Способ диагностики хронического вирусного гепатита с, обусловленного опийной наркоманией

Способ диагностики хронического вирусного гепатита с, обусловленного опийной наркоманией

Реферат

Изобретение относится к области медицины, в частности к гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики хронического вирусного гепатита С, обусловленного опийной наркоманией.

Несмотря на большое количество факторов, оказывающих влияние на течение вирусных гепатитов, на сегодняшний день, несомненно, важна оценка роли токсического агента - опиатов во взаимодействии с вирусом и в поражении печени, учитывая, что в настоящее время сформировано понятие о наркозависимом эпидемиологическом процессе при хроническом вирусном гепатите С [1, 2, 3, 4]. Вызывающие гепатиты вирусы выявляются, как правило, у больных наркоманией и нередко в комплексе являются причиной хронических поражений печени [5, 6]. Преимущественно это лица молодого возраста (15-29 лет), как правило, имеющие маркеры сочетанной вирусной инфекции HBV+HCV [7, 1, 8].

В целом ряде работ выявлена возможность более тяжелого течения вирусных гепатитов у потребителей наркотиков, обусловленного как прямым токсическим воздействием на гепатоцит вводимых веществ, так и иммуносупрессорным эффектом последних. Наркотические вещества усиливают биохимические, микроциркуляторные, иммунологические и морфологические нарушения при вирусных гепатитах [1, 6, 2, 8].

В настоящее время накоплен обширный материал, свидетельствующий о грубых изменениях иммунологической реактивности у больных, страдающих опийной наркоманией. С употреблением опиоидов связывают более тяжелое поражение печени за счет уменьшения в крови CD3+, CD4+, CD8+, уменьшением соотношения CD4+/CD8+ [9] отмечают иммунологическую недостаточность с преимущественным нарушением Т-клеточного звена иммунитета, что сопровождается значительным снижением CD3+ и CD4+ лимфоцитов [10].

При анализе литературы встречаются лишь единичные работы с оценкой показателей цитокинов при течении хронического вирусного гепатита С на фоне опийной наркомании, при этом в данных исследованиях не проводилось изучения морфологической картины поражения печени [11, 12, 13]. Так, в работе Д.X.Курамшина (2002) характерной особенностью иммунного статуса пациентов - наркоманов при хроническом вирусном гепатите В и В+С явилось увеличение показателей гуморального иммунитета и рост концентраций провоспалительных медиаторов, при этом показатели Т-клеточного звена мало отличались от результатов, полученных у пациентов, не употреблявших наркотики [11]. В работе В.Ю.Рисберга (2002), напротив, у пациентов с опийной наркоманией сывороточный уровень фактора некроза опухоли-α значимо не отличался от группы здоровых, сывороточный уровень интерлейкина-2 и интерлейкина-4 был повышен в два и в четыре с половиной раза соответственно, а при индукции синтеза цитокинов липополисахаридом (ЛПС) Е. coli - ЛПС-индуцированный синтез фактора некроза опухоли-α угнетался почти в 2 раза [12]. По данным работы Н.В.Касьяновой (2002) индивидуальные показатели активности ИФН-γ были одинаково низкими как у пациентов с изолированным течением хронического вирусного гепатита С, так и на фоне опийной наркомании [13]. Однако не в каждой работе сравнивались показатели цитокинового обмена у больных хроническим вирусным гепатитом С с аналогичными показателями при течении вирусного процесса на фоне опийной наркомании, уровни противовосполительного интерлейкина-10 не изучались. Перед авторами представленных работ не стояло задачи диагностировать хронический вирусный гепатит С, обусловленный опийной наркоманией.

Исследования, в которых представлены результаты морфологической картины хронического вирусного гепатита С на фоне приема опиатов, отличаются противоречивостью [6, 14, 15, 16]. Так, по данным Г.С.Томилка (2001) у потребителей наркотиков хронические вирусные гепатиты протекают клинически тяжелее, при этом морфологические изменения характеризуются усилением признаков активности процесса и степени фиброзирования [16]. Более высокая активность патологического процесса в печени, при сочетанном течении вирусной инфекции с наркоманией за счет выраженного некроза и белковой дистрофии печени, отмечена и рядом других авторов [6].

В других исследованиях отмечено в основном латентное малосимптомное течение хронического вирусного гепатита на фоне наркомании, отсутствие существенных изменений показателей иммунного статуса, выявлена преимущественно фаза интеграции вирусов и морфологически установлено преобладание неактивных и малоактивных форм поражения печени [17, 18, 2, 14, 15]. В ряде работ выявлено отсутствие влияния наркотических веществ на печень, при этом поражение гепатоцитов, по данным авторов, обусловлено исключительно вирусным компонентом [18]. Есть исследования, где описаны морфологические признаки, характерные для сочетанного воздействия вирусов и опиатов в виде склероза стенок центральных вен [17, 3], однако они носят описательный характер, в них нет информации о частоте встречаемости этого признака в группе контроля. Так, в работе Е.Г.Сахаровой характерной особенностью морфологической картины биоптатов больных хроническим вирусным гепатитом С на фоне опийной наркомании является склероз стенок центральных вен. Однако в данной работе не сравнивали морфологическую картину биоптатов печени, полученную у пациентов-наркоманов, с картиной при изолированном течении хронического вирусного гепатита С [17]. По данным Г.А.Мезенцева и др. также отмечается специфичность фиброзных изменений печени наркозависимых пациентов с HCV-инфекцией с преимущественным склерозом центральных вен, однако эти данные также не достоверны и не сравнивались с данными, полученными у пациентов с изолированным течением хронического вирусного гепатита С [19]. Упоминание о наличии значительного склероза стенок центральных вен у пациентов с течением хронических вирусных гепатитов на фоне опийной наркомании имеется и в работе других авторов [20], но также не проводится сравнения с частотой встречаемости этого морфологического признака у пациентов с хроническими вирусными гепатитами, не страдающих опийной наркоманией. Кроме того, в этих работах речь идет именно о склерозе стенок центральных вен, в то время как мы говорим не о склерозе, а о фиброзе самой центральной вены. Лишь в одной работе имеются достоверные данные о наличии фиброза стенок центральных вен у наркоманов по сравнению с лицами, не употреблявшими наркотики, но авторы говорят именно о стенках центральных вен. Кроме того, эти данные получены только по результатам аутопсийного исследования [21], что также может искажать картину и, несомненно, снижает их ценность для клинициста, работающего с живым пациентом. Таким образом, в современной литературе отсутствует достоверная информация о частоте встречаемости фиброза центральных вен у больных с изолированным течением хронического вирусного гепатита С в сравнении с течением этого процесса при опийной наркомании у живых пациентов.

Учитывая распространенность и тяжелые исходы хронических вирусных гепатитов, молодой возраст больных, крайне актуальным представляется поиск критериев диагностики хронического вирусного гепатита С, обусловленного опийной наркоманией, чему и посвящена наша работа.

Новая техническая задача - создание способа диагностики хронического вирусного гепатита С, обусловленного опийной наркоманией.

Для решения поставленной задачи в способе диагностики хронического вирусного гепатита С, обусловленного опийной наркоманией, у больных хроническим вирусным гепатитом С определяют базальный, стимулированный уровень интерлейкина-10 (ИЛ-10), проводят пункционную биопсию печени с последующей световой микроскопией полученных биоптатов и при уровне базального ИЛ-10 от 218,5 пг/мл до 288,5 пг/мл, стимулированного ИЛ-10 от 468 пг/мл до 588 пг/мл, наличии фиброза центральных вен диагностируют хронический вирусный гепатит С, обусловленный опийной наркоманией.

Способ осуществляют следующим образом. Предлагаемый способ применим для диагностики у пациентов с отсутствием противопоказаний к проведению пункционной биопсии печени. При обращении пациента с диагностированным хроническим вирусным гепатитом С определяют уровень базального, стимулированного ИЛ-10 и проводят слепую чрескожную пункционную биопсию печени под местной инфильтрационной анестезией 6 мл 2% раствора новокаина.

Определение уровня ИЛ-10 в супернатантах культивированных мононуклеаров проводят с использованием твердофазного иммуноферментного «сэндвичевого» метода. В основе этой идентификации лежит конъюгация одного эпитопа молекулы цитокина мышиными моноклональными антителами, сорбированного на твердой фазе микропланшета. Процедуру выполнения иммуноферментного анализа проводят по инструкциям, предлагаемым производителями тест-систем («Procon», Россия; «Cytimmune», США).

Для получения супернатантов выделенные мононуклеары ресуспендируют в полной питательной среде, состоящей из 90% RPMI-1640, 10% инактивированной (при 56°С в течение 30 мин) эмбриональной телячьей сыворотки («ICN Biomedicals Inc.», США), 280 мг/л L-глутамина, 100 мг/л гентамицина и 2 мМ/л HEPES («Flow», Великобритания). Стандартизируют количество клеток в суспензии до 2,0×10⁶/мл. Для стимуляции секреторной способности лимфоцитов в пробы вносят фитогемаглютинин (ФГА) («Difco», Германия) в концентрации 0,01 мг/мл культуры. Клеточные суспензии в количестве 2 мл инкубируют при 37°С и 5% CO₂ на протяжении 24 ч. После инкубации пробирки встряхивали, центрифугируют 10 мин при 1500 об/мин, супернатант собирают и используют для количественного определения концентрации цитокинов [22].

Для оценки продукции IL-10 мононуклеарами периферической крови автоматической микропипеткой в соответствующие ячейки микропланшета добавлют по 100 мкл «0 дозы» и стандартов IL-10 с известными концентрациями. В оставшиеся ячейки помещают 100 мкл супернатанта и 25 мкл поликлональных антител и инкубируют планшет 3 ч при комнатной температуре. После двухкратного цикла промывки в каждую лунку добавляют по 50 мкл козлиной антикроличьей щелочной фосфатазы и инкубировали 45 мин. После очередного цикла промывки в ячейки микропланшета вводят по 200 мкл окрашивающего раствора и инкубировали 10 мин при комнатной температуре в темном месте. По окончании завершающей фазы инкубации в лунки вносят по 50 мкл стоп-раствора. Учет результатов иммуноферментого анализа производят с помощью фотометра для микропланшетов «Multiscan EX» («ThermoLabSystems», Финляндия) при длине волны 490 нм IL-10. Концентрацию цитокинов вычисляют по калибровочной кривой.

Слепую чрескожную пункционную биопсию печени проводят под местной инфильтрационной анестезией 6 мл 2% раствора новокаин. Исключив абсолютные и относительные противопоказания, после проведения предварительного общеклинического обследования пациентов с обязательным контролем основных показателей гемостаза осуществляют забор материала. Для получения биоптатов печени используют одноразовый набор «Hepafix» фирмы «Braun» (ФРГ) с внутренним диаметром от 1,4 до 1,8 мм и длиной иглы 88 мм. Объем биоптатов составлял от 20 до 35 мм³. Светооптическое исследование биоптатов печени проводят следующим образом. Взятый для исследования фрагмент ткани печени немедленно помещают в фиксирующую жидкость, состоящую из 96% этилового спирта и формалина в соотношении 1:4. Препараты готовят по стандартной методике, заливают в парафин [15]. Срезы толщиной 5-6 мкм исследуют с помощью следующих гистологических методик: окраска гематоксилином и эозином, окраска пикнофуксином по Ван Гизону коллагеновых волокон соединительной ткани печени, окраска пиронином по Браше на РНК, ШИК-реакция по Мак-Манусу на гликоген и гликопротеиды, окраска липидов суданом черным, реакция Перлса на верификацию железа [15]. Биоптаты считают информативными при обнаружении четырех и более портальных трактов с полноценными триадами (портальная вена, печеночная артерия, желчный проток). Индекс гистологической активности (ИГА) гепатита и степень фиброза рассчитывали по V. J. Desmet et al. (1994): минимальная активность - от 1 до 3 баллов, слабая - от 4 до 8 баллов, умеренная - от 9 до 12 баллов, высокая - от 13 до 18 баллов. При наличии портального и перипортального фиброза его считают слабым, одной и более порто-портальных септ - умеренным, одной и более порто-центральных септ - тяжелым и при наличии ложных долек диагностировался цирроз печени [16, 22].

Изучают качественную и количественную характеристику состояния гепатоцитов как перипортальной, так и интралобулярной зон. Оценивают дистрофические процессы, гидропическую, жировую дистрофии, содержание в гепатоцитах железа. Обращают внимание на некроз гепатоцитов (моноцеллюлярный, ступенчатый, мостовидный, очаговый интралобулярный), портальную и интралобулярную клеточную инфильтрацию, а также характер фиброза (портальный, перипортальный, порто-портальный, порто-центральный и порто-лобулярный), при этом учитывают перигепатоцеллюлярный фиброз и фиброз центральных вен.

Количественная характеристика включает в себя анализ состояния гепатоцитов различных участков печеночной дольки: перипортальной зоны, гепатоцитов второй и третьей зон. Оценке в перипортальной и интралобулярной зонах подвергают дистрофические, некротические и регенераторные процессы. Для оценки выраженности дистрофических процессов подсчитывают относительное количество гепатоцитов, содержащих в своей цитоплазме жировые вакуоли мелкого, среднего и крупного калибра. Гепатоциты, в ядрах которых была обнаружена конденсация хроматина с маргинальной локализацией, относят к гепатоцитам с «песочными» ядрами; подсчитывают их относительное количество как интралобулярно, так и перипортально. Определяют относительное количество гепатоцитов, ядра которых находились в состоянии пикноза. Гепатоциты с выраженной базофилией ядер относят к гиперхромным, а имеющие в цитоплазме более трех ядер - к многоядерным. Гепатоциты, имеющие ядра с различиями по величине и тинкториальным свойствам, считают клетками с полиморфностью ядер. Количество гепатоцитов с вышеописанными изменениями рассчитывают в процентах от числа клеток перипортальной и интралобулярной зон.

Количественной оценке подвергают и клеточный инфильтрат портальных трактов и внутри долек на срезах, окрашенных эозином и гематоксилином и по Браше. Подсчитывают абсолютное и относительное количество лимфоцитов, плазматических клеток, эозинофилов, нейтрофильных лейкоцитов, фибробластов во всех портальных трактах биоптата. Кроме того, подсчитывают гепатоциты со слабой, умеренной и выраженной концентрацией железа.

Для морфометрического исследования используют компьютерную систему анализа изображений, включающую световой микроскоп с цифровой фотокамерой и программную обработку полученных изображений.

При уровне базального ИЛ-10 от 218,5 пг/мл до 288,5 пг/мл, стимулированного ИЛ-10 от 468 пг/мл до 588 пг/мл и наличии фиброза центральных вен диагностируют хронический вирусный гепатит С, обусловленный опийной наркоманией.

Предлагаемые критерии отобраны на основании анализа результатов клинических наблюдений за пациентами, страдающими хроническим вирусным гепатитом С и хроническим вирусным гепатитом С на фоне опийной наркомании. Проведено обследование 49 больных хроническим вирусным гепатитом С, 16 из которых составили основную группу и были опийными наркоманами с максимальным сроком абстиненции 2 месяца. Все они имели положительную ПЦР к HCV. Возраст обследованных составлял от 18 до 48 лет (средний возраст обследованных - 28,2±5,1 лет), мужчин было 40 (81,6%), женщин - 9 (18,4%). Момент включения в исследование - верификация в стационаре ОКБ г.Томска хронического вирусного гепатита С и факт системного регулярного внутривенного употребления опиатов по данным анамнеза. Часть пациентов (7 человек), употреблявших наркотики, при обследовании находились в состоянии абстиненции (с максимальным сроком 2 месяца), у других (9 человек) исследования были проведены на фоне приема опиатов, что подтверждалось положительным тестом на наличие опиатов в моче. Во всех случаях в качестве наркотика использовался сырец опия. У всех больных в группе опийных наркоманов методом иммуноферментного анализа (ИФА) определялись маркеры перенесенного острого вирусного гепатита В в виде изолированных НВ cor AT (IgG) и активной HCV инфекции. Длительность приема наркотиков составляла от 2 до 14 лет (средняя продолжительность опийной наркомании 6±3,4 лет), длительность инфекции составляла от 2 до 14 лет (средняя продолжительность HCV инфекции 7,3±3,6 лет). Из исследования были исключены пациенты, для которых злоупотребление алкоголем являлось изолированным токсическим фактором при наличии хронического вирусного гепатита С, пациенты с противовирусным лечением в анамнезе, с тяжелой сопутствующей патологией, которая могла бы оказать влияние на тяжесть поражения печени, исключался факт злоупотребления лекарственными препаратами.

Всем пациентам определяли базальный и стимулированный уровень ИЛ-10 и проводили слепую чрескожную пункционную биопсию печени под местной инфильтрационной анестезией 6 мл 2% раствора новокаина. Здоровым взрослым добровольцам (15 человек) оценивали базальный и стимулированный уровень ИЛ-10.

Для проведения статистической обработки фактического материала использовали статистический пакет SAS 8.0 (SAS Inc., США). Проверку на нормальность распределения фактических данных проводили с помощью критерия Шапиро-Вилка. Результаты представлены в виде медианы, нижнего и верхнего квартилей (Me, Q₁-Q₃) и среднего ± стандартное отклонение (M±SD).

При проведении сравнений независимых выборок, при количестве групп =2 в случае нормального распределения и равных дисперсий в группах применяли t-критерий Стьюдента для независимых наблюдений или критерий Аспера-Уолча при неравенстве дисперсий; при отклонении распределения от нормального применяли критерий Манна-Уитни. Статистически значимыми считались отличия при р<0,05. При анализе результатов (см. табл.1, 2). В таблице 1 представлены данные морфологического исследования биоптатов печени у пациентов с изолированным течением хронического вирусного гепатита С и с течением вирусного процесса на фоне опийной наркомании. В таблице 2 представлены данные о содержании иммуноцитокинов в супернатантах (пг/мл) у больных с изолированным течением хронического вирусного гепатита С и с течением вирусного процесса на фоне опийной наркомании (Me; Q₁:Q₃). Получено, что у пациентов, страдающих хроническим вирусным гепатитом С, уровень ИЛ-10 был выше, чем у здоровых добровольцев. Однако у опийных наркоманов выявлены достоверно более высокие показатели ИЛ-10 как в сравнении со здоровыми добровольцами, так и в сравнении с пациентами с изолированным течением хронического вирусного гепатита С. Фиброз центральных вен при системной наркомании встречался достоверно чаще, чем при изолированном вирусном поражении печени (50% и 18,2% соответственно), что свидетельствует о том, что данная локализация фиброза является характерным признаком присутствия в качестве этиологического фактора повреждения печени опиатов. Это позволяет рассматривать именно фиброз центральных вен, как диагностический признак токсического воздействия опиатов.

Таким образом, при повышении базального уровня противовоспалительного цитокина ИЛ-10 от 218,5 пг/мл до 288,5 пг/мл, стимулированного ИЛ-10 от 468 пг/мл до 588 пг/мл и наличии фиброза центральных вен диагностируют хронический вирусный гепатит С, обусловленный опийной наркоманией.

Примеры диагностики

Пример 1

В отделение гастроэнтерологии ОКБ г.Томска поступил больной 20 лет с жалобами на слабость, боли в правом подреберье тянущего характера. Пациент являлся опийным наркоманом, в возрасте 17 лет диагностирован хронический вирусный гепатит С. Злоупотребление алкоголем, лекарственными препаратами отрицал, противовирусное лечение не получал. При объективном исследовании выявлено повышение температуры тела до 37,3°С, гепато- и спленомегалия. В биохимическом анализе крови выявлено повышение АсАТ до 63 Е/л, АлАТ до 52 Е/л, повышение уровня билирубина до 28,3 Мкмоль/л. Диагностировано поражение почек в виде смешанной формы гломерулонефрита. В сыворотке крови определялись маркеры вирусных гепатитов как В, так и С, с наличием активной HCV-инфекции в сочетании с серологическими маркерами HBV в виде «изолированных» Hbcor AT (IgG). При изучении показателей иммунитета обнаружен Т-клеточный иммунодефицит (абсолютная лимфопения, низкое содержание зрелых Т-лимфоцитов),снижение иммунорегуляторного индекса, угнетение неспецифического звена защиты (низкое число натуральных киллеров), увеличение количества лимфоцитов с повышенной апоптотической готовностью и высокая активность гуморального звена иммунитета (IgM 1,3 г/л), увеличено содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) до 87 Ед. Значение базального ИЛ-10 находилось на уроне 218,5 пг/мл, стимулированного - 468 пг/мл. Пациенту проведена пункционная биопсия печени. При проведении световой микроскопии биоптата был выявлен фиброз центральных вен и при его обнаружении выставлен диагноз, подтверждающий присутствие в качестве этиологического фактора повреждения печени опиатов.

Пример 2

В отделение гастроэнтерологии ОКБ г.Томска поступил больной 22 лет с жалобами на тянущие боли в правом подреберье. Наркоманию, злоупотребление алкоголем, лекарственными препаратами отрицал, противовирусное лечение не получал. По данным объективного обследования выявлена гепатомегалия. В биохимическом анализе крови выявлено двукратное повышение АлАТ. Показатели иммунитета свидетельствовали о наличии Т-клеточного иммунодефицита, снижении иммунорегуляторного индекса, угнетении неспецифического звена защиты, увеличении количества лимфоцитов с повышенной апоптотической готовностью, повышении активности гуморального звена иммунитета (IgM 1,6 г/л) и комплексообразовании (уровень ЦИК 120 Ед). Уровень базального ИЛ-10 составил 288,5 пг/мл, стимулированного - 588 пг/мл. Пациенту проведена пункционная биопсия печени. По результатам световой микроскопии биоптата был выявлен фиброз центральных вен. Показатели базального значения противовосполительного цитокина в совокупности с наличием фиброза центральных вен позволили с уверенностью говорить о присутствии опиатов в качестве этиологического фактора повреждения печени, что было подтверждено сведениями, полученными от родственников.

Пример 3

Обратился больной хроническим вирусным гепатитом С 28 лет с жалобами на утомляемость, боли в правом подреберье тянущего характера. Из анамнеза выяснено, что причиной заражения явилась гемотрансфузия, проведенная 6 лет назад. Наркоманию, злоупотребление алкоголем, лекарственными препаратами отрицал, противовирусное лечение не получал. При объективном исследовании выявлена гепатомегалия. В биохимическом анализе крови патологии не выявлено. Больной имел положительную ПЦР к HCV.

При изучении показателей иммунитета выявлена абсолютная лимфопения, высокая активность гуморального звена иммунитета (IgG 12,5 г/л, IgM 2,3 г/л), увеличение количества ЦИК до 85 Ед. Уровень базального ИЛ-10 составил 174 пг/мл, стимулированного - 430 пг/мл. По результатам световой микроскопии биоптата фиброз центральных вен не выявлен. Значения базального и стимулированного уровня ИЛ-10 в совокупности с отсутствием фиброза центральных вен позволили говорить об изолированном течении вирусного процесса в печени.

Таким образом, хронический вирусный гепатит С, обусловленный опийной наркоманией, диагностирован у 16 пациентов, что подтверждено у 8 пациентов наличием фиброза центральных вен. Предлагаемый способ позволяет проводить диагностику присутствия в качестве этиологического фактора повреждения печени опиатов с достаточной степенью точности.

Источники информации

1. Кожевникова Г.М. Эпидемиологические и клинические особенности острых вирусных гепатитов В и С у потребителей наркотиков: Автореф. дис.… д-ра мед. наук / Г.М.Кожевникова. - М., 2000.

2. Печень наркоманов / А.С.Логинов, Л.Ю.Ильченко, Т.М.Царегородцева и др. // Терапевтический архив. - 1999. - №9. С.39-44.

3. Семке В.Я. Распространенность, патоморфоз и клинико-психологические аспекты опийной наркомании в Томской области / В.Я.Семке, Н.А.Бохан, А.И.Мандель // Наркология. - 2002. - №7. - С.20-23.

4. Чуйкова К.И. Актуальные вопросы эпидемиологии и профилактики вирусных гепатитов В и С в Томской области / К.И.Чуйкова // Сибирский медицинский журнал. - 2000. - №3. - С.27-29.

5. Логинов А.С. Гастроэнтерология вчера, сегодня, завтра / А.С.Логинов // Терапевтический архив. - 2000. - №2. - С.5-7.

6. Масевич Ц.Г., Ермолаева Л.Г. Клинические, биохимические и морфологические особенности хронических гепатитов различной этиологии / Ц.Г.Масевич, Л.Г.Ермолаева // Терапевтический архив. - 2002. - №2. - С.35-37.

7. Ивашкин В.Т. Состояние и перспективы развития гастроэнтерологии / В.Т.Ивашкин, Ф.И.Комаров // Терапевтический архив. - 2002. - №2. - С.5-8.

8. Томилка Г.С. Биохимическая характеристика вирусных гепатитов у лиц, употребляющих и не употребляющих наркотики / Г.С.Томилка, Я.А.Журавлев, Н.М.Гординская // Терапевтический архив. - 2002. - №11. - С.6-10.

9. Взаимосвязь активности гепатита, фиброза печени и иммунного статуса у детей с хроническим вирусным гепатитом В+С / П.Н.Филимонов, Н.И.Гаврилова, Г.Я.Иванов, В.А.Шкурупий // Журнал микробиологии, эпидемиологии, иммунологии. - 2004. - №2. - С.50-56.

10. Клинико-лабораторные особенности гепатита С у наркозависимых больных молодого возраста / Е.А.Иоанниди, Е.В.Патока, С.М.Шаршова, О.А.Чернявская, О.В.Александров // Вестник ВолГМУ. - 2007. - №4.

11. Курамшин Д.X. Цитокины и показатели иммунного статуса больных вирусным гепатитом С и сочетанным вариантом гепатита С+В: Автореф. дис.… канд. биол. наук / Д.X.Курамшин. - Новосибирск, 2002. - 22 с.

12. Рисберг В.Ю. Особенности иммунного статуса и апоптоз лимфоцитов при опийной наркомании: Автореф. дис.… канд. мед. наук / В.Ю.Рисберг. - Уфа, 2002. - 27 с.

13. Касьянова Н.В. Система интерферона у наркоманов с хронической HCV-инфекцией: Автореф. дис.… канд. мед. наук / Н.В.Касьянова. - Москва, 2002. - 19 с.

14. Сахарова Е.Г. Патоморфологический анализ и клинические особенности гепатита С и его сочетания с гепатитом В: Автореф. дис.… канд. мед. наук / Е.Г.Сахарова. - Новосибирск, 1999. - 24 с.

15. Толоконская Н.П. Пато- и морфогенез гепатита С. Обоснование стратегии терапии персистирующих инфекций: Автореф. дис.… д-ра мед. наук / Н.П.Толоконская. - Новосибирск, 1999. - 60 с.

16. Томилка Г.С. Вирусные гепатиты сочетанной этиологии у потребителей наркотиков: Автореф. дис.… д-ра мед. наук / Г.С.Томилка. - Москва, 2001. - 39 с.

17. Гистопатология и ультраструктура печени при действии наркотических веществ в сочетании с вирусами гепатита С и В / Г.И.Непомнящих, Н.П.Толоконская, Е.Г.Сахарова и др. // Бюллетень экспериментальной биологии. - 1999. - Т.128, №9. - С.351-355.

18. Ильченко Л.Ю. Поражение печени у наркоманов и токсикоманов: Автореф. дис.… д-ра мед. наук / Л.Ю.Ильченко. - Москва, 1999. - 51 с.

19. Морфологические маркеры токсического поражения печениу наркозависимых пациентов с хронической HCV-инфекцией / Г.А.Мезенцева и др. // Бюллетень Сибирского отделения Российской академии медицинских наук: ежеквартальный научно-теоретический журнал. - 2003. - №1. - С.28-31.

20. Лекарственно-индуцированное поражение печени: универсальные структурные маркеры / Ивашкин В.Т., Непомнящих Г.И., Айдагулова С.В., Непомнящих Д.Л., Дюбанова Г.А., Домникова Н.П., Мигуськина Е.И. // Российский журнал гастроэнтерологии и колопроктологии. - 2009. - №2. - С.22-30.

21. Морфологические особенности хронического вирусного гепатита у наркоманов / О.В.Макарова и др. // Архив патологии: Двухмесячный научно-теоретический журнал. - 2008. - №6. - С.25-30.

22. Хаитов Р.М. Норма и патология оценки иммунного статуса человека / Р.М.Хаитов // Клиническая иммунология. - 2000. - №2. - С.5-6.

Таблица 1.
Показатели	ХВГ-С	Нарк.	Р парные
1	2
Фиброз центральных вен	абс.	6	8	P1-2=0,034
%	18,2	50

Таблица 2.
Показатели	Здоровые доноры	ХВГ-С	Наркомания	Р парн.
1	2	3
N	Me	N	Me	N	Me
ИЛ-10 базальный уровень	10	64,95		175,66	16	248,5	P1-2<0,001, P1-3<0,001, P2-3=0,034
60,52:85,96	33	133,6:228		218,5:288,5
ИЛ-10		133,13		431,0		508,0	P1-2<0,001, P1-3<0,001, Р2-3=0,001
стимулированный уровень	10	115,4:170,8	33	357,6:477	16	468:558

Способ диагностики хронического вирусного гепатита С, обусловленного опийной наркоманией, характеризующийся тем, что проводят пункционную биопсию печени с последующей световой микроскопией в полученных биоптатах определяют базальный, стимулированный уровень интерлейкина-10 (ИЛ-10), и при уровне базального ИЛ-10 от 218,5 до 288,5 пг/мл, стимулированного ИЛ-10 от 468 до 588 пг/мл, наличии фиброза центральных вен диагностируют хронический вирусный гепатит С, обусловленный опийной наркоманией.