Применение однократной дозы cd20-специфических связывающих молекул

Применение однократной дозы cd20-специфических связывающих молекул

Иллюстрации

Показать все

Реферат

По данной заявке испрашивается приоритет предварительных патентных заявок США № 60/702498 от 25 июля 2005 и № 60/702875 от 27 июля 2006, каждая из которых полностью включена в настоящее описание путем ссылки.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к материалам и способам для лечения заболеваний, при которых имеет место аберрантная В-клеточная активность, с использованием однократной дозы CD20-специфической связывающей молекулы.

Уровень техники

В своей обычной роли иммунная система человека защищает организм от повреждения чужеродными субстанциями и патогенами. Одним из способов, которым иммунная система защищает организм, является продукция специализированных клеток, называемых В-лимфоцитами или В-клетками. В-клетки продуцируют антитела, которые связываются и в некоторых случаях опосредуют уничтожение чужеродной субстанции или патогена.

Хотя в ряде случаев иммунная система человека, и особенно В-лимфоциты иммунной системы человека, действуют аномально, приводя к заболеванию. Существуют многочисленные виды рака, при которых имеет место неконтролируемая пролиферация В-клеток. Также существуют многочисленные аутоиммунные заболевания, при которых наблюдается В-клеточная продукция антител, которые вместо связывания чужеродных субстанций и патогенов связываются с частями организма. Кроме того, существуют многочисленные аутоиммунные и воспалительные заболевания, в патологии которых задействованы В-клетки, например, посредством неадекватного представления В-клетками антигена Т-клеткам или другими путями с участием В-клеток. Например, у склонных к аутоиммунным заболеваниям мышей, дефицитных по В-клеткам, не развивается аутоиммунное заболевание почек, васкулит и не вырабатываются аутоантитела (Shlomchik et al., J. Exp. Med. 1994, 180:1295-306). Интересно, что у этих склонных к аутоиммунным заболеваниям мышей, которые имеют В-клетки, но являются дефицитными по продукции иммуноглобулина, развиваются экспериментально вызванные аутоиммунные заболевания (Chan et al., J. Exp. Med. 1999, 189:1639-48), показывающие, что В-клетки выполняют интегральную роль в развитии аутоиммунного заболевания.

В-клетки могут быть идентифицированы по молекулам на их клеточной поверхности. CD20 была первой человеческой В-клеточной линейно-специфической поверхностной молекулой, идентифицированной моноклональным антителом. CD20 представляет собой негликозилированный гидрофобный 35 кДа В-клеточный трансмембранный белок, оба конца которого, амино и карбокси, расположены внутри клетки. Einfeld et al., EMSO J. 1988, 7:711-17. СD20 экспрессируется всеми нормальными зрелыми B-клетками, но не экспрессируется В-клетками-предшественниками или плазматическими клетками. Природные лиганды для СD20 не идентифицированы, и функция СD20 в биологии В-клеток еще не изучена полностью.

Анти-СD20 моноклональные антитела влияют на жизнеспособность и рост В-клеток (Clark et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1986, 83:4494-98). Обширное перекрестное связывание СD20 может вызвать апоптоз в В-клеточных лимфомных линиях (Shan et al., Blood 1998, 91:1644-52), и сообщалось, что перекрестное связывание СD20 на клеточной поверхности увеличивает величину и усиливает кинетику передачи сигнала, например, обнаруживаемую измерением фосфорилирования тирозина клеточных поверхностей (Deans et al., J. Immunol. 1993, 146:846-53). Поэтому, в дополнение к клеточной элиминации механизмами комплемента и ADCC, связывание Fc-рецептора СD20 моноклональными антителами in vivo может ускорять апоптоз злокачественных В-клеток с помощью СD20 перекрестного связывания, в соответствии с теорией, согласно которой эффективность CD20 терапии лимфомы человека в SCID мышиной модели может зависеть от связывания Fc-рецептора СD20 моноклональными антителами (Funakoshi et al., J. Immunotherapy 1996, 19:93-101). Присутствие множественных перекрывающих мембрану доменов в СD20 полипептиде (Einfeld et al., EMBO J. 1988, 7:711-17; Stamenkovic et al., J. Exp. Med. 1988, 167:1975-80; Tedder et al., J. Immunol. 1988, 141:4388-4394) предотвращает интернализацию CD20 после связывания антитела, и это было признано важной особенностью терапии В-клеточных злокачественных опухолей, при которой мышиное СD20 моноклональное антитело, 1F5, инъецировали пациентам с В-клеточной лимфомой, что приводило к значительному уменьшению числа злокачественных клеток и к частичным клиническим ответам (Press et al., Blood 1987, 69:584-91).

Поскольку нормальные зрелые В-клетки также экспрессируют СD20, нормальные В-клетки элиминируются при терапии анти-CD20 антителами (Reff et al., Blood 1994, 83:435-445). Однако после завершения лечения нормальные В-клетки могут быть восстановлены из СD20-негативных предшественников B-клеток; поэтому пациенты, получавшие анти-CD20 терапию, не испытывают значительной иммуносупрессии.

CD20 экспрессируется злокачественными клетками В-клеточного происхождения, включая В-клеточную лимфому и хроническую лимфоцитарную лейкемию (CLL). CD20 не экспрессируется злокачественными опухолями пре-В-клеток, такими как острый лимфобластный лейкоз. Следовательно, CD20 является хорошей мишенью для терапии В-клеточной лимфомы, CLL и других заболеваний, при которых В-клетки вовлечены в этиологию заболевания. Другие В-клеточные заболевания включают аутоиммунные заболевания, при которых продуцируются аутоантитела при дифференцировке В-клеток в плазматические клетки.

Многие научные группы исследовали применение анти-CD20 антител для лечения заболеваний, связанных с В-клетками. Одно лечение включает анти-CD20 антитела, полученные в форме радионуклидов для обработки В-клеточной лимфомы (например, ¹³¹I-меченое анти-CD антитело), а также ⁸⁹Sr-меченую форму для уменьшения костной боли, вызванной метастазами рака предстательной железы и рака молочной железы (Endo, Gan To Kagaku Ryoho 1999, 26:744-748).

Патенты и патентные публикации, касающиеся CD20 антител, включают патенты США №№ 5776456, 5736137, 6399061 и 5843439, а также патентные заявки США №№ US 2002/0197255A1 и US 2003/0021781A1 (Anderson et al.); патент США № 6455043B1 и международные заявки WO 00/09160 (Grillo-Lopez, A.); WO 00/27428 (Grillo-Lopez and White); WO 00/27433 (Grillo-Lopez and Leonard); WO 00/44788 (Braslawsky et al.); WO 01/10462 (Rastetter, W.); WO 01/10461 (Rastetter and White); WO 01/10460 (White and Grillo-Lopez); патентную заявку США № US2002/0006404 и международную заявку WO 02/04021 (Hanna and Hariharan); патентную заявку США № US2002/0012665 A1 и международную заявку WO 01/74388 (Hanna, N.); патентную заявку США № US2002/0009444A1 и международную заявку WO 01/80884 (Grillo-Lopez, A.); WO 01/97858 (White, C); патентную заявку США № US2002/0128488A1 и международные заявки WO 02/34790 (Reff, M.); WO 02/060955 (Braslawsky et al.); WO 02/096948 (Braslawsky et al.); WO 02/079255 (Reff and Davies); патент США № 6171586B1 и международные заявки WO 98/56418 (Lam et al.); WO 98/58964 (Raju, S.); WO 99/22764 (Raju, S.); WO 99/51642, патент США № 6194551B1 , патент США № 6242195B1, патент США № 6528624B1 и патент США № 6538124 (Idusogie et al.); международные заявки WO 00/42072 (Presta, L.); WO 00/67796 (Curd et al.); WO 01/03734 (Grillo-Lopez et al.); патентную заявку США № US2002/0004587A1 и международную заявку WO 01/77342 (Miller and Presta); патентную заявку США № US2002/0197256 (Grewal, I.); патенты США №№ 6090365B1, 6287537B1, 6015542, 5843398 и 5595721 (Kaminski et al.); патенты США №№ 5500362, 5677180, 5721108 и 6120767 (Robinson et al.); патент США № 6410391B1 (Raubitschek et al.); патент США № 6224866B1 и международные заявки WO 00/20864 (Barbera-Guillem, E.); WO 01/13945 (Barbera-Guillem, E.); WO 00/67795 (Goldenberg); WO 00/74718 (Goldenberg and Hansen); WO 00/76542 (Golay et al.); WO 01/72333 (Wolin and Rosenblatt); патент США № 6368596B1 (Ghetie et al.); патентую заявку США № US2002/0041847A1 (Goldenberg, D.); патентую заявку США № US2003/0026801A1 (Weiner and Hartmann); международную заявку WO 02/102312 (Engleman, E.), см. также патент США № 5849898 и европейскую патентую заявку EP 330191 (Seed et al.); патент США № 4861579 и EP332865A2 (Meyer and Weiss); и международную заявку WO 95/03770 (Bhat et al.), которые полностью включены в настоящее описание путем ссылки.

Химерное моноклональное антитело, специфичное к CD20, состоящее из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей мыши, соединенных с тяжелой цепью IgG1 человека и константными областями человеческой легкой цепи каппа, по имеющимся данным сохраняет связывание с CD20 и способность опосредовать ADCC и фиксировать комплемент (Liu et al., J. Immunol. 1987, 139:3521-26). Другое химерное анти-CD20 антитело было создано из IDEC гибридомы C2B8 и названо ритуксимаб. Механизм противоопухолевой активности ритуксимаба, описанный выше, считается комбинацией нескольких активностей, включая антителозависимую клеточноопосредованную цитотоксичность (ADCC), фиксацию комплемента и запускание сигналов, которые активизируют апоптоз в злокачественных В-клетках. ADCC представляет собой клеточноопосредованную реакцию, в которой неспецифические цитотоксические клетки, которые экспрессируют Fc-рецепторы (FcRs) (например, естественные клетки-киллеры (NK), нейтрофилы и макрофаги), распознают связанное на клетке-мишени антитело и затем вызывают лизис клетки-мишени. Фиксация комплемента или комплементзависимая цитотоксичность (CDC) представляет собой способность молекулы лизировать мишень в присутствии комплемента. Путь активации комплемента инициируется связыванием первого компонента системы комплемента (C1q) с молекулой (например, антителом), связанной с узнаваемым антигеном. Большой размер ритуксимаба препятствуют оптимальной диффузии молекулы в лимфоидные ткани, которые содержат злокачественные В-клетки, что ограничивает указанные противоопухолевые активности.

Ритуксимаб, обычно вводимый в 4 дозах в виде 4-недельных инфузий антитела (1 доза/неделя × 4), в настоящее время используют для лечения высокодифференцированных или фолликулярных В-клеточных неходжкинских лимфом ((McLaughlin et al., Oncology 1998, 12: 1763-1777; Leget et al., Curr. Opin. Oncol. 1998, 10:548-551) и рецидивной стадии III/IV фолликулярной лимфомы (White et al., Pharm. Sci Technol. Today 1999, 2:95-101). Другие заболевания, поддающиеся лечению ритуксимабом, включают лимфому из клеток центра фолликула (FCC), лимфому из клеток мантийной зоны (MCL), диффузную крупноклеточную лимфому (DLCL) и лимфому из малых лимфоцитов (SLL) (Nguyen et al., Eur J. Haematol. 1999, 62:76-82)). Ритуксимаб, вводимый в недельных инфузиях, также используют для лечения CLL (Lin et al., Sem Oncol. 2003, 30:483-92).

Анти-CD20 антитела также широко используют для лечения пациентов с аутоиммунными заболеваниями, связанными с В-клеточной продукцией аутоантител. Например, ритуксимаб продемонстрировал выраженный клинический эффект уничтожения CD20+ В-клеток у пациентов с многочисленными аутоиммунными/воспалительными заболеваниями, включая RA (Edwards, N. Engl J. Med. 2004, 350:2546-8; Cambridge et al., Arthritis Rheum. 2003, 48:2146-54). Пациенты с RA получали продолжительные дозы метотрексата (MTX) и курс из 2 доз ритуксимаба (Edwards et al., выше). Эти пациенты демонстрировали улучшенные ответные реакции (ACR, American College of Rheumatology) по сравнению с контрольными группами.

В испытании по лечению системной красной волчанки (SLE) (Leandro et al., Arthritis Rheum. 2002, 46:2673-7) у пациентов, которым проводили две инфузии высоких доз ритуксимаба, наблюдали В-клеточную элиминацию и улучшение состояния. Во втором исследовании В-клеточной элиминации при SLE (Looney et al., Arthritis Rheum. 2004, 50:2580-9) пациентам проводили однократную инфузию 100 мг/м² (низкая доза), однократную инфузию 375 мг/м² (средняя доза) или в 4 инфузиях (1 неделя отдельно) 375 мг/м² (высокая доза). Эти пациенты демонстрировали В-клеточную элиминацию и улучшенные показатели состояния, но лечение не изменяло уровень аутоантител. Испытания ритуксимаба также проводили при макроглобулинемии Вальденстрема (Treon et al., Immunother. 2001, 24:272-9), где у пациентов обнаружен повышенный гематокрит (HCT) и повышенное количество тромбоцитов (PLT) после 4 инфузий ритуксимаба.

Недавние публикации о лечении ритуксимабом пациентов с рассеянным склерозом, аутоиммунным заболеванием, поражающим центральную нервную систему, показали, что курс лечения ритуксимабом уменьшает количество периферических В-клеток, но дает небольшой эффект на В-клетках цереброспинальной жидкости (Monson et al., Arch Neurol. 2005, 62:258-64).

Дополнительные публикации, касающиеся применения ритуксимаба, включают: Stashi et al. "Rituximab chimeric anti-CD20 monoclonal antibody treatment for adults with chronic idiopathic thrombocytopenic purpura" Blood 2001, 98:952-957; Matthews, R. "Medical Heretics" New Scientist (7 Apr., 20001); Leandro et al. "Clinical outcome in 22 patients with rheumatoid arthritis treated with В lymphocyte depletion" Ann Rheum Dis 2002, 61:833-888; Leandro et al. "Lymphocyte depletion in rheumatoid arthritis: early evidence for safety, efficacy and dose response. Arthritis and Rheumatism 2001, 44:S370; Leandro et al. "An open study of В lymphocyte depletion in systemic lupus erythematosus", Arthritis Rheum. 2002, 46:2673-2677; Edwards et al., "Sustained improvement in rheumatoid arthritis following a protocol designed to deplete В lymphocytes" Rheumatology 2001, 40:205-211; Edwards et al. "B-lymphocyte depletion therapy in rheumatoid arthritis and other autoimmune disorders" Biochem. Soc. Trans. 2002, 30:824-828; Edwards et al. "Efficacy and safety of Rituximab, a B-cell targeted chimeric monoclonal antibody: A randomized, placebo controlled trial in patients with rheumatoid arthritis. Arthritis Rheum. 2002,46:S197; Levine et al., "IgM antibody-related polyneuropathies: B-cell depletion chemotherapy using Rituximab" Neurology 1999, 52:1701-1704; DeVita et al. "Efficacy of selective B-cell blockade in the treatment of rheumatoid arthritis" Arthritis Rheum. 2002, 46:2029-2033; Hidashida et al. "Treatment of DMARD-Refractory rheumatoid arthritis with rituximab. " Presented at the Annual Scientific Meeting of the American College of Rheumatology; October 24-29; New Orleans, La. 2002; Tuscano, J. "Successful treatment of infliximab-refractory rheumatoid arthritis with rituximab" Presented at the Annual Scientific Meeting of the American College of Rheumatology; October 24-29; New Orleans, La. 2002.

Остаются проблемы, связанные с терапией ритуксимабом. Например, большинство раковых пациентов, лечившихся ритуксимабом, переносили рецидив, обычно в течение примерно 6-12 месяцев, и сообщалось о фатальных реакциях на инфузию ритуксимаба в течение 24 часов. Эти фатальные реакции наступали после комплекса инфузионной реакции, который включал гипоксию, легочные инфильтраты, острый респираторный дистресс-синдром, инфаркт миокарда, фибрилляцию желудочков или кардиогенный шок. Также сообщалось об острой почечной недостаточности, требующей диализа, со случаями фатального исхода при синдроме лизиса опухоли после лечения ритуксимабом, также имели место тяжелые кожно-слизистые реакции, некоторые с фатальным исходом. Кроме того, высокие дозы ритуксимаба требуют внутривенной инъекции, поскольку молекула является большой, приблизительно 150 кДа, и, как отмечалось выше, ограничена ее диффузия в лимфоидные ткани, где находится много опухолевых клеток. Другим недостатком лечения ритуксимабом являются многократные дозы ритуксимаба, обычно вводимые пациентам, получающим терапию, обычно высокая доза каждую неделю в течение четырех недель (Maloney et al., Blood 1997, 90:2188-2195), но исследование «доза-ответ» у лиц, принимающих однократную дозу антитела ритуксимаба, приводило к небольшой элиминации B-клеток у пациентов, получающих высокие дозы антитела (Maloney et al. Blood 1994, 84:2457-2466).

Технология моноклональных антител и методы генной инженерии привели к быстрому развитию иммуноглобулиновых молекул для диагностики и лечения заболеваний человека. Белковая инженерия была применена для увеличения аффинности антитела к узнаваемому им антигену, чтобы уменьшить проблемы, связанные с иммуногенностью, и чтобы изменить эффекторные функции антител. Доменная структура иммуноглобулинов пригодна для инженерии, при которой антигенсвязывающие домены и домены, придающие эффекторные функции, могут обмениваться между иммуноглобулиновыми классами и подклассами. Структура и функции иммуноглобулинов изложены, например, в Harlow et al., Eds., Antibodies: A Laboratory Manual, Chapter 14, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor (1988). Обширное введение и подробную информацию обо всех аспектах технологии рекомбинантых антител можно найти в руководстве "Recombinant Antibodies" (John Wiley & Sons, NY, 1999). Полную коллекцию подробных лабораторных протоколов по инженерии антител можно найти в R. Kontermann and S. Dubel (eds.), "The Antibody Engineering Lab Manual" (Springer Verlag, Heidelberg/New York, 2000).

Недавно были сконструированы небольшие иммуноглобулиновые молекулы для преодоления проблем, связанных с терапией целыми иммуноглобулинами. Одиночная цепь Fv (scFv) включает вариабельный домен тяжелой цепи антитела, соединенный через короткий линкерный пептид с вариабельным доменом легкой цепи антитела (Huston et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1988, 85: 5879-83). В дополнение к вариабельным областям, каждая из цепей антитела имеет одну или более константных областей. Легкие цепи имеют один константный домен. Таким образом, легкие цепи имеют одну вариабельную область и одну константную область. Тяжелые цепи имеют несколько константных доменов. Тяжелые цепи в IgG, IgA и IgD антителах имеют три константных домена, которые обозначены CH1, CH2 и CH3, и тяжелые цепи в антителах IgМ и IgЕ имеют четыре константных домена, CH1, CH2, CH3 и CH4. Таким образом, тяжелые цепи имеют одну вариабельную область и три или четыре константных области.

Тяжелые цепи иммуноглобулинов также можно разделить на три функциональных области: область Fd (фрагмент, включающий V_H и CH1, т.е. 2 N-терминальных домена тяжелой цепи), шарнирная область и область Fc (область «кристаллизуемого фрагмента», происходящая из константных областей и образующаяся после расщепления пепсином). Область Fd в комбинации с легкой цепью образует Fab («антигенсвязывающий фрагмент»). Поскольку антиген будет стереохимически реагировать с антигенсвязывающей областью на аминоконце каждого Fab, молекула IgG является двухвалентной, т.е. она может связывать две молекулы антигена. Fc содержит домены, которые взаимодействуют с иммуноглобулиновыми рецепторами на клетках и с начальными элементами каскада комплемента. Таким образом, Fc-фрагмент обычно считают ответственным за эффекторные функции иммуноглобулина, такие как фиксация комплемента и связывание с Fc-рецепторами.

Благодаря малому размеру scFv-молекул они характеризуются очень быстрым клиренсом из плазмы и тканей и более эффективным проникновением в ткани, чем целый иммуноглобулин. Противоопухолевый scFv показал более быстрое проникновение в опухоль и даже большее распределение в опухолевой массе, чем соответствующее химерное антитело (Yokota et al., Cancer Res. 1992, 52:3402-08). Слияние scFv с другой молекулой, такой как токсин, дает преимущество специфической антигенсвязывающей активности и малого размера scFv для доставки токсина в ткани-мишени (Chaudary et al., Nature 1989, 339:394); Batra et al., Mol. Cell. Biol. 1991, 11:2200).

Несмотря на преимущества, которые scFv-молекулы привносят в серотерапию, существует несколько недостатков этого терапевтического подхода. В то время как быстрый клиренс scFv может уменьшить токсические воздействия на нормальные клетки, такой быстрый клиренс может препятствовать доставке минимальной эффективной дозы к ткани-мишени.

Производство достаточных количеств scFv для введения пациентам вызывает сомнения из-за сложностей экспрессии и выделения scFv, которые неблагоприятно влияют на производственный выход. В процессе экспрессии scFv-молекулы нестабильны и часто агрегируют в результате спаривания вариабельных областей разных молекул. Кроме того, уровни продукции scFv-молекул в системах экспрессии млекопитающих являются низкими, ограничивая потенциал для эффективного производства scFv-молекул для терапии (Davis et al, J. Biol. Chem. 1990, 265:10410-18); Traunecker et al., EMBO J. 1991, 10:3655-59). Были исследованы стратегии улучшения продукции, включая добавление сайтов гликозилирования к вариабельным областям (Jost, C. R. U.S. Pat. No. 5888773, Jost et al, J. Biol. Chem. 1994, 69:26267-73).

Другим недостатком использования scFv для терапии является недостаток эффекторной функции. scFv без цитолитических функций, ADCC и комплементзависимой цитотоксичности (CDC), связанных с константной областью иммуноглобулина, может быть неэффективен для лечения заболевания. Несмотря на то, что развитие scFv-технологии началось 20 лет назад, в настоящее время нет scFv-продуктов, утвержденных для терапии.

В качестве альтернативы прогнозируют, что слияние scFv с другой молекулой, такой как токсин, могло бы дать преимущество специфической антигенсвязывающей активности и малых размеров scFv для доставки токсинов к тканям-мишеням. Chaudary et al., Nature 1989, 339:394; Batra et al., Mol. Cell. Biol. 1991, 11:2200. Таким образом, конъюгирование или слияние токсинов с scFv было предложено в качестве альтернативной стратегии для создания сильнодействующих антигенспецифических молекул, но дозирование таких конъюгатов или химер может быть ограничено избыточной и/или неспецифической токсичностью, обусловленной токсичным фрагментом таких препаратов. Токсические эффекты могут включать возрастание ферментов печени выше физиологических значений, синдром повышенной проницаемости сосудов и другие нежелательные эффекты. Кроме того, иммунотоксины сами по себе являются высокоиммуногенными при введении хозяину, и антитела хозяина, вырабатываемые против иммунотоксина, ограничивают потенциальную применимость для повторного терапевтического лечения индивидуума.

Другие рекомбинантные слитые белки, названные малыми, модульными иммунофармацевтическими (SMIP™) продуктами, описаны в совместных патентах США 2003/133939, 2003/0118592 и 2005/0136049 и в совместных международных патентных публикациях WO 02/056910, WO 2005/037989 и WO 2005/017148, которые полностью включены в настоящее описание путем ссылки. SMIP продукты являются новыми слитыми белками связывающий домен-иммуноглобулин, отличительным признаком которых является связывающий домен для узнаваемой структуры, такой как антиген, контррецептор или т.п.; полипептид шарнирной области IgG, IgA или IgE дикого типа или мутантный полипептид шарнирной области IgG1, не имеющий цистеиновых остатков или имеющий один или два цистеиновых остатка; и домены СН2 и СН3 иммуноглобулина. SMIP-продукты способны к ADCC и/или CDC.

Хотя были проведены обширные исследования по терапии на основе антител, в данной области техники остается необходимость в улучшенных способах лечения заболеваний, связанных с аберрантной В-клеточной активностью. Способы по настоящему изобретению, описанные и заявленные в настоящей заявке, предоставляют такие улучшенные способы и другие преимущества.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение относится к способам изменения уровней В-клеточной популяции при заболевании, связанном с аберрантной В-клеточной активностью.

В одном аспекте изобретение относится к способу лечения пациента, имеющего или предположительно имеющего заболевание, связанное с аберрантной В-клеточной активностью, включающий введение пациенту однократной дозы терапевтически эффективного количества CD20-специфической связывающей молекулы. В одном варианте осуществления CD20-специфическая связывающая молекула является CD20-специфической малой модульной иммунофармацевтической (SMIP).

«Аберрантная В-клеточная активность» относится к клеточной активности, которая отклоняется от нормального, правильного или ожидаемого направления. Например, аберрантная клеточная активность может включать неадекватную пролиферацию клеток, чьи ДНК или другие клеточные компоненты повредились или стали дефектными. Аберрантная В-клеточная активность может включать клеточную пролиферацию, свойства которой связаны с заболеванием, вызванным, опосредованным или приводящим к неадекватно высоким уровням деления, неадекватно низким уровням апоптоза или с ними обоими. Эти заболевания могут быть классифицированы, например, по единичным или множественным локальным аномальным пролиферациям клеток, групп клеток или ткани (тканей), как раковых, так и нераковых, доброкачественных или злокачественных, описанных более подробно ниже. Аберрантная В-клеточная активность может также включать аберрантную продукцию антител, такую как продукция аутоантител или избыточная продукция антител, обычно нужных в нормальных количествах. Предполагается, что аберрантную В-клеточную активность можно наблюдать в определенных субпопуляциях В-клеток, но не в других субпопуляциях. Аберрантная В-клеточная активность может также включать неадекватную стимуляцию Т-клеток, такую как при неадекватной В-клеточной презентации антигена Т-клеткам или другие каскады реакций с участием В-клеток.

«Однократная доза» CD20-специфической связывающей молекулы относится к введению однократной продолжительной инфузии одной дозы CD20-специфической SMIP в начале лечения, в отличие от терапий многократными дозами, которые требуют введения CD20-специфической связывающей молекулы раз в неделю или раз в две недели. В одном варианте осуществления однократная продолжительная инфузия может быть пролонгированной подкожной инфузией, внутривенной инфузией или т.п. Однократная продолжительная инфузия может быть введена в течение периода времени, например, от примерно 15 минут до примерно 1 часа, в течение примерно 2 часов, примерно 3 часов, примерно 4 часов, примерно 5 часов, примерно 6 часов, примерно 7 часов, примерно 8 часов, примерно 9 часов, примерно 10 часов, примерно 11 часов, примерно 12 часов, примерно 24 часов, или одного или нескольких дней или недель (например, поддерживаемое высвобождение из имплантированного устройства или гелевого депо). Однократная доза может быть введена в сочетании с другими терапевтическими средствами или вторыми агентами и может быть введена одновременно, до или после введения второго терапевтического средства, как описано в настоящем описании. Согласно настоящему изобретению однократная продолжительная инфузия может включать короткие перерывы в инфузии, требуемые по практическим соображениям.

«Пациент, имеющий или предположительно имеющий заболевание, связанное с аберрантной В-клеточной активностью», представляет собой пациента, у которого заболевание или симптом заболевания могут быть вызваны аберрантной В-клеточной активностью, могут быть отягощены аберрантной В-клеточной активностью или смогут быть ослаблены регуляцией В-клеточной активности. Примерами этих заболеваний являются виды В-клеточного рака (такие как В-клеточная лимфома, В-клеточный лейкоз, В-клеточная миелома), заболевание, характеризующееся продукцией аутоантител или заболевание, характеризующееся неадекватной Т-клеточной стимуляцией, такое как при неадекватной В-клеточной презентации антигена Т-клеткам или вовлекающее В-клетки другими путями.

В одном аспекте лицо, получающее лечение способами по изобретению, демонстрирует улучшенный ответ на лечение CD20-связывающей молекулой, описанной в настоящей заявке, который лучше, чем ответ на лечение ритуксимабом без другой CD20-связывающей молекулы. Ответ, который лучше, чем при лечении ритуксимабом без другой CD20-связывающей молекулы, означает клинический ответ, при котором лечение способом по изобретению дает в результате клинический ответ у пациента, который лучше, чем клинический ответ у пациента, получающего лечение ритуксимабом, такое, как только один ритуксимаб или ритуксимаб в комбинации с другими агентами, где другие агенты не являются CD20-связывающими молекулами. Улучшенный ответ оценивают сравнением клинических критериев, хорошо известных в данной области и описанных в настоящей заявке. Типичные примеры критериев включают, но не ограничиваются ими, длительность В-клеточной элиминации, уменьшение количеств В-клеток в целом, уменьшение количеств В-клеток в биологическом образце, уменьшение размера опухоли, уменьшение числа опухолей, существующих и/или возникающих после лечения, и, в целом, улучшенный ответ по оценкам пациентов и врачей, например, с использованием международного прогностического индекса. Улучшение может быть по одному или более чем по одному из клинических критериев. Улучшение ответа на способ лечения по изобретению может быть вследствие неадекватного ответа на проведенное ранее или текущее лечение ритуксимабом, например, по причине токсичности и/или неадекватной эффективности лечения ритуксимабом.

В родственном аспекте лицу, получающему лечение способами по изобретению, также вводят ритуксимаб. В одном варианте осуществления ритуксимаб вводят в качестве первой линии лечения, и он остается, когда начинают лечение способом по изобретению. В другом варианте осуществления лечение ритуксимабом прекращают после начала лечения способом по изобретению.

«Пациент, имеющий или предположительно имеющий ревматическое заболевание», является пациентом или лицом, страдающим заболеванием или нарушением суставного происхождения или скелетно-мышечной системы, поражающим такие участки, как суставы, хрящи, мышцы, нервы и сухожилия. Далее предполагают, что пациент, имеющий или предположительно имеющий ревматическое заболевание, мог ранее получать терапию для лечения ревматического заболевания. В одном варианте осуществления ревматическое заболевание включает, но не ограничивается ими, ревматоидный артрит, анкилозирующий спондилит, дерматомиозит, болезнь Шенлейн-Геноха, ювенильный ревматоидный артрит, псориатический артрит, синдром Рейно, синдром Рейтера, саркоидоз, спондилоартропатии, прогрессирующий системный склероз и миозит.

«Пациент, имеющий или предположительно имеющий определенное аутоиммунное заболевание центральной нервной системы», является пациентом или лицом, страдающим заболеванием или нарушением, поражающим центральную нервную систему, включая головной и спинной мозг, или такие участки, как глазной нерв. Далее предполагают, что пациент, имеющий или предположительно имеющий нарушение центральной нервной системы, мог ранее получать терапию для лечения нарушения центральной нервной системы. В одном варианте осуществления аутоиммунное заболевание центральной нервной системы включает, но не ограничивается ими, рассеянный склероз, аллергический энцефаломиелит, оптикомиелит, волчаночный миелит и волчаночный энцефалит.

«Васкулит» относится к заболеванию или нарушению, связанному с воспалением кровеносного сосуда. Примеры васкулитных поражений включают, но не ограничиваются ими, болезнь Бехчета, васкулит центральной нервной системы, синдром Черджа-Строса, криоглобулинемию, гигантоклеточный артериит, болезнь Шенлейн-Геноха, аллергические васкулиты/ангииты, болезнь Кавасаки, лейкоцитокластный васкулит, полиангиит, нодозный полиартериит, полимиалгию, полихондрит, ревматоидный васкулит, (артериит) болезнь Такаясу, (гранулематоз) болезнь Вегенера, васкулит вследствие гепатита, семейную средиземноморскую лихорадку, микроскопический полиангиит, синдром Когана, синдром Вискотта-Олдрича и облитерирующий тромбоангиит.

«Лечение» или «обработка» относится к терапевтическому лечению или к профилактической или предупредительной обработке. Терапевтическое лечение может уменьшить интенсивность по меньшей мере одного симптома заболевания у лица, получающего лечение, или может отсрочить ухудшение прогрессирующего заболевания у этого лица, или может предотвратить начало дополнительных ассоциированных заболеваний.

«Терапевтически эффективная доза» или «эффективная доза» CD20-специфической связывающей молекулы относится к количеству соединения, достаточному, чтобы получить уменьшение интенсивности одного или нескольких симптомов заболевания, которое начали лечить. Когда используемый индивидуальный активный ингредиент вводят отдельно, то терапевтически эффективная доза относится только к одному этому ингредиенту. При использовании в комбинации терапевтически эффективная доза относится к общим количествам активных ингредиентов, которые дают в результате терапевтический эффект, вводятся ли они в комбинации, последовательно или одновременно. Изобретение определенно предполагает, что одна или несколько CD20-специфических связывающих молекул могут быть введены согласно способам по изобретению, каждая в эффективной дозе.

Предлагаемые способы по изобретению полезны для лечения таких заболеваний, как виды В-клеточного рака (например, В-клеточные лимфомы, В-клеточные лейкозы), заболеваний, характеризующихся продукцией аутоантител, или заболеваний, характеризующихся неадекватной В-клеточной стимуляцией Т-клеток, такой как при неадекватной В-клеточной презентации антигена Т-клеткам или при вовлечении В-клеток другими путями.

В-клеточныый рак включает В-клеточные лимфомы [такие как различные формы болезни Ходжкина, неходжкинская лимфома (NHL) или лимфомы центральной нервной системы], лейкозы [такие как острый лимфобластный лейкоз (ALL), хронический лимфоидный лейкоз (CLL), волосатоклеточный лейкоз и хронический миобластный лейкоз] и миеломы (такие как множественная миелома). Дополнительно виды В-клеточного рака включают лимфомы из малых лимфоцитов, В-клеточный пролимфоцитарный лейкоз, лимфоплазматическую лимфому, селезеночную лимфому маргинальной зоны, плазмоклеточную миелому, солитарную плазмоцитому кости, экстраоссальную плазмоцитому, экстронодальную В-клеточную лимфому маргинальной зоны лимфоидной ткани слизистой (MALT), нодальную В-клеточную лимфому маргинальной зоны, фолликулярную лимфому, лимфому из клеток мантийной зоны, диффузную В-крупноклеточную лимфому, медиастинальную (тимусную) В-крупноклеточную лимфому, интраваскулярную В-крупноклеточную лимфому, первичную экссудативную лимфому, лимфому/лейкоз Беркитта, В-клеточные пролиферации неясного злокачественного потенциала, лимфоматоидный гранулематоз, посттрансплантационное лимфопролиферативное нарушение.

Нарушения, характеризующиеся продукцией аутоантител, часто рассматривают как аутоиммунные заболевания. Аутоиммунные заболевания включают, но не ограничиваются ими, артрит, ревматоидный артрит, ювенильный ревматоидный артрит, остеоартрит, полихондрит, псориатический артрит, псориаз, дерматит, полимиозит/дерматомиозит, миозит с включенными тельцами, воспалительный миозит, токсический эпидермальный некролиз, системную склеродерму и склероз, CREST-синдром, ответы, связанные с воспалительным заболеванием кишечника, болезнь Крона, язвенный колит, респираторный дистресс-синдром, респираторный дистресс-синдром взрослых (ARDS), менингит, энцефалит, увеит, колит, гломерулонефрит, аллергические состояния, экзему, астму, состояния, вовлекающие инфильтрацию Т-клеток и хронические воспалительные ответы, атеросклероз, аутоиммунный миокардит, нарушение адгезии лейкоцитов, системную красную волчанку (SLE), подострую кожную системную волчанку, дискоидную волчанку, волчаночный миелит, волчаночный энцефалит, ювенильный диабет, рассеянный склероз, аллергический энцефаломиелит, оптикомиелит, ревматическую лихорадку, хорею Сиденгама, иммунные ответы, связанные с острой и отложенной гиперчувствительностью, опосредованные цитокинами и Т-лимфоцитами, туберкулез, саркоидоз, гранулематоз, включая гранулематоз Вегенера и болезнь Черджа-Строса, агранулоцитоз, васкулит (включая аллергический васкулит/ангиит, ANCA и ревматоидный васкулит), апластическую анемию Диамонда-Блэкфана, иммунную гемолитическую анемию, включая аутоиммунную гемолитическую анемию (AIHA), пернициозную анемию, истинную эритроцитарную аплазию (PRCA), дефицит фактора VIII, гемофилию А, аутоиммунную нейтропению, панцитопению, лейкопению, заболевания, вовлекающие диапедез лейкоцитов, воспалительные заболевания центральной нервной системы (ЦНС), синдром множественного повреждения органов, миастению гравис, заболевания, вызванные комплексами антиген-антитело, заболевание базальной мембраны клубочков, антифосфолипидный синдром, аллергический неврит, болезнь Бехчета, синдром Кастлемена, синдром Гудпасчера, миастенический синдром Итона-Ламберта, синдром Рейно, синдром Шегрена, синдром Стивенса-Джонсона, отторжение трансплантата паренхиматозного органа, реакцию "трансплантат против хозяина" (GVHD), буллезный пемфигоид, пемфигоид, аутоиммунные полиэндокринопатии, сероотрицательные спондилоартропатии, болезнь Рейтера, синдром «застывшего человека» (stiff-man syndrome), гигантоклеточный артериит, иммунокомплексный нефрит, IgA нефропатии, IgM полинейропатии или IgM вызванную нейропатию, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру (ITP), тромботическую тромбоцитопеническую пурпуру (TTP), болезнь Шенлейн-Геноха, аутоиммунную тромбоцитопению, аутоиммунное заболевание яичка и яичника, включая аутоиммунный орхит и оофорит, первичный гипотериоз; аутоиммунные эндокринные заболевания, включая аутоиммунный тиреоидит, хронический тиреоидит (тиреоидит Хашимото), подострый тиреоидит, идиопатический гипотериоз, болезнь Аддисона, болезнь Грейва, аутоиммунные полигландулярные синдромы (или полигландулярные эндокринопатические синдромы), диабет I типа, также называемый инсулинзависимым сахарным диабетом (IDDM), и синдром Шихана; аутоиммунный гепатит, лимфоидую интерстициальную пневмонию (HIV), облитерирующий бронхиолит (нетрансплантационный) в противоположность NSIP, синдром Гийена-Баре, васкулит крупных сосудов (включая ревматическую полимиалгию и гигантоклеточный (Такаяши) артериит), васкулит средних сосудов (включая болезнь Кавасаки и нодозный полиартериит), нодозный полиартериит (PAN), анкилозирующий спондилит, болезнь Бергера (IgA нефропатия), быстро прогрессирующий гломерулонефрит, первичный билиарный цирроз, кишечную спру (глютеновую энтеропатию), криоглобулинемию, криоглобулинемию, ассоциированную с гепатитом, боковой амиотрофический склероз (ALS), заболевание коронарной артерии, семейную средиземноморскую лихо