Способ прижизненной дифференциальной диагностики зооноза trichocephalus trichiurus и trichocephalus suis по микроструктуре яиц

Способ прижизненной дифференциальной диагностики зооноза trichocephalus trichiurus и trichocephalus suis по микроструктуре яиц

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Изобретение относится к области ветеринарной медицины, а более конкретно к паразитологии (гельминтологии) для постановки прижизненного дифференциального диагноза до вида гельминтов по микроструктуре яиц: зооноза Trichocephalus (Trichuris) trichiurus (поражающий человека, обезьян и в ларвальной стадии домашних и диких свиней) и Trichocephalus (Trichuris) suis (поражающий свиней, кабанов=вепрей и в ларвальной стадии человека), и предназначено для использования при постановке диагноза методами копроовоскопии (флотации, седиментации, комбинированным) и при гельминтологических исследованиях объектов окружающей среды (на животноводческих фермах, в цирках, зоопарках, в вивариях институтов), при которых ставится диагноз болезни до рода гельминта, если не известен хозяин паразита: человек, обезьяна, свинья.

Известны работы Мозгового А.А. (1967) (3), который путем сложных манипуляций на яйца Trichocephalus suis: крепкой уксусной кислотой и крепкой серной кислотой (10-15 часов), выявил 4 оболочки у яиц этого вида (с.422-425), и Динник Н.Н., которая по измерению по 200 яиц «человеческого» и 200 свиного власоглавов выявила незначительные различия в размерах яиц Trichocephalus trichiurus (L., 1771) и Trichocephalus suis Schrank, 1788.

Перечисленные выше работы имеют свою научную ценность, однако имеют и некоторые недостатки в научном и практическом плане.

4 оболочки, выявленные Мозговым А.А. (3) у яиц Trichocephalus suis, были выявлены автором очень сложными и длительными опытами, а это затрудняет диагностику до вида трихоцефал, а в практических условиях, особенно при выявлении контаминации внешней среды (почвы, травы, кормов, кормушек) на животноводческих фермах, свинофабриках, в цирках, зоопарках, вивариях институтов ветеринарного и медицинского профиля, на биофабриках, в частных свиноводческих фермах и у частных владельцев горожан, которые содержат не только мини-свиней, но и обычных свиней и обезьян, или в зверинцах, принадлежащих различным кинокомпаниям, весьма затруднительно проводить диагностику яиц поражающего мини-свиней, домашних, цирковых, зоопарковых свиней и диких свиней вида Trichocephalus suis и особенно дифференциальную диагностику с яйцами гельминта поражающего человека и обезьян вида Trichocephalus trichiurus, предложенную Мозговым А.А. (3), так как это требует очень много времени и химикатов.

Это имеет не только научное значение, но и практическое, так как внешняя среда цирков, зоопарков, свиноферм и съемочных площадок кинокомпаний может быть заражена (загрязнена) выделениями не только от свиней, но и от людей, дрессированных обезьян, так как трихоцефалез в данное время может наблюдаться не только у местных жителей, но и у приезжих: туристов, иностранных рабочих (из Турции, Африки, Средней Азии, юга России, Молдовы, Украины), студентов (из стран Азии и Африки, Южной и Центральной Америки, Австралии) и у завозимых свиней из других стран.

Динник Н.Н. (1941) (1) выявила разницу в средних размерах этих двух видов трихоцефал Trichocephalus suis (вид от свиней) и Trichocephalus trichiurus (вид от человека, обезьян), однако этот признак - размеры яиц, имеет больше научное значение, чем практическое, так как в практических условиях при исследовании контаминации внешней среды (съемочных площадок, пола у частных владельцев, зоопарков, цирков) собрать и измерить из исследованных проб 400 и более яиц трихоцефал мало согласуется с реальностью, так как врачи-практики имеют дело зачастую и с другими инвазиями, которые также требуют времени и иногда даже других методов исследования.

Этих отличительных признаков яиц Т.suis и Т.trichiurus на практике оказалось крайне недостаточно для диагностики и тем более для дифференциальной диагностики видов, тем более что при исследовании внешней среды (почвы и помещений в цирках, зоопарках, съемочных площадках, в квартирах частных владельцев животных) могут быть и яйца возбудителей других болезней: трихоцефалы от жвачных и хищных (собак, кошек, лисиц, хорьков), капиллярии, гепатиколы, диоктофимы.

Известны работы Пасечника В.Е., Pasechnik V.E. (4, 5, 6, 7, 9), в которых автор впервые в мировой науке (в соответствии с научной литературой) приводит данные по изучению им микроструктуры и ультраструктуры яиц 3-х видов трихоцефал от жвачных животных под световой и сканирующей электронной микроскопией и выявлению им наиболее характерных признаков по ультраструктуре яиц.

Известен патент №2396069 (заявка 2008140245/13, 13.10.2008) Пасечника В.Е. (8) «Способ прижизненной дифференциальной диагностики трихоцефал Trichocephalus ovis, Trichocephalus skrjabini и Trichocephalus capreoli от жвачных животных», разработанный автором на основании изученных им впервые в научном мире (в соответствии с научной литературой) под световым микроскопом: микроструктуры оболочек, пробочек и шейки пробочек яиц от 3-х видов трихоцефал.

Эти работы Пасечника В.Е., Pasechnik V.E. (4, 5, 6, 7, 8, 9) имеют большое научное значение в отношении фундаментальных исследований: морфологии, систематики и практическое значение: совершенствование прижизненной диагностики и терапии при трихоцефалезе зоопарковых, цирковых, племенных и редких видов жвачных.

Однако приведенные в научных работах Пасечника В.Е., Pasechnik V.E. (4, 5, 6, 7, 8, 9) дифференциальные признаки по микроструктуре и ультраструктуре яиц трихоцефал, которые чрезвычайно важны при разработке дифференциальной посмертной и прижизненной диагностики, относятся только к трихоцефалам сельскохозяйственных и диких жвачных, а что касается прижизненной дифференциальной диагностики по микроструктуре яиц трихоцефал от свиней, приматов и человека, этот вопрос остается открытым.

Кроме того, Мозговой А.А. (3) изучил только строение оболочек (путем сложных химических манипуляций на яйца Trichocephalus suis), однако микроструктура пробочек и шейки пробочек яиц трихоцефал вида Trichocephalus suis осталась не изученной.

Прижизненно заражение домашних и диких свиней, человека и обезьян трихоцефалами может быть установлено овоскопическим методом исследования фекалий (копроовоскопией), так как яйца их имеют достаточно характерную для рода Trichocephalus Schrank, 1788, типичную форму бочонка с двумя пробочками на полюсах, и ставится диагноз с учетом, что исследованные пробы фекалий были индивидуально собраны от конкретного вида животных: свиней, обезьян и человека.

Однако трудности в постановке диагноза возникают при необходимости уточнения диагноза до вида паразита: Trichocephalus trichiurus, Trichocephalus suis, при загрязнении внешней среды и помещений в зоопарках, цирках, племенных свинарниках и у частных владельцев (внешняя среда часто бывает загрязнена яйцами возбудителя болезни как от человека, так и от обезьян и свиней!), так как особенности микроструктуры яиц отдельных видов трихоцефал слабо изучены. А это крайне необходимо в научных целях: совершенствование систематики гельминтов и с практической целью: при исследовании контаминации внешней среды: пола, воды, кормов, навозожижесборников и уточнении эффективности дегельминтизации в помещениях и выгульных площадках в вивариях, зоопарках и цирках страны.

Величина яиц Trichocephalus (Trichuris) trichiurus 0,050-0,065 мм ×0,022-0,030 мм и в среднем 0,057×0,026 мм, a Trichocephalus suis 0,057-0,067×0,025-0,0355 мм и в среднем 0,062×0,029 мм, то есть для выявления реальной разницы в их размере (которая является очень незначительной) исследователям (с научной и особенно с практической целью) необходимо измерить не менее 200 яиц паразитов от каждого из указанных выше видов трихоцефал, что в научных целях допустимо, а в практических это нереально.

Следовательно, поиск и разработка прижизненных методов диагностики по микроструктуре яиц трихоцефал от приматов, человека и свиней является актуальной задачей ветеринарной и медицинской науки.

Поэтому все исследователи, каким бы известным прижизненным методом не пользовались (2): флотации по Фюллеборну и его модификации, седиментации (осаждения) по Эрлиху и его модификации, комбинированным по Дарлингу и его модификации, ставят диагноз болезни по виду животного (считая, что вид животного соответствует виду паразита): у домашних, цирковых, зоопарковых и диких свиней - Trichocephalus suis, а у человека и обезьян - Trichocephalus trichiurus, а при исследовании внешней среды (загрязненной яйцами различных видов) дифференциальная диагностика трихоцефал до вида отсутствует, так как способ прижизненной диагностики трихоцефал до вида Trichocephalus trichiurus и Trichocephalus suis не разработан, исключая 3 вида власоглава от домашних и диких жвачных, определяемые и дифференцируемые по микроструктуре яиц по способу Пасечника В.Е. (8 - патент №2396069).

У домашних и диких свиней и человека паразитируют различные виды трихоцефал, однако при исследовании зараженной внешней среды: почвы на детских площадках, на съемочных площадках кинокомпаний, в помещениях цирков, зоопарках и вивариях биофабрик, научно-исследовательских институтах, в пробах могут быть обнаружены (и как правило обнаруживают!) яйца не только трихоцефал от свиней, человека, но и яйца трихоцефал от собак, кошек, хорьков, лисиц, домашних и диких (дрессированных) жвачных.

Известные методы прижизненной диагностики: флотации по Фюллеборну с раствором хлорида натрия (1920) и его модификации (2); метод седиментации по Эрлиху (1927) и его модификации (2); метод комбинированный по Дарлингу (1911) (седиментации и флотации) и его модификации (2), которые при исследовании на трихоцефалезы домашних и диких свиней, обезьян и человека имеют один существенный недостаток: они позволяют исследователю прижизненно поставить общий родовой диагноз заболеванию трихоцефалез. Поэтому в научных целях и в практических условиях необходимо уточнять диагноз болезни, вызываемой гельминтом до вида.

Это, как правило, происходит либо посмертно: при гельминтологических исследованиях трупов животных и человека, либо после дегельминтизаций, если удается обнаружить собственно имагинальные формы паразитов, что в практических условиях не всегда возможно осуществить, так как необходимо ежедневно собирать и исследовать максимальное количество экскрементов от свиней, обезьян и человека (до возможного обнаружения половозрелых гельминтов!).

Особенно это важно при заболевании:

высокоценных племенных и дрессированных свиней и обезьян, используемых в цирковых представлениях, хозяйственных целях;

свиней и обезьян, которые являются объектом лабораторной модели для изучения особенно опасных инфекционных и паразитарных зоонозных болезней человека, сельскохозяйственных и диких животных, цирковыми «артистами»;

ценных охотничье-промысловых видов животных: кабан=вепрь;

пород свиней: мини-свиньи, домашние свиньи, которые являются поставщиками не только эстетического наслаждения - дрессированные «артисты» цирков: свиньи и мини-свиньи - но и поставщиками ценных продуктов для физических потребностей человека (беконное мясо, сало, качественные кожаные изделия: перчатки, сапоги, куртки и т.д.);

при заболевании и гибели исчезающих видов приматов: орангутанов (стоимость 1 орангутана достигает от 25000 $ до 50000 $), а с учетом незаменимости обезьян при изучении, лечении и создании вакцин особенно опасных вирусных, бактериальных и паразитарных болезнях человека становится тем более понятна актуальность совершенствования диагностики паразитарных болезней, при которых для уточнения диагноза до вида трихоцефал Trichocephalus trichiurus; Trichocephalus suis - возбудителя болезни необходимо исследовать посмертно (на вскрытии), что влечет за собой огромные экономические потери и иногда может стать причиной гибели не только животных, но и потери трудоспособности самого ценного для нашей страны существа - самого человека, а точнее наших детей (заболевание трихоцефалезом детей регистрируется во всех странах мира и даже в тех, где экономические и социальные условия находятся на самом высоком уровне: Франция, Италия, Канада, Англия, США).

Иногда снижается эффективность методов профилактики и лечения, так как отсутствует прижизненный способ дифференциальной диагностики до вида возбудителей болезни трихоцефал от приматов, человека и племенных, цирковых, зоопарковых свиней Trichocephalus (Trichuris) trichiurus, Trichuris suis при контаминации внешней среды источниками заболевания и человеком, и обезьянами, и домашними и дикими свиньями как в помещениях для животных, так и в людских помещениях: в квартирах, домах, приусадебных дворах и дачах, или пляжах: речных, морских и т.д.

Цель изобретения. Целью изобретения является использование изученной нами впервые микроструктуры оболочки, шейки пробочек и зародыша зрелых 500 яиц трихоцефал, извлеченных из вагины самок каждого идентифицированного до вида паразита, которые были собраны методом гельминтологических вскрытий от свиней из Молдавии и Российской Федерации и от дегельминтизированных пастухов и чабанов в Молдавии, спонтанно зараженных трихоцефалезом, и которая могла бы быть применена для повышения эффективности способа и постановки диагноза не только до рода, но и до вида трихоцефал по микроструктуре яиц: Trichicephalus (=Trichuris) trichiurus и Trichocephalus (=Trichuris) suis - возбудителей болезни обезьян, человека и свиней, при исследовании загрязненной внешней среды яйцами возбудителей паразитарных зоонозов (гельминтозоонозов).

1. Поставленная цель достигается тем, что при проведении диагностики на трихоцефалез при загрязнении внешней среды: приморских, речных, приозерных пляжей, дворов фермеров, приусадебных участков, квартир граждан (имеющих обезьян, свиней, мини-свиней), арен и помещений цирков, зоопарков, воды из поилок, кормов и предметов ухода за животными, вивариев институтов, съемочных площадок кинокомпаний (2), применяют разработанный нами способ прижизненной дифференциальной диагностики зооноза Trichocephalus trichiurus и Trichocephalus suis по микроструктуре яиц от обезьян, человека и домашних и диких свиней, который заключается в отборе на предметное стекло яиц, просветлении их в растворе глицерина плюс 40% молочная кислота в соотношении 1:1, накрывают предметным стеклом и просматривают под микроскопом при увеличениях: 600, 1200 и 900 под иммерсией, отличающийся от известных методов (2) прижизненной диагностики (флотации, седиментации, комбинированный) тем, что с целью повышения эффективности диагностики проводят определение микроструктурных отличий яиц, ставя диагноз болезни не по виду хозяина паразита (свиньи, обезьяны, человека), а по особенностям микроструктуры (выявленным нами впервые!) каждого вида яиц паразита (тем более, что при загрязнении внешней среды яйцами возбудителей инвазии определить, от какого вида животного обнаружено инвазионное начало, способа нет).

Trichocephalus trichiurus (см. Приложение) имеет высокие пробочки с тонкими шейками и широкими шапочками на полюсах яиц с острым концом в Фиг.2(б); над полюсами яиц видна 1-я наружная прозрачная оболочка в виде прозрачного диска, или в виде вертящегося пропеллера самолета, Фиг.1(б), Фиг.2(б) - А; Г (гранулы) и П (головка пробочки); шейки пробочек винтообразной формы и имеют 4 кольца, Фиг.2(б): 1, 2, 3, 4; 3-е кольцо, считая от апикального конца, выпуклое, чем отличается от предыдущих двух колец, Фиг.2(б) - 3; 4-е последнее кольцо, Фиг.2(б) - 4 и Т (зародыш) - это кольцо на нашем снимке прозрачное, но бывает и кератизированным - выполняет роль связующего звена между основанием шейки пробочек и четвертой внутренней прозрачной оболочкой зародыша, Фиг.2(б).

На 2-й кератизированной оболочке видны шипики, Фиг.1(a); на полюсах яиц имеется вооружение, Фиг.1(a); Фиг.2(а): пластинчатые шипики различной конфигурации.

2. Способ прижизненной дифференциальной диагностики трихоцефал: зооноза Trichocephalus trichiurus и Trichocephalus suis по микроструктуре яиц по п.1., отличающийся тем, что Trichocephalus suis (см. Приложение) имеет пробочки без выраженной шейки и небольшими шапочками и не выступающие над поверхностью яиц, Фиг.3(б) - А (шапочка); Фиг.4(б); на полюсах яиц 1-я наружная прозрачная оболочка видна в виде фонтана полупрозрачных микроструктур, выходящих из яйца, Фиг.3(а); на 2-й кератизированной наружной оболочке видны шипы, Фиг.5(а); на пробочках имеются пластинчатые шипики и стилет, Фиг.4(а) и Фиг.5(а); шейки пробочек винтообразной формы с 4-мя кольцами, Фиг.3(б): 1, 2, 3, 4; 4-е кольцо выпуклое - скрепляет основание шейки пробочек с четвертой внутренней прозрачной оболочкой зародыша, Фиг.3(б) - 4 и Б (зародыш); Фиг.5(б).

Эти микроструктурные отличия видовых признаков яиц 2-х видов трихоцефал позволяют отдифференцировать в 100% случаев виды трихоцефал: Trichocephalus trichiurus и Trichocephalus suis, не прибегая к гельминтологическим исследованиям на вскрытии домашних и диких свиней, обезьян или при отсутствии самих гельминтов при дегельминтизации (человека, обезьян и свиней), или при исследовании контаминации (загрязнения) внешней среды зародышами возбудителей паразитарных зоонозов.

Сопоставительный анализ заявляемого технического решения с прототипом (флотации, седиментации и комбинированными) показывает, что заявляемый способ отличается от известных тем, что проводят раздельное сопоставление морфологических особенностей яиц и в соответствии с нашими микрофотографиями (Приложение) ставят диагноз болезни не только до рода, но и до вида гельминта Trichocephalus (Trichuris) trichiurus и Trichocephalus suis.

Эти отличия позволяют сделать вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию «новизна». Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, не выявлены в других технических решениях, и поэтому они обеспечивают заявляемому техническому решению соответствие критерию «существенные отличия».

Примеры конкретного выполнения предлагаемого способа.

Пример. От 25 свиней (перед убоем на мясокомбинате) и 5 человек в Республике Молдова были взяты известными методами флотации, комбинированным и седиментации пробы фекалий и выделены для исследования по 500 яиц трихоцефал от каждой группы инвазированных животных и людей. Предварительно просветленные яйца паразита смесью 98,5% раствора глицерина (плотность 1,256) и 40% молочной кислоты в соотношении 1:1 помещали на предметное стекло и исследовали при увеличениях микроскопа: 600, 1200 и 900 под иммерсией.

В процессе исследования использовали изученные нами впервые микроструктурные признаки в совокупности с микрофотографиями яиц (Приложение) видов (Trichuris) trichiurus и Trichocephalus (Trichuris) suis.

При соответствии морфологических признаков: длинные с тонкими шейками и широкими шапочками на пробочках на полюсах яиц с острым концом, Фиг.2(б), на полюсах яиц (над пробочками) видна 1-я наружная прозрачная оболочка в виде прозрачного диска, Фиг.1(б), или в виде вертящегося пропеллера самолета, Фиг.1(б), при увеличении микроскопа 900, Фиг.2(б) - А; шейки пробочек яиц винтообразной формы и имеют 4 кольца, Фиг.2(б) - 1, 2, 3, 4; 3-е кольцо на шейках пробочек, считая от апикального конца, выпуклое, чем отличается от предыдущих 2-х колец, Фиг.2(б) - 3; 4-е кольцо выполняет роль связующего звена основания шеек пробочек с четвертой прозрачной оболочкой (зародыша) яйца, Фиг.2(б) - Т (зародыш); на 2-й кератизированной оболочке видны шипики; Фиг.1(a); на полюсах яиц имеется вооружение, Фиг.1(а) и Фиг.2(а): пластинчатые шипы различной конфигурации, Фиг.2(а).

В таком комплексе признаков и в сопоставлении их с нашими микрофотографиями ставится диагноз вида Trichocephalus (Trichuris) trichiurus.

При исследовании 500 яиц от второй группы и используя впервые изученные нами микроструктурные признаки: пробочки с короткими шейками и шапочками, тупым концом (верхушкой) и не выступают над поверхностью оболочек яиц, Фиг.3(б) - А (шапочка); на полюсах яиц 1-я прозрачная оболочка видна в виде фонтана полупрозрачных микроструктур, выходящих из яйца; Фиг.3(а); Фиг.4(б); шейки пробочек на полюсах винтообразной формы и имеют 4 кольца, охватывающие шейки от шапочек до основания, Фиг.3(б) - 1, 2, 3, 4; 4-е кольцо выпуклое (предыдущие 3 кольца одинаковой ширины), Фиг.3(б) - 4, и играет роль связующего звена между пробочками и четвертой внутренней прозрачной оболочкой зародыша яйца; на 2-й кератизированной оболочке видны шипики, Фиг.5(а); на пробочках яиц видны пластинчатые шипы и стилет, Фиг.4(а) и Фиг.5(а); через 1-ю прозрачную наружную и 3-ю и 4-ю внутренние прозрачные оболочки хорошо просматривается зародыш в одной части яйца, Фиг.5(б). Совокупность этих признаков и соответствие их нашим микрофотографиям (Приложение) позволило поставить диагноз возбудителя болезни, вызванной видом Trichocephalus (Trichuris) suis.

После проведения вышеуказанных исследований свиней убили, а толстый отдел кишечника и слепую кишку исследовали на вскрытии по методу К.И.Скрябина. У свиней были обнаружены половозрелые гельминты вида Trichocephalus (Trichuris) suis.

Таким образом, результаты гельминтологических исследований проб экскрементов от людей и свиней подтвердили данные, полученные при использовании предлагаемого способа прижизненного дифференциального диагноза до вида Trichocephalus trichiurus и Trichocephalus suis, а не до рода (яйца имеют форму бочонка с двумя пробочками на полюсах) возбудителя болезни, так как микроструктура яиц трихоцефал от свиней, приматов и человека имеет свои видовые особенности, которые были выявлены и изучены нами впервые (в соответствии с научной литературой) в мировой науке.

Использование предлагаемого способа прижизненной дифференциальной диагностики по микроструктуре яиц при контаминации внешней среды в свинарниках, зоопараках, цирках, на киноплощадках (при использовании для съемок фильмов животных: свиней, вепрей, обезьян), на пляжах (куда иногда забредают свиньи, и не только домашние, но и дикие (кабан=вепрь)), вокруг частных домов с «удобствами» во дворах - туалеты - яйцами трихоцефал от приматов, свиней и человека обеспечивает по сравнению с существующими: флотации, комбинированным и седиментации следующие преимущества.

1. Сокращает время и снижает трудоемкость исследований за счет исключения необходимости проведения измерений большого количества яиц: 400 и более (что в практических условиях проводить врачам нереально!) яиц трихоцефал (диагностику можно проводить по нескольким яйцам паразита, попавшим в поле зрения исследователя).

2. Исключает необходимость исследования на вскрытии хозяйственно ценных племенных свиней и находящихся на грани исчезновения видов приматов в зоопарках, цирках и зверинцах кинокомпаний: орангутанов, горилл, шимпанзе и др.

3. Экономически выражается в сохранении больших финансовых сумм в результате точного видового диагноза возбудителя болезни: Trichocephalus (Trichuris) trichiurus, Trichocephalus suis и, соответственно, сохранении и предотвращении гибели больных трихоцефалезом приматов и ценных пород и племенных свиней и более радикальной дезинвазии (загрязненной яйцами возбудителей болезни) внешней среды и помещений, если источником инвазии были свиньи или, что наиболее опасно (особенно для детей!), обезьяны или человек.

4. Способ прижизненной дифференциальной диагностики при контаминации внешней среды яйцами трихоцефалозооноза Trichocephalus trichuris и Trichocephalus suis от обезьян, человека и от домашних и диких свиней легко осуществим в лабораторных условиях.

5. Обеспечивает 100% точность постановки прижизненного дифференциального диагноза не только до рода, но и до вида паразита.

Источники информации

1. Динник Н.Н. Сравнение власоглавов человека, свиньи и некоторых низших обезьян. // Диссер…кандидата наук. - М. - 1941. - 73 с.

2. Котельников Г.А. «Гельминтологические исследования животных и окружающей среды»: Справочник. - М.: Колос. - 1984. - 208 с.

3. Мозговой А.А. Гельминты домашних и диких свиней и вызываемые ими заболевания. - М.: Наука. - 1967. - С.418-426.

4. Пасечник В.Е. К морфологии видов Trichuris (Trichocephalus) ovis Abildgaard, 1795 Т. skrjabini Baskakov, 1924 // Труды Всероссийского института гельминтологии имени К.И.Скрябина. - М. - 1999. - Том 35. - С.85-120.

5. Пасечник В.Е. Сканирующая электронная микроскопия Trichocephalus (Trichuris) capreoli Artjuch, 1948. // Труды Всероссийского института гельминтологии имени К.И.Скрябина. - М. - 2000. - Том 36. - С.141-156.

6. Пасечник В.Е. Диссер…кандидата ветеринарных наук. - М. - 2000. - 184 с.

7. Пасечник В.Е. Патент на изобретение №2396069, заявка: 2008140245/13, 13.10.2008, дата публикации заявки: 20.04.2010. // Бюл. Федеральной службы по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам Российской Федерации №22, 10.08.2010.

8. Pasechnik V.E. Ultrastructure of eggs surface of the genus Trichocephalus Schrank, 1788 // Second English language International Nematology Simposium of the Societi of Nematologist. - Abstract. - Moscow. - 23-30 August 1997. - P.20.

Способ прижизненной дифференциальной диагностики зооноза Trichocephalus trichiurus и Trichocephalus suis по микроструктуре яиц, заключающийся в отборе яиц трихоцефал на предметное стекло, просветления их в смеси 98,5%-ного раствора глицерина плотностью 1,256 и 40%-ной молочной кислоты, взятых в соотношении 1:1, после чего яйца накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом при увеличениях 600, 1200 и 900 под иммерсией, отличающийся тем, что для диагностики проводят определение микроструктурных отличий яиц и дифференцируют виды трихоцефал по следующим признакам: Trichocephalus trichiurus имеет высокие, с тонкими шейками и широкими шапочками пробочки на полюсах яиц с острым концом; 1-я наружная прозрачная оболочка охватывает все яйцо и видна вблизи полюсов в виде прозрачного диска либо на шапочках пробочек; шейки пробочек винтообразной формы и имеют 4 кольца; 3-е кольцо, считая от апикального конца, выпуклое, чем отличается от предыдущих 2 колец; 4-е кольцо может быть прозрачным или кератизированным: выполняет роль связующего звена между основанием шейки пробочек и 4-й оболочкой зародыша; на 2-й кератизированной оболочке видны шипики; на полюсах яиц имеются пластинчатые шипики различной конфигурации; Trichocephalus suis имеет с короткими шейками и шапочками и не выступающие над поверхностью яиц пробочки; на полюсах яиц 1-я прозрачная оболочка видна в виде фонтана полупрозрачных микроструктур, выходящих из яйца; шейки пробочек винтообразной формы с 4 кольцами; 4-е кольцо выпуклое, скрепляет основание шейки пробочек с внутренней оболочкой зародыша; имеет на 2-й оболочке шипы, на пробочках пластинчатые шипики и стилет.