Способ получения сульфоксидов

Способ получения сульфоксидов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Изобретение относится к области органической химии и гомогенного катализа, а именно к разработке нового каталитического процесса стереоселективного каталитического окисления тиоэфиров для синтеза оптически чистых хиральных сульфоксидов.

Хиральные сульфоксиды находят все более широкое применение в процессах асимметрического синтеза благодаря способности сульфинильной группы служить эффективным хиральным контроллером в образовании С-С и С-Х связей (Прилежаева Е.Н. Химия сульфоксидов и сульфонов // Получение и свойства органических соединений серы, Л.И.Беленький, ред., Москва: Химия, 1998). Кроме того, многие сульфоксиды проявляют биологическую активность, что позволяет использовать их в качестве фармпрепаратов / Kalir A., Kalir H.H. Biological activity of sulfoxides and sulfones // In The Chemistry of Sulfur-Containing Functional Groups, S.Patai, Z.Rappoport, Eds., Wiley: New York, 1993, p.957-975).

Выделяют три общих подхода к синтезу энантиомерно чистых органических соединений: (1) разделение рацемических смесей, например классическое расщепление через диастереомеры, хроматографическре разделение, энзиматическое разделение, кинетическое разделение, (2) химическую модификацию природных хиральных соединений и (3) асимметрический синтез (Julien Legros, Juan R. Dehli, Carsten Bolm. Applications of Catalytic Asymmetric Sulfide Oxidations to the Syntheses of Biologically Active Sulfoxides // Adv. Synth. Catal. 2005, v.347, p.19-31).

Основным подходом к синтезу оптически чистых сульфоксидов в настоящее время является асимметрический синтез, причем наиболее перспективным представляется каталитический асимметрический синтез, поскольку в последнем случае открывается возможность получать много хиральных молекул продукта с использованием всего одной хиральной молекулы катализатора.

На сегодняшний день единственным применяемым в промышленности способом асимметрического каталитического окисления тиоэфиров в сульфоксиды является модифицированный способ Кагана-Модены, в котором катализатором выступает получаемый in situ комплекс титана(IV) с (S,S)-диэтилтартратом. Однако существующие методики требуют присутствия до 30 мол.% титана и 60 мол.% диэтилтартрата, а в качестве окислителя используется токсичный кумилгидропероксид или трет-бутилгидропероксид, обладающий резким запахом (Cotton H., Elebring Т., Larsson M., Li L., Sörensen H., von Unge S. Asymmetric synthesis of esomeprazole // Tetrahedron: Asymmetry, 2000, v.11, p.3819-3825).

Другие известные способы, основанные на применении вместо (S,S)-диэтилтартрата других хиральных лигандов, например 1,2-дифенилэтан-1,2-диола, позволяют снизить соотношение титан:пирметазол до 5 мол.% (Jiang В., Zhao X.-L., Dong J.-J., Wang W.-J., Eur. J. Org. Chem. 2009, p.987-991), при этом в качестве окислителя также используются органические гидропероксиды.

Отметим, что в заявке на изобретение WO 03089408 описан способ получения хиральных замещенных пиридинилметилсульфинильных бензимидазолов и их солей с помощью окисляющего агента в органическом растворителе в присутствии основания и катализатора, состоящего из комплекса титана или ванадия с хиральным монодентатным лигандом. Окислитель при этом выбирается из пероксида водорода, алкилгидропероксидов и алкиларилгидропероксида. Однако использование пероксида водорода и алкиларилгидропероксида не подтверждено примерами, содержащимися в WO 03089408.

В патенте ЕА 009385 описан способ энантиоселективного синтеза отдельных энантиомеров модафинила путем взаимодействия прохирального сульфида с комплексом металла с хиральным лигандом, основанием и окисляющим агентом в среде органического растворителя. При этом в качестве комплекса металла с хиральным лигандом используется хиральный комплекс титана, циркония, марганца или ванадия, который получают из соединения металла, хирального лиганда и воды. При этом окислитель представляет собой пероксид водорода, трет-бутилгидропероксид и гидропероксид кумола. Однако использование пероксида водорода не подтверждено примерами, содержащимися в ЕА 009385. Кроме того, в качестве хиральных лигандов авторы подтвердили примерами только (S,S)-диэтилтартрат и (R,R)-диэтилтартрат.

В патенте WO 2010029950 описаны способы приготовления комплексов титана с саленовыми, салаленовыми и салановыми лигандами, предназначенных для применения в процессах получения оптически активных эпоксисоединений и сульфоксидов. В частности, авторами описан синтез ряда комплексов титана с лигандами, содержащими O-алкильные, О-арильные либо О-алкиларильные заместители в орто-положениях фенильных заместителей арильных колец, в связи с чем эти лиганды следует отнести к достаточно узкому и специфическому классу гексадентатных (O,O,N,N,O,O-донорных). В то же время WO 2010029950 не сообщает о возможности проведения процессов получения оптически чистых сульфоксидов в присутствии комплексов титана, молибдена, ванадия с тетрадентатными O,N,N,O-донорными салановыми лигандами в различных органических растворителях.

Очевидно, для целей получения фармацевтических препаратов, к чистоте и безопасности для человека которых предъявляются повышенные требования, целесообразно максимально снизить количество катализатора - комплекса металла - и воспользоваться наиболее безопасным для человека и окружающей среды (и при этом доступным) окислителем, таким как Н₂О₂. Кроме того, для достижения наибольшей эффективности желательно (1) максимально упростить технический процесс, например загружать готовый к употреблению катализатор, а не готовить его in situ, (2) повысить количество совершаемых катализатором циклов и соответственно снизить соотношение катализатор/субстрат.

Таким образом, изобретение решает задачу упрощения процесса получения оптически чистых органических сульфоксидов и повышение экологической безопасности этого процесса.

Технический результат - снижение соотношения катализатор/субстрат, использование доступного и экологически безопасного окислителя, например Н₂О₂.

Задача решается способом получения оптически чистых сульфоксидов, который осуществляют при взаимодействии несимметричных тиоэфиров, имеющих в своем составе алкильные и/или ароматические заместители, с хиральными комплексами титана, либо молибдена, либо ванадия с тетрадентатными О,N,N,О-донорными лигандами саланового типа, представляющими собой производные бис(салицил)этилендиамина, и окислителем в среде любого из перечисленных растворителей: метиленхлорида, хлороформа, тетрахлорметана, толуола, метанола либо их смеси. В качестве хиральных комплексов металлов с тетрадентатными О,N,N,О-донорными лигандами используют предпочтительно хиральные комплексы титана с О,N,N,О-донорными лигандами саланового типа, представляющими собой производные бис(салицил)этилендиамина. Окислителем может быть пероксид водорода либо аддукт пероксида водорода с мочевиной Н₂О₂·(NH₂)₂СО. Хиральные комплексы металлов используют заранее приготовленные либо получаемые in situ.

В частности, настоящим изобретением предлагается новый способ получения оптически чистых сульфоксидов, основанный на процессе селективного окисления прохиральных тиоэфиров 30% пероксидом водорода, в присутствии каталитических количеств (≤1 мол.%) хиральных комплексов титана, молибдена или ванадия типа 1 с тетрадентатными О,N,N,О-донорными лигандами саланового типа - производных бис(салицил)этилендиамина (см. Фиг.1, примеры строения салановых лигандов и салановых комплексов титана, где X,Y,Z = алкил, арил, галоген, NO₂). В качестве предпочтительных катализаторов используют хиральные комплексы титана.

При этом не требуется использовать никакие дополнительные каталитические добавки, как-то: вода, кислоты, щелочи, соли, комплексы, донорные лиганды и т.д., либо буферные соединения.

Готовить катализаторы можно так, как описано в статье (Bryliakov K.P., Talsi E.P. Titanium-salan-catalyzed asymmetric oxidation of sulfides and kinetic resolution of sulfoxides with H₂O₂ as the oxidant // Eur. J. Org. Chem., 2008, p.3369-3376) или в Примере 2. В качестве катализаторов можно использовать как заранее приготовленные комплексы титана, так и получаемые in situ.

Было установлено, что комплексы титана, обладающие данным строением, способны катализировать стереоселективное окисление тиоэфиров до сульфоксидов пероксидом водорода, причем лучшим для данной реакции растворителем является метиленхлорид CH₂Cl₂, т.к. в нем образуются сульфоксиды с наибольшим выходом и энантиомерным избытком.

Сущность изобретения иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1.

Получение хиральных алкиларилсульфоксидов окислением соответствующих тиоэфиров пероксидом водорода в присутствии каталитических количеств салановых комплексов титана.

К раствору саланового комплекса титана 1a-i (1 мкмоль или 0.2 мкмоль) в 2 мл CH₂Cl₂, термостатированному при заданной температуре, добавляют 0.1 ммоль сульфида и необходимое количество 30% водного пероксида водорода одной порцией. Перемешивают полученный раствор на магнитной мешалке до достижения нужной глубины протекания реакции (1-48 ч), контролируя протекание реакции с помощью ТСХ (элюент: EtOAc/гексан).

В реакционную смесь добавляют 1 мл воды. Органическую фазу отделяют и отгоняют растворитель в токе сжатого воздуха. Остаток экстрагируют 8 мл ССl₄, экстракт осушают CaSO₄ и анализируют с помощью ¹Н ЯМР. Энантиомерный избыток (ЭИ) определяют с помощью ¹Н ЯМР с хиральным реагентом сдвига Eu(hfc)₃.

Пример 2.

Получение хиральных алкиларилсульфоксидов окислением соответствующих тиоэфиров пероксидом водорода в присутствии каталитических количеств салановых комплексов титана, получаемых in situ.

К раствору саланового лиганда a-i (1.68-3.0 мкмоль) в CH₂Cl₂ добавляют Ti(O-i-Pr)₄ (2.0 мкмоль) и перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре. Образец термостатируют при нужной температуре и добавляют 0.1 ммоль сульфида и необходимое количество 30% водного пероксида водорода одной порцией. Перемешивают полученный раствор на магнитной мешалке до достижения нужной глубины протекания реакции (1-48 ч), контролируя протекание реакции с помощью ТСХ (элюент: EtOAc/гексан).

В реакционную смесь добавляют 1 мл воды. Органическую фазу отделяют и отгоняют растворитель в токе сжатого воздуха. Остаток экстрагируют 8 мл CCl₄, экстракт осушают CaSO₄ и анализируют с помощью ¹Н ЯМР. Энантиомерный избыток (ЭИ) определяют с помощью ¹Н ЯМР с хиральным реагентом сдвига Eu(hfc)₃. Окисление по данному способу показывает более низкую хемо- и энантиоселективность, чем по способу, описанному в примере 1.

Результаты окисления различных сульфидов в присутствии каталитических количеств комплексов 1 приведены в таблице 1.

Выяснилось, что комплексы данного типа являются наиболее подходящими для окисления тиоэфиров с двумя объемными заместителями, такими как PhSCH₂Ph. Именно для этого субстрата наблюдался наибольший выход и энантиоселективность реакции, причем наилучшие каталитические свойства показал комплекс 1g (X=Ph, Y=Н) (таблица 1). Энантиомерный избыток образующегося бензилфенилсульфоксида возрастал при увеличении соотношения окислитель/субстрат одновременно с повышением доли сульфона в продуктах реакции (таблица 1, опыты 14-17), что свидетельствовало о существовании кинетического разделения образующихся сульфоксидов в процессе дальнейшего их окисления до сульфона (Bryliakov K.P., Talsi Е.Р. Titanium-salan-catalyzed asymmetric oxidation of sulfides and kinetic resolution of sulfoxides with H₂O₂ as the oxidant // Eur. J. Org. Chem., 2008, p.3369-3376). Катализатор оказался способен осуществлять не менее 500 каталитических циклов без снижения энантиоселективности (ср. таблица 1, опыты 17-20). Было также показано, что понижение температуры способствует росту селективности по сульфоксиду и энантиомерного избытка (таблица 1, ср. опыты 15 и 21).

Данные о влиянии растворителя и температуры на асимметрическое окисление ряда тиоэфиров приведены в таблице 2. Наилучшим растворителем для данной реакции является CH₂Cl₂, в то время как использование CHCl₃, CCl₄, толуола и метанола приводит к более низким значениям энантиомерного избытка получаемых сульфоксидов (примеры 1-5). Показано также, что наилучшим окислителем является пероксид водорода, а применение аддукта пероксида водорода с мочевиной Н₂О₂·(NH₂)₂СО (пример 4) приводит к более низким значениям энантиомерного избытка.

В таблице 3 приведены результаты энантиоселективного окисления тиоэфиров пероксидом водорода в присутствии каталитических количеств комплексов ряда переходных металлов с тетрадентатными О,N,N,О-донорными лигандами, получаемых in situ. Показано, что наивысшие величины энантиомерных избытков достигаются в присутствии комплексов титана, в то время как использование комплексов ванадия и молибдена дает более низкие значения энантиомерных избытков.

Явление кинетического разделения сульфоксидов было более подробно изучено на примере двух сульфоксидов: PhS-i-Pr и PhSCH₂Ph (Фиг.2). На Фиг.2 показан выход сульфоксида и сульфона и энантиомерный избыток (ЭИ) сульфоксида в зависимости от соотношения окислитель/субстрат при окислении PhS-i-Pr (а) и PhSCH₂Ph (b). Катализатор 1g, CH₂Cl₂, 25°С, сульфид/[1]=100:1.

Было показано, что с ростом соотношения окислитель/субстрат энантиомерный избыток для данных сульфоксидов монотонно возрастает (приближаясь в случае PhSOCH₂Ph к 99%), при этом, однако, снижается доля целевого продукта - сульфоксида - в реакционной смеси и возрастает доля продукта дальнейшего окисления сульфоксида - сульфона.

На Фиг.3 представлен выход сульфоксида и сульфона и энантиомерный избыток (ЭИ) сульфоксида в зависимости от соотношения окислитель/субстрат при окислении PhSCH₂Ph (а). Содержание сульфида, сульфоксида и сульфона в реакционной смеси по окончании реакции при окислении PhSCH₂Ph (b). Катализатор 1g, 5°С, сульфид/[1]=100:1.

Таблица 1
Энантиоселективное окисление сульфидов системой комплекс титана 1/H2O2.
№	Комплекс	[O]/[S] [моль/моль]	Сульфид	Время реакции [ч]	Выход сульфоксид/сульфон [%][а]	Селективность [%][b]	ЭИ [%][c] (конфигурация)
1	1d	1.12	PhSCH3	2	77.5/12.0	87.0	45.0 (R)
2	1d	1.12	p-BrPhSCH3	2	70.5/10.5	87.0	42.0 (R)
3	1d	1.28	PhS-i-Pr	3	52.2/40.0	56.6	69.5 (R)
4	1d	1.6	PhSCH2Ph	3	51.0/47.6	51.7	86.0 (R)
5	1e	1.12	PhSCH3	2	76.0/16.5	82.0	46.7 (R)
6	1e	1.12	p-BrPhSCH3	2	68.3/10.7	86.5	39.0 (R)
7	1e	1.28	PhS-i-Pr	3	60.5/21.0	73.5	64.0 (R)
8	1e	1.6	PhSCH2Ph	3	62.0/34.0	64.5	74.5 (R)
9	1h	1.28	PhS-i-Pr	2.5	23.0/3.5	85.0	4.5 (R)
10	1h	1.12	PhSCH2Ph	2.5	26.5/3.0	90.0	4.0 (R)
11	1g	1.12	p-BrPhSCH3	16	72.5/13.5	84.0	16.0 (S)
12	1g	1.12	PhSiPr	16	47.5/27.0	63.5	69.0 (S)
13	1i	1.12	PhSCH2Ph	2	75.0/17.0	81.5	60.0 (S)
14	1g	0.64	PhSCH2Ph	16	48.0/4.0	92.5	82.0 (S)
15	1g	1.12	PhSCH2Ph	2	75.0/19.0	80.0	88.0 (S)
16	1g	1.36	PhSCH2Ph	4	73.5/22.0	77.0	90.5 (S)
17	1g	1.6	PhSCH2Ph	4	65.0/34.5	65.5	97.0 (S)
18	1g	1.6	PhSCH2Ph	4	63.5/35.5	64.0	97.0 (S)
19	1g	1.6	PhSCH2Ph	24	49.5/14.5	77.5	77.0 (S)
20	1g	1.6	PhSCH2Ph[d]	48	34.0/3.0	91.5	60.0 (S)
21	1g[e]	1.12	PhSCH2Ph	8	76.5/17.5	81.0	93.5 (S)
[Субстрат]:[комплекс титана]=100:1 моль/моль (опыты 1-17 и 19), 500:1 моль/моль (опыт 18), 1000:1 моль/моль (опыт 19), 2000:1 моль/моль (опыт 20). Представлены результаты реакций согласно Примеру 1 при 25°С (опыты 1-18) и +5°С (опыт 19) в CH2Cl2. Начальная концентрация сульфида 0.05 М.
[a] Определены из соотношения сульфида, сульфоксида и сульфона в реакционной смеси по данным 1Н ЯМР.
[b] Селективность по сульфоксиду.
[с] Энантиомерный избыток полученного сульфоксида.
[d] Начальная концентрация сульфида 0.1 М.
[е] При +5°С.

Таблица 2
Влияние растворителя, температуры на энантиоселективное окисление PhSCH2Ph, PhSiPr и 2-NaphSMe в присутствии катализаторов типа 1
№	Комплекс	Темп. [°C]	Растворитель	[O]/[S] [моль/моль]	[S]/[Cat] [моль/моль]	Время реакции [ч]	Выход сульфоксид/сульфон [%][а]	Селективность [а]	ЭИ (конфигурация) [%][b]
1	1g	25	CHCl3	1.6	100	4	58.0/27.5	68.0	88.0 (S)
2	1g	25	CCl4	1.6	100	4	8.0/7.0	53.0	57.5 (S)
3	1g	25	толуол	1.6	100	4	23.0/26.0	47.0	66.5 (5)
4	1g[c]	25	метанол	1.12	50	15	60.0/3.0	95.0	14.0 (S)
5	1g	25	CH2Cl2	1.6	100	4	65.0/34.5	65.5	97.0 (S)
6	1d	0	CH2Cl2	1.12	100	5	71.0/15.5	82.0	81.0 (R)
7	1e	0	CH2Cl2	1.12	100	5	67.5/10.0	87.0	75.5 (R)
8	1g	0	CH2Cl2	1.12	100	5	77.5/13.0	85.5	92.5 (S)
9	1d	0[d]	CH2Cl2	1.28	100	6	60.5/31.0	66.0	72.5 (R)
10	1d	0[e]	CH2Cl2	1.28	100	6	85.5/14.0	85.5	59.0 (R)
Начальная концентрация сульфида 0.05 М, если не указано иное. В качестве субстрата использовали PhSCH2Ph, если не указано иное.
[a] Определены из соотношения сульфида, сульфоксида и сульфона в реакционной смеси по данным 1Н ЯМР. Селективность определена по сульфоксиду.
[b] Значения энантиомерных избытков (ЭИ) измерены с помощью метода 1Н NMR с хиральным реагентом сдвига Eu(hfc)3 в CCl4.
[c] В качестве окислителя использовали аддукт пероксида водорода с мочевиной H2O2·(NH2)2CO.
[d] В качестве субстрата использовали PhSiPr.
[e] В качестве субстрата использовали 2-NaphSMe.

Таблица 3
Энантиоселективное окисление сульфидов системой лиганд/источник металла/Н2О2
№	Лиганд/металл	Источник металла	Тиоэфир	Время реакции [ч]	Выход сульфоксид/сульфон [%][а]	Селективность [а] [%]	ЭИ (конфигу-рация) [%] [b]
1	g/Mo=1.0	МоО2(асас)2	PhSCH2Ph	24	79.5/12.0	87.0	8.5 (R)
2	g/Mo=1.0	МоО2(асас)2	PhSCH3	24	82.0/10.5	88.5	0
3	a/Mo=1.5	МоО2(асас)2	p-CH3PhSCH3	24	57.0/3.0	95.0	2.5 (5)
4	g/V=1.5	VO(acac)2	PhSCH2Ph	15	86.0/10.5	89.0	8.5 (R)
5	a/V=1.5	VO(асас)2	p-CH3PhSCH3	4	85.8/5.5	94.0	10.0 (R)
6	g/V=1.5	VO(O-n-Bu)3	p-BrPhSCH3	14	89.5/6.0	93.7	2.0 (R)
7	2/V=1.5	VO(O-n-Bu)3	p-CH3PhSCH3	14	51.5/6.5	89.0	6.0 (S)
8	d/V=1.5[c]	VO(O-n-Bu)3	p-BrPhSCH3	20	32.0/4.5	87.5	37.5 (R)
9	d/V=1.5	VO(O-n-Bu)3	p-CH3PhSCH3	14	82.0/12.5	86.5	19.5 (R)
10	e/V=1.0	VO(O-n-Bu)3	p-CH3PhSCH3	15	85.5/14.0	85.9	17.0 (R)
11	e/V=1.0	VO(O-n-Bu)3	p-BrPhSCH3	15	78.0/13.5	85.2	13.5 (R)
12	d/Ti=1.0	Ti(O-i-Pr)4	PhSCH2Ph	5	62.5/29.5	68.0	62.5 (R)
13	e/Ti=1.0	Ti(O-i-Pr)4	PhSCH2Ph	5	64.5/26.5	70.5	62.0 (R)
14	g/Ti=1.0	Ti(O-i-Pr)4	PhSCH2Ph	2.5	62.5/14.5	81.0	64.0 (S)
15	g/Ti=1.0	Ti(O-i-Pr)4	PhSCH2Ph	15	68.8/17.0	80.0	60.0 (S)
Соотношение [окислитель]:[субстрат]:[металл]=56:50:1. Реакцию вели при 25°С в CH2Cl2. Начальная концентрация сульфида 0.05 М.
[a] Определены из соотношения сульфида, сульфоксида и сульфона в реакционной смеси по данным 1H ЯМР. Селективность определена по сульфоксиду.
[b] Значения энантиомерных избытков (ЭИ) измерены с помощью метода 1Н NMR с хиральным реагентом сдвига Eu(hfc)3 в CCl4.
[c] Реакцию вели в CHCl3 при -12°С без перемешивания.

Было показано, что понижение температуры позволяет повысить хемо- и стереоселективность окисления PhSCH₂Ph (Фиг.3). Так, при проведении каталитической реакции при +5°С был достигнут энантиомерный избыток 98.5% при соотношении окислитель/субстрат 1.34 (при этом выход сульфоксида составил 65.8%). Максимальный выход сульфоксида (72-77%) достигается при соотношении окислитель/субстрат 1.05-1.15, что позволяет рекомендовать использование таких соотношений для проведения препаративных каталитических синтезов.

Таким образом, впервые показано, что салановые комплексы титана способны катализировать окисление тиоэфиров пероксидом водорода с высокой селективностью до 72-77% и энантиоселективностью до 98.5%. Наилучшие результаты были показаны при окислении тиоэфиров с двумя объемными заместителями (такими как PhS-i-Pr и PhSCH₂Ph), которые могут рассматриваться в качестве реалистичных моделей биологически активных соединений. Высокий уровень асимметрической индукции достигается в результате одновременного стереоселективного окисления сульфидов/кинетического разделения сульфоксидов. Катализаторы способны выполнять до 500 каталитических циклов без снижения энантиоселективности. Катализаторы данного типа используют хиральные лиганды, приготавливаемые из доступных предшественников, нетоксичный металл, экологически безопасный окислитель. Окисление проводится в предпочтительном растворителе дихлорометане, который благодаря низкой температуре кипения (+39.8°С при 760 торр) легко отгоняется от реакционной смеси. Хемо- и энантиоселективность окисления можно повысить понижением температуры проведения реакции.

1. Способ получения оптически чистых сульфоксидов при взаимодействии несимметричных тиоэфиров, имеющих в своем составе алкильные и/или ароматические заместители, с хиральными комплексами титана, либо молибдена, либо ванадия с тетрадентатными О,N,N,О-донорными лигандами саланового типа, представляющими собой производные бис(салицил)этилендиамина, и окислителем в среде любого из перечисленных растворителей: метиленхлорида, хлороформа, тетрахлорметана, толуола, метанола либо их смеси.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве хиральных комплексов металлов с тетрадентатными О,N,N,О-донорными лигандами используют предпочтительно хиральные комплексы титана с О,N,N,О-донорными лигандами саланового типа, представляющими собой производные бис(салицил)этилендиамина.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что окислителем может быть пероксид водорода либо аддукт пероксида водорода с мочевиной H₂O₂·(NH₂)₂CO.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что хиральные комплексы металлов используют заранее приготовленные либо получаемые in situ.