Способ мутагенной обработки семян ячменя
Изобретение относится к биотехнологии. Для получения исходного материала для селекции ячменя методом экспериментального мутагенеза в качестве мутагена применяют раствор препарата альбит. Во втором поколении под действием препарата проявляются хлорофилльные мутации и морфофизиологические изменения ячменя. Формы с морфофизиологическими мутациями оценивают по комплексу хозяйственно ценных признаков и при наличии ценности используют для дальнейшей селекции. Способ мутагенной обработки семян ячменя позволяет получить за короткий период времени достаточно большое количество разнообразных форм растений ячменя для использования в селекции. 4 табл.
Реферат
Предлагаемое изобретение относится к области генетики и селекции и может быть использовано для получения наследственных изменений при создании исходного материала для селекции сельскохозяйственных растений.
Для получения мутаций применяются гамма- и рентгеновские лучи, лазерное излучение, химические вещества, в т.ч. и регуляторы роста (эпин, тур, кампозан, абсцизовая кислота) [1, 2].
Наиболее близким к предлагаемому изобретению является способ обработки семян с помощью химического мутагена - регулятора роста эпин [3]. Семена обрабатывались водным раствором препарата эпин различных концентраций за 24 часа до посева. В первом поколении (M1) наблюдалось положительное влияние препарата на рост и развитие растений ячменя.
Однако при существующем способе обработки во втором поколении (М2) независимо от концентраций препарата наблюдается низкий уровень выхода хлорофильных мутаций - средняя частота 0,32%. Выход морфофизиологических изменений в М2 на уровне - 5,5%, узкий спектр новообразований.
Предлагаемый способ обработки семян включает в себя обработку семян зерновых за сутки до посева водным раствором препарата альбит из расчета 3…300 г/т.
Препарат альбит зарегистрирован в реестре пестицидов, разрешенных к применению на территории Российской Федерации в качестве фунгицида. Биопрепарат альбит, разработанный в научном центре при РАН РФ, успешно применяется на 47 сельскохозяйственных культурах в 36 регионах РФ. Альбит - это комплексный препарат, обладающий свойствами регулятора роста, фунгицида, удобрения и антидота [4, 5].
Характеристика предлагаемого способа.
Семена ярового ячменя сорта Биос-1 обрабатывались водным раствором препарата альбит в дозах 3,30 и 300 г препарата на тонну семян при расходе рабочего раствора 10 л/т. Контролем служили семена, обработанные дистиллированной водой в дозе 10 л/т.
В M1 в каждом варианте обрабатывалось и высевалось по 500 семян, повторность опыта четырехкратная (по 125 зерен на делянку площадью 1 м2).
Наблюдения за динамикой развития растений в M1 показали, что в вариантах с применением альбита наступление всех фаз развития растений опережало показатели контроля на 1-2 дня.
Применение препарата альбит повлияло на значение элементов продуктивности растений ячменя (табл.1).
Таблица 1 | ||||
Влияние альбита на элементы продуктивности растений ячменя в M1 | ||||
Вариант | Продуктивная кустистость, шт | Длина колоса, см | Число колосков в колосе, шт | Число зерен в колосе, шт |
Контроль | 2,70±0,17 | 7,83±0,13 | 21,80±0,25 | 20,62±0,30 |
Альбит 3 г/т | 3,23±0,21 | 8,40±0,20* | 22,65±0,39 | 20,42±0,41 |
Альбит 30 г/т | 4,52±0,28*** | 8,02±0,15 | 21,62±0,37 | 21,57±0,31* |
Альбит 300 г/т | 4,40±0,34*** | 8,07±0,17 | 22,90±0,31** | 19,50±0,43* |
Примечание: * - уровень вероятности Р>0,95** - уровень вероятности Р>0,99*** - уровень вероятности Р>0,999 |
Препарат альбит оказал стимулирующее действие на растения ячменя, в варианте альбит 3 г/т достоверно увеличилась длина колоса, в вариантах альбит 30 и 300 г/т существенно возросла продуктивная кустистость и число зерен в колосе. Достоверного снижения значений элементов продуктивности от применения препарата альбит не зафиксировано.
Во втором поколении (М2) проводили отбор хлорофилльных мутаций. Все хлорофилльные мутации классифицировали [6].
Таблица 2 | ||||
Частота и спектр хлорофилльных мутаций в М2 | ||||
Вариант | Проанализировано семей, шт | Число семей с мутациями, шт | Частота хлорофилльных мутаций, p±Sp | Спектр мутаций |
Контроль | 258 | 0 | 0 | - |
Альбит 3 г/т | 266 | 2 | 0,75±0,53 | Albina Claroviridis |
Альбит 30 г/т | 307 | 3 | 0,98±0,56 | Claroviridis Flavoviridis Claroviridis |
Альбит 300 г/т | 247 | 2 | 0,81±0,57 | Claroviridis Viridoxanthostriata |
Наибольшее количество семей с хлорофилльными мутациями отмечено в варианте альбит 30 г/т - 3 семьи. Спектр мутаций во всех вариантах с применением альбита ограничен двумя видами мутаций. Чаще других встречались хлорофилльные мутации типа Claroviridis - светло-зеленая окраска растений, по одной семье встречались мутации типа flavoviridis - желтовато-зеленые растения, albina - белые растения, viridoxanthostriata - растения, на листовых пластинках которых чередуются желтые и зеленые полосы.
Кроме хлорофилльных мутантов ячменя в M2 отмечены и формы растений с морфофизиологическими отклонениями от исходного сорта контроля. Частота таких изменений в М2 представлена в таблице 3.
Таблица 3 | |||
Частота морфофизиологических изменений ячменя в М2 | |||
Вариант | Число проанализированных семей | Число семей с морфофизиологическими изменениями | Частота морфофизиологических изменений, p±Sp |
Вариант | 258 | 3 | 1,16±0,67 |
Альбит 3 г/т | 266 | 10 | 3,76±1,17 |
Альбит 30 г/т | 307 | 13 | 4,23±1,15* |
Альбит 300 г/т | 247 | 15 | 6,07±1,52** |
Примечание: * - уровень вероятности Р>0,95** - уровень вероятности Р>0,99 |
С увеличением концентрации препарата альбит происходит увеличение частоты выхода измененных форм. Наибольшее количество семей с изменениями - 15 семей отмечено в варианте альбит 300 г/т.
Для практической селекции наряду с частотой мутаций крайне важен и спектр мутационной изменчивости. Из таблицы 4 видно, что в целом спектр морфофизиологических новообразований представлен 7…13 типами. Наибольшее количество новообразований отмечено в варианте альбит 300 г/т - 13 типов, наименьшее число - 7 типов в варианте альбит 30 г/т.
Наиболее распространенными типами были новообразования по длине стебля и длине колоса. Наименее распространены изменения, связанные с ранним наступлением кущения и позднеспелостью. Не встречались в опытах следующие типы морфофизиологических изменений ячменя: раннее кущение, ранний выход в трубку, высокая масса зерна с колоса, низкая продуктивная кустистость, отсутствие воскового налета на листьях.
Таким образом препарат альбит является мутагенным факторам с такой правильностью, что при увеличении нормы расхода препарата увеличивается его мутагенная активность. В сравнении с прототипом препарат альбит дает большое количество хлорофилльных мутаций и дает более широкий спектр морфофизиологических изменений в М2.
Описание мутантов с хозяйственно полезными признаками.
Мутант 7-5 создан при воздействии альбита 3 г/т. Разновидность нутанс. Колос двурядный желто-серый, длиной 9,3 см, плотность низкая, 10,3 членика на 4 см длины колосового стержня. Длина соломины выше, чем у родительской формы, и составляет - 73,6 см. Куст прямостоячий.
Мутант 7-10 получен в варианте альбит 3 г/т. Разновидность нутанс. Колос двурядный желтый, длинный (10,2 см), что на 2,3 см выше, чем у Биос-1. Куст прямостоячий. Средняя длина стебля 78,7 см. Имеет высокое число зерен в колосе, отличается ранним колошением.
Мутант 6-7 выделен при обработке альбитом 30 г/т. Разновидность нутанс. Колос двурядный, желтый с сероватым оттенком, длиной 8,7 см. Стебель высокий (71 см). Высокая продуктивная кустистость 3,8 продуктивных стебля на одно растение.
Мутант 5-1 получен в варианте альбит 300 г/т. Разновидность нутанс. Колос двурядный желтый, длинный (9,3 см), что на 1,4 см выше, чем у Биос-1. Куст прямостоячий. Средняя длина стебля 76,3 см. Имеет высокую продуктивную кустистость.
Источники информации
1. Дудин Г.П. Мутагенное действие излучения гелий-неонового лазера на яровой ячмень // Генетика. 1983, №10, с.1693-1699.
2. Соколова Е.В., Ленточкин A.M. Сравнительтная мутабильность ячменя к регуляторам роста // Адаптивные технологии в растениеводстве - итоги и перспективы: материалы всероссийской научно-практической конференции, посвященной 60-летию кафедры растениеводства ИжГСХА. - Ижевск: Изд-во ИжГСХА, 2003. - С.115-118.
3. Черемисинов М.В., Дудин Г.П. Изменчивость ярового ячменя во втором и третьем поколениях под влиянием протравителей семян // Селекция и семеноводство сельскохозяйственных культур: сборник материалов VIII Всероссийской научно-практической конференции. - Пенза: РИО ПГСХА, 2004. - С.43-45.
4. Мелькумова А. Биопрепарат Альбит для повышения урожая и защиты сельскохозяйственных культур. - М.: ВНИИ защиты растений МСХ РФ. - 2006 г.
5. Алехин В.Г. Биопрепарат Альбит: результаты и особенности применения (Комплексный препарат, обладающий свойствами регулятора роста, фунгицида, удобрения и антидота) // Гл. агроном, - 2007. - №3. - с.55-59.
6. Калам Ю., Орав Т. Хлорофилльная мутация. - Таллин: Валгус, 1974. - 59 с.
Способ получения мутантных растений ячменя, заключающийся в замачивании семян ячменя в водном растворе препарата Альбит из расчета 30-300 г препарата на тонну семян и выращивании из обработанных семян растений второго поколения.