Суспензии кристаллических пиримидиновых нуклеозидных производных в капсулах

Суспензии кристаллических пиримидиновых нуклеозидных производных в капсулах

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к новой фармацевтической препаративной форме. В частности, настоящее изобретение предоставляет новую препаративную форму в виде капсул для пиримидинового нуклеозидного производного, 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина, для терапевтического применения в лечении и/или предотвращении рака.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Терапевтическое применение пиримидиновых нуклеозидов в лечении пролиферативных нарушений хорошо известно из уровня техники. В качестве примера, коммерчески доступные противоопухолевые агенты пиримидиновых серий включают 5-фторурацил (Duschinsky R. с соавторами, J. Am. Chem. Soc., 79, 4559 (1957)), Тегафур (Hiller SA. с соавторами, Dokl. Akad. Nauk USSR, 176, 332 (1967)), UFT (Fujii S. с соавторами, Gann, 69, 763 (1978)), Carmofur (Hoshi A. с соавторами, Gann, 67, 725 (1976)), Doxyfluridine (Cook A.F. с соавторами, J. Med. Chem., 22, 1330 (1979)), Cytarabine (Evance J.S. с соавторами, Proc. Soc. Exp. Bio. Med., 106. 350 (1961)), Ancytabine (Hoshi, A., с соавторами, Gann, 63, 353 (1972)) и Enocytabine (Aoshima M. с соавторами, Cancer Res., 36, 2726 (1976)).

EP 536936 (Sankyo Company Limited) описывает различные 2'-циано-2'-дезокси-производные 1-β-D-арабинофуранозилцитозина, которые проявляют значительную противоопухолевую активность. Одно конкретное соединение, описанное в EP 536936, представляет собой 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозин (соответственно в дальнейшем в этом документе обозначено как «CYC682»); это соединение в настоящее время изучается.

CYC682, также известный как 1-(2-C-циано-2-дезокси-β-D-арабино-пентофуранозил)-N⁴-пальмитоил цитозин (Hanaoka K. с соавторами, Int. J. Cancer, 1999:82:226-236; Donehower R с соавторами, Proc Am Soc Clin Oncol, 2000: реферат 764; Burch PA. с соавторами, Proc Am Soc Clin Oncol, 2001: реферат 364), представляет собой орально применяемое новое 2'-дезоксицитидиновое антиметаболическое пролекарство нуклеозида CNDAC, 1-(2-C-циано-2-дезокси-β-D-арабино-пентофуранозил)-цитозина.

CYC682 обладает уникальным действием среди других нуклеозидных метаболитов, таких как гемцитабин, заключающимся в том, что он обладает способностью спонтанного разрыва цепи ДНК, что приводит к потенциальной противоопухолевой активности в различных клеточных линиях, ксенотрансплантате и метастатической модели рака.

CYC682 находится в центре внимания множества исследований в виду его оральной биодоступности и его улучшенной активности по сравнению с гемцитабином (лидирующий по продажам нуклеозидный аналог) и 5-FU (общепринятое антиметаболическое лекарство) на основании преклинических данных в твердых опухолях. В последнее время исследователи докладывают, что CYC682 проявляет сильную противораковую активность на модели рака толстой кишки. Для такой модели было обнаружено, что CYC682 является лучшим по сравнению с гемцитабином или 5-FU по продолжительности существования и также по предотвращению разрастания метастазов рака толстой кишки в печени (Wu M. с соавторами, Cancer Research, 2003:63:2477-2482). На сегодняшний день данные фазы I от пациентов с различными видами рака наводят на мысль, что CYC682 хорошо переносится людьми с миелосупрессией в качестве дозы, ограничивающей токсичность.

На сегодняшний день разработано множество различных препаративных форм для CYC682. Известные из уровня техники препаративные формы обычно включают наполненные гранулированным порошком капсулы, приготовленные с использованием активного агента в аморфной форме. Однако эти препаративные формы являются трудно производимыми и приводили к капсулам, содержащим различные количества кристаллического материала, образующегося в результате абсорбции воды во время процесса получения препаративной формы. Как следствие, эти капсулы обладали плохой стабильностью и требовали хранения при пониженной температуре (4°С).

Настоящее изобретение направлено на предоставление новой препаративной формы CYC682, которая устраняет одну или более проблем, связанных с известными из уровня техники препаративными формами, разработанными на сегодняшний день. В частности, настоящее изобретение направлено на предоставление препаративной формы CYC682, которая допускает облегченный технологический процесс и которая в результате приводит к капсулам, проявляющим улучшенную стабильность.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Первый аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической препаративной форме, которая включает (i) капсулу и (ii) ядро, включающее кристаллический 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозин и жидкий носитель.

Преимущественно заявленная препаративная форма демонстрирует улучшенную стабильность и может храниться при комнатной температуре по сравнению с 4°С для известных из уровня техники наполненных порошком препаративных форм. Кроме того, предварительные исследования показали, что наполненные жидкостью препаративные формы допускают эквивалентную абсорбцию активного агента в кровопотоке и в случае дозирования для человека показывают сходные фармакодинамические эффекты. В заключение, процесс приготовления заявленной препаративной формы имеет производственные преимущества в том, что минимизируется манипулирование цитотоксическим агентом в форме порошка, так как один раз проведя смешение, все процессы наполнения вовлекают манипулирование жидкостью без необходимости существенной герметизации.

Второй аспект настоящего изобретения относится к применению в капсулах триглицерида со средней длиной цепи в качестве жидкого носителя кристаллического 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина.

Третий аспект изобретения относится к жидкому носителю кристаллического 2'-циано-2'-дeзoкcи-N⁴-пaльмитoил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина для использования в капсулах, где жидкий носитель представляет собой фракционированное кокосовое масло или каприловый/каприновый триглицерид.

Четвертый аспект настоящего изобретения относится к способу изготовления вышеописанной фармацевтической препаративной формы, который включает стадии:

(i) смешивание кристаллического 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина и триглицерида со средней длиной цепи для получения суспензии;

(ii) помещение смеси, полученной на стадии (i), в предварительно подготовленную капсулу и

(iii) герметизация капсулы.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНОГО ВАРИАНТА ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ

Как приведено выше, в первом аспекте настоящее изобретение предоставляет новую фармацевтическую препаративную форму 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина в форме капсулы, наполненной жидкостью.

Более конкретно, фармацевтическая препаративная форма включает (i) капсулу и (ii) ядро (внутреннее содержимое), включающее кристаллический 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозин и жидкий носитель.

Предпочтительно, фармацевтическая препаративная форма предназначена для орального применения.

КАПСУЛА

Фармацевтическая композиция настоящего изобретения включает внешнюю капсулу или оболочку, которая способна герметизировать жидкое внутреннее содержимое.

Пригодные материалы капсул, известные для специалиста в данной области техники, включают, например, любой полимерный материал (полимеры или сополимеры, природные или синтетические), обладающий требуемыми физическими характеристиками для осуществления доставки активного агента при оральном применении.

В качестве примера, пригодные капсулы включают приготовленные из водорастворимых производных целлюлозы, гелеобразующего агента и со-гелеобразующего агента (см., например, US 5431917). Другие примеры включают капсулы, приготовленные из гидроксипропилметилцеллюлозы и аммониевой соли полимера целлюлозы ацетата фталата, или капсулы, приготовленные из желатина и аммониевой соли сополимера метакриловой кислоты и алкилового эфира метакриловой кислоты.

Дополнительные примеры включают полимеры, получаемые полимеризацией по меньшей мере одного винилового эфира в присутствии одного или нескольких полиэфирсодержащих соединений и, где применимо, одного или нескольких сополимеризуемых мономеров (см., например, US 6783770).

Другие пригодные материалы капсул включают полимеры или сополимеры, получаемые полимеризацией или сополимеризацией по меньшей мере одного полимеризуемого винилового мономера в присутствии поливинилового спирта и/или его производного (см., например, US 20050186268). В отличие от обычных капсул твердые капсулы этого типа совместимы с жидкими или полужидкими внутренними содержимыми.

Предпочтительно, капсула представляет собой твердую капсулу несмотря на то, что мягкие капсулы также могут быть использованы.

В одном предпочтительном варианте осуществления, капсула представляет собой желатиновую капсулу, более предпочтительно твердую желатиновую капсулу. Желатиновые капсулы согласно настоящему изобретению могут быть приготовлены с использованием общепринятых технологий (см., например, The Theory and Practice of Industrial Pharmacy, Ed. Lachman L. с соавторами, третье издание, Lea & Febiger, 1986, Philadelphia, p. 398-412).

В одном особенно предпочтительном варианте осуществления желатиновая капсула включает один или несколько замутняющих агентов и/или один или несколько пигментов.

Предпочтительно, пигменты и/или замутняющие агенты представлены в количестве от приблизительно 0,1 до приблизительно 10% по массе каждый.

Пригодные пигменты включают, например, диоксид титана, лаковые пигменты (например, FS&C алюминиевые лаки или D&C лаки), пигменты на основе оксида железа, натуральные красители, синтетические оксиды или им подобные или красящие вещества, выбранные из индиго, кармина, хинолинового желтого, оранжево-желтого S, куркумина, рибофлавина и кошениля.

Особенно предпочтительный замутняющий агент представляет собой диоксид титана. Более предпочтительно, диоксид титана представлен в количестве приблизительно 2%.

В дополнение, материал капсулы также может содержать другие добавки. Таковые включают абсорбенты, кислоты, адъюванты, предотвращающий слеживание агент, способствующие скольжению вещества, антиадгезивы, пеногасители, антикоагулянты, противомикробные средства, антиоксиданты, противовоспалительные средства, вяжущие средства, антисептики, основания, связующие вещества, хелатообразующие агенты, усиливающие экскрецию вещества, коагулянты, глазировочные средства, пигменты, красители, красящие вещества, совместители, комплексообразующие агенты, смягчители, регуляторы роста кристаллов, денатурирующие агенты, влагопоглотители, осушители, дегидратирующие агенты, разбавители, диспергирующие агенты, смягчающие вещества, эмульсификаторы, герметизирующие вещества, энзимы, наполнители, модифицирующие агенты, маскирующие ароматы агенты, флаворанты, ароматизаторы, гелеобразующие агенты, затвердители, усилители жесткости, увлажнители, лубриканты, увлажняющие вещества, буферанты, pH регулирующие агенты, пластификаторы, успокаивающие средства, болеутоляющие средства, замедлители схватывания, поверхностно-активные агенты, стабилизаторы, суспендирующие агенты, подсластители, дезинтегранты, загустители, регуляторы консиcтенции, сурфактанты, замутнители, полимеры, консерванты, предотвращающие гелеобразование средства, регулирующие реологию агенты, УФ-поглотители, концетраторы и регуляторы вязкости, но не ограничиваются приведенными. Одна или несколько добавок из любого конкретного класса, а также одного или нескольких классов добавок могут быть представлены в композициях. Конкретные примеры добавок хорошо известны в данном уровне техники. Предпочтительные добавки включают сурфактанты и полимеры.

В одном особенно предпочтительном варианте осуществления желатиновая капсула загерметизирована желатиновой полоской.

ЖИДКИЙ НОСИТЕЛЬ

Как описано выше, препаративная форма настоящего изобретения включает жидкое или полужидкое внутреннее содержимое, включающее 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозин (в качестве активного агента) и жидкий носитель.

Предпочтительно по существу весь активный агент суспендирован в жидком носителе. Однако в некоторых случаях активный агент может быть частично растворен и частично суспендирован в жидком носителе.

В одном особенно предпочтительном варианте осуществления активный агент суспендирован в жидком носителе.

В другом варианте осуществления активный агент частично или полностью растворен в жидком носителе.

В одном особенно предпочтительном варианте осуществления жидкий носитель представляет собой масло триглицерида со средней длиной цепи.

В одном наиболее предпочтительном варианте осуществления триглицерид со средней длиной цепи представляет собой фракционированное кокосовое масло или каприловый/каприновый триглицерид. Коммерчески доступный Myglyol 812N наиболее предпочтителен.

При комнатной температуре Myglyol 812N (также ивестный как MCT, DAC, oleum neutrale, CTFA, каприловый/каприновый триглицерид (каприловая кислота: C₈, каприновая кислота: C₁₀)) представляет собой жидкое липидное масло с низкой вязкостью. Как правило, в композиции MCT жирной кислоты преобладают C₈ жирные кислоты (от 50 до 65%), далее C₁₀ (от 30 до 45%), C₁₂ (максимум 5%) и C₆ (максимум 3%). Для масла известна большая склонность к биодеградации, чем для липидов с длинными цепями жирных кислот. Вследствие отсутствия токсичности для кожных и слизистых мембран MCT нашел применения в дерматологических продуктах, где он усиливает проникновение и распространение. MCT также широко применяют в оральных препаративных формах в качестве смазывающего агента и растворителя лекарства и в качестве усилителя растворимости в парентеральных препаративных формах.

В альтернативном варианте осуществления жидкий носитель включает полигликолизированные глицериды, например Gelucire®.

Композиции Gelucire представляют собой инертные полутвердые воскообразные материалы, которые обладают амфифильным характером и доступны с варьированием физических характеристик. Они поверхностно-активны по природе и диспергируемы или растворимы в водной среде с образованием мицелл, микроскопических глобул или везикул. Они идентифицируются по их температуре плавления/значению HLB. Температура плавления выражена в градусах Цельсия, и HLB (гидрофильно-липофильный баланс) выражен на числовой шкале от 0 до приблизительно 20. Нижние значения HLB отмечают более липофильные и гидрофобные субстанции, и высшие значения отмечают более гидрофильные и липофобные субстанции. Сродство соединения к водным или жирным субстанциям определено, и его значение HLB задано экспериментально. Один или смесь разных Gelucire наполнителей может быть выбрана для достижения требуемых характеристик температуры плавления и/или значения HLB.

Предпочтительные Gelucire для использования в настоящем изобретении включают Gelucire® 44/14, 53/10, 50/13, 42/12 и 35/10 от компании Gaftefosse.

Композиции Gelucire 50/13 представляют собой полигликолизированные глицериды, которые приготовлены за счет реакции алкоголиза натуральных масел с полиэтиленгликолями (PEG). Они представляют собой смеси моноэфиров, диэфиров и/или триэфиров глицеридов с длинной цепью (от C₁₂ до C₁₈) жирных кислот и PEG (моно- и/или ди-) эфиров жирных кислот с длинной цепью (от C₁₂ до C₁₈) и могут включать свободный PEG. Композиции Gelucire в тексте настоящего документа обычно описываются как эфиры жирных кислот с глицеролом, или PEG эфиры, или как полигликолизированные глицериды.

Большая группа композиций Gelucire характеризуется широким диапазоном температур плавления от приблизительно 33°С до приблизительно 64°С и более характерно от приблизительно 35°С до приблизительно 55°С, и изменением значений HLB от приблизительно 1 до приблизительно 14, более характерно от приблизительно 7 до приблизительно 14. Например, Gelucire 50/13 имеет температуру плавления приблизительно 50°С и значение HLB приблизительно 13 для этой марки Gelucire. Приемлемый выбор температуры плавления/ значения HLB для Gelucire или смеси композиций Gelucire будет обеспечивать характеристики доставки, требуемые для специфичной функции, например немедленного высвобождения, непрерывного высвобождения, и им подобных. Низкие температуры плавления многих твердых композиций Gelucire обеспечивают средства включения в них фармацевтически активных ингредиентов при температурах от приблизительно 0°С до приблизительно 50°С выше их соответствующих температур плавления и затем наполнение расплавом (раствором и/или дисперсией) в твердые желатиновые капсулы. Расплав затвердевает внутри капсул после охлаждения до комнатной температуры.

В одном наиболее предпочтительном варианте осуществления жидкий носитель включает Gelucire 44/14. Этот носитель представляет собой полутвердый наполнитель, который представляет собой смесь эфиров глицерола и PEG1500 и жирных кислот с длинной цепью. Суффиксы 44 и 14 относятся к его температуре плавления и гидрофильно-липофильному балансу (HLB) соответственно. Gelucire 44/14 коммерчески доступен (CAS 121548-04-7) и также известен как PEG 32 глицерол лаурат.

Gelucire 44/14 и Myglyol 812N могут использоваться каждый индивидуально или в комбинации с одним или более других соносителей или добавок. В одном предпочтительном варианте осуществления Myglyol 812N используется в комбинации с коллоидным диоксидом кремния (Aerosil 200). Предпочтительно Myglyol 812N используется с комбинацией до 2% коллоидного диоксида кремния.

Преимущественно препаративные формы, включающие совместно Myglyol 812N и Gelucire 44/14, проявляют лучшую стабильность, превосходящую другие препаративные формы. Myglyol 812N более предпочтителен в качестве жидкого носителя с учетом его более предпочтительных свойств вязкости.

В одном варианте осуществления внутреннее содержимое также включает дополнительные ингредиенты, например одно или несколько растительных масел, особенно арахиновое масло или кунжутное масло, или другие фармацевтически приемлемые разбавители, наполнители или носители. Внутреннее содержимое также может содержать один или несколько солюбилизаторов, один или несколько сурфактантов и/или один или несколько сосурфактантов. Предпочтительный солюбилизатор представляет собой моноэтиловый эфир диэтиленгликоля. Предпочтительные сурфактанты включают каприлкаприловые макроглицериды или производные полиоксоэтиленового касторового масла. Особенно предпочтительные производные полиоксоэтиленового касторового масла представляют собой полиоксил (40) гидрогенизированное касторовое масло или полиоксил (35) гидрогенизированное касторовое масло. Предпочтительный сосурфактант представляет собой полиэтиленгликоль 400. Предпочтительный регулятор вязкости представляет собой поливинилпирролидон. Особенно предпочтительный регулятор вязкости представляет собой повидон (PVP K-30).

Другие примеры дополнительных ингредиентов включают коллоидный диоксид кремния (например, Aerosil 200), Gelucire 44/11, PEG4005, Polyoxamer188 и 124, Lipoid PPL, Captex 200 и Labrafil.

В одном предпочтительном варианте осуществления внутреннее содержимое по существу состоит из кристаллического 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина и жидкого носителя.

В более предпочтительном варианте осуществления внутреннее содержимое состоит из индивидуальных кристаллического 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина и жидкого носителя, то есть не представлено никаких других ингредиентов.

В одном предпочтительном варианте осуществления содержание жидкого носителя представляет собой от 1 до 50 частей по массе относительно 1 части по массе кристаллического 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина.

В одном предпочтительном варианте осуществления содержание жидкого носителя представляет собой от 2 до 50 частей по массе относительно 1 части по массе кристаллического 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина.

В более предпочтительном варианте осуществления содержание жидкого носителя представляет собой от 1 до 10 частей по массе относительно 1 части по массе кристаллического 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина.

В более предпочтительном варианте осуществления содержание жидкого носителя представляет собой от 2 до 10 частей по массе относительно 1 части по массе кристаллического 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина.

В еще более предпочтительном варианте осуществления содержание жидкого носителя представляет собой от 1 до 5 частей по массе относительно 1 части по массе кристаллического 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина.

В еще более предпочтительном варианте осуществления содержание жидкого носителя представляет собой от 2 до 5 частей по массе относительно 1 части по массе кристаллического 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина.

В одном наиболее предпочтительном варианте осуществления содержание жидкого носителя представляет собой приблизительно 3 части по массе относительно 1 части по массе кристаллического 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина.

В одном наиболее предпочтительном варианте осуществления препаративная форма включает 25% в массовом соотношении активного агента и 75% в массовом соотношении жидкого носителя.

Еще одна особенность настоящего изобретения относится к применению в капсулах триглицерида со средней длиной цепи в качестве жидкого носителя кристаллического 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина.

Предпочтительно триглицерид со средней длиной цепи представляет собой фракционированное кокосовое масло или каприловый/каприновый триглицерид.

Еще одна особенность настоящего изобретения относится к жидкому носителю кристаллического 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина для использования в капсулах, где жидкий носитель представляет собой фракционированное кокосовое масло или каприловый/каприновый триглицерид.

АКТИВНЫЙ АГЕНТ

Настоящая препаративная форма содержит 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозин в качестве активного ингредиента. Это соединение, также известное как 1-(2-C-циано-2-дезокси-β-D-арабино-пентофуранозил)-N⁴-пальмитоил цитозин, обладает структурой, показанной ниже, и упоминается по тексту настоящего документа как “CYC682”.

CYC682 был впервые описан в EP 536936 (Sankyo Company Limited; патент-аналог JP2569251) и продемонстрировал обладание отличной противоопухолевой активностью.

Впоследствии были описаны различные кристаллические формы CYC682 (см., например, EP 1364959; Европейская заявка, производная из WO 02/64609 на имя Sankyo Company Limited). Эти кристаллические формы продемонстрировали улучшенную стабильность при хранении и легкость в обращении, пока сохраняется желаемый фармакокинетический профиль.

В одном особенно предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения кристаллический 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозин включает B-форму.

В одном особенно предпочтительном варианте осуществления кристаллический 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозин по существу состоит из B-формы.

В одном особенно предпочтительном варианте осуществления кристаллический 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозин состоит из B-формы.

B-форма CYC682 может быть приготовлена в соответствии с идеями EP 1364959. Сам CYC682 приготовляют в соответствии с идеями EP 536936.

В качестве обобщения, моногидрохлорид 2'-циано-2'-дезокси-1-β-D-арабинофуранозилцитозина пропускают через ионообменную смолу (типа CHCOO^-) для формирования 2'-циано-2'-дезокси-1-β-D-арабинофуранозилцитозина. Далее это соединение реагирует с 1,3-дихлор-1,1,3,3-тетраизопропилдисилоксаном для формирования 2'-циано-2'-дезокси-3',5'-O-(1,1,3,3-тетраизопропилдисилоксан-1,3-диил)-1-β-D-арабинофуранозилцитозина, который вовлекают в реакцию с пальмитиновой кислотой для формирования 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-3',5'-O-(1,1,3,3-тетраизопропилдисилоксан-1,3-диил)-1-β-D-арабинофуранозилцитозина. Финальная стадия включает снятие защитной группы с использованием фторида тетрабутиламмония для формирования желаемого продукта, 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина (CYC682).

Альтернативно CYC682 может быть приготовлен за счет реакции 2'-циано-2'-дезокси-1-β-D-арабинофуранозилцитозина с пальмитиновым ангидридом.

B-форма CYC682 приготовляется за счет добавления метилацетата, содержащего воду приблизительно 2,5% по объему, к CYC682 и нагревания до приблизительно 55°С для приготовления прозрачного раствора. Впоследствии раствор охлаждают в специфичных условиях и отделяют пластины кристаллов от раствора. После дальнейшего перемешивания отделенные кристаллы собирают фильтрацией и промывают метилацетатом, содержащим воду приблизительно 2,5% по объему, для получения желаемых кристаллов B.

В одном предпочтительном варианте осуществления фармацевтическая препаративная форма представлена в стандартной дозированной форме. Предпочтительно препаративная форма включает от приблизительно 0,1 до приблизительно 500 мг активного агента, более предпочтительно от приблизительно 1 до приблизительно 200 мг или еще более предпочтительно от приблизительно 1 до приблизительно 100 мг активного агента.

В одном наиболее предпочтительном варианте осуществления препаративная форма включает приблизительно 25 мг активного агента. В еще одном наиболее предпочтительном варианте осуществления препаративная форма включает приблизительно 75 мг активного агента.

СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ

Как описано выше, еще один аспект настоящего изобретения относится к способу изготовления вышеописанной фармацевтической препаративной формы, который включает стадии:

(i) смешивание кристаллического 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина и триглицерида со средней длиной цепи;

(ii) помещение смеси, полученной на стадии (i), в предварительно подготовленную капсулу и

(iii) герметизация капсулы.

Предпочтительно к отмеренному количеству CYC682 в смесительной камере добавляют порциями жидкий носитель до тех пор, когда будет добавлено необходимое количество. Компоненты перемешивают с использованием коммерчески доступного смесителя, например смесителя Silverson.

Предпочтительно компоненты перемешивают с высокой скоростью по меньшей мере 2 минуты, более предпочтительно по меньшей мере 3 минуты, еще более предпочтительно по меньшей мере 5 минут. В одном особенно предпочтительном варианте осуществления компоненты перемешивают от приблизительно 5 до приблизительно 8 минут.

В идеале компоненты перемешивают до достижения гомогенности. Получив гомогенную смесь, ее предпочтительно дегазируют с использованием вакуума.

Предпочтительно дегазированную смесь помещают в капсулу с использованием наполнителя капсул, отрегулированного для получения желаемой массы наполнителя. В завершение капсулы герметизируют для предотвращения утечек. Различные методы доступны для герметизации капсул (см., например, F. Wittner. New Developments in Hermetic Sealing of Hard Gelatin Capsules. Pharm. Manuf. 2:24-27, 1985).

В одном предпочтительном варианте осуществления стадия (iii) включает герметизацию желатиновой капсулы желатиновой полоской. Обычно это включает в себя выпрямление капсул и пропускание их один или два раза через колесо, которое вращается в желатиновой бане. Количество желатина захватывается зубчатым колесом и применяется для связывания колпачка и корпуса. Капсулы помещают в индивидуальные носители для сушки.

В альтернативном предпочтительном варианте осуществления стадия (iii) включает герметизацию желатиновой капсулы за счет микрораспыления. Обычно это включает в себя герметизацию с использованием водно-спиртового раствора и использует принцип понижения температуры плавления желатина за счет применения микстуры на поверхности капсулы между колпачком и корпусом. Процесс включает в себя обрызгивание каждой капсулы микроколичеством герметизирующей жидкости на соединение колпачка и корпуса с использованием прямого потока. Капиллярный эффект затягивает жидкость между колпачком и корпусом. Затем имеет место сушка за счет аккуратного переворачивания капсул во вращающемся барабане. Процесс может быть проведен с использованием коммерчески доступного устройства, такого как LEMS™ 30 (Liquid Encapsulation by MicroSpray; Capsugel Division of Warner Lambert Company).

Кроме того, настоящее изобретение описано в качестве примера.

ПРИМЕРЫ

Пример 1.

B-форма CYC682 приготовлена в соответствии с методикой, описанной в EP 536936 и EP 1364959, оба на имя Sankyo Company Limited.

Приготовление CYC682(в соответствии с EP 536936)

1(a) 2'-циано-2'-дезокси-1-β-D-арабинофуранозилцитозин.

Раствор 8,66 г (30 ммоль) моногидрохлорида 2'-циано-2'-дезокси-1-β-D-арабинофуранозилцитозина в 50 мл воды пропустили через колонку, снабженную 90 мл Dowex 1X2 (торговое имя) ионообменной смолы (типа CHCOO^-), и промыли колонку 300 мл воды. Отфильтрованную жидкость и осадок после промывки объединили и лиофилизировали, получив 7,23 г (выход 95,5%) соединения, указанного в заголовке, в форме бесцветного порошка.

ЯМР Спектр (ДМСО-Д₆, 270МГц) δ ppm:

7,28 (1H, уширенный синглет);

7,23 (1H, уширенный синглет);

7,83 (1H, дублет, J=7,8 Гц);

6,17 (1H, дублет, J=7,3 Гц);

6,17 (1H, дублет, J=5,9 Гц);

5,77 (1H, дублет, J=7,3 Гц);

5,12-5,16 (1H, мультиплет);

4,36-4,44 (1H, мультиплет);

3,56-3,80 (4H, мультиплет).

1(b) 2'-циано-2'-дезокси-3',5'-O-(1,1,3,3-тетраизопропилдисилоксан-1,3-диил)-1-β-D-арабинофуранозилцитозин

5,045 г (20 ммоль) 2'-циано-2'-дезокси-1-β-D-арабинофуранозилцитозина (приготовленный согласно вышеописанной стадии (a)) высушили трижды за счет азеотропной отгонки с пиридином и остаток суспендировали в 200 мл пиридина. 6,7 мл (21 ммоль) 1,3-дихлор-1,1,3,3-тетраизопропилдисилоксана добавили к суспензии и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение часа в атмосфере азота. Раствор сконцентрировали приблизительно в два раза по отношению к первоначальному объему за счет дистилляции при пониженном давлении и концентрат разбавили 200 мл этилацетата. Разбавленный раствор дважды промыли, каждый раз по 200 мл насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Затем его сушили над безводным сульфатом магния. Растворитель удалили за счет дистилляции при пониженном давлении и полученный остаток смешали со смесью толуола и метанола. Смесь подвергли азеотропной дистилляции, получив 11,21 г остатка. Его очистили за счет колоночной хроматографии через 300 г силикагеля (230-400 меш) с использованием в качестве элюента хлористого метилена, содержащего метанола 5% по объему, выделив 8,67 г (выход 87%) соединения, указанного в заголовке, в форме пены.

ЯМР Спектр (CDCl₃, 270 МГц) δ ppm:

7,69 (1H, дублет, J=7,26 Гц);

6,31 (1H, дублет, J=7,26 Гц);

5,74 (1H, дублет, J=7,26 Гц);

4,64 (1H, дублет дублетов, J=7,26 & 7,26 Гц);

4,15-4,04 (2H, мультиплет);

3,84 (1H, дублет триплетов, J=7,26 & 3,30 Гц);

3,67 (1H, дублет дублетов, J=7,26 & 7,26 Гц);

1,15-0,93 (28H, мультиплет).

1(с) 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-3',5'-O-(1,1,3,3-тетраизопропилдисилоксан-1,3-диил)-1-β-D-арабинофуранозилцитозин

Смесь 1,48 г (3 ммоль) 2'-циано-2'-дезокси-3',5'-O-(1,1,3,3-тетраизопропилдисилоксан-1,3-диил)-1-β-D-арабинофуранозилцитозина (приготовленный согласно вышеописанной стадии (b)) и 3,07 г (12 ммоль) пальмитиновой кислоты высушили за счет азеотропной отгонки с использованием 50 мл бензола и остаток растворили в 30 мл ТГФ. 2,47 г (12 ммоль) дициклогексилкарбодиимида и 120 мг (0,9 моль) 4-(N,N-диметиламино)пиридина добавили к раствору и полученную смесь перемешивали в течение 2,5 часов при 50°С в атмосфере азота. По окончании этого времени нерастворимые материалы удалили фильтрацией и фильтрат освободили от растворителя за счет дистилляции при пониженном давлении. Остаток распределили между 100 мл этилацетата и 50 мл 5% (масса/объем) водного раствора гидрокарбоната натрия. Органический слой промыли 50 мл насыщенного водного раствора хлорида натрия и высушили над безводным сульфатом магния. Растворитель удалили за счет дистилляции при пониженном давлении и остаток очистили за счет колоночной хроматографии через силикагель с использованием в качестве элюента хлористого метилена, содержащего метанола 1% по объему, выделив 1,85 г соединения, указанного в заголовке, в качестве карамелеподобного осадка.

ЯМР Спектр (ДМСО-Д₆, 270 МГц) δ ppm:

10,94 (1H, синглет);

8,02 (1H, дублет, J=7,82 Гц);

7,30 (1H, дублет, J=7,32 Гц);

6,21 (1H, дублет, J=7,83 Гц);

4,69 (1H, синглет);

4,22 (2H, мультиплет);

3,98 (1H, дублет, J=2,45 Гц);

3,42 (1H, дублет, J=3,92 Гц);

2,40 (2H, триплет, J=7,32 Гц);

1,53 (2H, синглет);

0,82-1,23 (55H).

1(d) 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозин

0,31 мл (5,45 ммоль) уксусной кислоты и 2,84 г (10,9 ммоль) фторида тетрабутиламмония были добавлены при охлаждении льдом и перемешивании к раствору 4,0 г (5,45) ммоль 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-3',5'-O-(1,1,3,3-тетраизопропилдисилоксан-1,3-диил)-1-β-D-арабинофуранозилцитозина (приготовленный согласно вышеописанной стадии (с)) в 60 мл ТГФ (предварительно высушенном над молекулярными ситами 3А) и полученную смесь перемешивали в течение 40 мин в атмосфере азота. Реакционную смесь сконцентрировали досуха упариванием при пониженном давлении и остаток распределили между 100 мл хлористого метилена и 50 мл насыщенного водного раствора хлорида натрия. Органический слой промыли 50 мл насыщенного водного раствора хлорида натрия и высушили над безводным сульфатом магния. Растворитель удалили за счет дистилляции при пониженном давлении и карамелеподобный остаток очистили за счет колоночной хроматографии через силикагель с использованием в качестве элюента хлористого метилена, содержащего метанола 4% по объему, выделив 2,25 г соединения, указанного в заголовке, в качестве бесцветного порошка.

ЯМР Спектр (ДМСО-Д₆, 270 МГц) δ ppm:

10,91 (1H, синглет);

8,36 (1H, дублет, J=7,8 Гц);

7,29 (1H, дублет, J=7,8 Гц);

6,25 (1H, дублет, J=5,4 Гц);

6,21 (1H, дублет, J=7,3 Гц);

5,22 (1H, уширенный синглет);

4,43 (1H, мультиплет);

3,61-3,93 (4H, мультиплет);

2,40 (2H, триплет, J=7,3 Гц);

1,54 (2H, триплет, J=6,8 Гц);

1,24 (24H, синглет);

0,83-0,88 (3H, мультиплет).

Альтернативное приготовление 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозина

Смесь 12,9 г (51,1 ммоль) 2'-циано-2'-дезокси-1-β-D-арабинофуранозилцитозина (приготовленный согласно вышеописанному Примеру 1(a)) и 38,1 г (76,7 ммоль) пальмитинового ангидрида поместили в круглодонную колбу объемом 1 л и затем добавили 51 мл диметилформамида. Полученную смесь перемешивали в масляной бане при 100°C в течение 20 минут, соблюдая осторожность в защите ее от микстуры. Исчезновение исходного соединения подтвердили по данным тонкослойной хроматографии (с использованием в качестве подобранного элюента хлористого метилена, содержащего метанола 5% по объему). Когда исходное соединение исчезло, при перемешивании добавили к реакционной смеси 513 мл диизопропилового эфира и смесь оставили на 1 час при охлаждении льдом. По окончании этого времени нерастворимые материалы отфильтровали. Нерастворимые материалы полностью растворили в 513 мл пропанола при перемешивании и нагревании и оставили раствор на ночь в холодильнике, выделив 18 г соединения, указанного в заголовке, в качестве бесцветного порошка, имеющего такие же физико-химические свойства, как и вышеописанный продукт 1(d).

Пример 2

Получение B-формы CYC682 (в соответствии с EP 1364959)

(a) К 2'-циано-2'-дезокси-N⁴-пальмитоил-1-β-D-арабинофуранозилцитозину (30 г), который представляет собой соединение, описанное в Примере 1(1d) JP № 2569251 и EP 536936 (описано выше в Примере 1), добавили 300 мл метилацетата, содержащего воду приблизительно 2,5% по объему, и полученную смесь нагревали примерно до 55°С для приготовления прозрачного раствора. Впоследствии раствор охладили до 5°С со скоростью приблизительно 0,5°С в минуту. После охлаждения до 45°С в процессе охлаждения отделялись пластины кристаллов от раствора. После дальнейшего перемешивания при 5°С в течение 20 минут выделившиеся кристаллы собрали фильтрацией и промыли 30 мл метилацетата, содержащего воду приблизительно 2,5% по объему, для получения желаемых кристаллов B (28,78 г, чистота 97,9%) с выходом 96,0% [N/N].

(b) К 2'-циано-2'-дезокси-N⁴