Фармацевтические композиции, содержащие циклоспорин

Фармацевтические композиции, содержащие циклоспорин

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Изобретение относится к жидким фармацевтическим препаратам, которые содержат в качестве активного агента циклоспорин, а также вещества с похожими физическими, химическими и терапевтическими свойствами, и которые пригодны для орального, парентерального, назального, глазного, топического применения, введения через слизистую оболочку и, в особенности, введения в легкие. Другие аспекты изобретения относятся к контейнерам для упаковки и введения препаратов и их концентратов. Кроме того, данное изобретение относится к фармацевтическому применению препаратов и их применению для лечения конкретных заболеваний.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Циклоспорин представляет собой циклический олигопептид с иммунодепрессивной и кальциневриновой ингибирующей активностью. Он характеризуется селективным и обратимым механизмом иммунодепрессивности. Он селективно блокирует активацию Т-лимфоцитов за счет продуцирования некоторых цитокинов, которые принимают участие в регуляции этих Т-клеток. В частности, это включает ингибирование синтеза интерлейкина 2, что, в то же самое время, подавляет пролиферацию цитотоксических Т-лимфоцитов, которые являются ответственными, например, за отторжение инородных тканей. Циклоспорин действует внутриклеточно при связывании с так называемыми циклофилинами или иммунофилинами, которые относятся к семейству белков, которые связывают циклоспорин с высокой степенью сродства. Затем комплекс циклоспорина и циклофилина блокирует серин - треонин - фосфатазу - кальциневрин. Его активное состояние, в свою очередь, регулирует активацию факторов транскрипции, таких как NF-каппа В или NFATp/c, которые играют решающую роль в активации различных генов цитокинов, включая интерлейкин-2. Это приводит к угнетению иммунокомпетентных лимфоцитов во время фазы GO или фазы G1 клеточного цикла, так как эти белки являются существенными для деления клеток, например, интерлейкин-2 не может больше образовываться. Клетки Т- хелперы, которые повышают активность цитотоксических Т-клеток, являющихся ответственными за отторжение, являются предпочтительным местом для атаки циклоспорина.

Кроме того, циклоспорин ингибирует синтез и высвобождение других лимфокинов, которые ответственны за пролиферацию зрелых цитотоксических Т-лимфоцитов и за другие функции лимфоцитов. Способность циклоспорина блокировать интерлейкин-2 является критической для его клинической эффективности: реципиенты трансплантатов, которые толерантны по отношению к их трансплантатам, характеризуются низким продуцированием интерлейкина-2. Пациенты с проявляющими реакциями отторжения, напротив, не характеризуются ингибированием образования интерлейкина-2.

Первым и до сих пор единственным циклоспорином, появившимся на рынке (в 1980-е годы) был циклоспорин-А. Циклоспорин-А с химической точки зрения представляет собой цикло- [[(Е)-(2S, 3R, 4R)-3-гидрокси-4-метил-2-(метиламино)-6-октеноил]-L-2-аминобутирил-N-метилглицидил-N-метил-L-лейцил-L-валил-N-метил-L-лейцил-L-аланил-D-аланил-N-метил-L-лейцил-N-метил-L-лейцил-N-метил-L-валил]. Его доступность открыла новую эру в трансплантологии, так как с его помощью количество трансплантированных органов, которые остаются действующими в течение продолжительного времени, может быть значительно увеличено.

Первое лекарственное вещество на основе циклоспорина (Sandimmun фирмы Sandoz) уже смогло повысить успешные результаты при трансплантации почек примерно в 2 раза. Новый пероральный препарат циклоспорина (Neoral фирмы Sandoz, позже Novartis) с более высокой и более надежной биодоступностью позволил достигнуть лучшей дозировки и еще более увеличить успешные результаты, начиная с 1990-х годов. Несмотря на некоторые новые достижения в создании активных агентов, циклоспорин все еще остается часто применяемым в трансплантологии агентом.

В настоящее время трансплантация легких в принципе может протекать успешно, если пациенты подвергаются лечению циклоспорином-А. Со времени введения этого активного агента в клиническую терапию количество трансплантаций легких по всему миру резко возросло. Это справедливо как для трансплантации одного легкого, так и для трансплантации обоих легких. Трансплантацию легких обычно назначают пациентам с терминальной стадией легочной болезни, когда медицинская терапия потерпела поражение и возможность выживаемости мала из-за болезни. Например, трансплантация одного легкого показана в случае некоторых форм эмфиземы и фиброза, такого как идиопатический фиброз легких.

Трансплантацию обоих легких осуществляют в случае муковисцидоза, первичной гипертензии легких, эмфиземы с общей легочной недостаточностью, частых тяжелых инфекций, а также идиопатического фиброза легких с осложнениями в виде повторяющихся инфекционных заболеваний.

В случае успешной трансплантации легких качество жизни пациентов может быть снова повышено до почти нормального уровня. Однако в отличие от трансплантации сердца, почек и печени время дожития после трансплантации легких все еще остается довольно коротким и в среднем составляет только 5 лет. Среди прочих факторов это может быть обусловлено тем фактом, что активный агент циклоспорин нельзя эффективно дозировать всем пациентам из-за системных побочных эффектов, таких как нарушение функции почек, повышенное содержание креатинина и мочевины в сыворотке крови, поражение почек со структурными изменениями, например интерстициальный фиброз, повышенные уровни билирубина и печеночных ферментов в сыворотке, гипертрихоз, тремор, утомляемость, головная боль, гипертрофический гингивит, заболевания желудочно-кишечного тракта, например анорексия, боль в животе, тошнота, рвота, диарея, гастрит, гастероэнтерит, парестезия, чувство жжения на руках и ногах, артериальная гипертензия, повышенный уровень жиров в крови, акне, сыпь, аллергические реакции на коже, гипергликемия, анемия, гиперурикемия, подагра, возрастающий вес тела, эдемы, язва желудка, судороги, менструальные расстройства, гиперкалиемия, гипермагниемия, приливы, эритема, зуд, спазмы в мышцах, мышечная боль, миопатия и т.д.

Следовательно, желательно, если, например, в случае трансплантации легких или в случае некоторых других показаний, циклоспорин-А можно было вводить целенаправленно и специфически по отношению к тканям и так, чтобы проявлялась только небольшая системная биодоступность активного агента для сведения к минимуму воздействия активного агента на здоровую ткань.

Подходящая лекарственная форма может быть также применена для лечения и профилактики болезней, таких как астма, идиопатический фиброз легких, саркоидоз, альвеолит и паренхимные заболевания легких (см. Drugs for the treatment of respiratory diseases, edited by Domenico Spina, Clive p.Page et. al., Cambridge University Press, 2003, ISBN 0521773210). Новые терапевтические аспекты также предусматривают топическое лечение возможных аутоиммунных болезней, таких как нейродерматит, псориаз, неспецифические экземы, пролиферация или мутация клеток кожи и лечение после трансплантации кожи. Интересной областью применения является офтальмология, например лечение после трансплантации роговицы, лечение кератоконъюнктивита или других инфекционных глазных болезней, которые недостаточно отвечают на противовоспалительную терапию, например, при помощи стероидов. Эта форма пригодна также для лечения кератидов у животных, например у собак.

В действительности были сделаны попытки применять циклоспорин локально, например, в виде масляных глазных капель с концентрацией, равной 1% и 2% (состав согласно Немецкому кодексу лекарств (German codex of medicines) с применением в качестве стабилизатора очищенного арахисового масла) или в виде аэрозоля. Однако этот подход обычно приводит к поражению, в основном из-за очень низкой растворимости активного агента в воде, что очень затрудняет эффективное введение лекарства. Таким образом, в случае легочного применения некоторые добавки для солюбилизации, которые можно применять в случае перорального введения, нельзя использовать из-за отсутствия переносимости. Например, капсулы Sandimmun Optoral (Novartis), которые включают циклоспорин-А, содержат концентрат микроэмульсии с этанолом, пропиленгликолем и значительными количествами поверхностно-активных веществ и поэтому являются составом, который в случае ингаляции вызывает серьезные токсические эффекты.

Кроме того, концентрат раствора для инфузии Sandimmun® (Novartis), который доступен для инфузии, нельзя вводить путем ингаляции. Единственные адъюванты, содержащиеся в нем, представляют собой этанол и полиоксиэтилен-40 касторовое масло. Его можно применять для инфузии только потому, что он предварительно разбавляется 0,9%-ным раствором хлорида натрия или 5%-ным раствором глюкозы в отношении от 1:20 до 1:100.

В заявке WO 00/45834 предложена ингаляция аэрозоля на основе циклоспорина для профилактики или лечения реакций отторжения после трансплантации легких. Рекомендуется вводить в легкие дозу циклоспорина, равную 15-30 мг. Носитель, который должен применяться для активного агента, представляет собой пропиленгликоль, который в такой высокой концентрации вызывает значительное раздражение, что вызывает необходимость ингаляции раствора лидокаина пациентам для местной анестезии перед введением препарата на основе циклоспорина. Недавнее исследование (Akkar et al., Poster presentation at NACF, 2005) показывает, что в зависимости от концентрации пропиленгликоль приводит к гибели клеток Calu-3, что представляют признанную модель для клеток эпителия легких (Steimer et al. Jour. Aerosol. Med. 18 (2), pp.137-182, 2005). Следовательно, по физиологическим причинам было бы желательно иметь преимущественно водный препарат.

В заявке ЕР 0294239 A1 описан водный препарат циклоспорина для легочного применения. Для увеличения растворимости препарат содержит α-циклодекстрин. Однако эффект солюбилизации является слишком слабым для эффективной ингаляции: достигаемые концентрации циклоспорина составляют только от 0,1 до 2,0 мг/мл, в частности от 0,2 до 1,5 мг/мл. Это означает, что введение единичной дозы, равной 20 мг в легкие, занимает несколько часов при применении обычного небулайзера.

В заявке ЕР 0504760 А1 описана особая орторомбическая кристаллическая форма циклоспорина-А, которая, как говорится, особенно пригодна для ингаляции. Однако это относится только к ингаляции порошковой формы или к препаратам, содержащим дисперсию активного агента, но не к водным растворам для небулайзеров.

Порошковые ингаляторы, однако, требуют сравнительно большого объема вдыхания и плохо подходят для эффективного лечения пациентов с заболеваниями легких. Более того, известно, что количества порошка более 20 мг часто вызывают кашель и что вдыхаемая фракция большинства порошковых смесей снижается с увеличением концентрации носителя, такого как лактоза или трегалоза. Кроме того, ввиду наличия всех известных in vitro данных кажется сомнительным, что очень плохо растворимый активный агент, будучи введен в легкие в виде суспендированных частиц, будет растворяться в том количестве слизи, которое имеется в легких, в значительной степени, что является условием для терапевтической эффективности. То же самое верно, в принципе, и для заявки WO 99/42124, в которой описан аморфный жидкий кристаллический циклоспорин.

В заявке WO 95/24892 описан препарат циклоспорина с газообразным пропеллентом, который нужно вводить в виде дозируемого аэрозоля. Однако дозируемые аэрозоли в течение многих лет критиковали за то, что они вносят вклад в глобальное потепление и поэтому неизвестно, будут ли признаны на рынке аэрозоли, содержащие газообразные пропелленты. То же относится и к заявке WO 98/01147. Известно также, что вдыхаемая фракция уменьшается, если активные агенты применяются в концентрациях более 1 мг/вдох, и, кроме того, точность дозирования in vivo сильно меняется. При осаждении в легких только 10% в случае дозируемых аэрозолей можно сделать вывод, что потребуется более 50 вдохов, чтобы произошло осаждение терапевтически релевантных концентраций циклоспорина в периферических областях легких.

В заявке WO 98/00111 предложена липосомная дисперсия циклоспорина-А для ингаляции, которая содержит очень высокую концентрацию фосфолипида - до 225 мг/мл. Однако она имеет такую высокую динамическую вязкость, что нельзя эффективно применять небулайзер.

Липосомный препарат циклоспорина-А известен также из заявки US 2003/ 0215494; изобретение, описанное в этой заявке, основывается на том факте, что такой препарат нужно применять для ингибирования метастазов в легких. Эта заявка не вносит вклад в решение технической проблемы создания препарата активного агента, который более пригоден для ингаляции.

В патенте США №5958378 описаны липосомные препараты на основе циклоспорина для небулизации; однако их вязкость так высока, что они не могут быть распылены при помощи электронного небулайзера с колебательной мембраной. Более того, в препарате использован органический растворитель бутанол, но, несмотря на последующий процесс лиофилизации, он не может быть полностью удален и обеспечивает получение липосом с размером >1 мкм, которые не могут быть стерилизованы путем фильтрации и которые имеют только небольшую способность проникать через мембраны эпителиальных клеток.

Обычные нелипосомные топические препараты, например кремы, мази или лосьоны, не обладают достаточной топической эффективностью при лечении кожных заболеваний, таких как нейродерматит или псориаз, так как эффект проникновения является недостаточным из-за образования отложений на эпидермисе и его ороговения. Известно также, что в некоторых случаях этих заболеваний даже липосомные препараты не всегда обеспечивают эффективное проникновение через кожу и в зависимости от конкретного состава и размера и природы липосом приводят только к незначительным улучшениям.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Целью данного изобретения является получение композиции, содержащей циклоспорин, которая устраняет недостатки составов, известных из уровня техники.

Эта цель достигается путем создания композиции по п.1 формулы изобретения. Другие растворы и варианты указаны в других пунктах формулы изобретения.

Согласно данному изобретению композиция представляет собой жидкий водный препарат, который содержит терапевтически эффективную дозу циклоспорина, первое способствующее растворению вещество, выбранное из группы фосфолипидов, и второе способствующее растворению вещество, выбранное из группы неионных поверхностно-активных веществ. Особенно предпочтительным циклоспорином является циклоспорин А.

Композиция предпочтительно содержит активный агент циклоспорин в липосомально солюбилизированной форме. Липосомы, которые в основном образуются фосфолипидом, содержащимся в композиции, предпочтительно представляют собой униламеллярные липосомы. Эти липосомы преимущественно имеют средний диаметр, равный максимум примерно 100 нм, измеренный как средний Z - диаметр при помощи Malvern ZetaSizer, и индекс полидисперсности, равный максимум примерно 0,5, предпочтительно равный максимум примерно 0,4.

Липосомы предпочтительно получают с водой в качестве жидкого носителя и без органических растворителей. Процесс получения, по существу, предпочтительно является изотоническим и не оказывает отрицательного влияния на трансэпителиальное электрическое сопротивление (TEER) в модели легочных эпителиальных клеток Calu-3, что является мерой переносимости активного агента и состава по отношению к действию на жизнеспособность клеток, и в легочных клетках человека композиция не приводит к значительному увеличению количества интерлейкина-8, биомаркера воспаления.

В контексте данного изобретения фармацевтическая композиция представляет собой препарат на основе по меньшей мере одного активного агента и по меньшей мере одного адъюванта, которым в простейшем случае может быть, например, носитель, такой как вода. Активный агент является веществом или смесью веществ, которое/которые пригодно (пригодны) для непосредственной или косвенной активации или поддержания здоровья или благосостояния животного или человека. Активный агент может выполнять диагностическую, терапевтическую или профилактическую функцию, обычно в организме животного или человека или на поверхности тела животного или человека, иногда, например, in vitro, например, в контакте с выделенными частями организма, такими как клетки или жидкости из организма.

В данном случае препарат представляет собой предпочтительно коллоидный водный раствор без органического растворителя, состоящий из униламеллярных липосом, имеющих диаметр, равный максимум 100 нм, в котором активный агент, по меньшей мере преимущественно, находится в растворенном состоянии. Предпочтительно, чтобы вода была единственным жидким растворителем, содержащимся в препарате. Кроме того, предпочтительно, чтобы препарат являлся водным раствором или водным коллоидным раствором, то есть однофазной жидкой системой. Такая система, по существу, не содержит диспергированных частиц, размер которых больше, чем у коллоидных частиц. Для удобства частицы с размером менее примерно 1 мкм рассматриваются как коллоидные частицы, которые не образуют отдельную фазу и не приводят к образованию границы между физическими фазами. Иногда частицы размером немного более 1 мкм также рассматриваются как коллоидные. Однако предпочтительно, когда композиция по изобретению, по существу, не содержит частиц, которые не относятся четко к ряду коллоидных частиц, а именно частиц, которые, например, имеют диаметр, равный 1 мкм или более.

Композиция содержит терапевтически эффективную дозу циклоспорина, который предпочтительно представляет собой циклоспорин-А. Циклоспорин-А с химической точки зрения представляет собой цикло-[[(Е)-(2S, 3R, 4R)-3-гидрокси-4-метил-2-(метиламино)-6-октеноил]-L-2-аминобутирил-N-метилглицидил-N-метил-L-лейцил-L-валил-N-метил-L-лейцил-L-аланил-D-аланил-N-метил-L-лейцил-N-метил-L-лейцил-N-метил-L-валил] и является циклическим пептидом с иммуносупрессорной активностью. В этом контексте термин "терапевтически эффективный" включает также профилактическую активность. Терапевтическую дозу следует определять в зависимости от индивидуального случая применения. В зависимости от природы и тяжести заболевания, метода введения, а также роста и состояния пациента терапевтическую дозу определяют методом, известным среднему специалисту в данной области. Некоторые общие советы по выбору дозы содержатся, например, в обзоре свойств продуктов, продаваемых под торговым названием Sandimmun® фирмы Novartis Pharma AG, которые также являются препаратами, содержащими циклоспорин-А. Однако данное изобретение также применяется для введения циклоспорина такими путями, которые не использовались до сих пор, в частности путем ингаляции после распыления препарата при помощи подходящего небулайзера, при этом необходимо адаптировать дозу активного агента к такому применению обычными методами. Кроме того, препарат по изобретению может в той же или более низкой концентрации применяться топически или распыляться на поверхность кожи, или же его можно закапывать в глаз или в ухо.

Неожиданно было установлено, что в виде водного жидкого препарата циклоспорин может быть эффективно солюбилизирован, его вкус может быть при этом замаскирован фосфолипидом и неионным поверхностно-активным веществом, а в некоторых случаях его стабильность может быть повышена.

Таким образом, согласно изобретению препарат содержит, помимо циклоспорина и воды, фосфолипид или смесь фосфолипидов, такую как например, Lipoid S 100 или Phospholipon G90, и неионное поверхностно-активное вещество, которым предпочтительно является полисорбат, особенно полисорбат 80.

Это второе поверхностно-активное вещество действует синергически с фосфолипидом и тоже повышает настоящую или коллоидную водную стабильность циклоспорина, содержащегося в препарате в статистически значимой степени. Поверхностно-активное вещество является амфифильным или поверхностно-активным веществом или смесью веществ с поверхностно-активными свойствами.

Поверхностно-активные вещества содержат, по меньшей мере один, скорее гидрофильный и, по меньшей мере один, скорее липофильный, участки молекулы. Существуют мономерные, низкомолекулярные поверхностно-активные вещества и поверхностно-активные вещества, имеющие олигомерную или полимерную структуру. Кроме того, имеется различие между ионной и неионной природой поверхностно-активных веществ. Примерами подходящих поверхностно-активных веществ в смысле данного изобретения являются алкиловые эфиры полиоксиэтилена, эфиры жирных кислот и полиоксиэтиленсорбитана, такие как, например, полиоксиэтилен сорбитанолеат, эфиры жирных кислот и сорбитана, полоксамеры, витамин Е-TPGS (D-α-токоферил полиэтиленгликоля 1000 сукцинат) и тилоксапол (tyloxapol).

В настоящее время предпочтительные фосфолипиды представляют собой, в частности, смеси природных или обогащенных фосфолипидов, например лецитины, такие как коммерчески доступный Phospholipon G90, 100 или Lipoid 90, S 100. К неионным поверхностно-активным веществам относятся полисорбаты и витамин-TPGS, они являются предпочтительными, особенно полисорбат 80.

Фосфолипиды являются амфифильными липидами, которые содержат фосфор. Известные также как фосфатиды, они играют важную роль в природе, особенно как компоненты, образующие двойные слои в биологических мембранах, и часто применялись для фармацевтических целей такие фосфолипиды, которые получены на основе фосфатидовой кислоты. Последняя представляет собой (обычно двойной) ацилированный глицерол-3-фосфат, в котором остатки жирной кислоты могут быть разной длины. Производными фосфатидовой кислоты являются, например, фосфохолины или фосфатидилхолины, в которых фосфатная группа дополнительно этерифицирована холином, а также фосфатидилэтаноламин, фосфатидилинозитолы и т.д. Лецитины представляют собой природные смеси различных фосфолипидов, которые обычно содержат большое количество фосфатидилхолинов. Предпочтительными фосфолипидами по изобретению являются лецитины, а также чистые или обогащенные фосфатидилхолины, такие как димиристоилфосфатидилхолин, дипальмитоил фосфатидилхолин и дистеароилфосфатидилхолин.

Согласно другому предпочтительному варианту данного изобретения могут быть добавлены приемлемые с токсикологической точки зрения стабилизаторы и антиоксиданты, например натровая соль этилендиаминотетрауксусной кислоты (Na-EDTA, токоферолы), изотонирующие добавки, такие как хлорид натрия, маннит, трегалоза или буферные соли (цитрат, карбонат, фосфат, борат и т.д.), агенты, корректирующие вкус, например сахарин или мятное масло.

Количественный состав обычно зависит от медицинского назначения. В общем, выбранное содержание циклоспорина колеблется в пределах между 0,2 и 20 мг/мл, предпочтительно между 0,5 и 10 мг/мл, более предпочтительно между примерно 1 и 5 мг/мл, наиболее предпочтительно между 1 и 4,5 мг/мл. Для лечения астмы предлагаются более низкие дозы, которые могут быть в пределах от 0,25 до 5 мг/мл. Для того чтобы поддерживать время распыления в компрессорном, струйном или электронном небулайзере, таком как, например, Аеr X, AeroNeb Go, Omron U22 или EFlow, как можно более коротким, предпочтительно применять небольшие объемы растворов (<2 мл) с более высокими концентрациями. При особенно предпочтительном применении препарата, а именно в виде раствора для ингаляции, для профилактики и лечения в случае отторжения трансплантата легких, желательно и, в интересах достаточной переносимости пациентами, необходимо, чтобы содержание циклоспорина было как можно больше, а время ингаляции, таким образом, как можно меньше. Предпочтительно, чтобы содержание циклоспорина, особенно в случае циклоспорина А, составляло, по меньшей мере, примерно 0,5 мг/мл, например от 0,5 до 10 мг/мл. Содержание, равное 1-5 мг/мл, даже лучше и может быть достигнуто при использовании данного изобретения. Согласно еще одному предпочтительному варианту композиция в случае топического нанесения на кожу или при закапывании в глаз или в ухо содержит циклоспорин А в количестве 0,1-2%, а для профилактики и лечения респираторных заболеваний - в количестве 1,5-5 мг/мл или более, например в количестве примерно 5-10 мг/мл.

Требуемое содержание поверхностно-активных добавок зависит от содержания циклоспорина А. Если солюбилизируется циклоспорин А в более низких концентрациях порядка 0,5-1% активного агента, содержание лецитина/поверхностно-активного вещества должно быть пропорционально снижено. В общем содержание фосфолипида в композиции должно лежать в пределах между примерно 0,2 и примерно 15 вес.% и, предпочтительно, в пределах от примерно 1 до примерно 8 вес.%.

Неионное поверхностно-активное вещество должно содержаться в концентрации, равной от примерно 0,01 до примерно 5 вес.%, и, предпочтительно, в пределах от 0,1 до 2 вес.%, особенно в случае, когда выбран полисорбат, например полисорбат 80.

Весовое отношение фосфолипида или фосфолипидного компонента к неионному поверхностно-активному веществу является особенно важным при определении количества циклоспорина, которое может быть солюбилизировано на единицу объема. Предпочтительным является отношение между примерно 15:1 и 9:1, особенно между примерно 14:1 и 12:1, то есть, например, примерно 13:1. Это предпочтительное отношение применяется также, в частности, в случае, когда в качестве неионного поверхностно-активного вещества выбран полисорбат, такой как, например, полисорбат 80.

Выбранное весовое отношение между двумя солюбилизирующими компонентами добавки, а именно фосфолипидом и неионным поверхностно-активным веществом, с одной стороны, и циклоспорином, с другой стороны, обычно составляет от примерно 5:1 до примерно 20:1. Согласно предпочтительным вариантам отношение составляет примерно от 8:1 до примерно 12:1, например, оно равно примерно 10:1.

В особенно предпочтительной композиции отношение циклоспорина А к смеси Lipoid S 100/поверхностно-активное вещество составляет 1:9, а содержание солюбилизированного циклоспорина А составляет до 0,5 вес.%, что обеспечивает следующее отношение смесь: циклоспорин:Lipoid S 100:полисорбат 80, равное 1:9:0,69, при этом получаются униламеллярные липосомы с содержанием циклоспорина, в общем, равным примерно 4-6 вес.%, например примерно 5 вес.%.

В следующей таблице приведены некоторые примеры количеств компонентов, при которых циклоспорин А может быть оптимально солюбилизирован в липосомной форме.

Циклоспорин А	Lipoid S 100	Polysorbate 80	Очищенная вода	NaCl
0.1%	0.9%	0.07%	98.77%	8%
1%	9.0%	0.7%	87.7%	8%
5%	45%	3.5%	38.5%	8.0%

Композиция по изобретению имеет то преимущество, что она может содержать довольно большое количество плохо растворимого циклоспорина в солюбилизированной форме. В то же самое время, вкус циклоспорина замаскирован, что имеет особое преимущество во всех оральных, назальных и легочных формах и при введении через слизистую оболочку рта, а также в случае особенно предпочтительного применения препарата для получения медикамента для топической терапии кожи, для введения в глаз, нос и ухо и особенно для профилактики или лечения отторжения трансплантатов легких путем ингаляции.

Композиция может содержать дополнительные фармацевтические адъюванты, которые являются полезными и общеупотребительными для намеченного применения. Подходящие адъюванты известны специалистам в данной области. Например, композиция может содержать агенты, корректирующие величину рН, для регулирования рН, такие как физиологически приемлемые основания, кислоты или соли, возможно, в виде буферных смесей. В этом контексте термин "физиологически приемлемые" не означает, что один из адъювантов должен быть сам по себе переносимым и в неразбавленной форме, что не имеет место, например, для раствора гидроокиси натрия, но означает, что он должен переноситься пациентом в той концентрации, в которой он содержится в препарате.

Подходящие для регулировки рН агенты, корректирующие рН, могут быть выбраны, наряду с прочим, с учетом намеченного пути введения. Примеры потенциально пригодных адъювантов этой группы включают раствор гидроокиси натрия, основные натриевые, кальциевые или магниевые соли, такие как, например, цитраты, фосфаты, ацетаты, тартраты, лактаты и т.д., аминокислоты, кислые соли, такие как кислые фосфаты или дигидрофосфаты, особенно такие соли натрия, кроме того, органические и неорганические кислоты, такие как, например, соляная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, лимонная кислота, кромоглициновая кислота, уксусная кислота, молочная кислота, винная кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, лизин, метионин, кислые гидрофосфаты натрия или калия и т.д.

Согласно одному из предпочтительных вариантов данного изобретения препарат имеет - с агентом, корректирующим рН, или без него - нейтральный или кислый рН. Предпочтительно, чтобы величина рН была равна максимум 8,5 или находилась в пределах от примерно 2,5 до примерно 7,5. В случае введения в легкие или парентерального введения величина рН, равная примерно от 4 до 7,5, является предпочтительной при условии, что она совместима с другими требованиями к составу, например, в отношении стабильности. Особенно предпочтительна композиция, в которой содержится фосфатный буфер с величиной рН в пределах от 6,7 до 7,5 и особенно в пределах от 6,7 до 7,3, при этом стабильность липосомного состава может быть значительно повышена и образование нежелательного лизолецитина во время хранения значительно уменьшено (см. Пример 4).

Кроме того, препарат может содержать осмотически активные добавки, чтобы регулировать осмоляльность до желаемой величины, что важно для некоторых областей применения, таких как парентеральная инъекция или ингаляция, или другие локальные применения для того, чтобы достичь хорошей переносимости. Такие адъюванты часто называются изотоническими агентами, даже если их добавление не обязательно приводит к получению изотонической композиции, а обеспечивает состояние, близкое к изотоническому и к физиологической осмоляльности для достижения наиболее возможно лучшей физиологической переносимости.

Особенно часто применяемым придающим изотоничность агентом является хлорид натрия, но он не пригоден для любого случая. Согласно преимущественному варианту изобретения препарат не содержит хлорида натрия, за исключением, конечно, количеств повсеместного хлорида натрия, который может также находиться в воде фармацевтического качества. Согласно другому варианту препарат содержит практически нейтральную соль в качестве изотонического агента, которая не является хлоридом натрия, но, например, представляет собой сульфат натрия или фосфат натрия. Однако в этом случае даже более предпочтительными являются соли, отличающиеся от солей натрия. Так, известно, что некоторые соли кальция и магния оказывают положительное или поддерживающее действие при ингаляции растворов активного агента, возможно потому, что они сами по себе противодействуют местным раздражениям, вызываемым введением активного агента, и потому, что они расширяют бронхи, что указывается в клинической литературе (например, Hughes et al., lancet, 2003; 361 (9375): 2114-7), и/или потому, что они ингибируют адгезию возбудителей инфекции к протеогликанам слизистой оболочки респираторного тракта, при этом косвенно поддерживается клиренс реснитчатого эпителия как природной защиты организма от патогенов (K.W.Tsang et al., Eur. Resp. 2003, 21, 932-938). Предпочтительными являются, например, сульфат магния, который обладает превосходной легочной переносимостью и может использоваться спокойно для ингаляции, а также хлорид кальция (1-10 ммоль).

В качестве альтернативы нейтральным минеральным солям, как изотонические агенты могут применяться физиологически приемлемые органические адъюванты. Особенно пригодными являются водорастворимые вещества со сравнительно низкими молекулярными весами, например с молекулярной массой менее 300 или, более предпочтительно, менее 200 и имеющие, соответственно, высокую осмотическую активность. Примеры таких адъювантов представляют сахара и сахарные спирты, в частности маннит и сорбит, ксилит, трегалоза.

Количества изотонизирующего агента должно регулироваться таким образом, чтобы с учетом других компонентов, содержащихся в композиции, осмоляльность составляла, по меньшей мере 150 мосмол/л. Согласно другим вариантам предпочтительна осмоляльность в пределах от примерно 150 до 800 мосмол/л. По еще другому варианту препарат имеет осмоляльность от около 250 до около 600 мосмол/л или от около 250 до 400 мосмол/л.

Если содержание циклоспорина является таким высоким, как только возможно и если, соответственно, должно быть применено довольно большое количество адъювантов, повышающих растворимость, можно предположить, что даже без добавления отдельного агента, регулирующего изотоничность, осмоляльность композиции уже будет находиться в желаемых пределах или выше этих пределов и применение изотонического агента не будет необходимым.

Так как композиция в качестве агентов, улучшающих растворимость, содержит поверхностно-активные вещества, это, несомненно, будет влиять на поверхностное натяжение препарата. Это может быть особенно релевантным в случае введения в легкие. Согласно предпочтительному варианту препарат в стандартных условиях, т.е. при комнатной температуре и нормальном давлении, имеет поверхностное натяжение от примерно 25 до 75 мН/м, что обеспечивает эффективное распыление с высокой долей вдыхаемых капель, имеющих диаметр, равный максимум 5 мкм, при применении обычных небулайзеров.

Однако, если препарат должен быть адаптирован для применения в небулайзерах специального типа, поверхностное натяжение можно регулировать до специальных величин, например до величин от примерно 30 до примерно 65 мН/м. Более предпочтительной является величина поверхностного натяжения от примерно 30 до примерно 45 мН/м, хотя это не всегда может быть достигнуто, если другие параметры состава являются более первостепенными. С другой стороны, величина поверхностного натяжения не должна быть меньше примерно 25 мН/м.

Поверхностное натяжение, величина которого снижена путем введения поверхностно-активных веществ, может способствовать распределению аэрозоля в легких, что, в свою очередь, оказывает положительное влияние на эффективность введения.

В случае введения путем ингаляции вязкость композиции также может иметь значение. Согласно варианту, который является предпочтительным для распыления, композиция по изобретению имеет динамическую вязкость, в стандартных условиях равную примерно от 1,0 до 3,0 мПа·с. Согласно другому варианту величина вязкости находится в пределах между 1,2 и 2,0 мПа·с.

Кроме того, препарат может содержать другие обычные адъюванты, такие как стабилизаторы, антиоксиданты, агенты, улучшающие вкус, ароматизаторы, подсластители, красители и т.д., которые доступны специалистам в данной области при получении препаратов, в зависимости от предполагаемого применения.

Липосомный препарат по изобретению может быть получен путем гомогенизации при высоком давлении. Например, водорастворимые компоненты можно применять в виде водного раствора, в котором диспергирован циклоспорин, и липосомы затем образуются в процессе гомогенизации при высоком давлении, при этом размер и индекс полидисперсности липосом можно регулировать, меняя величину давления и количество циклов.

Композиция или концентрат согласно изобретению подаются в контейнеры с одной дозой или множеством доз, предпочтительно в асептических условиях. Подходящими контейнерами являются, например, флаконы из полипропилена или полиэтилена (РР-РЕ-флаконы) и блистеры из сополимеров циклоолефинов (СОС-блистеры) или блистеры из полиэтилентерефталата (РЕЕТ-блистеры). Или же можно применять контейнеры, изготовленные из других полимеров или сополимеров, которые пригодны для переработки по технологии упаковка/розлив (выдув-наполнение- запаивание) или методом переработки термопластов. Запаянные контейнеры из пластика, такие как флаконы из РР или РЕ, могут быть изготовлены, наполнены и запаяны, например, при осуществлении