и спиртов, сравнивают полученные показатели с аналогичными показателями в биопробе продуктов убоя здоровых животных и при изменении показателей общей концентрации карбоновых кислот, альдегидов, сложных эфиров и спиртов в исследуемой биопробе относительно аналогичных показателей в биопробе продуктов убоя здоровых животных продукты убоя животных считают зараженными гельминтами и оценивают как недоброкачественные.
Преимущество данного метода состоит в следующем: высокая эффективность разделения компонентов, недоступная при других методах исследования; низкий расход реактивов и растворителей; простота аппаратуры; высокая скорость анализа и высокая воспроизводимость условий реакции; хорошая растворимость производных в водной среде; широкие возможности газо-жидкостной хроматографии для выявления летучих органических веществ в вытяжке органов и тканях (длиннейшая мышца спины, сердечная мышца, печень, легкие, селезенка и почки) при метастронгилезе свиней, дикроцелиозе и эхинококкозе крупного рогатого скота. Кроме того, установлены порядок и время выхода летучих органических веществ в вытяжке органов и тканей (длиннейшая мышца спины, сердечная мышца, печень, легкие, селезенка и почки) у свиней и крупного рогатого скота, а также заявляемое предложение является более экономичным, т.к. не требует применения особо дорогостоящих химических реактивов.
Новизна заявленного предложения обусловлена тем, что экспресс-анализом установлены параметры изменения концентрации летучих органических веществ в органах и тканях при инвазии свиней возбудителем Metastrongylus elongates, крупного рогатого скота - Dicrocoelium lanceatum, крупного рогатого скота - Echinococcus granulosus на газо-жидкостном хроматографе (ГАЛС-311), за счет разделения смесей летучих веществ, при многократном динамическом перераспределении их компонентов между сорбентом и газом-носителем при его движении вдоль слоя сорбента.
Пример конкретного осуществления способа оценки качества продуктов убоя животных.
Состав летучих компонентов изучают на газо-жидкостном хроматографе «Кристалл-2000 М», оборудованном 50 м кварцевой капиллярной колонкой HP FFAP с внутренним диаметром 0,32 мм, производства США.
Для изучения компонентов летучих жирных кислот в органах и мышечных тканях проводят подготовку проб органов и тканей (длиннейшая мышца спины, сердечная мышца, печень, легкие, селезенка и почки) при метастронгилезе свиней, дикроцелиозе и эхинококкозе крупного рогатого скота. С этой целью предварительно измельчают требуемые орган или мышечную ткань, затем берут навеску органов и тканей в количестве 4-6 г и помещают в прибор для отгонки летучих продуктов с водяным паром. Проводят перегонку проб органов и тканей, при этом полученную вытяжку собирают в мерную колбу на 50 см3. Одну часть вытяжки используют для определения летучих компонентов на газовом хроматографе, другую - для определения аммиака. Объем вытяжки делят на массу навески, таким образом, производят разбавление исходной пробы, что учитывают в количественных расчетах.
Для определения летучих компонентов (альдегиды, спирты, уксусная, масляная, валериановая кислоты и другие) 2 мкл вытяжки из органов и тканей с использованием заранее проведенной калибровки дозируют в газо-жидкостной хроматограф.
Режим работы газового хроматографа: кварцевая капиллярная колонка длиной 50 м, внутренний диаметр 0,32 мм; неподвижная жидкая фаза FFAP; температура инжектора хроматографа - 170°С; температура подогрева детектора ДИП - 170°С; входное давление на колонке - 60 кПа; температура термостата колонок - 50°С, изотерма - 7 мин, затем программирование температуры со скоростью 5°С/мин до 140°С, выдержка - 20 мин, затем программирование температуры со скоростью 10°С/мин до 160°С и выдержка до конца анализа не менее 40 мин.; испаритель с делением потока, коэффициент деления потока - 1: 33; поток газа-носителя через колонку - 1,21 см3/мин; объем пробы - 2 мм3; газ-носитель - азот; расход водорода - 25 см3/минуту; расход воздуха - 250 см3/мин; время анализа - 60 мин.
Для количественных расчетов содержания компонентов в органах и тканях применяют метод абсолютной калибровки. Модельную смесь ацетальдегида, сложных эфиров, метанола и сивушного масла готовят на 40%-ном водноспиртовом растворе с использованием спирта «Экстра» и дистиллированной воды. Модель подбирают по составу с использованием аттестованных градуировочных смесей, близких к исследуемым объектам (длиннейшая мышца спины, сердечная мышца, печень, легкие, селезенка и почки).
Порядок и время выхода (мин, сек) летучих органических компонентов в указанном режиме анализа приведены в таблицах 1 и 2.
Таблица 1 - Порядок и время выхода летучих веществ в вытяжке органов и тка ней клинически здоровых животных на капиллярной колонке FFAP | |||||
№ | Компонент | Время выхода, мин | № | Компонент | Время выхода, мин |
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
1 | Ацетальдегид | 5,54 | 15 | Метилкаприлат | 21,33 |
2 | Этилформиат | 6,48 | 16 | Этилкаприлат | 21,56 |
3 | Метилацетат | 6,54 | 17 | Этиллактат | 22,57 |
4 | Этилацеталь | 7,21 | 18 | Фурфурол | 23,28 |
5 | Метанол | 7,42 | 19 | Этилацетат | 23,36 |
6 | 2-пропанол | 7,49 | 20 | Пропионовая | 24,22 |
7 | 1-амилол | 7,52 | 21 | 2,3-бутиленгликоль | 24,38 |
8 | Этанол об.% | 8,35 | 22 | Изомасляная | 24,54 |
9 | Диацетил | 8,59 | 23 | Масляная | 26,57 |
10 | 1-бутанол | 13,58 | 24 | Изо-валериановая | 27,45 |
11 | Изоамиловый | 15,45 | 25 | Валериановая | 29,56 |
12 | Ацетоин | 17,26 | 26 | 1,3-пропиленгликоль | 31,49 |
13 | 1-гексанол | 19,56 | 27 | Каприновый альдегид | 33,54 |
14 | Уксусная | 20,46 | 28 | Фенилэтанол | 37,47 |
Таблица 2 - Порядок и время выхода летучих веществ в вытяжке органов и тка ней животных при гельминтозах на капиллярной колонке FFAP | |||||
№ | Компонент | Время выхода, мин | № | Компонент | Время выхода, мин |
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
1 | Ацетальдегид | 5,49 | 15 | Этилкаприлат | 21,14 |
2 | Этилформиат | 6,37 | 16 | Уксусная | 22,25 |
3 | Метилацетат | 6,40 | 17 | Этиллактат | 22,32 |
4 | Метанол | 7,30 | 18 | Фурфурол | 22,46 |
5 | Этилацеталь | 7,16 | 19 | Этилацетат | 23,15 |
6 | 2-пропанол | 7,35 | 20 | Пропионовая | 23,29 |
7 | 1-амилол | 7,42 | 21 | 2,3 -бутиленгликоль | 24,28 |
8 | Этанол об.% | 8,01 | 22 | Изомасляная | 24,35 |
9 | Диацетил | 8,46 | 23 | Масляная | 26,16 |
10 | 1-бутанол | 13,23 | 24 | Изо-валериановая | 27,38 |
11 | Изоамиловый | 15,24 | 25 | Валериановая | 29,12 |
12 | Ацетоин | 16,41 | 26 | 1,3-пропиленгликоль | 31,17 |
13 | 1-гексанол | 18,52 | 27 | Каприновый альдегид | 33,07 |
14 | Метилкаприлат | 20,53 | 28 | Фенилэтанол | 37,21 |
Установлены границы относительной погрешности (%) измерения массовой концентрации (мг/дм3) летучих компонентов и нормативы оперативного контроля (%) измеряемых массовых концентраций (мг/дм3) летучих компонентов, результаты которых показаны в таблицах 3 и 4.
Таблица 3 - Границы относительной погрешности измерения массовой концентрации летучих компонентов | ||||
Компоненты | Массовая концентрация (мг/дм3) | Границы относительной погрешности (%) | ||
Сивушные масла: | ||||
2-пропанол | ||||
1-пропанол | ||||
2-бутанол | от 0,5 до 10,0 | ±12 | ||
изоамилол | свыше 10,0 до 5000 | ±3 | ||
1-бутанол | ||||
изоамилол | ||||
1-амилол | ||||
1-гексанол | ||||
Сложные эфиры | от 0,5 до 10,0 свыше | ±8 | ||
10,0 до 5000 | ±4 | |||
Ацетальдегид | от 0,5 до 10,0 | ±10 | ||
свыше 10,0 до 5000 | ±3 | |||
Метанол | от 1 до 10,0 | ±20 | ||
свыше 10,0 до 100 | ±7 | |||
свыше 100 до 2000 | ±3 | |||
Таблица 4 - Нормативы оперативного контроля измеряемых массовых концентраций летучих компонентов | ||||
Компоненты | Массовая концентрация (мг/дм3) | Нормативы оперативного контроля (%) | ||
Сходимости, п=2, при Р=0,95 | Воспроизводимости, m=2, при Р=0,95 | Погрешности при Р=0,90 | ||
Сивушное масло | от 0,5 до 10,0 | 12 | 18 | 13 |
свыше 10,0 до 5000 | 3 | 10 | 8,4 | |
Сложные эфиры | от 0,5 до 10,0 | 8 | 18 | 13 |
свыше 10,0 до 5000 | 4 | 8,2 | 8,4 | |
Ацетальдегид | от 0,5 до 10,0 | 10 | 18 | 13 |
свыше 10,0 до 5000 | 3 | 7,4 | 8,0 | |
Метанол | от 1 до 10,0 | 20 | 30 | 17 |
свыше 10,0 до 100; | 7 | 20 | 13 | |
свыше 100 до 2000 | 3 | 10 | 8,4 |
Результаты научных исследований для установления качества и безопасности продуктов убоя животных при гельминтозах по выявлению концентрации летучих органических веществ
В результате проведенных исследований при инвазии свиней метастронгилюсами в длиннейшей мышце спины концентрация уксусной кислоты была ниже на 51% (в 2 раза), пропионовой - в 1,7 раза, изовалериановой - в 6 раз, чем у клинически здоровых животных. В отличие от контрольной группы масляная кислота в опытной группе не была выявлена. В длиннейшей мышце спины при метастронгилезе общая концентрация карбоновых кислот составила 46,76 мг/кг фарша и была ниже в 2 раза, чем у клинически здоровых свиней (табл.5).
При метастронгилезе свиней в сердечной мышце концентрация уксусной кислоты была ниже в 2,2 раза, пропионовой - в 38 раз, изомасляной - в 18 раз, изовалериановой - в 1,1 раза, чем у клинически здоровых животных. В сердечной мышце общая концентрация карбоновых кислот составила 60,58 мг/кг фарша и была ниже в 2,3 раза, чем у клинически здоровых свиней (табл.5).
В тканях печени при метастронгилезе свиней концентрация уксусной кислоты была выше в 1,6 раза, пропионовой - в 44 раза, изомасляной - в 14,2 раза, чем у клинически здоровых животных. В отличие от контрольной группы масляная и валериановая кислоты в опытной группе не были выявлены. В тканях печени общая концентрация карбоновых кислот составила 39,33 мг/кг фарша и была выше в 2,5 раза, чем у клинически здоровых свиней (табл.6).
В легочной ткани, пораженной метастронгилюсами, концентрация уксусной кислоты была выше в 5 раз, пропионовой - в 16 раз и, напротив, ниже изовалериановой кислоты в 4 раза, чем у клинически здоровых животных. В отличие от контрольной группы в опытной группе были зарегистрированы изомасляная кислота, концентрация которой составила 4,48 мг/кг фарша и масляная - 2,72 мг/кг фарша. В тканях печени общая концентрация карбоновых кислот составила 39,33 мг/кг фарша и была выше в 2,5 раза, чем у клинически здоровых животных (табл.6).
В тканях селезенки при метастронгилезе концентрация уксусной кислоты была выше в 1,3 раза, пропионовой - в 52 раза, чем у клинически здоровых животных. В отличие от контрольной группы в опытной группе была зарегистрирована изомасляная кислота, концентрация которой составила 0,17 мг/кг фарша. В тканях селезенки общая концентрация карбоновых кислот составила 180,04 мг/кг фарша и была выше в 2,5 раза, чем у клинически здоровых свиней (табл.7).
В тканях почек при метастронгилезе концентрация уксусной кислоты была ниже в 1,1 раза, пропионовой - в 8 раз и, напротив, изовалериановая кислота была выше в 1,6 раза, чем у клинически здоровых животных. В почечной ткани общая концентрация карбоновых кислот составила 71,38 мг/кг фарша и была ниже в 1,1 раза, чем у клинически здоровых свиней (табл.7).
При метастронгилезе в вытяжке длиннейшей мышцы спины концентрация фурфурола была выше в 5,4 раза и, напротив, ацетальдегида - ниже в 1,1 раза, чем у клинически здоровых животных. В опытной группе не был зарегистрирован ацетоин и, напротив, выявлен каприловый альдегид, концентрация которого составила 14,69 мг/кг фарша. В вытяжке длиннейшей мышцы спины общая концентрация альдегидов составила 44,29 мг/кг фарша и была выше в 2,8 раза, чем у клинически здоровых свиней.
В вытяжке сердечной мышцы при метастронгилезе концентрация фурфурола была выше в 2 раза, ацетоина - в 5,4 раза и, напротив, этилацеталя была ниже в 10 раз, ацетальдегида - в 6 раз, каприлового альдегида - в 1,6 раза, чем у клинически здоровых животных. В вытяжке сердечной мышцы общая концентрация альдегидов составила 92,49 мг/кг фарша и была выше в 2,8 раза, чем у клинически здоровых свиней.
При метастронгилезе в вытяжке печени концентрация ацетальдегида и каприлового альдегида была выше в 4 раза, фурфурола - в 10 раз, ацетоина - в 12 раз, чем у клинически здоровых животных. В опытной группе в отличие от контрольной группы был зарегистрирован этилацеталь, концентрация которого составила 1,38 мг/кг фарша. В вытяжке печени общая концентрация альдегидов составила 14,74 мг/кг фарша и была выше в 5,7 раза, чем у клинически здоровых свиней.
В пораженной легочной ткани были зарегистрированы альдегиды в концентрации 75,75 мг/кг фарша, при этом концентрация ацетальдегида составила 15,40 мг/кг фарша, фурфурола - 29,55 мг/кг фарша, ацетоина - 17,54 мг/кг фарша, каприлового альдегида - 13,26 мг/кг фарша. При этом концентрация фурфурола была выше в 2,2 раза, чем каприлового альдегида, ацетальдегида - в 1,9 раза, ацетонна - в 1,7 раза по сравнению с клинически здоровыми животными.
При метастронгилезе в вытяжке селезенки концентрация ацетальдегида и каприлового альдегида была выше в 2 и 3 раза соответственно, фурфурола - в 12 раз, чем у клинически здоровых животных. В опытной группе в отличие от контрольной группы был зарегистрирован ацетоин, концентрация которого составила 4,68 мг/кг фарша. В вытяжке селезенки общая концентрация альдегидов составила 129,45 мг/кг фарша и была выше в 7 раз, чем у клинически здоровых свиней.
При метастронгилезе в вытяжке почек концентрация ацетальдегида, каприлового альдегида, фурфурола и ацетоина была выше в 2-3 раза, чем у клинически здоровых животных. В вытяжке почек общая концентрация альдегидов составила 80,70 мг/кг фарша и была выше в 2,4 раза, чем у клинически здоровых свиней.
Максимальная концентрация альдегидов при метастронгилезе отмечена в вытяжке селезенки, которая была выше в 9 раз, чем в вытяжке печени, в 3 раза - в вытяжке длиннейшей мышцы спины, в 1,7 раза - в вытяжке легких, в 1,4 раза - в вытяжке сердечной мышцы.
При метастронгилезе в вытяжке длиннейшей мышцы спины были выявлены сложные эфиры: концентрация этилкаприлата была выше в 1,3 раза и, напротив, ниже метилкаприлата в 5,3 раза. В опытной группе в отличие от контрольной группы был зарегистрирован этилацетат, концентрация которого составила 4,33 мг/кг фарша и метилацетат - 11,37 мг/кг фарша. В вытяжке длиннейшей мышцы спины общая концентрация сложных эфиров составила 20,01 мг/кг фарша и была выше в 1,4 раза, чем у клинически здоровых свиней.
В вытяжке сердечной мышцы при метастронгилезе были выявлены сложные эфиры: концентрация метилкаприлата была выше в 2,4 раза, этилформиата - в 5 раз, этилкаприлата - в 2,7 раза, чем у клинически здоровых свиней. В опытной группе в отличие от контрольной группы также зарегистрирован этилацетат, концентрация которого составила 0,75 мг/кг фарша, изоамилацетата - 0,31 мг/кг фарша, метилацетат - 16,11 мг/кг фарша. В вытяжке сердечной мышцы общая концентрация сложных эфиров составила 25,70 мг/кг фарша и была выше в 10 раз, чем у клинически здоровых свиней (табл.6).
При метастронгилезе в вытяжке печени выявлены сложные эфиры: концентрация этилацетата была выше в 32 раза, этилформиата - в 2 раза, чем у клинически здоровых свиней. В изучаемых группах в вытяжке печени не были зарегистрированы метилкаприлат, изоамилацетат, метилацетат и этилкаприлат. В вытяжке печени общая концентрация сложных эфиров составила 9,76 мг/кг фарша и была выше в 13 раз, чем у клинически здоровых свиней (табл.6).
В вытяжке легких при метастронгилезе были выявлены сложные эфиры: концентрация метилкаприлата была выше в 1,1 раза, этилкаприлата - в 11,2 раза, чем у клинически здоровых свиней. В опытной группе были зарегистрированы этилацетат, концентрация которого составила 0,74 мг/кг фарша, метилацетат - 6,18 мг/кг фарша, этилформиат - 2,70 мг/кг фарша, в отличие от контрольной группы. В изучаемых группах не был зарегистрирован сложный эфир изоамилацетат. В вытяжке легких общая концентрация сложных эфиров составила 11,46 мг/кг фарша и была практически на одном уровне с концентрацией клинически здоровых свиней (табл.6).
При метастронгилезе в вытяжке селезенки выявлены сложные эфиры: концентрация этилацетата была выше в 11 раз, метилацетата - в 2,2 раза, этилкаприлата - в 3,5 раза, чем у клинически здоровых свиней. В опытной группе были зарегистрированы: метилкаприлат, концентрация которого составила 1,73 мг/кг фарша, этилформиат - 1,41 мг/кг фарша, в отличие от контрольной группы. В изучаемых группах не был зарегистрирован сложный эфир изоамилацетат. В вытяжке селезенки общая концентрация сложных эфиров составила 58,87 мг/кг фарша и была выше в 2,6 раза, чем у клинически здоровых свиней (табл.7).
В вытяжке почечной ткани были выявлены сложные эфиры: концентрация метилкаприлата была выше в 1,4 раза, этилформиата - 1,5 раза и, напротив, была ниже этилацетата - в 1,3 раза, чем у клинически здоровых свиней. В изучаемых группах не были зарегистрированы изометилацетат, метилацетат и этилкаприлат. В вытяжке селезенки общая концентрация сложных эфиров составила 10,50 мг/кг фарша и была выше в 1,2 раза, чем у клинически здоровых свиней (табл.7).
При метастронгилезе общая концентрация сложных эфиров составила: в вытяжке длиннейшей мышцы спины - 20,01 мг/кг, в вытяжке сердечной мышцы - 25,70 мг/кг, в вытяжке печени - 9,76 мг/кг, в вытяжке легких - 11,46 мг/кг, в вытяжке селезенки - 58,87 мг/кг, в вытяжке почек - 10,50 мг/кг. Наибольшее содержание сложных эфиров отмечено в вытяжке селезенки, которое было выше в 5 раз, чем в вытяжке легких, в 6 раз - в вытяжке печени, в 3 раза - в вытяжке длиннейшей мышцы спины, в 2,3 раза - в вытяжке сердечной мышцы (табл.5).
Среди спиртов при метастронгилезе свиней в вытяжке длиннейшей мышце спины были зарегистрированы: метанол, концентрация которого составила 31,22 мг/кг, изоамиловый спирт - 4,72 мг/кг. В вытяжке длиннейшей мышце спины концентрация фенилэтанола и 1-гексанола была практически на одном уровне с концентрацией у клинически здоровых животных. В опытной группе 1,3-пропиленгликоль был ниже в 2 раза, чем в контрольной. В отличие от контрольной в опытной группе не был зарегистрирован 2,3-бутиленгликоль (табл.5).
При метастронгилезе в сердечной мышце были зарегистрированы спирты: метанол, концентрация которого составила 16,15 мг/кг, фенилэтанола - 5,19 мг/кг, 1-пропанола - 1,77 мг/кг, 1-гексанола - 1,85 мг/кг. В опытной группе концентрация изобутанола была выше в 4,4 раза, 1-бутанола и 2,3-бутиленгликоля - в 2 раза (табл.5).
В тканях печени при метастронгилезе были зарегистрированы спирты: этанол, концентрация которого составила 0,02об.%, изобутанола - 0,21 мг/кг, 2-пропанола - 4,76 мг/кг, 1-амилола - 0,83 мг/кг, 1-гексанола - 0,80 мг/кг. В опытной группе концентрация фенилэтанола была выше в 1,1 раза, 2,3-бутиленгликоля - в 33 раза, чем в контрольной группе (табл.6).
В легочной ткани при метастронгилезе были зарегистрированы спирты: метанол, концентрация которого составила 8,90 мг/кг, этанола - 0,03об.%, фенилэтанола - 12,07 мг/кг, изоамилового - 4,42 мг/кг, 1-амилола - 3,73 мг/кг, 1 гексанола - 5,22 мг/кг, 1-бутанола - 0,29 мг/кг. В опытной группе концентрации 2,3-бутиленгликоля была выше в 3,3 раза и 1,3-пропиленгликоля - в 1,3 раза, чем в контрольной группе (табл.6).
При метастронгилезе в тканях селезенки были зарегистрированы спирты: метанол, концентрация которого составила 9,44 мг/кг, этанола - 0,02об.%, фенилэтанола - 8,33 мг/кг, 1-пропанола - 2,03 мг/кг, 2-пропанола - 1,96 мг/кг, изоамилового - 2,33 и 1,3-пропиленгликоля - 11,44 мг/кг. В опытной группе концентрация 2,3-бутиленгликоля была выше в 10 раз, 1-гексанола - 1,7 раза, чем в контрольной группе (табл.7).
Таблица 5 - Концентрация летучих органических веществ в вытяжке органов и тканей свиней при метастронгилезе мг/кг (М±m; n=10) | ||||
Наименование органических летучих кислот | Органы и ткани | |||
мышцы | сердце | |||
контроль | опытная | контрольная | опытная | |
Уксусная | 88,07±1,33 | 43,38±1,03*** | 129,43±1,46 | 58,95±0,97 |
Пропионовая | 4,55±0,07 | 2,66±0,12*** | 9,22±0,12 | 0,24±0,03 |
Изомасляная | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,70±0,08 | 0,04±0,01 |
Масляная | 5,33±0,08 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Валериановая | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Изовалериановая | 4,30±0,02 | 0,72±0,02*** | 1,49±0,01 | 1,35±0,01 |
Метанол | 0,00±0,00 | 31,22±0,40 | 0,00±0,00 | 16,15±0,30 |
Этанол об.% | 0,01±0,01 | 0,02±0,01* | 0,01±0,01 | 0,02±0,01 |
Изобутанол | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,36±0,03 | 1,59±0,02 |
Фенилэтанол | 3,62±0,08 | 3,69±0,03 | 0,00±0,00 | 5,19±0,09 |
1-пропанол | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 1,77±0,04 |
2-пропанол | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 3,19±0,05 | 0,00±0,00 |
Изоамиловый | 0,00±0,00 | 4,72±0,03 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
1-амилол | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,32±0,03 | 0,00±0,00 |
1-гексанол | 1,76±0,04 | 1,80±0,02 | 0,00±0,00 | 1,85±0,04 |
1-бутанол | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,20±0,01 | 0,43±0,03 |
2,3-бутиленгликоль | 15,49±0,39 | 0,00±0,00 | 4,84±0,04 | 8,67±0,21 |
1,3-пропиленгликоль | 6,30±0,14 | 3,22±0,03*** | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Этилацеталь | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 1,40±0,01 | 0,14±0,01 |
Ацетальдегид | 6,71±0,05 | 6,33±0,08*** | 4,04±0,03 | 24,95±0,062 |
Фурфурол | 4,31±1,81 | 23,27±0,13*** | 4,72±0,07 | 8,88±0,18 |
Ацетоин | 5,04±0,29 | 0,00±0,00 | 9,40±4,40 | 50,50±0,59 |
Каприновый альд | 0,00±0,00 | 14,69±0,17 | 12,94±0,17 | 8,02±0,20 |
Этилацетат | 0,00±0,00 | 4,33±0,04 | 0,00±0,00 | 0,75±0,03 |
Метилкаприлат | 12,71±0,09 | 2,40±0,04*** | 0,79±0,11 | 1,90±0,02 |
Изоамилацетат | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,31±0,02 |
Метилацетат | 0,00±0,00 | 11,37±0,03 | 0,00±0,00 | 16,11±0,15 |
Этилформиат | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,62±0,27 | 3,20±0,08 |
Этилкаприлат | 1,47±0,01 | 1,91±0,04*** | 1,29±0,03 | 3,43±0,05 |
Этиллактат | 5,96±0,04 | 0,00±0,00 | 2,20±0,02 | 0,33±0,01 |
Диацетил | 4,47±0,05 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 4,54±0,08 |
*Р<0,05; **Р>0,01; ***Р>0,001 |
Таблица 6 - Концентрация летучих органических веществ в вытяжке органов тканей свиней при метастронгилезе мг/кг (М±m; n=10) | ||||
Наименование органических летучих кислот | Органы и ткани | |||
печень | легкие | |||
контрольная | опытная | контрольная | опытная | |
Уксусная | 14,71±0,19 | 24,27±0,89 | 22,17±0,45 | 110,30±1,39 |
Пропионовая | 0,29±0,02 | 12,64±0,49 | 2,47±0,06 | 40,35±0,93 |
Изомасляная | 0,17±0,01 | 2,42±0,01 | 0,00±0,00 | 4,18±0,01 |
Масляная | 0,05±0,01 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 2,72±0,02 |
Валериановая | 0,49±0,01 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Изовалериановая | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 7,60±0,01 | 1,82±0,01 |
Метанол | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 8,90±0,03 |
Этанол об.% | 0,00±0,00 | 0,02±0,01 | 0,00±0,00 | 0,03±0,01 |
Изобутанол | 0,00±0,00 | 0,21±0,01 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Фенилэтанол | 5,10±0,08 | 5,60±0,04 | 0,00±0,00 | 12,07±0,14 |
1-пропанол | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
2-пропанол | 0,00±0,00 | 4,76±0,05 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Изоамиловый | 0,70±0,01 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 4,42±0,06 |
1-амилол | 0,00±0,00 | 0,83±0,04 | 0,00±0,00 | 3,73±0,06 |
1-гексанол | 0,00±0,00 | 0,80±0,04 | 0,00±0,00 | 5,22±0,07 |
1-бутанол | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,29±0,02 |
2,3-бутиленгликоль | 0,18±0,01 | 5,94±0,11 | 2,45±0,08 | 8,15±0,17 |
1,3-пропиленгликоль | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 5,43±0,06 | 8,93±0,22 |
Этилацеталь | 0,00±0,00 | 1,38±0,02 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Ацетальдегид | 1,84±0,02 | 8,16±0,07 | 0,00±0,00 | 15,40±0,28 |
Фурфурол | 0,09±0,08 | 0,90±0,02 | 0,00±0,00 | 29,55±0,47 |
Ацетоин | 0,20±0,19 | 2,42±0,06 | 0,00±0,00 | 17,54±0,48 |
Каприновый альд | 0,47±0,14 | 1,88±0,02 | 0,00±0,00 | 13,26±0,29 |
Этилацетат | 0,27±0,03 | 8,71±0,15 | 0,00±0,00 | 0,74±0,02 |
Метилкаприлат | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,81±0,04 | 0,90±0,02 |
Изоамилацетат | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Метилацетат | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 6,18±0,08 |
Этилформиат | 0,48±0,03 | 1,05±0,01 | 0,00±0,00 | 2,70±0,07 |
Этилкаприлат | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 10,87±0,09 | 0,94±0,03 |
Этиллактат | 0,00±0,00 | 3,58±0,07 | 0,00±0,00 | 0,39±0,01 |
Диацетил | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 2,56±0,05 |
***Р>0,001 |
Таблица 7 - Концентрация летучих органических веществ в вытяжке органов и тканей свиней при метастронгилезе мг/кг (М±m; n=10) | ||||
Наименование органических летучих кислот | Органы и ткани | |||
селезенка | почки | |||
контрольная | опытная | контрольная | опытная | |
Уксусная | 68,16±0,90 | 90,15±1,98 | 75,20±0,76 | 69,19±0,91 |
Пропионовая | 1,73±0,03 | 89,72±1,81 | 5,34±0,09 | 0,65±0,02 |
Изомасляная | 0,00±0,00 | 0,17±0,01 | 0,00±0,00 | 0,02±0,01 |
Масляная | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Валериановая | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Изовалериановая | 0,92±0,01 | 0,00±0,00 | 0,94±0,01 | 1,52±0,01 |
Метанол | 0,00±0,00 | 9,44±0,13 | 8,01±0,05 | 13,26±0,29 |
Этанол об.% | 0,00±0,00 | 0,02±0,01 | 0,00±0,00 | 0,02±0,01 |
Изобутанол | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Фенилэтанол | 0,00±0,00 | 8,33±0,18 | 2,52±0,03 | 3,34±0,04 |
1-пропанол | 0,00±0,00 | 2,03±0,05 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
2-пропанол | 0,00±0,00 | 1,96±0,06 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Изоамиловый | 0,00±0,00 | 2,33±0,03 | 0,00±0,00 | 1,61±0,04 |
1-амилол | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 1,47±0,03 |
1-гексанол | 2,78±0,10 | 4,79±0,10 | 1,62±0,03 | 2,62±0,06 |
1-бутанол | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
2,3-бутиленгликоль | 1,14±0,03 | 11,27±0,29 | 5,97±0,09 | 15,03±0,16 |
1,3-пропиленгликоль | 0,00±0,00 | 11,44±0,34 | 4,80±0,13 | 6,05±0,12 |
Этилацеталь | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Ацетальдегид | 4,21±0,02 | 8,16±0,12 | 5,64±0,06 | 11,44±0,27 |
Фурфурол | 8,20±0,21 | 97,87±0,69 | 12,88±0,31 | 35,28±0,87 |
Ацетоин | 0,00±0,00 | 4,68±0,13 | 4,65±0,83 | 13,52±0,27 |
Каприновый альд. | 6,23±1,18 | 18,74±0,21 | 9,98±0,86 | 20,46±0,47 |
Этилацетат | 0,35±0,32 | 4,02±0,08 | 2,28±0,04 | 1,77±0,04 |
Метилкаприлат | 0,00±0,00 | 1,73±0,02 | 4,08±1,66 | 5,72±0,08 |
Изоамилацетат | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Метилацетат | 19,81±0,20 | 44,36±0,98 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Этилформиат | 0,00±0,00 | 1,41±0,02 | 2,05±0,05 | 3,01±0,07 |
Этилкаприлат | 2,08±0,07 | 7,35±0,20 | 0,00±0,00 | 0,00±0,00 |
Этиллактат | 7,82±0,10 | 0,00±0,00 | 1,85±0,03 | 0,32±0,02 |
Диацетил | 0,00±0,00 | 5,27±0,10 | 2,04±0,02 | 3,19±0,09 |
***Р>0,001 |
В почечной ткани при метастронгилезе были зарегистрированы спирты: этанол, концентрация которого составила 0,02об.%, изоамилового - 1,61 мг/кг, 1-амилола - 1,47 мг/кг. В опытной группе концентрация 1-гексанола и метанола была выше в 1,6 раза и в 1,7 раза соответственно, фенилэтанола и 1,3-пропиленгликоля - в 1,3 раза, 2,3-бутиленгликоля - в 2,5 раза, чем в контрольной группе (табл.7).
При метастронгилезе свиней концентрация этиллактата (полисахарид) в вытяжке сердечной мышцы и почек была ниже в 7 раз и 5 раз соответственно по сравнению с клинически здоровыми животными. В опытной группе концентрация этиллактата в тканях печени и легких составила 3,58 мг/кг и 0,39 мг/кг соответственно и в то же время не выявлена в длиннейшей мышце спины и в тканях селезенки (табл.5).
При метастронгилезе свиней концентрация диацетила (кетон) в вытяжке почек была выше в 1,6 раза по сравнению с клинически здоровыми животными. В опытной группе концентрация этиллактата сердечной мышцы составила 4,54 мг/кг, в тканях легких - 2,56 мг/кг, в тканях селезенки - 5,27 мг/кг и не выявлена в длиннейшей мышце спины и в тканях печени (табл.7).
В результате проведенных исследований при инвазии крупного рогатого скота Echinococcus granulosus общая концентрация карбоновых кислот составила 46,95 мг/кг и была ниже в 1,3 раза в длиннейшей мышце спины, 34,59 мг/кг (в 1,2 раза) - в сердечной мышце (табл.8), 16,17 мг/кг (в 2 раза) - селезенки и, напротив, выше в 10 раз (149,28 мг/кг) в тканях печени, в 3,4 раза (105,10 мг/кг) - в легочной ткани (табл.9), в 2 раза (88,10 мг/кг) - почек (табл.10), чем у клинически здоровых животных
При эхинококкозе общая концентрация альдегидов составила 23,02 мг/кг и была ниже в 1,6 раза в длиннейшей мышце спины, 6,82 мг/кг (в 1,7 раза) - селезенки и, напротив, выше в 19,4 раза (46,90 мг/кг) в тканях печени, в 4 раза (48,70 мг/кг) - в легочной ткани, в 2 раза (117,95 мг/кг) - в сердечной мышце, в 1,1 раза (18,95 мг/кг) - почек, чем у клинически здоровых животных.
При эхинококкозе общая концентрация сложных эфиров составила 10,48 мг/кг и была выше в 2 раза в длиннейшей мышце спины, 4,49 мг/кг (в 3,7 раза) - селезенки, 7,47 мг/кг (в 3 раза) - в тканях печени, 9,68 мг/кг (в 3,3 раза) - в легочной ткани, 5,25 мг/кг (в 3 раза) - в сердечной мышце, 11,26 мг/кг (в 9 раз) - почек, чем у клинически здоровых животных.
При эхинококкозе в длиннейшей мышце спины были зарегистрированы спирты: метанол, концентрация которого составила 2,89±0,05 мг/кг, изоамиловый спирт - 2,76±0,03 мг/кг, этанол - 0,06±0,001 об.%. Концентрация 2,3-бутиленгликоля была выше в 1,1 раза, чем у клинически здоровых животных.
При эхинококкозе в сердечной мышце были зарегистрированы спирты: метанол, концентрация которого составила 3,05±0,02 мг/кг, изоамиловый спирт - 3,82±0,05 мг/кг. Концентрация 2,3-бутиленгликоля была выше в 5 раз, этанола - в 8 раз, чем у клинически здоровых животных.
При эхинококкозе в тканях печени были зарегистрированы спирты: метанол, концентрация которого составила 10,76±0,05 мг/кг, изоамиловый спирт - 1,78±0,02 мг/кг, 1-амилол - 1,83±0,03 мг/кг, 2,3-бутиленгликоль - 30,88±0,21 мг/кг, 1,3-пропиленгликоль - 10,96±0,07 мг/кг (табл.9).
В легочной ткани при эхинококкозе были