Композиция пролонгированного действия и способ получения указанной композиции

Композиция пролонгированного действия и способ получения указанной композиции

Реферат

Область техники

Настоящее изобретение относится к препарату пролонгированного действия, содержащему физиологически активное вещество, и способу получения указанного препарата.

Предпосылки изобретения

В заявке на патент Японии № 60-100516 описана микрокапсула пролонгированного действия с водорастворимым лекарственным средством, которая представляет частицу со средним диаметром от 2 до 200 мкм, содержащую водорастворимое лекарственное средство, диспергированное в матрице из полимера молочной и гликолевой кислот со средней молекулярной массой около 5000-200000, включающей около 100-50 мас.% молочной кислоты и около 0-50 мас.% гликолевой кислоты, которую получают методом сушки в воде.

В заявке на патент Японии № 62-201816 описана микрокапсула пролонгированного действия, отличающаяся тем, что вязкость эмульсии вода в масле при получении эмульсии вода в масле в воде доводят примерно до 150-10000 сантипуаз, и способ получения указанной микрокапсулы.

В заявке на патент Японии № 62-54760 описан биологически разлагаемый эфир полиоксикарбоксилкарбоновой кислоты, представляющий сополимер или полимер со средней молекулярной массой около 2000-50000, содержащий водорастворимую оксикарбоновую кислоту в количестве менее 0,01 моль/100 г в пересчете на одноосновную кислоту, и предназначенная для инъекций микрокапсула пролонгированного действия, содержащая указанный полимер.

В заявке на патент Японии № 61-28521 описан полимер молочной и гликолевой кислот со средней молекулярной массой около 5000-30000, не содержащий катализатора, который характеризуется диспергируемостью (по результатам гельпроникающей хроматографии) около 1,5-2 и содержит около 50-95 мас.% молочной кислоты и 50-5 мас.% гликолевой кислоты, и фармацевтический препарат, содержащий указанный полимер в качестве основы.

В заявке на патент Японии № 6-192068 описан способ получения микрокапсулы пролонгированного действия, который заключается в том, что микрокапсулу нагревают при температуре выше температуры стеклования полимера, при которой соответствующие частицы микрокапсулы не прилипают друг к другу.

В заявке на патент Японии № 4-218528 описан способ очистки биологически разлагаемого алифатического полиэфира, который заключается в том, что биологически разлагаемый алифатический полиэфир, содержащий низкомолекулярный полимер с молекулярной массой 1000 или менее, растворяют в органическом растворителе, добавляют воду для осаждения полимерной массы и удаляют низкомолекулярный полимер с молекулярной массой 1000, причем воду добавляют в количестве 50-150 частей (в объемном отношении) на 100 частей органического растворителя.

Цели изобретения

Настоящее изобретение относится к препарату пролонгированного действия, который не содержит желатина, содержащему физиологически активное вещество в большом количестве и обеспечивающему стабильную скорость высвобождения на протяжении примерно одного месяца при подавлении высокого начального высвобождения физиологически активного вещества.

Краткое изложение существа изобретения

Чтобы решить вышеуказанную проблему, авторы настоящего изобретения провели всестороннее исследование, в результате которого был создан препарат пролонгированного действия, содержащий большое количество физиологически активного вещества и не содержащий желатина, который подавляет высокое начальное высвобождение физиологически активного вещества и обеспечивает стабильную скорость высвобождения на протяжении примерно одного месяца, причем при создании указанного препарата в качестве основы использован сополимер PLGA с соотношением средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы около 1,90 или менее либо полимер молочной и гликолевой кислот со средней молекулярной массой от около 11600 до около 140000 или его соль.

Таким образом, объектами настоящего изобретения являются:

(1) композиция пролонгированного действия, содержащая полимер молочной и гликолевой кислот с соотношением средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы около 1,90 или менее или его соль и физиологически активное вещество;

(2) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (1), в которой физиологически активное вещество представляет физиологически активный пептид;

(3) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (2), в которой физиологически активное вещество представляет производное LH-RH;

(4) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (1), в которой полимер молочной и гликолевой кислот имеет среднюю молекулярную массу от около 3000 до около 100000;

(5) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (4), в которой полимер молочной и гликолевой кислот имеет среднюю молекулярную массу от около 8000 до около 15000;

(6) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (1), в которой низкомолекулярная фракция полимера молочной и гликолевой кислот с массой около 3000 или ниже составляет около 9% или менее;

(7) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (6), в которой низкомолекулярная фракция полимера молочной и гликолевой кислот с массой около 3000 или ниже составляет от около 3% до около 9%;

(8) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (1), в которой указанный полимер характеризуется молярным соотношением молочной кислоты и гликолевой кислоты от 100:0 до 40:60;

(9) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (1), в которой указанный полимер характеризуется молярным соотношением молочной кислоты и гликолевой кислоты от 70:30 до 80:20;

(10) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (3), в которой производное LH-RH представляет пептид, выраженный формулой

5-оксо-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z,

где Y означает DLeu, DAla, DTrp, DSer (tBu), D2Nal или DHis (ImBzl) и Z означает HN-С₂H₅ или Gly-NH₂, или его соль;

(11) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (3), в которой производное LH-RH представляет пептид, выраженный формулой

5-оксо-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H₅,

или его ацетат;

(12) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (3), в которой производное LH-RH или его соль находится в количестве от около 5% (мас./мас.) до около 24% (мас./мас.);

(13) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (1), в которой физиологически активное вещество или его соль являются малорастворимыми в воде или водорастворимыми;

(14) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (1), которая предназначена для инъекций;

(15) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (1), которая высвобождает физиологически активное вещество или его соль по крайней мере в течение двух недель;

(16) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (1), которая не содержит вещество, удерживающее лекарственное средство;

(17) композиция пролонгированного действия, описанная в пункте (1), которая не содержит желатин;

(18) способ получения композиции пролонгированного действия, описанной в пункте (1), который включает удаление растворителя из смешанного раствора, содержащего физиологически активное вещество или его соль и полимер молочной и гликолевой кислот с соотношением средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы около 1,90 или менее или его соль;

(19) способ, описанный в пункте (18), который включает смешивание и диспергирование физиологически активного вещества или его соли в растворе в органическом растворителе, содержащем полимер молочной и гликолевой кислот с соотношением средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы около 1,90 или менее или его соли и последующее удаление органического растворителя;

(20) способ, описанный в пункте (19), в котором физиологически активное вещество или его соль используют в виде водного раствора, содержащего физиологически активное вещество или его соль;

(21) фармацевтический препарат, содержащий композицию пролонгированного действия, описанную в пункте (1);

(22) лекарственное средство для предотвращения или лечения рака предстательной железы, простатомегамии, эндометриоза, миомы матки, метрофибромы, преждевременного полового созревания, дисменореи и рака молочной железы или противозачаточное средство, которое содержит композицию пролонгированного действия, описанную в пункте (3);

(23) лекарственное средство для предотвращения рецидива рака молочной железы после операции по поводу предклимактерического рака молочной железы, которое содержит композицию пролонгированного действия, описанную в пункте (3);

(24) способ предотвращения или лечения рака предстательной железы, простатомегалии, эндометриоза, миомы матки, метрофибромы, преждевременного полового созревания и дисменореи или применения противозачаточного средства, который включает введение млекопитающему эффективной дозы композиции пролонгированного действия, описанной в пункте (3);

(25) способ предотвращения рецидива рака молочной железы после операции по поводу предклимактерического рака молочной железы, который включает введение млекопитающему эффективной дозы композиции пролонгированного действия, описанной в пункте (3);

(26) способ получения полимера молочной и гликолевой кислот, имеющего среднюю молекулярную массу от около 8000 до около 15000 и соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы около 1,90 или менее, или его соли, который включает добавление воды к органическому растворителю, содержащему полимер молочной и гликолевой кислот со средней молекулярной массой от около 5000 до около 15000, при соотношении менее 5-50 частей (в объемном отношении) на 100 частей органического растворителя;

(27) способ получения полимера, описанный в пункте (26), в котором органический растворитель является гидрофильным;

(28) способ получения полимера, описанный в пункте (27), в котором гидрофильный органический растворитель является ацетоном;

(29) способ получения полимера, описанный в пункте (26), в котором соотношение воды на 100 частей органического растворителя составляет от около 10 до около 45 частей (в объемном отношении);

(30) способ получения полимера, описанный в пункте (26), в котором соотношение воды на 100 частей органического растворителя составляет около 40 частей (в объемном отношении);

(31) полимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднюю молекулярную массу от около 8000 до около 15000 и соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы около 1,90 или менее, или его соль;

(32) применение полимера молочной и гликолевой кислот, описанного в пункте (31), или его соли для получения композиции пролонгированного действия, не содержащей желатина;

(33) микросфера, содержащая полимер молочной и гликолевой кислот со средней молекулярной массой от около 11600 до около 14000 или его соль и производное LH-RH или его соль и не содержащая желатина;

(34) микросфера, описанная в пункте (33), в которой производное LH-RH или его соль представляет пептид, выраженный формулой

5-оксо-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z,

где Y означает DLeu, DAla, DTrp, DSer (tBu), D2Nal или DHis (ImBzl) и Z означает HN-С₂H₅ или Gly-NH₂, или его соль;

(35) микросфера, описанная в пункте (33), в которой производное LH-RH или его соль представляет пептид, выраженный формулой

5-оксо-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H₅,

или его ацетат;

(36) микросфера, описанная в пункте (33), которая содержит производное LH-RH или его соль в количестве от около 5% (мас./мас.) до около 24% (мас./мас.);

(37) микросфера, описанная в пункте (33), которая представляет микрокапсулу;

(38) микросфера, описанная в пункте (33), которая высвобождает производное LH-RH или его соль по крайней мере в течение более 2 недель;

(39) лекарственное средство для предотвращения или лечения рака предстательной железы, простатомегалии, эндометриоза, миомы матки, метрофибромы, преждевременного полового созревания и дисменореи или противозачаточное средство, которое содержит микросферу, описанную в пункте (33);

(40) лекарственное средство для предотвращения рецидива рака молочной железы после операции по поводу предклимактерического рака молочной железы, которое содержит микросферу, описанную в пункте (33);

(41) способ предотвращения или лечения рака предстательной железы, простатомегалии, эндометриоза, миомы матки, метрофибромы, преждевременного полового созревания и дисменореи или применения противозачаточного средства, который включает введение млекопитающему эффективной дозы микросферы, описанной в пункте (33);

(42) способ предотвращения рецидива рака молочной железы после операции по поводу предклимактерического рака молочной железы, который включает введение млекопитающему эффективной дозы микросферы, описанной в пункте (33);

Подробное описание изобретения

Физиологически активное вещество, используемое в настоящем изобретении, не имеет конкретных ограничений, если оно является фармацевтически полезным и непептидным или пептидным соединением. Примеры приемлемого непептидного соединения включают агонист, антагонист и соединение, обладающее ингибирующей фермент активностью. Кроме того, предпочтительным пептидным соединением является физиологически активный пептид. Для достижения указанной цели пригодны физиологически активные пептиды с молекулярной массой от около 3000 до около 40000, предпочтительно от около 4000 до около 30000, более предпочтительно от около 5000 до около 200000.

Примеры физиологически активных пептидов включают рилизинг-гормон лютеинизирующего гормона (LH-RH), инсулин, соматостатин, соматотропин, рилизинг-гормон гормона роста (GH-RH), пролактин, эритропоэтин, кортикальный гормон коры надпочечников, меланоцитстимулирующий гормон, рилизинг-гормон тиреоидного гормона, гормон, стимулирующий щитовидную железу, лютеинизирующий гормон, фолликулостимулирующий гормон, вазопрессин, окситоцин, кальцитонин, гастрин, секретин, панкреозимин, холецистокинин, ангиотензин, плацентарный лактоген человека, гонадотропин хориона человека, энкефалин, эндорфин, киотрофин, туфтсин, тимопоэтин, тимозин, тимотимурин, гуморальный фактор тимуса, фактор крови тимуса, фактор некроза опухоли, колониеиндуцирующий фактор, мотилин, динорфин, бомбезин, нейротензин, церулеин, брадикинин, фактор усиления мочевыделения, фактор роста нервов, стимулятор роста клеток, нейротрофический фактор, пептиды, обладающие антагонистической активностью в отношении эндотелина, и их производные, фрагменты и производные указанных фрагментов.

Физиологически активное вещество, используемое в настоящем изобретении, может представлять само вещество или его фармакологически приемлемую соль.

Если физиологически активное вещество имеет основную группу, такую как аминогруппа, примеры солей включают соли с неорганическими кислотами (именуемыми также свободными неорганическими кислотами) (например, угольная кислота, биугольная кислота, хлористоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, борная кислота и тому подобные) и органическими кислотами (именуемыми также свободными органическими кислотами) (например, янтарная кислота, уксусная кислота, пропионовая кислота, трифторуксусная кислота и тому подобные); если физиологически активное вещество имеет кислотную группу, такую как карбоксильная группа и тому подобное, примеры солей включают соли с неорганическими основаниями (именуемыми также свободными неорганическими основаниями) (например, щелочной металл, такой как натрий, калий и тому подобные, щелочноземельный металл, такой как кальций, магний и тому подобные) и органическими основаниями (именуемыми также свободными органическими основаниями) (например, органические амины, такие как триэтиламин и тому подобные, основные аминокислоты, такие как аргинин и тому подобные). Кроме того, физиологически активный пептид может образовывать комплексное соединение металла (например, комплекс меди, комплекс цинка и тому подобные).

Предпочтительные примеры физиологически активных пептидов включают производные LH-RH или их соли, которые позволяют эффективно лечить гормональные заболевания, в частности раковые опухоли, вызываемые половым гормоном (например, рак предстательной железы, рак матки, рак молочной железы, опухоль гипофиза и тому подобные), заболевания, вызываемые половым гормоном, такие как простатомегалия, эндометриоз, миома матки, преждевременное половое созревание, дисменорея, аменорея, предменструальный синдром, синдром многокамерного яичника и тому подобные, обеспечивают контрацепцию (или восстановление активности после прекращения приема контрацептивов и лечение бесплодия), профилактику рецидива рака молочной железы после операции по поводу предклимактерического рака молочной железы. Кроме того, указанные примеры включают производные LH-RH или их соли, позволяющие эффективно лечить доброкачественные и злокачественные опухоли, не вызываемые половым гормоном, но чувствительные к LH-RH.

Типичные примеры производных LH-RH или их солей включают пептиды, описанные в Treatment with GnRH analogs: Controversies and perspectives (The Рarthenon Publishing Group Ltd.), опубликованном в 1996 г, заявках на патент Японии №№ 3-503165, 3-101695, 7-97334 и 8-259460.

Примеры производных LH-RH включают агонисты LH-RH и антагонисты LH-RH. В качестве антагонистов LH-RH можно использовать, например, физиологически активные пептиды общей формулой [I]

X-D2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-A-B-Leu-C-Pro-DAlaNH₂

[где Х означает N(4Н₂-фуроил) Gly или NAc, А означает остаток, выбранный из NHeTyr, Tyr, Aph(Atz) и NMeAph(Atz), В означает остаток, выбранный из DLys(Nic), DCit, DLis (AzaglyNic), DLis(AzaglyFur), DhArg(Et₂), DAph(Atz) и DhCi, и С означает Lys(Nisp), Arg или hArg(Et₂)],

или их соли.

В качестве агонистов LH-RH можно использовать, например, физиологически активные пептиды, выраженные общей формулой [II]

5-оксо-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z

[где Y означает остаток, выбранный из DLeu, DAla, DTrp, DSer(tBu), D2Nal и DHis(ImBzl), и Z означает NH-C₂H₅ или Gly-NH₂],

или их соли. В частности, для указанной цели пригоден пептид, в котором Y означает DLeu и Z означает NH-C₂H₅ (то есть пептид А, выраженный формулой 5-оксо-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H₅; лейпрорелин), или его соль (например, ацетат).

Указанные пептиды можно получить способами, описанными в приведенных выше публикациях и опубликованных патентах или аналогичными способами.

Аббревиатуры, используемые в настоящем описании изобретения, имеют нижеследующие значения:

Аббревиатура	Наименование
N(4H2-фуроил)Gly	Остаток N-тетрагидрофуроилглицина
NAc	N-ацетильная группа
N2Nal	остаток D-3-(2-нафтил)аланина
D4ClPhe	остаток D-3-(4-хлор)фенилаланина
D3Pal	остаток D-3-(3-пиридил)аланина
NMeTyr	остаток N-метилтирозина
Aph(Atz)	остаток N-[5'-(3'-амино-1'H-1',2',4'-триазолил)]фенилаланина
NmeAph(Atz)	остаток N-метил[5'-(3'-амино-1'H-1',2',4'-триазолил)]фенилаланина
DLys(Nic)	остаток D-(e-N-никотиноил)лизина
Dcit	остаток D-цитруллина
DLys(AzaglyNic)	остаток D-(азаглицилникотиноил)лизина
DLys(AzaglyFur)	остаток D-(азаглицилфуранил)лизина
DhArg(Et2)	остаток D-(N,N'-диэтил)гомоаргинина
DAph(Atz)	остаток D-N-[5'-(3'-амино-1'H-1',2',4'-триазолил)]фенилаланина
DhCi	остаток D-гомоцитруллина
Lys(Nisp)	остаток (e-N-изопропил)лизина
hArg(Et2)	остаток (N,N'-диэтил)гомоаргинина

Что касается других кислот, то используемые аббревиатуры соответствуют аббревиатурам, утвержденным (IUPAC-IUB) (European Journal of Biochemistry, Vol. 138, pp.9-37 (1984)), или обычным аббревиатурам, принятым в данной области. Кроме того, если аминокислота имеет оптический изомер, такая кислота определяется как L-аминокислота за исключением особо оговоренных случаев.

При осуществлении настоящего изобретения предпочтительно используют полимер молочной и гликолевой кислот, имеющий соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы, равное примерно 1,90 или менее.

Полимер молочной и гликолевой кислот может представлять соль. Примеры такой соли включают соли с неорганическими основаниями (например, с щелочным металлом, таким как натрий, калий и тому подобные, щелочноземельным металлом, таким как кальций, магний и тому подобные) или органическими основаниями (например, с органическими аминами, такими как триэтиламин и тому подобные, и основными аминокислотами, такими как аргинин и тому подобное), соли с переходными металлами (например, с цинком, железом, медью и тому подобное) и комплексные соли.

Молярное соотношение молочной кислоты и гликолевой кислоты в полимере предпочтительно составляет от около 100/0 до около 40/60, более предпочтительно от около 70/30 до около 80/20.

Соотношение оптических изомеров, представляющее D-изомер/L-изомер (моль/моль%), в молочной кислоте, которая является одним из минимальных структурных звеньев в “полимере молочной и гликолевой кислот”, предпочтительно составляет от около 75/25 до около 25/75. В частности, часто используется соотношение D-изомер/L-изомер (моль/моль%) в пределах от около 60/40 до около 30/70.

Средняя молекулярная масса “полимера молочной и гликолевой кислот” обычно равна от 3000 до около 100000, предпочтительно от около 3000 до около 50000, наиболее предпочтительно от около 8000 до около 15000.

Низкомолекулярная фракция с молекулярной массой около 3000 или менее “полимера молочной и гликолевой кислот” предпочтительно составляет около 9% или менее, более предпочтительно около 3-9% или менее.

Кроме того, полимер молочной и гликолевой кислот по настоящему изобретению имеет соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы около 1,90 или менее, предпочтительно от около 1,40 до около 1,90, более предпочтительно от около 1,45 до около 1,80.

Предпочтительные примеры включают:

(1) полимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднюю молекулярную массу от около 3000 до 100000 и соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы около 1,90 или менее;

(2) полимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднюю молекулярную массу от около 3000 до 50000 и соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы около 1,90 или менее;

(3) полимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднюю молекулярную массу от около 8000 до 15000 и соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы около 1,90 или менее;

(4) композиция пролонгированного действия, описанная в пунктах (1) - (3), в которой низкомолекулярная фракция с молекулярной массой около 3000 или менее полимера молочной и гликолевой кислот составляет около 9% или менее;

(5) композиция пролонгированного действия, описанная в пунктах (1) - (3), в которой низкомолекулярная фракция с молекулярной массой около 3000 или менее полимера молочной и гликолевой кислот составляет от около 3% до около 9%.

Более предпочтительные примеры включают:

(6) полимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднюю молекулярную массу от около 3000 до 100000 и соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы от около 1,40 до около 1,90;

(7) полимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднюю молекулярную массу от около 3000 до 50000 и соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы от около 1,40 до около 1,90;

(8) полимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднюю молекулярную массу от около 8000 до 15000 и соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы от около 1,40 до около 1,90;

(9) композиция пролонгированного действия, описанная в пунктах (6) - (8), в которой низкомолекулярная фракция с молекулярной массой около 3000 или менее полимера молочной и гликолевой кислот составляет около 9% или менее;

(10) композиция пролонгированного действия, описанная в пунктах (6) - (8), в которой низкомолекулярная фракция с молекулярной массой около 3000 или менее полимера молочной и гликолевой кислот составляет от около 3% до около 9%.

Наиболее предпочтительные примеры включают:

(11) полимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднюю молекулярную массу от около 3000 до 100000 и соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы от около 1,45 до около 1,80;

(12) полимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднюю молекулярную массу от около 3000 до 50000 и соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы от около 1,45 до около 1,80;

(13) полимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднюю молекулярную массу от около 3000 до 15000 и соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы от около 1,45 до около 1,80;

(14) композиция пролонгированного действия, описанная в пунктах (11) - (13), в которой низкомолекулярная фракция с молекулярной массой около 3000 или менее полимера молочной и гликолевой кислот составляет около 9% или менее;

(15) композиция пролонгированного действия, описанная в пунктах (11) - (13), в которой низкомолекулярная фракция с молекулярной массой около 3000 или менее полимера молочной и гликолевой кислот составляет от около 3% до около 9%.

Кроме того, можно использовать полимер молочной и гликолевой кислот со средней молекулярной массой от около 11600 до около 14000 или его соль.

Термины “средняя молекулярная масса” и “среднечисленная молекулярная масса” в настоящем описании изобретения означают молекулярную массу в пересчете на молекулярную массу полистирола, измеренную гельпроникающей хроматографией (GPC) с использованием в качестве стандартного вещества десяти типов монодисперсного полистирола (GPC1) со средней молекулярной массой 397000, 189000, 98900, 37200, 17100, 9490, 5870, 2500, 1050 и 495.

Кроме того, содержание низкомолекулярной фракции полимера с молекулярной массой около 3000 или менее соответствует количеству фракции с молекулярной массой около 3000 или менее на картине распределения средней молекулярной массы, полученной в результате выполнения вышеуказанного измерения GPC. В частности, определяют площадь под кривой части, соответствующей молекулярной массе около 3000 или менее, по отношению к площади под кривой картины распределения вычисленной средней молекулярной массы. Измерение выполняют при помощи ряда высокоскоростных устройств для GPC (фирмы Toso, HLC-8120GPC, метод обнаружения с использованием дифференциального показателя преломления) с колонками TSKguard Super H-L (внутренний диаметр 4,6 мм х 35 мм), TSKgel Super H4000 (внутренний диаметр 6 мм х 150 мм) х 2 и TSKgel SuperH2000 (внутренний диаметр 6 мм х 150 мм) (все колонки производства фирмы Toso) и ТГФ в качестве подвижной фазы со скоростью потока 0,6 мл/мин.

Если взаимодействие между полимером молочной и гликолевой кислот и физиологически активным веществом представляет межионное взаимодействие, то основное взаимодействие происходит между физиологически активным веществом и концевой карбоновой кислотой полимера молочной и гликолевой кислот. Когда низкомолекулярная фракция присутствует в большом количестве, физиологически активное вещество легко взаимодействует с низкомолекулярным полимером молочной и гликолевой кислот, обладающим высокой реакционной способностью. Физиологически активное вещество, входящее в состав инъекционного средства пролонгированного действия, которое высвобождается в процессе получения и на начальной стадии действия, представляет главным образом физиологически активное вещество, взаимодействующее с низкомолекулярной фракцией полимера молочной и гликолевой кислот. Чтобы увеличить количество физиологически активного вещества и снизить его начальное высвобождение, необходимо уменьшить ниже определенного уровня содержание низкомолекулярной фракции указанного полимера молочной и гликолевой кислот и соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы. Например, для получения препарата пролонгированного действия, высвобождающего лекарственное средство в течение одного месяца, желательно использовать полимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднюю молекулярную массу от около 8000 до около 15000, соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы около 1,90 или менее, предпочтительно от около 1,40 до около 1,90, более предпочтительно от около 1,45 до около 1,80, и низкомолекулярную фракцию со средней молекулярной массой 3000 или менее в количестве около 9% или менее, предпочтительно от около 3% до около 9%.

“Полимер молочной и гликолевой кислот” можно получить дегидратирующей поликонденсацией без катализатора из молочной кислоты и гликолевой кислоты (заявка на патент Японии 61-28521) или полимеризацией с раскрытием кольца из лактида и циклического сложного диэфира, такого как гликолид и тому подобные (Encyclopedic Handbook of Biomaterials and Bioengineering Part A: Materials, Volume 2, Marcel Dekker, Inс., 1995).

Полимер молочной и гликолевой кислот, полученный дегидратирующей поликонденсацией без катализатора из молочной кислоты и гликолевой кислоты, обычно содержит большое количество низкомолекулярной фракции и имеет соотношение средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы около 2 или более. Средняя молекулярная масса полимера молочной и гликолевой кислот по настоящему изобретению составляет от около 5000 до около 15000. Содержание низкомолекулярной фракции с молекулярной массой около 3000 или менее может изменяться в зависимости от средней молекулярной массы, и, когда средняя молекулярная масса равна примерно 10000, количество низкомолекулярной фракции с молекулярной массой около 3000 или менее составляет около 10% или более.

Полученный полимер молочной и гликолевой кислот можно очистить при помощи органического растворителя, получив при этом конечный полимер.

Примеры органического растворителя, используемого в настоящем изобретении, предпочтительно включают гидрофильные или легкорастворимые в воде органические растворители, такие как, например, ацетон, тетрагидрофуран, диоксан, диметилформамид и диметилсульфоксид, причем для указанной цели предпочтительно используют ацетон.

Количество добавляемой воды и органического растворителя не имеет конкретных ограничений. Однако когда количество воды является слишком большим, нельзя в достаточной степени уменьшить содержание низкомолекулярной фракции, и поэтому трудно получить конечный полимер. С другой стороны, когда количество воды является недостаточным, полимер плохо осаждается, поэтому ухудшается его выход и образуется полимер с более высокой молекулярной массой по сравнению с требуемой молекулярной массой. Количество воды на 100 частей органического растворителя обычно составляет около 5-50 частей, предпочтительно от около 10 до около 45 частей, более предпочтительно от около 24 до около 40 частей, особенно предпочтительно около 40 частей. Например, 10 г полимера молочной и гликолевой кислот растворяют в 100 мл ацетона, являющегося органическим растворителем, постепенно добавляют 40 мл очищенной воды, перемешивая приемлемым способом для осаждения конечного полимера, который можно высушить приемлемым способом. Если конечный полимер нельзя получить в процессе выполнения одной стадии растворения и осаждения, указанную процедуру можно повторить.

В препарате пролонгированного действия по настоящему изобретению в качестве основы предпочтительно используют полимер молочной и гликолевой кислот с соотношением средней молекулярной массы и среднечисленной молекулярной массы около 1,90 или менее или его соль либо полимер молочной и гликолевой кислот со средней молекулярной массой от около 11600 до около 14000 или его соль. Молярное соотношение молочной кислоты и гликолевой кислоты в полимере предпочтительно составляет от 100/0 до 40/60. Физиологически активным веществом предпочтительно является производное LH-RH, и производное LH-RH предпочтительно представляет пептид, выраженный формулой

5-оксо-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H₅,

или его ацетат. Производное LH-RH или его соль предпочтительно присутствуют в количестве от около 5% (мас./мас.) до около 24% (мас./мас.). Кроме того, предпочтителен препарат пролонгированного действия, не содержащий желатина и высвобождающий физиологически активное вещество или его соль по крайней мере в течение двух недель.

Способ получения микрокапсулы

Полученный таким образом полимер молочной и гликолевой кислот можно использовать в качестве основы для получения препарата пролонгированного действия. Ниже дано описание способа получения композиции пролонгированного действия по настоящему изобретению, например микрокапсулы, содержащей физиологически активное вещество или его соль и полимер молочной и гликолевой кислот или его соль.

(I) Способ сушки в воде

(i) Способ получения эмульсии масло в воде

В соответствии со способом по настоящему изобретению сначала получают раствор полимера молочной и гликолевой кислот или его соли в органическом растворителе. Органический растворитель, используемый для получения препарата пролонгированного действия по настоящему изобретению, предпочтительно имеет температуру кипения, равную 120°С или ниже.

В качестве органического растворителя можно использовать, например, галогенированный углеводород (например, дихлорметан, хлороформ, дихлорэтан, трихлорэтан, тетрахлорид углерода и тому подобные), простые эфиры (например, этиловый эфир, изопропиловый эфир и тому подобные), сложные эфиры жирных кислот (например, этилацетат, бутилацетат и тому подобные), ароматические углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и тому подобные), спирты (например, этанол, метанол и тому подобные) и ацетонитрил, а также смесь указанных растворителей. Предпочтительным органическим растворителем для полимера молочной и гликолевой кислот или его соли является дихлорметан.

Концентрация полимера молочной и гликолевой кислот в растворе органического растворителя может изменяться в зависимости от молекулярной массы полимера молочной и гликолевой кислот и типа органического растворителя. Например, при использовании дихлорметана в качестве органического растворителя концентрацию обычно выбирают от около 0,5 до около 70 мас.%, более предпочтительно от около 1 до около 60 мас.%, особенно предпочтительно от около 2 до около 50 мас.%.

Затем добавляют физиологически активное вещество или его соль, которое растворяют или диспергируют в полученном растворе полимера молочной и гликолевой кислот в органическом растворителе. Полученный раствор в органическом растворителе, содержащий композицию из физиологически активного вещества или его соли и полимера молочной и гликолевой кислот или его соли, добавляют к водной фазе для образования эмульсии масляной фазы в водной фазе, после чего растворитель в масляной фазе испаряют или диффундируют в водной фазе с образованием микрокапсулы. Объем водной фазы обычно выбирают так, чтобы он был примерно в 1-10000 раз, более предпочтительно примерно в 5-50000 раз, наиболее предпочтительно примерно в 10-2000 раз больше объема масляной фазы.

Помимо вышеуказанных компонентов к водной фазе может быть добавлен эмульгатор. Можно использовать любой эмульгатор, позволяющий получить устойчивую эмульсию масляной фазы в водной фазе. Например, можно использовать анионогенные поверхностно-активные вещества (олеат натрия, стеарат натрия, лаурилсульфат натрия и тому подобные), неионогенные поверхностно-активные вещества (сложные эфиры жирных кислот полиоксиэтиленсорбита) (твин 80, твин 60 фирмы Atlas Powder), полиоксиэтиленовые производные касторового масла (НСО-60, НСО-50 фирмы Nikko Chemical), поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, карбоксиметилцеллюлозу, лецитин, желатин и гиалуроновую кислоту. Указанные вещества можно использовать отдельно или в сочетании друг с другом. Концентрация указанных веществ предпочтительно находится в пределах от около 0,0001 до 10 мас.%, более предпочтительно от около 0,001 до 5 мас.%.

Помимо вышеуказанных компонентов к водной фазе может быть добавлено вещество, регулирующее осмотическое давление. Можно использовать любой регулятор осмотического давления, способный создавать требуемое осмотическое давление при введении в водный раствор.

Примеры регуляторов осмотического давления включают многоатомные спирты, одноатомные спирты, моносахариды, дисахариды, олигосахариды и аминокислоты или их производные.

В качестве мн