Способ кератопротезирования сосудистых осложненных бельм с помощью биокератопротезного комплекса

Способ кератопротезирования сосудистых осложненных бельм с помощью биокератопротезного комплекса

Реферат

Изобретение относится к области медицины, в частности к офтальмологии, и может быть использовано для лечения осложненных бельм.

Известен способ кератопротезирования сосудистых истонченных бельм, где производится имплантация аутоткани в тот же карман роговицы, что и опорная пластина кератопротеза (ОПК), описанный в патенте РФ №2080846.

Однако имплантация аутоткани в тот же карман роговицы, что и опорная пластинка кератопротеза, имеет ряд недостатков. В частности, в ходе расслаивания в глубоких слоях стромы неравномерно истонченного бельма высок риск перфорации задних слоев, что затрудняет или делает невозможным последующую имплантацию ОПК, а также не происходит полноценного прирастания имплантированной аутоткани к окружающим тканям бельма в проекции опорной пластинки, что не способствует улучшению трофики тканей бельма на всем протяжении.

Также известен способ имплантации ОПК в сосудистые осложненные бельма, заключающийся во введении реципиенту после проведения тотальной сквозной трепанации бельма в центре диска аллогенной донорской роговицы, в которую предварительно имплантирована ОПК (патент РФ №2079295). Однако при данном способе остается высокий уровень посттрансплантационных осложенений в связи кератомаляцией иммунного генеза.

Ближайшим аналогом является способ кератопротезирования сосудистых осложненных бельм (Джавришвили Г.В., докт. диссер. «Современные аспекты хирургического лечения ожоговых бельм», М., - 2004, стр.158-162), при котором в строме аллогенной донорской роговицы формируют карман, соответствующий размерам ОПК, вводят ОПК в образованный карман, после чего фиксируют разрез несколькими узловыми швами, далее помещают на сутки полученный кератопротезный комплекс во флакон со средством для консервации и фиксации донорской роговицы для повышения ее прочностных свойств и устойчивости к протеолитическим ферментам, полученного по патенту №2204247. После этого в течение нескольких недель отмывают данный кератопротезный комплекс в физиологическом растворе. Затем проводят сквозную трепацию бельма в центре, имплантируют пациенту кератопротезный комплекс, фиксируют его к тканям бельма и покрывают конъюнктивальной тканью.

Однако выше описанный способ кератопротезирования требует длительного отмывания стромы роговицы от токсических веществ, входящих в состав средства, повышающего ее прочностные свойства, и не исключает кератомаляции и развития других посттрансплантационных осложнений.

В настоящее время в регенеративной медицине разрабатываются подходы к использованию аутологичных недифференцированных мезенхимальных клеток, а также аутологичных дермальных фибробластов. В результате исследований по культивированию фибробластов было достаточно убедительно показано, что аутологичные фибробласты, выращенные in vitro, способны при поддержании их в определенных условиях полностью сохранять свои физиологические функции. Было установлено, что дермальные фибробласты, выделяемые из кожных биоптатов человека, имеют высокий уровень секреторной активности и продуцируют компоненты адгезивной системы клетки (рецептор гиалуроновой кислоты - CD44) и внеклеточного матрикса - проколлаген I типа, коллаген IV типа, фибронектин и тропоэластин.

По нашему мнению, использование аутофибробластов для конструирования биокератопротезного комплекса в связи с возможностью их культивирования в достаточном объеме, доступностью получения, онкологической безопасностью и иммунологической совместимостью с реципиентом, является перспективным направлением с точки зрения профилактики развития посттрансплантационных осложнений и повышения эффективности приживления.

Задачей изобретения является создание биокератопротезного комплекса для лечения осложненных сосудистых бельм с целью улучшения зрительных функций.

Техническим результатом, достигаемым при использовании изобретения, является повышение эффективности приживления кератопротеза, снижение посттрансплантационных осложнений за счет образования аутофибробластами соединительнотканного матрикса и использования донорской аллогенной роговицы с повышенными прочностными свойствами.

Технический результат достигается тем, что в способе кератопротезирования сосудистых осложненных бельм, включающем формирование в строме аллогенной донорской роговицы кармана, соответствующего размерам опорной пластины кератопротеза (ОПК), проводят обработку роговицы веществами для повышения прочностных свойств роговицы, имплантацию в карман ОПК, проведение сквозной трепации бельма в центре и имплантацию пациенту полученного кератопротезного комплекса (КПК), далее фиксируют его к тканям бельма, затем сверху покрывают биологической тканью, согласно изобретению роговицу с карманом обрабатывают рибофлавином и облучают ультрафиолетом для повышения ее прочностных свойств и устойчивости к протеолитическим ферментам слезы, а перед введением ОПК в сформированный карман, на ее поверхности культивируют до состояния монослоя аутофибробласты, предварительно выделенные из кожи реципиента, после чего в сформированный карман вводят полученную ОПК и прокультивированные на коллагеновых микроносителях упомянутые аутофибробласты, что способствует образованию соединительнотканного матрикса вокруг ОПК, а после фиксации КПК к тканям бельма его покрывают амниотической мембраной, для профилактики высыхания пересаженных тканей.

Изобретение осуществляется следующим образом. По лимбу аллогенной донорской роговицы производят несквозной разрез на 2/3 ее толщины. Формируют карман для опорной пластинки кератопротеза, расслаивая роговицу в глубоких слоях площадью, соответствующей размерам опорной пластины кератопротеза. Далее роговица с карманом модифицируется 0,1% рибофлавином и ультрафиолетовым облучением (3 МВт/см² (5,4 Дж/см²) и длиной волны 365 нм) по стандартной технологии. Предварительно осуществляется забор, выделение и культивирование аутофибробластов кожи реципиента по стандартной технологии. На ОПК культивируют аутофибробласты до состояния монослоя. Также культивирование аутофибробластов осуществляется на коллагеновых микроносителях диаметром 100-200 мкм. Далее в карман имплантируют ОПК, покрытую аутофибробластами, вводят указанные аутофибробласты на микроносителях и фиксируют разрез несколькими узловыми швами. Полученный биокератопротезный комплекс, состоящий из модифицированной аллогенной донорской роговицы с имплантированными в ее карман ОПК, аутофибробластами и коллагеновыми микроносителями вводится пациенту после проведения тотальной сквозной трепанации бельма в центре, далее фиксируется к тканям бельма узловыми швами, затем сверху покрывается амниотической мембраной, фиксирующейся непрерывным швом.

Пример 1. Больной С., 44 года.

Диагноз: Сосудистое бельмо V категории обоих глаз (OU).

Острота зрения правого глаза (OD) правильное светоощущение

Острота зрения левого глаза (OS) 0,01 н/к

Электроретинография: OU умеренное снижение функций сетчатки.

На правом глазу провели кератопротезирование по предложенному способу.

Острота зрения правого глаза после операции 0,4. Операция и послеоперационный период протекали без осложнений. При контрольных осмотрах на протяжении всего периода наблюдения (6 месяцев) кератопротез занимал правильное положение, признаков некроза поверхностных слоев бельма не отмечалось. Зрительные функции стабильны.

Таким образом, предлагаемое изобретение позволяет улучшить результаты кератопротезирования осложненных сосудистых бельм, повышая эффективность приживления кератопротеза, снижая риск посттрансплантационных осложнений за счет иммунологической совместимости аутофибробластов с реципиентом, продукции соединительнотканного матрикса, и повышения прочностных свойств донорской аллогенной роговицы.

Способ кератопротезирования сосудистых осложненных бельм, включающий формирование в строме аллогенной донорской роговицы кармана, соответствующего размерам опорной пластины кератопротеза (ОПК), обработку роговицы веществами для повышения ее прочностных свойств, имплантацию в карман ОПК, проведение сквозной трепации бельма в центре и имплантацию пациенту кератопротезного комплекса, фиксацию его к тканям бельма, покрытие его биологической тканью, отличающийся тем, что роговицу с карманом обрабатывают рибофлавином и облучают ультрафиолетом, а перед введением ОПК в сформированный карман на ее поверхности предварительно культивируют до состояния монослоя аутофибробласты, предварительно выделенные из кожи реципиента, после чего в сформированный карман вводят полученную ОПК и прокультивированные на коллагеновых микроносителях упомянутые аутофибробласты, а после фиксации полученного биокератопротезного комплекса КПК к тканям бельма его покрывают амниотической мембраной.