Композиция бис(тио-гидразид амида)

Композиция бис(тио-гидразид амида)

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Предпосылки создания изобретения.

В настоящее время доступно множество препаратов, которые могут использоваться в лечении рака. Однако во многих случаях не наблюдается отклика на противораковое лечение или рост раковой опухоли и/или метастазов только замедляется. Даже если опухоль первоначально реагирует на противораковое лечение, уменьшаясь в размере или переходя в стадию ремиссии, она вырабатывает резистентность к лекарственному средству. По этим причинам существует потребность в новых противораковых средствах и новых препаратах, которые могут использоваться в лечении рака с резистентностью к нескольким лекарствам.

Некоторые композиции бис(тио-гидразид амида) были описаны как обладающие значительной цитотоксичностью по отношению к раковым клеткам, включая раковые клетки, которые обрели устойчивость ко множеству лекарственных средств, а также улучшающие противораковое действие других противораковых лекарств, таких как таксол и аналоги таксола (см., например, патентную заявку США №10/758589 и патенты США №6762204 и 6800660).

Эти бис(тио-гидразид амиды) сами по себе только незначительно растворимы в воде. Однако их дисоли (описанные в патентной заявке США №11/157213) демонстрируют высокую растворимость в воде и биодоступность. Обычным недостатком этих дисолей является длительное время ресуспендирования в воде, а из-за низкой температуры стеклования эти дисоли требуют использования специального лиофилизационного оборудования, которое увеличивает затраты, связанные с сушкой дисолей.

Поэтому существует потребность в способах, которые позволят уменьшить затраты, связанные с сушкой указанных дисолей, и сократить время ресуспендирования дисолей.

Сущность изобретения

Было обнаружено, что время ресуспендирования некоторых бис(тио-гидразид амидных) дисолей может быть значительно сокращено путем лиофилизации и отжига дисолей в присутствии кристаллического объемного наполнителя в определенных условиях. Было также обнаружено, что лиофилизация и отжиг этих дисолей в присутствии кристаллического объемного наполнителя не требует применения специального лиофилизационного оборудования, поэтому затраты на производство значительно сокращаются.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции, включающей соединение, представленное структурной формулой (I):

,

где

Y - ковалентная связь или замещенная или незамещенная неразветвленная гидрокарбильная группа.

R₁-R₄ независимо представляют собой -Н, алифатическую группу, замещенную алифатическую группу, арильную группу или замещенную арильную группу, или R₁ и R₃, взятые вместе с атомами углерода и азота, с которыми они связаны, и/или R₂ и R₄, взятые вместе с атомами углерода и азота, с которыми они связаны, образуют неароматическое гетероциклическое кольцо, необязательно слитое с ароматическим кольцом.

Z означает -О или -S.

М⁺ является фармацевтически приемлемым моновалентным катионом, а М²⁺ - фармацевтически приемлемым двухвалентным катионом.

2 г композиции, включающей соединение, представленное структурной формулой (I), ресуспендируется в 10 мл воды в течение менее 10 минут.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции, включающей соединение, представленное структурной формулой (I), и фармацевтически приемлемый наполнитель, причем мольное отношение указанного соединения к указанному наполнителю составляет от 1:20 до 1:1.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения лиофилизата композиции, включающей соединение, представленное структурной формулой (I), и фармацевтически приемлемый кристаллический объемный наполнитель. Способ включает этапы:

a) приготовления водного раствора соединения и наполнителя, в котором мольное отношение указанного соединения к указанному наполнителю составляет от 1:20 до 1:1;

b) замораживания раствора, полученного на этапе а), при температуре ниже температуры стеклования соединения с образованием замороженного концентрата;

c) отжига замороженного концентрата при температуре выше температуры стеклования соединения, но ниже температуры плавления замороженного раствора, включающего замороженный концентрат, с образованием отожженной композиции;

а) замораживания отожженной композиции при температуре ниже температуры стеклования соединения; и

е) высушивания отожженной композиции из этапа е) с получением лиофилизата с содержанием влаги менее 10%.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к лиофилизату, включающему соединение, представленное структурной формулой (I), и фармацевтически приемлемый кристаллический объемный наполнитель. Лиофилизат готовят согласно описанному выше способу.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения лиофилизата композиции, включающей соединение, представленное структурной формулой (I), и фармацевтически приемлемый наполнитель, выбранный из группы гидроксиэтил крахмала, декстрана и их сочетаний. Способ включает этапы:

a) приготовления водного раствора соединения и наполнителя;

b) замораживания раствора, полученного на этапе а), при температуре ниже температуры стеклования соединения с образованием замороженного концентрата; и

с) высушивания указанного замороженного концентрата с получением лиофилизата с влажностью менее 10%.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к лиофилизату, включающему соединение, представленное структурной формулой (I), и фармацевтически приемлемый наполнитель, выбранный из группы гидроксиэтил крахмала, декстрана и их сочетаний. Лиофилизат готовят согласно описанному выше способу.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к использованию раскрытых здесь композиций в лечении, например, в качестве противораковых средств.

Настоящее изобретение также предлагает способ лечения пациента с раковым заболеванием. Способ включает введение пациенту эффективного количества раскрытой здесь композиции. Композиция вводится в виде монотерапии (т.е. в качестве единственного лекарственного средства против рака, вводимого пациенту), или вводится совместно с одним или несколькими другими противораковыми препаратами.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к использованию композиции или лиофилизата, раскрытых здесь, в производстве медикамента для лечения рака у пациента.

Раскрытые способы позволяют сушить лиофилизированные (и, необязательно, отожженные) композиции и хранить их в течение длительного времени без ухудшения качества композиций. Кроме того, высокая растворимость в воде раскрытых здесь лиофилизированных (и, необязательно, отожженных) композиций обеспечивает их быстрое ресуспендирование без необходимости в применении специального оборудования, такого как акустические ванны и т.д. Описанный здесь процесс лиофилизации и отжига также проводится при стандартных условиях без необходимости в высоком вакууме и низких температурах, которые обычно требуются для соединений с низкими температурами стеклования, что значительно повышает затраты, связанные с процессом лиофилизации.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение относится к композициям, включающим соединение бис(тио-гидразид амид), являющееся соединением, структура которого охватывается формулой, выбранной из Структурных формул (I)-(V), описанных ниже, 2 г которого может ресуспендироваться в 10 мл в течение менее чем 10 минут; предпочтительно - в течение менее чем 5 минут, более предпочтительно - в течение менее чем 2 минут, еще более предпочтительно - в течение менее чем 1 минуты и еще более предпочтительно - в течение менее чем 30 секунд.

Употребляемые здесь термины "ресуспендируемый" или "ресуспендированный" означают, что композиция или отожженная композиция и/или лиофилизированная композиция согласно настоящему изобретению может быть полностью растворена в воде в условиях окружающей среды.

В предпочтительном варианте осуществления композиция также включает фармацевтически приемлемый наполнитель. Употребляемый здесь термин "фармацевтически приемлемый наполнитель" относится к веществу, добавляемому к раствору перед лиофилизацией для улучшения таких характеристик, как цвет, текстура, прочность и объем лиофилизированной лепешки. Фармацевтически приемлемые наполнители могут быть, например, буферами и регуляторами рН, кристаллическими объемными наполнителями, стабилизаторами и агентами, повышающими тоничность.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления фармацевтически приемлемый наполнитель - это кристаллический объемный наполнитель. Употребляемые здесь термины "кристаллический объемный наполнитель" или "кристаллический объемный агент" означают наполнитель, который обеспечивает объем и структуру лиофилизационной лепешки. Эти кристаллические наполнители инертны и не реагируют с бис(тио-гидразид амидом). Кроме того, кристаллические объемные агенты способны к кристаллизации в условиях лиофилизации. Кристаллический объемный агент может образовывать кристаллическую структуру в сочетании с бис(тио-гидразид амидом) или может образовывать кристаллическую структуру независимо от бис(тио-гидразид амида).

Примеры подходящих кристаллических объемных агентов включают гидрофильные наполнители, такие как водорастворимые полимеры; сахары, такие как маннитол, сорбит, ксилит, глюцитол, дуцитол, инозитиол, арабинитол, арабитол, галактитол, идитол, аллитол, мальтитол, фруктоза, сорбоза, глюкоза, ксилоза, трегалоза, аллоза, декстроза, альтроза, лактоза, глюкоза, фруктоза, гулоза, идоза, галактоза, талоза, рибоза, арабиноза, ксилоза, ликсоза, сахароза, солодовый сахар, лактоза, лактулоза, фукоза, рамноза, мелецитоза, мальтотриоза, раффиноза, альтритол, их оптически активные формы (D- или L-формы), а также соответствующие рацематы; неорганические соли, минеральные и органические минеральные, такие как, соли кальция, такие как лактат, глюконат, глицерилфосфат, цитрат, фосфат, одноосновный и двухосновный, сукцинат, сульфат и тартрат, а также такие же соли алюминия и магния; углеводы, такие как, обычные моно- и дисахариды, а также соответствующие многоатомные спирты; белки, такие как альбумин; аминокислоты, такие как глицин; эмульгируемые жиры и поливинилпирролидон.

Предпочтительные кристаллические объемные агенты выбраны из группы, состоящей из глицина, маннитола, декстрана, декстрозы, лактозы, сахарозы, поливинилпирролидона, трегалозы, глюкозы и их сочетаний. Другими предпочтительными кристаллическими объемными агентами являются глицин или маннитол. В некоторых других предпочтительных вариантах осуществления кристаллический объемный агент является маннитолом.

В некоторых вариантах осуществления кристаллические объемные агенты присутствуют в мольном отношении бис(тио-гидразид амидов) к наполнителю от 1:20 до 1:1, предпочтительно от 1:10 до 1:1. Как правило, наполнители присутствуют в избытке мольного отношения дисоли бис(тио-гидразид амида) к наполнителям, например, от 1:20 до 1:2, предпочтительно от 1:10 до 1:2, еще более предпочтительно от 1:5,5 до 1:2,0.

В других вариантах осуществления фармацевтически приемлемый наполнитель может использоваться в сочетании с бис(тио-гидразид амидом), причем фармацевтически приемлемый наполнитель образовывает желатиновую или полимерную структуру, которая может быть аморфной или кристаллической. Примеры таких фармацевтически приемлемых наполнителей включают гидроксиэтил крахмал, декстран, поливинилпирролидон, желатин, пуллан, крахмал, пектин, амилопектин, хитин и их сочетания, предпочтительно наполнитель выбирают из гидроксиэтил крахмала, декстрана и их сочетаний. Обычно эти наполнители присутствуют в весовом соотношении бис(тио-гидразид амида) к инертному наполнителю от 1:0,5 до 1:20, предпочтительно от 1:1 до 1:10, более предпочтительно от 1:1 до 1:5, еще более предпочтительно от 1:1 до 1:2.

Для одного варианта осуществления композиция, включающая бис(тио-гидразид амид) и фармацевтически приемлемый наполнитель, является лиофилизированной, более предпочтительно лиофилизированной и отожженной композицией. Альтернативно, раскрытые композиции являются лиофилизированными или нелиофилизированными. Нелиофилизированные композиции могут служить исходным материалом для приготовления лиофилизированных и отожженных композиций согласно изобретению с помощью описанных ниже процессов.

Употребляемый здесь термин "лиофилизация" означает метод сушки или дегидратации замораживанием, включающий удаление растворителя, предпочтительно смешивающегося с водой растворителя, более предпочтительно - воды из композиции, обычно путем сублимации под высоким вакуумом, когда композиция находится в замороженном состоянии. Лиофилизация стабилизирует композицию и минимизирует окисление и другие процессы разрушения, обеспечивая длительное хранение композиции при температурах выше замерзания.

Употребляемые здесь термины "лиофилизированная композиция", "лиофилизированная лепешка" или "лиофилизат" означают твердый остаток или лепешку, получаемую или остающуюся после определенной выше процедуры лиофилизации. В некоторых вариантах осуществления, лиофилизированная композиция или лиофилизат содержит менее 10% влаги, предпочтительно менее 5%, более предпочтительно менее 2%, еще более предпочтительно менее 1%. Конечная влажность лиофилизированной композиции может быть измерена способом Karl Fisher или другими методами.

Как правило, лиофилизацию выполняют в лиофилизационном оборудовании (лиофилизаторе), включающем сушильный шкаф с регулированием температуры, конденсатор для сбора воды и вакуумную систему для снижения давления в сушильном шкафу.

Процесс лиофилизации обычно включает два этапа: этап замораживания и этап первичной сушки или сублимации и может необязательно включать этап вторичной сушки. Процесс лиофилизации может также включать стадию предварительной обработки, выполняемую перед стадией замораживания и стадией отжига, выполняемой перед стадией сушки.

Употребляемый здесь термин "предварительная обработка" включает любой способ обработки композиции или раствора перед замораживанием. Это может включать, например, концентрацию раствора, пересмотр композиции (т.е. добавление компонентов для повышения стабильности и/или улучшения обработки), или предварительное охлаждение раствора.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления композиция или раствор предварительно охлаждены до температуры от 10°C до -10°C, предпочтительно, от 0°C до -10°C в течение времени от 10 секунд до 1 часа, предпочтительно, от 1 минуты до 30 минут.

Для приготовления раскрытых ресуспендируемых композиций бис(тиогидразид амид) и фармацевтически приемлемый наполнитель растворяют или суспендируют в подходящем растворителе, предпочтительно бис(тио-гидразид амид) и фармацевтически приемлемый наполнитель растворяют в подходящем растворителе с образованием раствора. Как правило, растворитель - это водный растворитель, и он может необязательно включать другие ингредиенты, такие как буферы, фармацевтически приемлемые соли или другие фармацевтически приемлемые ингредиенты, растворенные в нем. Как правило, растворитель - стерилизованная вода без других ингредиентов. В альтернативном варианте растворитель - это неводный растворитель, такой как спирт, например, метанол, этанол, трет-бутиловый спирт или водная/спиртовая смесь, диметилсульфоксид (DMSO), тетрагидрофуран (THF) или диметилформамид (DMF).

Первая стадия раскрытого процесса лиофилизации, после любых этапов предварительной подготовки, является замораживанием. На этапе замораживания раствор замораживается при температуре ниже температуры стеклования бис(тио-гидразид амида) с образованием замороженного концентрата.

Температура стеклования (Tg), как определено здесь, - это температура, при которой соединение меняет состояние от стекловидного твердого состояния до вязкой жидкости. Например, при температуре ниже Tg материалы обычно являются твердыми или стекловидными, а выше Tg - резинообразными или похожими на кожу. Стеклование не всегда является острым переходом и в некоторых случаях может быть постепенным переходом. Для бис(тио-гидразид амида) Структурной формулы (II) Tg равняется -44,7°C.

По мере замерзания раствора концентрация соединения и наполнителя в растворе увеличивается, Tg' является температурой стеклования при максимальной концентрации лекарственного средства и наполнителя в растворе.

В результате замораживания получают "замороженный концентрат" высококонцентрированной композиции или смеси, состоящей из соединения согласно настоящему изобретению и наполнителя или наполнителей, находящихся в промежутках между кристаллами льда.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления на этапе замораживания раствор замораживают при температуре от -44,7°C до -80°C, предпочтительно от -44,7°C до -60°C, предпочтительно от -44,7°C до -50°C, в течение времени от 10 минут до 10 часов, предпочтительно от 30 минут до 3 часов, более предпочтительно от 30 минут до 2 часов.

В следующем этапе раскрытой процедуры лиофилизации "замороженный концентрат" необязательно отжигают. Употребляемые здесь термины "отожженный" или "отжиг" означают процесс поддержания температуры замороженного концентрата на постоянном уровне в течение времени, необходимого для кристаллизации кристаллического объемного наполнителя. Как правило, замороженный концентрат отжигают при температуре между точкой плавления замороженного раствора, включающего замороженный концентрат, и Tg соединения согласно настоящему изобретению. Точка плавления замороженного раствора, включающего замороженный концентрат, здесь означает температуру, при которой замороженный раствор, включающий бис(тио-гидразид амид) и инертный наполнитель, переходит из замороженного состояния в жидкое состояние или начинает таять. Обычно эта температура составляет приблизительно 0°C, но может меняться в зависимости от концентрации раствора. Когда замороженный концентрат согласно настоящему изобретению отожжен, кристаллический объемный наполнитель образует кристаллическую структуру, независимую от соединения настоящего изобретения.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления этап отжига выполняют один раз. В некотором более предпочтительном варианте осуществления этап отжига выполняют несколько раз, например дважды, трижды, пять раз или десять раз. Как правило, этап отжига выполняют дважды.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления на этапе отжига замороженный концентрат отжигают при температуре от 0°C до -44,7°C, предпочтительно от 0°C до -40°C и предпочтительно от 0°C до -30°C в течение времени от 10 минут до 10 часов, предпочтительно от 2 часов до 6 часов, более предпочтительно от 3 часов до 5 часов.

Употребляемый здесь термин "отожженная композиция" означает любую композицию, отожженную как определено выше.

На следующем этапе раскрытой процедуры лиофилизации отожженная композиция может быть заморожена до температуры ниже Tg бис(тио-гидразид амида). На этом этапе замораживания раствор замораживают при температуре от -44,7°C до -80°C, предпочтительно от -44,7°C до -60°C, предпочтительно от -44,7°C до -50°C в течение времени от 10 минут до 10 часов, предпочтительно от 30 минут до 3 часов, более предпочтительно от 30 минут до 1,5 часов.

Термин "высушивание" охватывает здесь любой способ удаления воды или растворителя из замороженного концентрата или отожженной композиции при поддержании застеклованного состояния замороженного концентрата или отожженной композиции.

Первичный этап высушивания включает сублимацию водного раствора или компонентов растворителя под вакуумом при температурах, достаточно низких для предотвращения коллапса замороженного концентрата. В некоторых особых вариантах осуществления водные компоненты или компоненты растворителя удаляют сублимацией во время первичной сушки. Температура на этапе сушки должна быть достаточно высокой, чтобы обеспечить достаточную скорость сублимации жидких компонентов, но все же достаточно низкой, чтобы все компоненты замороженного концентрата остались замороженными. Так как сублимация обеспечивает значительное охлаждение продукта, температуры для этапа сушки обычно намного выше, чем для этапа замораживания.

На этапе первичной сушки замороженный концентрат или отожженную композицию высушивают путем сублимации при температуре от 20°C до -20°C, предпочтительно от 10°C до -10°C, предпочтительно от 10°C до 0°C, дополнительные значения температуры сублимации включают величины от 0°C до -30°C, предпочтительно от 0°C до -25°C. Обычно сублимацию проводят в условиях вакуума при давлении от 200 мТорр до 20 мТорр, предпочтительно от 200 мТорр до 100 мТорр, более предпочтительно от 180 мТорр до 130 мТорр.

Сублимацию выполняют в течение времени между 5 часами и 40 часами, предпочтительно между 10 часами и 30 часами, более предпочтительно между 20 часами и 30 часами, дополнительно сублимацию выполняют в течение времени между 10 часами и 80 часами, предпочтительно между 30 часами и 60 часами.

После удаления ледяных кристаллов путем сублимации остающийся замороженный концентрат или отожженная композиция все еще могут содержать связанную воду / растворитель, которые могут быть удалены медленным нагреванием, которое необязательно проводят в условиях вакуума, с получениям лиофилизированной лепешки. Это - заключительная часть цикла лиофилизации, где остаточную влажность снижают до уровней, которые более не поддерживают биологический рост и химические реакции. Этот процесс - вторичное высушивание. Снижение влажности во время вторичного высушивания достигают путем повышения температуры до температуры окружающей среды или выше.

На этапе вторичной сушки замороженный концентрат или отожженную композицию высушивают путем десорбции при температуре от 20°C до 80°C, предпочтительно от 30°C до 60°C, предпочтительно от 40°C до 50°C, дополнительные значения температуры десорбции включают величины от 10°C до 80°C, предпочтительно от 10°C до 30°C. Обычно десорбцию проводят в условиях вакуума при давлении от 200 мТорр до 20 мТорр, предпочтительно от 200 мТорр до 100 мТорр, более предпочтительно от 180 мТорр до 130 мТорр.

В особом варианте осуществления десорбцию проводят в течение времени между 10 минутами и 10 часами, предпочтительно между 30 минутами и 5 часами, более предпочтительно между 1 часом и 3 часами, дополнительное время десорбции включает интервалы 10-30 часов, предпочтительно 10-20 часов.

Лиофилизированную композицию или лиофилизат обычно сушат, пока его влажность не станет меньше 10%, предпочтительно меньше 5%, более предпочтительно меньше 2%, еще более предпочтительно меньше 1%. Конечная влажность лиофилизированной композиции может быть измерена способом Kari Fisher или другими методами.

Типичный цикл лиофилизации, используемый в соответствии с настоящим изобретением, предоставлен ниже. Циклы могут изменяться в зависимости от имеющегося оборудования и средств известным из уровня техники образом.

В одном варианте осуществления лиофилизированную композицию готовят в соответствии со следующей процедурой. Температуру камеры необязательно уменьшают до значения между 10°C и -10°C и поддерживают в течение времени между 5 минутами и 5 часами перед замораживанием. Затем температуру камеры уменьшают до величины между -44,7°C и -80°C и поддерживают в течение времени от 10 минут до 10 часов. Затем температуру повышают до величины между 0°C и -44,7°C и поддерживают в течение 10 минут - 10 часов. Затем температуру камеры уменьшают до величины между -44,7°C и -80°C и поддерживают в течение времени от 10 минут до 10 часов. Затем температуру необязательно повышают до величины между 0°C и -44,7°C и поддерживают в течение 10 минут - 10 часов. Затем температуру камеры уменьшают до величины между -44,7°C и -80°C и поддерживают в течение времени от 10 минут до 10 часов. Потом давление в лиофилизационной камере уменьшают до 20-200 мТорр. После снижения давления в камере температуру линейно повышают до 20°C- -20°C и поддерживают в течение 4-40 часов. Затем температуру необязательно линейно повышают до величины между 20°C и 80°C и поддерживают в течение 10 минут - 10 часов. Конечная влажность лиофилизированного продукта предпочтительно составляет от менее чем приблизительно 10% до менее чем приблизительно 1%, обычно приблизительно 1%.

В дополнительном варианте осуществления лиофилизированную композицию готовят в соответствии со следующей процедурой. Температуру камеры необязательно уменьшают до величины от 10°C до 0°C и поддерживают в течение времени от 5 минут до 1 часа перед замораживанием. Затем температуру камеры уменьшают до величины между -44,7°C и -60°C и поддерживают в течение времени от 30 минут до 3 часов. Затем температуру повышают до величины между 0°C и -40°C и поддерживают в течение 2-6 часов. Затем температуру камеры уменьшают до величины между -44,7°C и -60°C и поддерживают в течение времени от 30 минут до 3 часов. Затем температуру необязательно повышают до величины между 0°C и -40°C и поддерживают в течение 2-6 часов. Затем температуру камеры уменьшают до величины между -44,7°C и -60°C и поддерживают в течение времени от 30 минут до 3 часов. Потом давление в лиофилизационной камере уменьшают до 100-200 мТорр. После снижения давления в камере температуру линейно повышают до 10°C- -10°C и поддерживают в течение 20-30 часов. Затем температуру необязательно линейно повышают до величины между 30°C и 60°С и поддерживают в течение 1-3 часов. Конечная влажность лиофилизированного продукта предпочтительно составляет от менее чем приблизительно 10% до менее чем приблизительно 1%, обычно приблизительно 1%.

В другом дополнительном варианте осуществления лиофилизированную композицию получают в соответствии со следующей процедурой. Температуру камеры необязательно уменьшают до -5°C и поддерживают в течение 15 минут. Затем температуру камеры уменьшают до -48°C и поддерживают в течение приблизительно 1 часа. Потом температуру повышают до -20°C и поддерживают в течение приблизительно 4 часов. Затем температуру камеры уменьшают до -48°C и поддерживают в течение приблизительно 1 часа. Затем температуру необязательно повышают до -20°C и поддерживают в течение приблизительно 3 часов. Затем температуру камеры уменьшают до -48°C и поддерживают в течение приблизительно 1 часа. Потом давление в лиофилизационной камере уменьшают до 100-200 мТорр. После снижения давления в камере температура линейно повышается до +5°C и поддерживается в течение приблизительно 25 часов. Затем температуру необязательно линейно повышают до +45°C и поддерживают в течение 3 часов. Конечная влажность лиофилизированного продукта предпочтительно составляет менее чем приблизительно 2% и обычно около 1%.

В еще одном дополнительном варианте осуществления лиофилизированную композицию получают в соответствии со следующей процедурой. Температуру камеры необязательно снижают до значения от 10°C до 0°C и поддерживают в течение времени от 5 минут до 1 часа. Затем температуру камеры уменьшают до величины между -44,7°C и -60°C и температуру поддерживают в течение времени от 30 минут до 3 часов. Потом давление в лиофилизационной камере уменьшают до 100 мТорр-200 мТорр. После снижения давления в камере температуру линейно повышают до 0°C--30°C и поддерживают в течение 30-60 часов. Затем температуру необязательно линейно повышают до величины между 10°C и 30°C и поддерживают в течение 10-30 часов. Конечная влажность лиофилизированного продукта предпочтительно составляет от менее чем приблизительно 10% до менее чем приблизительно 1%, обычно приблизительно 1%.

Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, включающая лиофилизированный, ресуспендированный бис(тио-гидразид амид), раскрытый здесь, и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

Для описанных здесь бис(тио-гидразид амидов) Структурной формулы (I)-(V), М⁺ является фармацевтически приемлемым моновалентным катионом. М²⁺ является фармацевтически приемлемым двухвалентным катионом. "Фармацевтически приемлемый" означает, что катион является подходящим для введения пациенту. Примеры М⁺ или М²⁺ включают Li⁺, Na⁺, K⁺, Mg²⁺, Са²⁺, Zn²⁺ и NR₄ ⁺, где каждый R независимо представляет собой водород, замещенную или незамещенную алифатическую группу (например, гидроксиалкильную группу, аминоалкильную группу или аммонийалкильную группу) или замещенную или незамещенную арильную группу, или две R группы, взятые вместе, образуют замещенное или незамещенное неароматическое гетероциклическое кольцо, необязательно слитое с ароматическим кольцом. Предпочтительно, фармацевтически приемлемый катион является Li⁺, Na⁺, K⁺, NH₃(C₂H₅OH)⁺, N(СН₃)₃(C₂H₅OH)⁺, аргинином или лизином. Более предпочтительно, фармацевтически приемлемый катион является Na⁺ или К⁺, Na⁺ еще более предпочтен.

В Структурной формуле (I) Z предпочтительно является -О. Более предпочтительно, Z является -О; R₁ и R₂ одинаковы; и R₃ и R₄ одинаковы.

В одном варианте осуществления Y в Структурной формуле (I) -ковалентная связь, -C(R₅R₆)-, -(CH₂CH₂)-, транс-(СН=СН)-, цис-(СН=СН)- или -(СС)- группа, предпочтительно -C(R₅R₆)-. R₁-R₄ - такие, как описано выше для Структурной формулы (I). R₅ и R₆ - каждый независимо представляет собой -Н, алифатическую или замещенную алифатическую группу, или R₅ - -Н, и R₆ -замещенная или незамещенная арильная группа, или R₅ и R₆ вместе являются С2-С6 замещенной или незамещенной алкиленовой группой. Фармацевтически приемлемый катион является таким, как описан выше.

В одном варианте осуществления бис(тио-гидразид амиды), описанные здесь, представлены Структурной формулой (III):

.

R₁-R₆ и фармацевтически приемлемый катион описаны выше для Структурной формулы (I).

В другом варианте осуществления бис(тио-гидразид амид) представлен Структурной формулой (III), где R₁ и R₂ каждый является замещенной или незамещенной арильной группой, предпочтительно замещенной или незамещенной фенильной группой; R₃ и R₄ - каждый замещенная или незамещенная алифатическая группа, предпочтительно алкильная группа, более предпочтительно, метил или этил; и R₅ и R₆ описаны выше, но R₅ является предпочтительно -Н, a R₆ - предпочтительно -Н, алифатическая или замещенная алифатическая группа.

Кроме того, R₁ и R₂ - каждый является замещенной или незамещенной арильной группой; R₃ и R₄ - каждый является замещенной или незамещенной алифатической группой; R₅ является -Н; и R₆ является -Н, алифатической или замещенной алифатической группой. Предпочтительно, R₁ и R₂ - каждый является замещенной или незамещенной арильной группой; каждый из R₃ и R₄ является алкильной группой; и R₅ является -Н; и R₆ является -Н или метилом. Еще более предпочтительно, каждый из R₁ и R₂ является замещенной или незамещенной фенильной группой; каждый из R₃ и R₄ является метилом или этилом; и R₅ является -Н; и R₆ является -Н или метилом. Подходящие заместители для арильной группы, представленной R₁ и R₂, и алифатической группы, представленной R₃, R₄ и R₆, описаны ниже для арильных и алифатических групп.

В другом варианте осуществления бис(тио-гидразид амид) представлен Структурной формулой (III), где каждый из R₁ и R₂ является замещенной или незамещенной алифатической группой, предпочтительно С3-С8 циклоалкильной группой, необязательно замещенной, по меньше мере, одной алкильной группой, более предпочтительно, циклопропилом или 1-метил циклопропилом; и R₃ и R₄ описаны выше для Структурной формулы (I), предпочтительно оба являются замещенной или незамещенной алкильной группой; и R₅ и R₆ описаны выше, но R₅ является предпочтительно -Н, a R₆ - предпочтительно -Н, алифатическая или замещенная алифатическая группа, более предпочтительно - -Н или метил.

Кроме того, бис(тио-гидразид амид) представлен Структурной формулой (III), где R₁ и R₂ каждый является замещенной или незамещенной алифатической группой; и R₃ и R₄ описаны выше для Структурной формулы (I), предпочтительно оба являются замещенной или незамещенной алкильной группой; и R₅ - это -Н и R₆ - это -Н или необязательно замещенная алифатическая группа. Предпочтительно, R₁ и R₂ оба являются С3-С8 циклоалкильной группой, необязательно замещенной, по меньшей мере, одной алкильной группой; оба, R₃ и R₄, описаны выше для Структурной формулы (I), предпочтительно оба являются алкильной группой; и R₅ - это -Н и R₆ - это -Н или алифатическая или замещенная алифатическая группа. Более предпочтительно, R₁ и R₂ оба являются С3-С8 циклоалкильной группой, необязательно замещенной, по меньшей мере, одной алкильной группой; оба, R₃ и R₄, являются алкильной группой; и R₅ является -Н; и R₆ является -Н или метилом. Еще более предпочтительно, R₁ и R₂ оба являются циклопропилом или 1-метилциклопропилом; R₃ и R₄ оба являются алкильной группой, предпочтительно метилом или этилом; и R₅ является -Н; и R₆ является -Н или метилом.

Далее приведены конкретные примеры дисолей бис(тио-гидразид амида), представленных Структурной формулой (III): R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ - -Н, a R₆ - этил; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются фенилом; a R₅ и R₆ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 2-тиенилом; R₃ и R₄ оба являются фенилом; a R₅ и R₆ оба являются метилом; R₁ и R₂ оба являются 4-цианофенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н, и R₆ является бензилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ - -Н, a R₆ - этил; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются этилом; R₅ - -Н, a R₆ - n-бутил; R₁ и R₂ оба являются 2,5-диметоксифенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ - -Н, a R₆ - изо-пропил; R₁ и R₂ оба являются 3-нитрофенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются 4-хлорфенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ - Н, и R₆ является 3-тиенилом; R₁ и R₂ оба являются фенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; a R₅ и R₆ вместе являются пропиленом; R₁ и R₂ оба являются 2,3-диметоксифенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются 2-хлор-5-метоксифенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются 2,5-дифторфенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются 2,5-дихлорфенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются 2,6-диметоксифенилом; R₃ и R₄ оба являются метилом; R₅ является -Н; и R₆ является метилом; R₁ и R₂ оба являются 2,5-диметилфенилом; R