Способ прогноза количества обострений у больных бронхиальной астмой
Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии, и касается способа прогноза количества обострений у больных бронхиальной астмой. Сущность способа заключается в том, что на градиенте плотности фиколл-верографин путем центрифугирования выделяют лимфоциты из цельной крови пациента, взятой из кубитальной вены в утренние часы натощак, в моменты обострения бронхиальной астмы и после его купирования. Взвесь лимфоцитов наносят на предметное стекло по типу «толстой капли», высушивают при комнатной температуре, в полученных образцах иммуноцитохимическим методом с использованием мышиных античеловеческих антител CD38, антимышиных FITC-меченных антител и люминесцентной микроскопии подсчитывают на 300 клеток в поле зрения CD38+ лимфоциты. При снижении их количества во втором образце относительно первого на 4 и более клеток прогнозируют отсутствие обострений бронхиальной астмы в течение года, при повышении на 4 и более клеток - как минимум 2 обострения, отсутствие динамики изменения количества CD38+ лимфоцитов либо колебания в пределах 3 клеток предусматривает 1 обострение. Использование способа позволяет прогнозировать количество обострений бронхиальной астмы в течение года после госпитализации с высокой точностью. 1 табл., 3 пр.
Реферат
Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии, и может быть использовано для заблаговременной адекватной коррекции терапии больным бронхиальной астмой.
Известны способы прогнозирования развития обострений, их степени тяжести и дальнейшего течения бронхиальной астмы:
1) способ прогнозирования нестабильного течения бронхиальной астмы, включающий определение радиоаэрозольным методом показателя скорости бронхиального мукоцилиарного клиренса радиофармпрепарата в % за 1 час, что позволяет определить риск нестабильного течения заболевания в 89,5% случаев [1];
2) способ прогноза тяжести обострения при атопической бронхиальной астме, включающий определение в лимфоцитах больного показателей активности ферментов глицерол-3-фосфатдегидрогеназы и НАД-зависимой малатдегидрогеназы, снижение активности которых прогнозирует тяжелую степень обострения бронхиальной астмы [2];
3) способ прогнозирования течения инфекционно-аллергической бронхиальной астмы, включающий определение в эритроцитах крови эффекта регуляции ЦАМФ глутатионтрансферазы, при отсутствии которого у больного наблюдается фаза обострения заболевания с ожидаемыми частыми приступами удушья и необходимостью более интенсивной бронхолитической терапии [3];
4) способ прогнозирования обострения бронхиальной астмы у детей острой респираторной инфекции путем определения уровня оксида азота в выдыхаемом воздухе, при повышении концентрации которого на 50% и более от исходного определяют необходимость предотвращения данного обострения и профилактическом увеличении объема базисной терапии [4].
Однако недостатком данных способов является невозможность определения количества обострений у больных бронхиальной астмой в течение года.
Задачей предлагаемого способа является прогнозирование количества обострений у больных бронхиальной астмой для заблаговременной адекватной коррекции терапии заболевания.
Поставленную задачу решают за счет того, что на градиенте плотности фиколл-верографин путем центрифугирования выделяют лимфоциты из цельной крови пациента, взятой из кубитальной вены в утренние часы натощак, в моменты обострения бронхиальной астмы и после его купирования, взвесь лимфоцитов наносят на предметное стекло по типу «толстой капли», высушивают при комнатной температуре, в полученных образцах иммуноцитохимическим методом с использованием мышиных античеловеческих антител CD38, антимышиных FITC-меченных антител и люминесцентной микроскопии подсчитывают на 300 клеток в поле зрения CD38+ лимфоциты, при снижении их количества во втором образце относительно первого на 4 и более клеток прогнозируют отсутствие обострений бронхиальной астмы в течение года, при повышении на 4 и более клеток - как минимум 2 обострения, отсутствие динамики изменения количества CD38+ лимфоцитов либо колебания в пределах 3 клеток предусматривает 1 обострение.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом: на градиенте плотности фиколл-верографин путем центрифугирования выделяют лимфоциты из цельной крови пациента, взятой из кубитальной вены в утренние часы натощак, в моменты обострения бронхиальной астмы и после его купирования, взвесь лимфоцитов наносят на предметное стекло по типу «толстой капли», высушивают при комнатной температуре, в полученных образцах иммуноцитохимическим методом с использованием мышиных античеловеческих антител CD38, антимышиных FIТС-меченных антител и люминесцентной микроскопии подсчитывают на 300 клеток в поле зрения CD38+ лимфоциты, при снижении их количества во втором образце относительно первого на 4 и более клеток прогнозируют отсутствие обострений бронхиальной астмы в течение года, при повышении на 4 и более клеток - как минимум 2 обострения, отсутствие динамики изменения количества CD38+ лимфоцитов либо колебания в пределах 3 клеток предусматривает 1 обострение (табл.1).
Предлагаемый способ позволяет прогнозировать количество обострений бронхиальной астмы в течение года после госпитализации с точностью до 92,86%.
Пример 1. Больная К., 23 года (в таблице данные №2), поступила в стационар с диагнозом: бронхиальная астма экзогенного генеза, обострение, аллергический ринит, сенсибилизация к эпидермалъным аллергенам. У данной пациентки из кубитальной вены в утренние часы натощак была взята кровь при поступлении (в момент обострения) и выписке (после купирования симптомов заболевания). Лимфоциты были выделены из цельной крови путем центрифугирования на градиенте плотности фиколл-верографин. Взвесь лимфоцитов нанесли на предметное стекло по типу «толстой капли», высушили при комнатной температуре, в полученных образцах иммуноцитохимическим методом с использованием мышиных античеловеческих антител CD38, антимышиных FITC-меченных антител и люминесцентной микроскопии подсчитали на 300 клеток в поле зрения CD38+ лимфоциты и выявили снижение количества CD38+ лимфоцитов на 16 клеток, что свидетельствует о купировании воспалительного процесса и определяет прогноз отсутствия обострений в течение года после госпитализации. При обследовании через год прогноз у больной К. подтвердился: обострений заболевания не было.
Пример 2. Больной В., 52 года (в таблице данные №14), поступил в стационар с диагнозом: бронхиальная астма смешанного генеза, тяжелое течение, обострение средней степени тяжести. Иммуноцитохимическое исследования крови при поступлении и выписке выявили повышение количества CD38+лимфоцитов на 12 клеток, что свидетельствует о продолжающемся воспалительном процессе, в связи с чем можно прогнозировать 2 и более обострений в течение года после госпитализации, что и подтвердилось у больного В.
Пример 3. Больная А., 48 лет (в таблице данные №11), поступила в стационар с диагнозом: бронхиальная астма аллергического генеза, среднетяжелое течение, обострение средней степени тяжести. Иммуноцитохимическое исследования крови при поступлении и выписке выявили изменение количества CD38+ лимфоцитов в пределах 3 клеток, что свидетельствует о недостаточном купировании воспалительного процесса, в связи с чем можно прогнозировать 1 обострение в течение года после госпитализации, что и подтвердилось у больной А.
Таблица 1 | |||||
Совпадение прогноза количества обострений по предлагаемому способу | |||||
№ п/п | Количество CD38+ лимфоцитов на 300 клеток при поступлении | Количество CD38+ лимфоцитов на 300 клеток при выписке | Прогноз количества обострений по предлагаемому способу | Количество обострений в течение 12 месяцев после госпитализации | Совпадение прогноза |
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
1 | 12 | 18 | 2 и более | 2 | + |
2 | 16 | 0 | 0 | 0 | + |
3 | 20 | 25 | 2 и более | 3 | + |
4 | 21 | 19 | 1 | 1 | + |
5 | 14 | 16 | 1 | 2 | - |
6 | 14 | 9 | 0 | 0 | + |
7 | 22 | 5 | 0 | 0 | + |
8 | 10 | 3 | 0 | 0 | + |
9 | 21 | 7 | 0 | 0 | + |
10 | 12 | 1 | 0 | 0 | + |
11 | 9 | 8 | 1 | 1 | + |
12 | 10 | 3 | 0 | 0 | + |
13 | 3 | 5 | 1 | 3 | - |
14 | 2 | 14 | 2 и более | 3 | + |
15 | 11 | 0 | 0 | 0 | + |
16 | 8 | 5 | 1 | 1 | + |
17 | 1 | 6 | 2 и более | 4 | + |
18 | 3 | 2 | 1 | 1 | + |
19 | 29 | 7 | 0 | 0 | + |
20 | 2 | 8 | 2 и более | 2 | + |
21 | 11 | 2 | 0 | 0 | + |
22 | 7 | 3 | 0 | 0 | + |
23 | 9 | 2 | 0 | 0 | + |
24 | 9 | 6 | 1 | 1 | + |
25 | 3 | 11 | 2 и более | 2 | + |
26 | 1 | 8 | 2 и более | 0 | - |
27 | 5 | 1 | 0 | 0 | + |
28 | 2 | 1 | 1 | 1 | + |
29 | 1 | 1 | 1 | 1 | + |
30 | 6 | 7 | 1 | 1 | + |
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
31 | 10 | 11 | 1 | 1 | + |
32 | 4 | 3 | 1 | 0 | - |
33 | 1 | 40 | 2 и более | 5 | + |
34 | 1 | 2 | 1 | 1 | + |
35 | 2 | 8 | 2 и более | 1 | - |
36 | 2 | 16 | 2 и более | 3 | + |
37 | 0 | 10 | 2 и более | 3 | + |
38 | 0 | 4 | 2 и более | 2 | + |
39 | 5 | 6 | 1 | 1 | + |
40 | 24 | 22 | 1 | 1 | + |
41 | 1 | 2 | 1 | 1 | + |
42 | 0 | 15 | 2 и более | 2 | + |
43 | 1 | 7 | 2 и более | 2 | + |
44 | 5 | 1 | 0 | 0 | + |
45 | 0 | 2 | 1 | 1 | + |
46 | 4 | 1 | 1 | 1 | + |
47 | 0 | 2 | 1 | 1 | + |
48 | 5 | 3 | 1 | 1 | + |
49 | 12 | 5 | 0 | 0 | + |
50 | 10 | 8 | 1 | 1 | + |
51 | 5 | 9 | 2 и более | 2 | + |
52 | 20 | 1 | 0 | 0 | + |
53 | 12 | 15 | 1 | 1 | + |
54 | 15 | 17 | 1 | 1 | + |
55 | 1 | 8 | 2 и более | 2 | + |
56 | 4 | 10 | 2 и более | 2 | + |
57 | 6 | 15 | 2 и более | 3 | + |
58 | 13 | 0 | 0 | 0 | + |
59 | 16 | 2 | 0 | 0 | + |
60 | 8 | 21 | 2 и более | 3 | + |
61 | 26 | 6 | 0 | 0 | + |
62 | 14 | 20 | 2 и более | 3 | + |
63 | 4 | 1 | 1 | 1 | + |
64 | 12 | 0 | 0 | 0 | + |
65 | 8 | 4 | 0 | 0 | + |
66 | 1 | 11 | 2 и более | 2 | + |
67 | 4 | 12 | 2 и более | 3 | + |
68 | 5 | 2 | 1 | 1 | + |
69 | 3 | 0 | 1 | 1 | + |
70 | 2 | 13 | 2 и более | 2 | + |
Список литературы
1. Патент РФ №2262891, А61В 6/02, A61K 51/12, А61Р 43/00, БИПМ №30, 27.10.2005 г.
2. Патент РФ №2190217, G01N 33/50, БИПМ №27, 27.09.2002 г.
3. Патент РФ №2063044, G01N 33/68, БИПМ №18, 27.06.1996 г.
4. Заявка на изобретение РФ №2007130783, А61В 5/093, БИПМ №5, 20.02.2009 г.
Способ прогноза количества обострений у больных бронхиальной астмой, заключающийся в том, что на градиенте плотности фиколл-верографин путем центрифугирования выделяют лимфоциты из цельной крови пациента, взятой из кубитальной вены в утренние часы натощак, в моменты обострения бронхиальной астмы и после его купирования взвесь лимфоцитов наносят на предметное стекло по типу «толстой капли», высушивают при комнатной температуре, в полученных образцах иммуноцитохимическим методом с использованием мышиных античеловеческих антител CD38, антимышиных FITC-меченных антител и люминесцентной микроскопии подсчитывают на 300 клеток в поле зрения CD38+ лимфоциты, при снижении их количества во втором образце относительно первого на 4 и более клеток прогнозируют отсутствие обострений бронхиальной астмы в течение года, при повышении на 4 и более клеток - как минимум 2 обострения, отсутствие динамики изменения количества CD38+ лимфоцитов либо колебания в пределах 3 клеток предусматривает 1 обострение.