Композиции и способы связывания сфингозин-1-фосфата

Композиции и способы связывания сфингозин-1-фосфата

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Уровень техники

1. Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к средствам, которые связывают сфингозин-1-фосфат (S1P), в частности к гуманизированным моноклональным антителам, фрагментам антител и производным антител, специфично реактивным к S1P в физиологических условиях. Такие средства можно применять в лечении и/или профилактике различных заболеваний или нарушений посредством введения фармацевтических композиций, которые содержат такие средства.

Представленное ниже описание включает информацию, которая может быть полезна для понимания настоящего изобретения. Оно не подразумевает допущения того, что любая информация, предоставленная в настоящем документе, или любая публикация, конкретно или косвенно цитируемая в настоящем документе, является предшествующим уровнем техники или даже частично относится к заявляемому настоящему изобретению.

2. Уровень техники

Биологически активные липиды каскада передачи сигнала

Липиды и их производные в настоящее время признаны важными объектами медицинских исследований, а не только простыми структурными элементами в клеточных мембранах или источником энергии для β-окисления, гликолиза или других метаболических процессов. В частности, некоторые биологически активные липиды функционируют в качестве медиаторов передачи сигнала, важных при заболеваниях животных и человека. Несмотря на то что большинство из липидов плазматической мембраны играют исключительно структурную роль, небольшая их часть вовлечена в передачу внеклеточных стимулов в клетку. "Липидная передача сигнала" относится к любому из множества клеточных каскадов передачи сигнала, в которых в качестве вторичных посредников используются липиды клеточных мембран, а также относится к прямому взаимодействию молекулы липидной передачи сигнала с ее собственным специфическим рецептором. Каскады липидной передачи сигнала активируются множеством внеклеточных стимулов, варьирующих от факторов роста до воспалительных цитокинов, и регулируют клеточную судьбу, такую как апоптоз, дифференцировка и пролиферация. Исследования передачи сигнала биологически активных липидов находятся в области интенсивного научного изучения, поскольку идентифицируется все больше и больше биологически активных липидов и охарактеризовывается их действие.

Примеры биологически активных липидов включают эйкозаноиды (включая каннабиноиды, лейкотриены, простагландины, липоксины, эпоксиэйкозатриеновые кислоты и изоэйкозаноиды), неэйкозаноидные каннабиноидные медиаторы, фосфолипиды и их производные, такие как фосфатидная кислота (РА) и фосфатидилглицерин (PG), фактор активации тромбоцитов (PAF) и кардиолипины, а также лизофосфолипиды, такие как лизофосфатидилхолин (LPC) и различные лизофосфатидные кислоты (LPA). Биологически активные липидные медиаторы передачи сигнала также включают сфинголипиды, такие как сфингомиелин, церамид, церамид-1-фосфат, сфингозин, сфингозилфосфорилхолин, сфинганин, сфинганин-1-фосфат (дигидро-S1P) и сфингозин-1-фосфат. Сфинголипиды и их производные составляют группу внеклеточных и внутриклеточных молекул передачи сигнала с плейотропыми эффектами на важные клеточные процессы. Другие примеры биологически активных липидов передачи сигнала включают фосфатидилсерин (PS), фосфатидилинозитол (PI), фосфатидилэтаноламин (PEA), диацилглицерид (DG), сульфатиды, ганглиозиды и цереброзиды.

Сфинголипиды представляют собой уникальный класс липидов, которые получили свое название вследствие их исходно загадочной природы, в честь Сфинкса. Сфинголипиды первоначально были охарактеризованы в качестве первичных структурных компонентов клеточных мембран, однако последние исследования показывают, что сфинголипиды также служат клеточными молекулами передачи сигнала и регуляторными молекулами (Hannun, et al., Adv. Lipid Res. 25:27-41, 1993; Speigel, et al., FASEB J. 10:1388-1397, 1996; Igarashi, J. Biochem 122:1080-1087, 1997; Hla, T. (2004). Semin Cell Dev Biol, 15, 513-2; Gardell, S.E., Dubin, A.E. & Chun, J. (2006). Trends Mol. Med, 12, 65-75). Сфинголипиды являются основными структурными компонентами клеточных мембран, которые также служат в качестве клеточных молекул передачи сигнала и регуляторных молекул (Hannun and Bell, Adv. Lipid Res. 25:27-41, 1993; Igarashi, J. Biochem 122:1080-1087, 1997). Сфинголипидные медиаторы передачи сигнала, церамид (CER), сфингозин (SPH) и сфингозин-1-фосфат (S1P), наиболее широко изучены, и недавно была признана их роль в сердечно-сосудистой системе, ангиогенезе и биологии опухолей (Claus, et al., Curr Drug Targets 1:185-205, 2000; Levade, et al., Circ. Res. 89:957-968, 2001; Wang, et al., J. Biol. Chem. 274:35343-50, 1999; Wascholowski and Giannis, Drug News Perspect. 14:581-90, 2001; Spiegel, S. & Milstien, S. (2003). Sphingosine-1-phosphate: an enigmatic signaling lipid. Nat Rev Mol Cell Biol, 4, 397-407).

Для обзора метаболизма сфинголипидов см. Liu, et al., Crit Rev. Clin. Lab. Sci. 36:511-573, 1999. Для обзора каскада передачи сигнала сфингомиелина см. Hannun, et al., Adv. Lipid Res. 25:27-41, 1993; Liu, et al., Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. 36:511-573, 1999; Igarashi, J. Biochem. 122:1080-1087, 1997; Oral, et al., J. Biol. Chem. 272:4836-4842, 1997; и Spiegel et al., Biochemistry (Moscow) 63:69-83, 1998.

S1P является медиатором пролиферации клеток и защищает от апоптоза посредством активации каскадов выживания (Maceyka, et al. (2002), ВВА, vol.1585:192-201, и Spiegel, et al. (2003), Nature Reviews Molecular Cell Biology, vol.4:397-407). Было предположено, что баланс между уровнями CER/SPH и S1P обеспечивает реостатный механизм, который определяет, направить ли клетку на путь гибели или защитить от апоптоза. Ключевым регуляторным ферментом реостатного механизма является сфингозинкиназа (SPHK), ролью которой является превращение обеспечивающих гибель биологически активных липидов передачи сигнала (CER/SPH) в способствующий росту S1P. S1P имеет два исхода: S1P может деградироваться S1P-лиазой, ферментом, который расщепляет S1P до фосфоэтаноламина и гексадеканаля, или, менее часто, он гидролизуется S1P-фосфатазой до SPH.

Плейотропные виды биологической активности S1P опосредуются через семейство сопряженных с G-белком рецепторов (GPCR), исходно известных как гены дифференцировки эндотелия (EDG). Было идентифицировано пять GPCR в качестве высокоаффинных рецепторов S1P (S1PR): S1P₁/EDG-1, S1P₂/EDG-5, S1P₃/EDG-3, S1P₄/EDG-6 и S1P₅/EDG-8, идентифицированный только в 1998 году (Lee, et al., 1998). Множество ответов, вызываемых S1P, сопряжено с различными гетеротримерными G-белками (G_q-, G_i, G_12-13) и малыми ГТФазами семейства Rho (Gardell, et al., 2006).

У взрослых S1P высвобождается из тромбоцитов (Murata et al., 2000) и тучных клеток, создавая локальный импульс свободного S1P (достаточный для превышения K_d для S1PR) для стимуляции заживления ран и участия в воспалительном ответе. В нормальных условиях общее количество S1P в плазме является достаточно высоким (300-500 нМ); однако была предложена гипотеза о том, что большая часть S1P может быть "буферизованной" сывороточными белками, в частности липопротеинами (например, HDL>LDL>VLDL) и альбумином, так что количество биологически доступного S1P (или свободной фракции S1P) не является достаточным для существенной активации S1PR (Murata et al., 2000). Если этого не происходит, результатом будет недостаточный ангиогенез и воспаление. Также было сделано предположение о внутриклеточном действии S1P (см., например, Spiegel S, Kolesnick R (2002), Leukemia, vol.16:1596-602; Suomalainen, et al (2005), Am. J. Pathol, vol.166:773-81).

Распространенная экспрессия рецепторов S1P клеточной поверхности позволяет SIP влиять на широкий спектр клеточных ответов, включая пролиферацию, адгезию, сокращение, подвижность, морфогенез, дифференцировку и выживание. Этот спектр ответов, по-видимому, зависит от перекрывающихся или отличающихся паттернов экспрессии рецепторов S1P в клеточной и тканевой системах. Кроме того, недавно было показано перекрестное наложение каскадов передачи сигнала S1P и факторов роста, включая тромбоцитарный фактор роста (PDGF), сосудисто-эндотелиальный фактор роста (VEGF) и основной фибробластный фактор роста (bFGF) (см., например, Baudhuin, et al. (2004), FASEB J, vol.18:341-3). Регуляция различных клеточных процессов, вовлекающих S1P, оказывает конкретное влияние в числе прочих на передачу сигнала в нейронах, тонус сосудов, заживление ран, транспорт иммунных клеток, воспроизведение и сердечно-сосудистую функцию. Изменения эндогенных уровней S1P в этих системах может оказывать отрицательные эффекты, вызывая некоторые патофизиологические состояния, в том числе злокачественную опухоль, воспаление, ангиогенез, заболевание сердца; астму и аутоиммунные заболевания.

Современный новый подход к лечению различных заболеваний и нарушений, включая сердечно-сосудистые заболевания, цереброваскулярные заболевания и различные злокачественные опухоли, включает снижение уровней биологически доступного S1P, отдельно или в сочетании с другими способами лечения. Несмотря на то что были предложены стратегии лечения на основе сфинголипидов, которые нацелены на ключевые ферменты метаболического каскада сфинголипидов, такие как SPHK, подавлению непосредственно липидного медиатора S1P до настоящего времени внимания не уделяли, главным образом, вследствие сложности прямого подавления этой липидной мишени, в частности вследствие сложности сначала индукции, а затем детекции антител против SlP-мишени.

Недавно было описано получение антител, специфичных к S1P. См., например, патентную заявку США с серийным номером №20070148168; WO 2007/053447 того же заявителя. Такие антитела, которые могут, например, селективно адсорбировать S1P из сыворотки, действуют в качестве молекулярных губок для нейтрализации внеклеточного S1P. См. также патенты США 6881546 и 6858383 и патентную заявку США с серийным номером 10/029372 того же заявителя. Было показано, что SPHINGOMAB™, моноклональное антитело (mAb) мыши, разработанное Lpath, Inc. и описанное в некоторых патентах или патентных заявках, перечисленных выше, является эффективным в моделях заболеваний человека. В некоторых случаях гуманизированное антитело может быть предпочтительнее антитела мыши, в частности, для терапевтического применения у людей, поскольку может возникнуть ответ в виде антител человека против антител мыши (НАМА). Такой ответ может снижать эффективность антитела посредством нейтрализации связывающей активности и/или посредством быстрого выведения антитела из кровотока в организме. Ответ НАМА также может вызывать токсичность при последующих введениях антител мыши.

В данной работе разработано гуманизированное антитело против S1P и оно описано в настоящем документе. Предполагается, что это антитело обладает всеми преимуществами mAb мыши с точки зрения эффективности связывания S1P, нейтрализации S1P и модулирования болезненных состояний, связанных с S1P, но не обладает потенциальными недостатками mAb мыши, связанными с применением у человека. Как описано в разделе "Примеры" настоящего документа ниже, это гуманизированное антитело (обозначаемое как LT1009 или сонепцизумаб (sonepcizumab)) в действительности демонстрирует активность, превышающую активность исходного антитела (мыши) в моделях заболевания на животных.

3. Определения

Перед подробным описанием настоящего изобретения будут определены некоторые термины, используемые в контексте настоящего изобретения. В дополнение к этим терминам, при необходимости, другие термины определены в других частях настоящего описания. Если в настоящем документе не указано иначе, термины, относящиеся к данной области, используемые в данном описании, будут иметь их признанные в данной области значения. В случае противоречий следует руководствоваться настоящим описанием, включая определения.

"Иммунная молекула" включает любое антитело (Ab) или иммуноглобулин (Ig) и относится к любой форме пептида, полипептида, образованного, смоделированного на основе гена иммуноглобулина или кодируемого геном иммуноглобулина, или к фрагменту такого пептида или полипептида, который способен связывать антиген или эпитоп (см., например, Immunobiology, 5th Edition, Janeway, Travers, Walport, Shlomchiked. (editors), Garland Publishing (2001)). Для настоящего изобретения антиген представляет собой молекулу биологически активного липида.

"Антитело против S1P" или "иммунная молекула, реактивная к S1P" относится к любому антителу или образованной из антитела молекуле, которая связывает S1P. Как будет понятно из этих определений, антитела или иммунные молекулы могут быть поликлональными или моноклональными, и их можно получать различными способами и/или их можно получать из животного, включая человека.

"Биологически активный липид" относится к липидной молекуле передачи сигнала. Как правило, биологически активный липид, когда он оказывает свои эффекты передачи сигнала, находится не в биологической мембране, что означает, что, хотя такой тип липида может существовать в некоторый момент времени в биологической мембране (например, клеточной мембране, мембране клеточной органеллы и т.д.), когда он связан с биологической мембраной, он представляет собой не "биологически активный липид", а вместо этого молекулу "структурного липида". Биологически активные липиды отличаются от структурных липидов (например, мембраносвязанных фосфолипидов) тем, что они опосредуют внеклеточную и/или внутриклеточную передачу сигнала и, таким образом, вовлечены в контроль функции многих типов клеток посредством модулирования дифференцировки, миграции, пролиферации, секреции, выживания и других процессов. In vivo биологически активные липиды могут встречаться во внеклеточных жидкостях, где они могут находиться в комплексе с другими молекулами, например сывороточными белками, такими как альбумин и липопротеины, или в "свободной" форме, т.е. не в комплексе с другими типами молекул. В качестве внеклеточных медиаторов некоторые биологически активные липиды изменяют клеточную передачу сигнала посредством активации мембраносвязанных ионных каналов или сопряженных с G-белком рецепторов, которые, в свою очередь, активируют комплексные системы передачи сигнала, что приводит к изменению клеточной функции или выживанию. В качестве внутриклеточных медиаторов биологически активные липиды могут осуществлять свое действие посредством прямого взаимодействия с внутриклеточными компонентами, такими как ферменты и ионные каналы. Иллюстративные примеры биологически активных липидов включают LPA и S1P.

Термин "лекарственное средство" означает средство, подавляющее ангиогенез и/или неоваскуляризацию, например созревание CNV и BV, отек, сосудистую проницаемость и фиброз, фиброгенез и рубцевание, связанные с основной патологией заболеваний и состояний глаза или являющиеся ее частью.

Термин "комбинированная терапия" относится к терапевтической схеме, которая включает предоставление по меньшей мере двух различных способов терапии для достижения указанного терапевтического эффекта. Например, комбинированная терапия может включать введение двух или более химически отличающихся активных ингредиентов, например антитела против LPA и антитела против S1P. Альтернативно комбинированная терапия может включать введение иммунной молекулы, реактивной к биологически активному липиду, и введение одного или нескольких других химиотерапевтических средств. Альтернативно комбинированная терапия может включать введение антитела против липида вместе с проведением другого лечения, такого как лучевая терапия и/или хирургическая операция. Кроме того, комбинированная терапия может включать введение антитела против липида вместе с одним или несколькими другими биологическими средствами (например, средство против VEGF, TGFβ, PDGF или bFGF), химиотерапевтическими средствами и другими способами лечения, такими как лучевая терапия и/или хирургическая операция. В контексте комбинированной терапии с использованием двух или более химически отличающихся активных ингредиентов, понятно, что активные ингредиенты можно вводить в качестве части одной и той же композиции или в качестве различных композиций. При введении в качестве отдельных композиций композиции, содержащие различные активные ингредиенты, можно вводить в одно и то же время или в разное время, одним и тем же способом или разными способами, с использованием одной и той же схемы дозирования или различных схем дозирования, в зависимости от конкретной потребности и как определит лечащий врач. Аналогично, когда один или несколько типов антител против липидов, например антитело против LPA, отдельно или вместе с одним или несколькими химиотерапевтическими средствами, комбинируют, например, с лучевой терапией и/или хирургической операцией, лекарственное средство(а) можно вводить до или после хирургической операции или лучевой терапии.

"Средство против S1P" относится к любому средству, которое является специфично реактивным к S1P, и включает антитела или образованные из антитела молекулы или не образованные из антитела молекулы, которые связывают S1P и его варианты.

"Гаптен" относится к молекуле, адаптированной для конъюгации с гаптеном, делая, таким образом, гаптен иммуногенным. Иллюстративным неограничивающим классом молекул гаптенов являются белки, примеры которых включают альбумин, гемоцианин лимфы улитки, гемаглютинин, столбнячный и дифтерийный токсоид. Другие классы и примеры молекул гаптенов, пригодных для применения в соответствии с изобретением, известны в данной области. Эти гаптены, а также природные и синтетические гаптены, которые будут открыты или изобретены впоследствии, могут быть адаптированы для применения в соответствии с изобретением.

Термин "химиотерапевтическое средство" означает средства против злокачественной опухоли и другие антигиперпролиферативные средства. Проще говоря, "химиотерапевтическое средство" относится к химическому веществу, предназначенному для уничтожения клеток и тканей. Такие средства включают, но не ограничиваются ими: (1) средства, повреждающие ДНК, и средства, которые ингибируют синтез ДНК: например, антрациклины (например, доксорубицин, донорубицин, эпирубицин), алкилирующие средства (например, бендамустин, бусульфан, карбоплатин, кармустин, цисплатин, хлорамбуцил, циклофосфамид, дакарбазин, гексаметилмеламин, ифосфамид, ломустин, мехлорэтамин, мелфалан, митотан, митомицин, пипоброман, прокарбазин, стрептозоцин, тиотепа и триэтиленмеламин), производные платины (например, цисплатин, карбоплатин, цис-диаминдихлорплатина), ингибиторы теломеразы и топоизомеразы (например, камптосар), (2) средства, деполимеризующие тубулин: например, таксоиды (например, паклитаксел, доцетаксел, BAY 59-8862), (3) антиметаболиты, такие как капецитабин, хлордезоксиаденозин, цитарабин (и его активированная форма, ara-СМР), цитозин арабинозид, дакарбазин, флоксуридин, флударабин, 5-фторурацил, 5-DFUR, гемцитабин, гидроксимочевина, 6-меркаптопурин, метотрексат, пентостатин, триметрексат и 6-тиогуанин, (4) антиангиогенные средства (например, авастин, талидомид, сунитиниб, леналидомид), средства, разрушающие сосуды (например, флавоноиды/флавоны, DMXAA, производные комбретастатина, такие как CA4DP, ZD6126, AVE8062A, и т.д.), (5) биологические вещества, такие как антитела или фрагменты антител (например, Герцептин, Авастин, Панорекс, Ритуксан, Зевалин, Милотарг, Кэмпас, Бексар, Эрбитукс, Луцентис), и (6) эндокринную терапию: например, ингибиторы ароматазы (например, 4-гидроандростендион, экземестан, аминоглютетимид, анастрозол, летозол), антиэстрогены (например, Тамоксифен, Торемифен, Ралоксифен, Фазлодекс), стероиды, такие как дексаметазон, (7) иммуномодуляторы: например, цитокины, такие как IFN-бета и IL2, ингибиторы интегринов, других белков адгезии и матриксных металлопротеиназ, (8) ингибиторы дезацетилазы гистонов, (9) ингибиторы передачи сигнала, такие как ингибиторы тирозинкиназ, такие как иматиниб (Gleevec), (10) ингибиторы белков теплового шока, (11) ретиноиды, такие как полностью транс-ретиноевая кислота, (12) ингибиторы рецепторов факторов роста или самих факторов роста, (13) антимитотические соединения, такие как навелбин, Паклитаксел, таксотер, винбластин, винкристин, виндезин и винорелбин, (14) противовоспалительные средства, такие как ингибиторы СОХ, и (15) регуляторы клеточного цикла, например регуляторы контрольной точки и ингибиторы теломеразы.

Термин "сфинголипид", как используют в настоящем документе, относится к классу соединений, известных в данной области как сфинголипиды, включая, но не ограничиваясь ими, следующие соединения (см. http//www.lipidmaps.org в качестве сайта, содержащего ссылки, указанные посредством заключенных в скобки буквенно-цифровых строк, ниже, причем эти ссылки содержат химические формулы, структурную информацию и т.д. для соответствующих соединений):

Сфингоидные основания [SP01]

Сфинг-4-енины (сфингозины) [SP0101]

Сфинганины [SP0102]

4-Гидроксисфинганины (фитосфингозины) [SP0103]

Гомологи и варианты сфингоидных оснований [SP0104]

1-фосфаты сфингоидных оснований [SP0105]

Лизосфингомиелины и лизогликосфинголипиды [SP0106]

N-метилированные сфингоидные основания [SP0107]

Аналоги сфингоидных оснований [SP0108]

Церамиды [SP02]

N-ацилсфингозины (церамиды) [SP0201]

N-ацилсфинганины (дигидроцерамиды) [SP0202]

N-ацил-4-гидроксисфинганины (фитоцерамиды) [SP0203]

Ацилцерамиды [SP0204]

1-фосфаты церамидов [SP0205]

Фосфосфинголипиды [SP03]

Фосфохолины церамидов (сфингомиелины) [SP0301]

Фосфоэтаноламины церамидов [SP0302]

Фосфоинозитолы церамидов [SP0303]

Фосфоносфинголипиды [SP04]

Нейтральные гликосфинголипиды [SP05]

Простые серии Glc (GlcCer, LacCer и т.д.) [SP0501]

GalNAcb1-3Gala1-4Galb1-4Glc- (серия Globo) [SP0502]

GalNAcb1-4Galb1-4Glc- (серия Ganglio) [SP0503]

Galb1-3GlcNAcb1-3Galb1-4Glc- (серия Lacto) [SP0504]

Galb1-4GlcNAcb1-3Galb1-4Glc- (серия Neolacto) [SP0505]

GalNAcb1-3Gala1-3Galb1-4Glc- (серия Isoglobo) [SP0506]

GlcNAcb1-2Mana1-3Manb1-4Glc- (серия Mollu) [SP0507]

GalNAcb1-4GlcNAcb1-3Manb1-4Glc- (серия Arthro) [SP0508]

Gal- (серия Gala) [SP0509]

Другие [SP0510]

Кислые гликосфинголипиды [SP06]

Ганглиозиды [SP0601]

Сульфогликосфинголипиды (сульфатиды) [SP0602]

Глюкуроносфинголипиды [SP0603]

Фосфогликосфинголипиды [SP0604]

Другие [SP0600]

Основные гликосфинголипиды [SP07]

Амфотерные гликосфинголипиды [SP08]

Арсеносфинголипиды [SP09]

Настоящее изобретение относится к средствам против сфинголипидов S1P, которые пригодны для лечения или профилактики гиперпролиферативных нарушений, таких как злокачественная опухоль, и сердечно-сосудистых или цереброваскулярных заболеваний и нарушений и различных глазных нарушений, как более подробно описано ниже. В частности, изобретение направлено на S1P и его варианты, включая без ограничения сфингозин-1-фосфат [сфинген-1-фосфат; D-эритросфингозин-1-фосфат; сфинг-4-енин-1-фосфат; (Е,2S,3R)-2-амино-3-гидроксиоктадек-4-енокси]фосфоновая кислота (AS 26993-30-6), DHS1P определяют как дигидросфингозин-1-фосфат [сфинганин-1-фосфат; [(2S,3R)-2-амино-3-гидроксиоктадекокси]фосфоновая кислота; D-эритродигидро-D-сфингозин-1-фосфат (CAS 19794-97-9)]; SPC представляет собой сфингозилфосфорилхолин, лизосфингомиелин, сфингозилфосфохолин, сфингозин-фосфорилхолин, этанаманий; 2-((((2-амино-3-гидрокси-4-октадекенил)окси)гидроксифосфинил)окси)-N,N,N-триметилхлорид, (R-(R*,S*-(Е))), хлорид 2-[[(E,2R,3S)-2-амино-3-гидроксиоктадек-4-енокси]гидроксифосфорил]оксиэтил-1-триметилазания (CAS 10216-23-6).

Термин "эпитоп" или "антигенная детерминанта" при использовании в настоящем документе, если нет иных указаний, относится к участку S1P, к которому средство против S1P является реактивным.

Термин "гиперпролиферативное нарушение" относится к заболеваниям и нарушениям, связанным с неконтролируемой пролиферацией клеток, включая, но не ограничиваясь ими, неконтролируемый рост клеток органов и тканей, приводящий к злокачественным опухолям или новообразованиям и доброкачественным опухолям. Гиперпролиферативные нарушения, связанные с эндотелиальными клетками, могут приводить к заболеваниям, связанным с ангиогенезом, таким как ангиомы, эндометриоз, ожирение, старческая дегенерация желтого пятна и различные ретинопатии, а также к пролиферации эндотелиальных клеток и гладкомышечных клеток, которая вызывает рестеноз после стентирования при лечении атеросклероза. Гиперпролиферативные нарушения, вовлекающие фибробласты (например, фиброгенез), включают, но не ограничиваются ими, нарушения с избыточным рубцеванием (например, фиброзом), такие как старческая дегенерация желтого пятна, ремоделирование сердца и недостаточность, связанная с инфарктом миокарда, избыточным заживлением ран, которое обычно происходит после хирургической операции или повреждения, келоидами и фиброидными опухолями и стентированием.

Композиции по изобретению применяют в способах терапии на основе сфинголипидов. "Терапия" относится к профилактике и/или лечению заболеваний, нарушений или физической травмы.

"Сердечно-сосудистая терапия" включает сердечную терапию, а также профилактику и/или лечение других заболеваний, связанных с сердечно-сосудистой системой, таких как заболевание сердца. Термин "заболевание сердца" включает любой тип заболевания, нарушения, травмы или хирургического лечения, которое включает ткань сердца или миокарда. Особый интерес представляют заболевания, которые связаны с гипоксией и/или ишемией ткани миокарда и/или с сердечной недостаточностью. Одним типом заболевания сердца, которое может быть следствием ишемии, является реперфузионное повреждение, например, которое может произойти при использовании в терапии антикоагулянтов, тромболитических средств или средств против стенокардии, или когда сосуды сердца хирургически открывают посредством ангиопластики или посредством пересадки коронарной артерии. Другим типом заболевания сердца, на которое направлено изобретение, является болезнь коронарных артерий (CAD), которая может возникать вследствие артериосклероза, в частности атеросклероза, основной причины ишемии. Симптомами CAD являются стабильная или нестабильная стенокардия, и она может приводить к инфарктам миокарда (MI) и внезапной сердечной смерти. Состояния, представляющие особый интерес, включают, но не ограничиваются ими, ишемию миокарда; острый инфаркт миокарда (AMI); болезнь коронарных артерий (CAD); острый коронарный синдром (ACS); повреждение клеток и тканей сердца, которое может происходить в процессе или вследствие перкутанной реваскуляризации (ангиопластики коронарных артерий) со стентированием или без него; аорто-коронарное шунтирование (CABG) или другие хирургические или медицинские процедуры или способы терапии, которые могут вызывать ишемическое или ишемическое/реперфузионное повреждение у людей; и сердечно-сосудистую травму. Термин "сердечная недостаточность" охватывает острый инфаркт миокарда, миокардит, кардиомиопатию, застойную сердечную недостаточность, септический шок, сердечную травму и идиопатическую сердечную недостаточность. Диапазон ишемических состояний, которые приводят к сердечной недостаточности, называют острым коронарным синдромом (ACS).

Термин "кардиотерапевтическое средство" относится к средству, которое является терапевтическим в отношении заболеваний и нарушений, вызываемых заболеваниями и нарушениями сердца и миокарда или связанных с ними.

"Цереброваскулярная терапия" относится к терапии, направленной на профилактику и/или лечение заболеваний и нарушений, связанных с ишемией и/или гипоксией головного мозга. Особый интерес представляет ишемия и/или гипоксия головного мозга вследствие общей ишемии при заболевании сердца, включающем, но не ограничивающимся этим, сердечную недостаточность.

Термин "метаболит сфинголипида" относится к соединению, из которого получен сфинголипид, а также к соединению, которое образуется при деградации конкретного сфинголипида. Иными словами, "метаболит сфинголипида" представляет собой соединение, которое вовлечено в метаболические каскады сфинголипидов. Метаболиты включают метаболические предшественники и продукты метаболизма. Термин "метаболические предшественники" относится к соединениям, из которых образуются сфинголипиды. Метаболические предшественники, представляющие особый интерес, включают, но не ограничиваются ими, SPC, сфингомиелин, дигидросфингозин, дигидроцерамид и 3-кетосфинганин. Термин "продукты метаболизма" относится к соединениям, которые образуются при деградации сфинголипидов, таким как фосфорилхолин (например, фосфохолин, фосфат холина), жирные кислоты, включая свободные жирные кислоты и гексадеканаль (например, пальмитальдегид).

Как используют в настоящем документе, термин "терапевтический" охватывает полный спектр способов лечения заболевания или нарушения. "Терапевтическое" средство по изобретению может действовать профилактическим или превентивным образом, включая случаи, которые охватывают процедуры, предназначенные для индивидов, которые могут быть идентифицированы, как подверженные риску (фармакогенетика); или смягчающим или излечивающим образом; или оно может действовать, замедляя скорость или степень прогрессирования по меньшей мере одного симптома заболевания или нарушения, подлежащего лечению; или может действовать, минимизируя требуемое время, возникновение или степень дискомфорта или боли, или физические ограничения, связанные с восстановлением после заболевания, нарушения или физической травмы; или их можно использовать в качестве адъювантов для других лекарственных средств и способов лечения.

"Лечение" относится как к терапевтическому лечению, так и к профилактическим или превентивным мерам. Индивиды, нуждающиеся в лечении, включают индивидов, которые уже имеют нарушение, а также индивидов, у которых нарушение подлежит профилактике.

Термин "комбинированная терапия" относится к терапевтической схеме, которая включает предоставление по меньшей мере двух различных способов лечения для достижения намеченного терапевтического эффекта. Например, комбинированная терапия может вовлекать введение двух или более химически отличающихся активных ингредиентов, например быстродействующего химиотерапевтического средства и антитела против липида. Альтернативно комбинированная терапия может вовлекать введение антитела против липида и/или одного или нескольких химиотерапевтических средств, отдельно или вместе с предоставлением другого способа лечения, такого как лучевая терапия и/или хирургическая операция. Кроме того, комбинированная терапия может вовлекать введение антитела против липида вместе с одним или несколькими другими биологическими средствами (например, средством против VEGF, TGFβ, PDGF или bFGF), химиотерапевтическими средствами и другим способом лечения, таким как лучевая терапия и/или хирургическая операция. В контексте введения двух или более химически отличающихся активных ингредиентов, понятно, что активные ингредиенты можно вводить в качестве части одной и той же композиции или в качестве различных композиций. При введении в качестве отдельных композиций композиции, содержащие отличающиеся активные ингредиенты, можно вводить одновременно или в разное время, посредством одного и того же или разных способов введения, с использованием одинаковых или различных схем дозирования, в зависимости от потребностей в конкретных условиях и как определяет лечащий врач. Аналогично, когда один или несколько типов антител против липида, например антитело против LPA, отдельно или совместно с одним или несколькими химиотерапевтическими средствами, комбинируют, например, с лучевой терапией и/или хирургической операцией, лекарственное средство(а) можно доставлять до или после хирургической операции или лучевой терапии.

"Монотерапия" относится к схеме лечения на основе доставки одного терапевтически эффективного соединения, вводимого в качестве одной дозы или нескольких доз с течением времени.

"Новообразование" или "злокачественная опухоль" относится к аномальному и неконтролируемому клеточному росту. "Новообразование", или опухоль или злокачественная опухоль, представляет собой аномальную, нерегулируемую и дезорганизованную пролиферацию при росте клеток и, как правило, относится к злокачественной опухоли. Новообразование может быть доброкачественным или злокачественным. Новообразование является злокачественным, или раковым, если оно обладает свойствами деструктивного роста, инвазивности и метастазирования. Инвазивность относится к локальному распространению новообразования посредством инфильтрации или разрушения окружающей ткани, как правило, прорывающегося через базальные мембраны, которые определяют границы тканей, таким образом, часто проникающего в кровеносную систему организма. Метастазы, как правило, относятся к распространению опухолевых клеток через лимфатические или кровеносные сосуды. Метастазы также относятся к миграции опухолевых клеток посредством прямого распространения через серозные полости или субарахноидальное или другие пространства. Посредством процесса метастазирования миграция опухолевых клеток в другие области организма приводит к развитию новообразований в областях, отдаленных от области исходного возникновения.

"Млекопитающее" для целей лечения относится к любому животному, классифицируемому как млекопитающее, включая человека, домашних и сельскохозяйственных животных, и животных зоопарков, спортивных животных или комнатных животных, таких как собаки, лошади, кошки, коровы и т.д. Предпочтительно млекопитающим является человек.

"Нативные антитела" и "нативные иммуноглобулины", как правило, представляют собой гетеротетрамерные гликопротеины массой приблизительно 150000 дальтон, которые состоят из двух идентичных легких (L) цепей и двух идентичных тяжелых (Н) цепей. Каждая легкая цепь связана с тяжелой цепью одной ковалентной дисульфидной связью, хотя количество дисульфидных связей варьирует среди тяжелых цепей различных изотипов иммуноглобулинов. Каждая тяжелая и легкая цепи также обладает дисульфидными мостиками, расположенными внутри цепи с равными интервалами. Каждая тяжелая цепь на одном конце обладает вариабельным доменом (V_H), за которым следует ряд константных доменов. Каждая легкая цепь обладает вариабельным доменом (V_L) на одном конце и константным доменом на другом конце; константный домен легкой цепи расположен параллельно первому константному домену тяжелой цепи, а вариабельный домен легкой цепи расположен параллельно вариабельному домену тяжелой цепи. Полагают, что область контакта между вариабельными доменами легкой цепи и тяжелой цепи формируют конкретные аминокислотные остатки.

Термин "вариабельная" область включает каркасную область и CDR (иначе известные как гипервариабельные области) и относится к тому факту, что последовательности определенных участков вариабельных доменов значительно отличаются среди антител и они задействованы в связывании и специфичности каждого конкретного антитела в отношении его конкретного антигена. Однако вариабельность не является равномерно распределенной на протяжении вариабельных доменов антител. Она сконцентрирована в трех сегментах, называемых гипервариабельными областями в вариабельных доменах как легких цепей, так и тяжелых цепей. Наиболее высококонсервативные участки вариабельных доменов называются каркасными областями (FR). Вариабельные домены нативных тяжелых и легких цепей содержат четыре FR (FR1, FR2, FR3 и FR4 соответственно), главным образом, приминающих конфигурацию β-слоев, соединенных тремя гипервариабельными областями, которые формируют петли, соединяющие структуры β-слоев и в некоторых случаях формирующие их часть. Гипервариабельные области в каждой цепи расположены вместе в непосредственной близости от FR и совместно с гипервариабельными областями другой цепи участвуют в формировании антигенсвязывающего центра антител (см. Kabat et al., Sequences of Protein of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991), стр.647-669). Константные домены не вовлечены непосредственно в связывание антитела с антигеном, но они проявляют различные эффекторные функции, такие как участие антитела в антителозависимой клеточной цитотоксичности (ADCC).

Как используют в настоящем документе, термин "гипервариабельная область" относится к аминокислотным остаткам антитела, которые отвечают за связывание антигена. Гипервариабельная область содержит аминокислотные остатки из "определяющей комплементарность области"' или "CDR" (например, остатки 24-34 (L1), 50-56 (L2) и 89-97 (L3) в вариабельном домене легкой цепи и 31-35 (H1), 50-65 (Н2) и 95-102 (Н3) в вариабельном домене тяжелой цепи; Kabat et al. (1991), выше), и/или остатки из "гипервариабельной петли" (например, остатки 26-32 (L1), 50-52 (L2) и 91-96 (L3) в вариабельном домене легкой цепи и 26-32 (H1), 53-55 (Н2) и 96-101 (Н3) в вариабельном домене тяжелой цепи; Chothia and Lesk J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). Остатки "каркасной