Препарат для коррекции обменных процессов и повышения естественной резистентности организма животных

Препарат для коррекции обменных процессов и повышения естественной резистентности организма животных

Реферат

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к препаратам на основе органических кислот, обеспечивающих выраженную коррекцию обменных процессов при патологиях различного генеза и повышение резистентности организма животных.

Разработка и поиск эффективных средств для профилактики и лечения нарушений обмена веществ и повышения факторов естественной резистентности организма животных является одной из актуальных проблем современной ветеринарии. В значительной степени эта проблема специфична для промышленного ведения животноводства. Далекие от потребностей организма животных условия содержания и ухода приводят к глубоким патофизиологическим состояниям. В этом ряду ведущее место занимают патологии обмена веществ, что влечет за собой ослабление факторов естественной резистентности и повышенную чувствительность организма животных к эндогенным инфекциям. В настоящее время нарушения обмена веществ в той или иной степени наблюдаются практически у всех животных. Это обусловливает необходимость применения биологически активных добавок (БАД), оказывающих стимулирующее, метаболическое действие. Однако стимулирующие действие этих препаратов проявляется только при правильном сочетании их с электролитами, антиоксидантами. В противном случае эффект получается обратный (Мозгов И.Е. Фармакология. М.: Колос. 1979. С.205-207).

Применение многочисленных БАДов не лишено недостатков. Значительная часть их активных веществ, не усваиваясь в желудочно-кишечном тракте, выводится с экскрементами. В отличие от БАДов лекарственные препараты, предназначенные для инъекций, при меньшей концентрации биологически активных веществ тем не менее обладают более выраженным и более быстрым стимулирующим действием, нежели их формы, применяемые орально. С учетом имеющихся в данном направлении разработок, в качестве прототипа использовали препарат эмицидин. Препарат эмицидин - производное 3-оксидипиридина (структурный аналог витамина B₆) и янтарной кислоты обладает выраженными антиоксидантными свойствами. Механизм действия эмицидина заключается в его способности связывать свободные радикалы, оказывающие повреждающее действие на белки, липиды и биомембраны клеток, что является базисным фактором в патогенезе многих заболеваний, а также в процессе старения клеток и тканей организма. В настоящее время разработаны составы эмицидина, предназначенные для применения per os и для инъекций (Временное наставление по применению эмицидина 2,5% и 5% водных растворов для инъекций в порядке широкого производственного испытания в 2002-2004 гг. Минсельхоз России. Департамент ветеринарии, 2002).

Препарат эмицидин достаточно хорошо эффективен в клинике лечения заболеваний, связанных с воспалительными процессами у непродуктивных животных и для повышения продуктивности пушных зверей (патент РФ 2322052, 2008). Его фармакологический эффект может быть усилен за счет включения в состав дополнительных компонентов, хорошо сочетающихся и усиливающих ее метаболическую активность. Именно такими свойствами обладает лимонная кислота, которая является активатором янтарной кислоты в цикле трикарбоновых кислот Кребса. Комплексное соединение янтарной и лимонной кислот нашло применение в хорошо известном таблетированном препарате Лимонтар (патент РФ 2039556).

Для усиления метаболической активности янтарной кислоты и повышения факторов естественной резистентности организма животных может быть использована аскорбиновая кислота - витамин C, и метионин.

Аскорбиновая кислота (витамин C) играет ключевую роль в антиоксидантной защите организма, в том числе от окислительного стресса, являясь активатором ретикулоэндотелиальной системы, она умеренно и на длительный срок повышает устойчивость организма животных ко многим ядам эндогенного и экзогенного происхождения. Данное качество аскорбиновой кислоты очень важно при токсикозах различного генеза.

Метионин относится к незаменимым аминокислотам и является «критической» аминокислотой для новорожденных животных, поскольку их пищеварительная система не может ее синтезировать из азотсодержащих веществ корма. При недостатке метионина часто наблюдается анемия, жировая и токсическая дистрофия печени. В организме метионин активирует действие ряда ферментов, гормонов, витамина B_]2, фолиевой и аскорбиновой кислот. Многие процессы обезвреживания токсинов в печени происходят с участием метионина. Таким образом, включение метионина способно повысить гепатопротекторную и метаболическую активность препарата.

Очень важно, что аскорбиновая кислота и метионин, хорошо сочетаются с янтарной кислотой и выдерживают температурное воздействие при стерилизации автоклавированием.

Включение в состав комплексного препарата, наряду с янтарной кислотой, лимонной и аскорбиновой кислот, метионина позволит активизировать цикл трикарбоновых кислот, метаболические процессы, а также усилить защитные силы организма.

В процессе экспериментальных опытов был определен наиболее оптимальный состав компонентов препарата, обеспечивающий выраженную стимуляцию обменных процессов и усиление защитных факторов организма животных. Были созданы два варианта препарата, названные «ЯЛА» и «ЯЛА+М», следующего состава, мас.%:

«ЯЛА»	«ЯЛА+М»
Янтарная кислота 2,0-2,5	Янтарная кислота 2,0-2,5
Лимонная 0,1-0,3	Лимонная 0,1-0,3
Аскорбиновая кислота 0,2-0,4	Аскорбиновая кислота 0,2-0,4
Вода для инъекций Остальное	Метионин 0,9-1,0
	Вода для инъекций Остальное

Таким образом, для приготовления нового препарата используют компоненты, широко применяющиеся в медицине и в ветеринарии, имеющие сертификаты качества. Способ получения инъекционной формы метаболического препарата на основе органических кислот и метионина заключается в растворении данных компонентов в воде для инъекций, расфасовку по флаконам и стерилизацию автоклавированием. При определении безвредности препарата установлено, что белые мыши переносили десятикратное увеличение концентрации кислот при внутрибрюшинном методе введения. Приготовление метаболического препарата.

Вариант 1. В колбу вливают 500 мл воды для инъекций, добавляют 50 г янтарной кислоты и 5 г лимонной кислоты и прогревают до полного растворения. Дробным добавлением гидроксида натрия доводят pH до 6,0. Содержимое колбы вливают в биобутыль и добавляют воду для инъекций до объема, равного 5 литрам.

Вариант 2. В колбу вливают 500 мл воды для инъекций, добавляют 100 г янтарной кислоты, 10 г лимонной кислоты, 15 г аскорбиновой кислоты и прогревают до полного растворения. Дробным добавлением гидроокиси натрия доводят рН до 6,0. Содержимое колбы вливают в биобутыль и добавляют воду для инъекций до объема, равного 5 литрам.

Вариант 3. В колбу вливают 500 мл воды для инъекций, добавляют 125 г янтарной кислоты, 15 г лимонной кислоты, 20 г аскорбиновой кислоты, 45 г метионина и прогревают до полного растворения. Дробным добавлением гидроокиси натрия доводят pH до 6,0. Содержимое колбы вливают в биобутыль и добавляют воду для инъекций до объема, равного 5 литрам.

Приготовленные по вышеуказанным вариантам препараты расфасовывают по флаконам емкостью от 20 мл до 200 мл и осуществляют стерилизацию автоклавированием в режиме 1,0-1,1 атм. Продолжительность автоклавирования зависит от объема флакона. Автоклавирование не изменяет физико-химических свойств препарата. Полученные варианты препаратов обеспечивают выраженное метаболическое действие и стимуляцию защитных сил организма, что подтверждается следующими примерами:

Для проведения опытов были приготовлены растворы органических кислот по вариантам 1, 2 и 3.

Во всех растворах pH составляла 6,0. Для нейтрализации повышенной кислотности использовали гидроксид натрия.

Пример №1. В данном опыте определена дезинтоксикационная активность вышеуказанных растворов органических кислот. Объектом для проведения опытов служили белые мыши (самцы) в количестве 35 особей массой 18-20 г, которым подкожно ввели заведомо смертельную дозу четыреххлористого углерода (ССЦ). Спустя 30 минут этим мышам внутрибрюшинно в объеме 0,25 мл ввели сравниваемые составы органических кислот и эмицидин 2,5% концентрации. Результаты теста на выживаемости белых мышей представлены в таблице 1.

Таблица 1
Влияние растворов органических кислот и эмицидина на выживаемость белых мышей при моделировании смертельного токсикоза ССЦ.
Препарат	Гибель мышей в период	Выжило
3-6 часов	7-10 часов	Кол-во	%
Раствор №1	4	1	2	28,6
Раствор №2	3	1	3	43,0
Раствор №3	3	-	4	57,1
Эмицидин, 2,5%	3	-	4	57,1
Физраствор	6	1	-	-

Таким образом, в данном опыте установлено, что препараты, содержащие 2,0-2,5% янтарной кислоты, обеспечивают 43,0-57,1% выживаемости белых мышей при смертельной интоксикации ССЦ.

Пример №2. Метаболическая активность раствора органических кислот.

Оценку метаболической активности испытуемых растворов органических кислот провели в сравнении с эмицидином на коровах с выраженным нарушением обмена веществ с явлениями алиментарного ацидоза и кетоза. При этом в каждую группу отбирались коровы, имевшие близкие фоновые показатели содержания резервной щелочности и кетоновых тел. Препараты были введены однократно, внутримышечно, в объеме 10,0 мл.

Таблица 2
Влияние растворов органических кислот и эмицидина на метаболические процессы при алиментарном ацидозе и кетозе коров.
№	Состав препарата	Белок, г/л	Резервная щелочность, Об.% CO2	Кет. тела, мг/100 мл	Кальций, ммоль/л	Фосфор, ммоль/л
при ацидозе
		88,6±2,47	39,6±2,75	5,39±0,82	2,34±0,18	2,08±0,14
1	Раствор №1	85,3±2,36	44,2±2,46	4,74±0,48	2,38±0,43	2,02±0,24
		88,2±2,48	39,8±2,57	4,93±0,67	2,29±0,17	2,07±0,26
		87,3±1,96	37,2±2,42	5,35±0,26	2,48±0,17	2,11±0,16
2	Раствор №2	84,2±2,04	45,6±2,14	4,27±0,18	2,75±0,22	2,14±0,17
		85,1±2,12	40,1±2,12	4,39±0,36	2,39±0,16	2,10±0,13
		89,4±1,72	38,7±2,38	5,48±0,29	2,27±0,19	1,98±0,16
3	Раствор №3	82,6±1,85	49,2±2,56	4,26±0,22	2,79±0,28	1,96±0,14
		83,6±2,02	44,3±2,24	4,32±0,28	2,59±0,16	1,93±0,12
		87,9±2,38	37,9±2,26	5,32±0,36	2,32±0,13	2,02±0,14
4	Эмицидин, (ЯК - 2,5%)	12,4±1,72	48,4±2,58	4,28±0,26	2,74±0,26	1,95±0,10
		84,3±2,14	42,7±2,38	4,55±0,32	2,42±0,18	2,01±0,15
при кетозе
		89,8±2,54	34,2±2,36	14,29±1,62	2,08±0,14	2,06±0,12
1	Раствор №3	86,3±2,36	39,8±2,17	12,24±0,96	2,36±0,16	2,04±0,16
		88,7±2,82	38,2±2,18	12,48±1,24	2,22±0,14	2,02±0,11
		88,6±2,54	36,3±2,14	14,26±1,33	2,11±0,13	2,14±0,16
2	Эмицидин, 2,5%	86,5±2,73	39,2±2,15	11,58±1,72	2,38±0,14	2,09±0,18
		88,4±2,44	36,8±2,17	14,12±1,02	2,08±0,11	2,11±0,14
Примечание: верхняя строк - фоновые показатели;
средняя строка - на 7 сутки;
нижняя строка - на 14 сутки; количество коров в группе по 5 особей.

По результатам биохимических исследований крови выявлена выраженная тенденция роста щелочного резерва, что связано с улучшением функциональной активности работы печени. При этом введение раствора №3 органических кислот и эмицидина обеспечило полное устранение ацидоза (показатель резервной щелочности >46 об.% CO₂). Наблюдаемое снижение показателя резервной щелочности на 14 сутки проходило менее выражено у коров, которым вводился состав раствора, содержащий 2,5% ЯК, 0,3% лимонной кислоты, 0,4% аскорбиновой кислоты по отношению к животным, которым применяли эмицидин и раствор с более низкой концентрацией органических кислот. Это указывало на то, что состав органических кислот с 2,5% концентрацией по ЯК обладает более выраженным действием на метаболические процессы. Достигаемый эффект нормализации кислотно-щелочного баланса благоприятным образом отразился на белковом обмене (устранение гиперпротеинемии) и улучшении кальциево-фосфорного соотношения (увеличение показателя содержания кальция), снижения накопления кетоновых тел. Следует отметить менее выраженную, по сравнению с эмицидином, тенденцию роста кетонурии на 14 сутки после введения препаратов. Таким образом, состав органических кислот 2,5% концентрацией по ЯК обеспечивает выраженный метаболический эффект при алиментарном ацидозе и кетозе. Устранение явлений ацидоза и кетонурии растворами органических кислот было более продолжительным по сравнению с эмицидином, это свидетельствовало об усилении метаболической активности янтарной кислоты, достигнутой за счет включения в состав раствора лимонной и аскорбиновой кислот.

Пример 3. Метаболическая активность растворов органических кислот.

Определение метаболической активности растворов органических кислот было проведено в опытах на поросятах 15-20 дневного возраста с клиническими признаками гипотрофии. При этом в испытуемый состав №3 органических кислот дополнительно ввели метионин в количестве 0,9%. Препараты вводились внутримышечно, однократно, в объеме 2,0 мл. Результаты биохимических исследований крови подопытных поросят (в каждой группе было по 5 особей) представлены в таблице 3.

Таблица 3
Влияние растворов органических кислот на метаболические процессы поросят-гипотрофиков.
Препарат	Гемоглобин,г/л	Эритроциты, млн/см3	Белок, г/л	Кальций ммоль/л	Фосфор ммоль/л
Раствор №3
Раствор №3 в комплексе с метионином
Эмицидин
Примечание: числитель - фоновые показатели;
знаменатель - показатели на 7 сутки

По результатам биохимического теста установлено более выраженное влияние раствора органических кислот с добавлением метионина на гемопоэз (количество эритроцитов и насыщенность их гемоглобином), белковый и минеральный обмен по сравнению с эмицидином и раствором без добавления метионина.

Таблица 4
Влияние растворов органических кислот на факторы естественной резистентности поросят-гипотрофиков
Препарат	Фагоцитарная активность нейтрофилов, %	Фагоцитарное число	Бактерицидная активность, %	Лизоцимная активность, мкг/мл
Раствор №3
Раствор №3 в комплексе с метионином
Эмицидин, 2,5%
Примечание: числитель - фоновые показатели;
знаменатель - показатели на 7 сутки

По результатам иммунологического теста установлено, что базовый раствор органических кислот не уступает эмицидину, а при добавлении в него метионина оказывает более выраженное влияние на повышение факторов естественной резистентности поросят-гипотрофиков.

При оценке ростовой активности на 30 сутки после применения препаратов установлено, что среднесуточный прирост живой массы у поросят первой группы составил 332 г; второй - 347 г; третьей - 322 г.

Таким образом, результаты проведенных опытов и иммунобиохимических исследований свидетельствуют о том, что растворы органических кислот, при парентеральном методе введения оказывают хорошо выраженное стимулирующее действие на метаболические процессы, систему гемопоэза, состояние естественной резистентности организма.

1. Препарат для коррекции обменных процессов и повышения естественной резистентности организма животных, содержащий янтарную кислоту, отличающийся тем, что дополнительно содержит лимонную и аскорбиновую кислоты при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Янтарная кислота	2,0-2,5
Лимонная кислота	0,1-0,3
Аскорбиновая кислота	0,2-0,4
Вода для инъекций	Остальное,

при рН 6,0, причем препарат вводят внутримышечно в объеме 2,0-10,0 мл.

2. Препарат для коррекции обменных процессов и повышения естественной резистентности организма животных, содержащий янтарную кислоту, отличающийся тем, что дополнительно содержит лимонную, аскорбиновую кислоты и метионин при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Янтарная кислота	2,0-2,5
Лимонная кислота	0,1-0,3
Аскорбиновая кислота	0,2-0,4
Метионин	0,9-1,0
Вода для инъекций	Остальное,

при рН 6,0, причем препарат вводят внутримышечно в объеме 2,0-10,0 мл.