Противовирусное средство - глазные капли

Противовирусное средство - глазные капли

Реферат

Изобретение относится к фармакологии, конкретно к приготовлению интерферонсодержащих композиций, способных повышать свою противовирусную активность, которые могут найти применение в офтальмологии при лечении вирусных поражений глаз.

В офтальмологии инфекционная патология занимает одно из ведущих мест. Арсенал противомикробных средств достаточно обширен. Однако до настоящего времени существуют значительные трудности в фармакотерапии вирусных заболеваний глаз. Это обусловлено тем, что для лечения вирусных инфекций глаз, как и вирусных инфекций вообще, практически нет специфических препаратов.

В практике терапии таких заболеваний, как конъюнктивиты аденовирусный, эпидемический, геморрагический (энтеровирусный), герпетический, кератиты аденовирусные, герпетические (везикулезный, точечный, древовидный, картообразный), кератит герпетический стромальный с изъязвлением и без изъязвления, кератоконъюктивиты герпетической и аденовирусной этиологии, герпетический увеит, герпетический кератоувеит, (с изъязвлением и без него), показана достаточно высокая эффективность препаратов природного интерферона при местном применении.

В нашей стране для этих целей используется "Локферон", который содержит интерферон, синтезированный лейкоцитами донорской крови под воздействием вируса-индуктора (вирус парагриппа 1 Сейдай ГКВ N "2339, препарат сконцентрирован и очищен микро- и ультрафильтрацией (RU, патент 2108804, А61К 38/21, 1998 г.).

Однако как препараты, сырьем для которых служит кровь человека, интерфероны природного происхождения небезопасны с точки зрения отсутствия вирусов контаминантов (вирусы гепатитов, СПИДа, цитомегаловирусной, герпесвирусной инфекции и т.д.).

Это обусловливает все более широкое внедрение в практику здравоохранения препаратов интерферона генно-инженерного происхождения, как наиболее очищенных (степень очистки до 98%) и гарантированно безопасных с точки зрения вирусной контаминации.

Известна также фармацевтическая композиция антивирусного действия для приготовления глазных капель, содержащая человеческий интерферон, биологически совместимый полимер - полиглюкин 6%-ный раствор и буферную смесь при следующем содержании компонентов в 1 мл раствора:

Интерферон, ME - (1-6,6)·10

Биологически совместимый полимер (полиглюкин) - 5-30

Буферная смесь - до pH раствора 7,0-7,6

(RU, патент 2095081, кл. А61К 38/21, 1997 г.).

Известен препарат "Берофор" фирмы BOEHRINGER INGELHEIM" (Австрия), предназначенный для глазных капель. Препарат приготовлен по рекомбинантной ДНК-технологии с использованием бактериальных штаммов Е.coli. (Ф.И.Ершов. Система интерферона в норме и при патологии. М.: Медицина. 1996 г., стр.216).

Известен препарат реаферон, представляющий собой рекомбинантный альфа-интерферон, продуцируемый бактериальным штаммом псевдомонады, в генетический аппарат которой встроен ген человеческого лейкоцитарного альфа-интерферона. Препарат обладает противовирусной иммуномодулирующей и противоопухолевой активностью. Используют реаферон в изотоническом растворе натрия хлорида при вирусном конъюнктивите, кератоконъюнктивите, кератите в виде глазных капель по 2 капли 6-8 раз в день, затем 3-4 раза в течение 2-х недель. 1 ампулу разводят в 10 мл физиологического раствора. Разведенный препарат годен для употребления только сутки (М.Д.Машковский. Лекарственные средства. М.: Медицина. 1993 г., ч.2, стр.390-391).

Наиболее близким аналогом данного изобретения по предлагаемой сущности и достигаемому результату является противовирусное средство - глазные капли «Офтальмоферон», содержащие рекомбинантный интерферон, стабилизатор биологических, физико-химических свойств, выбранный из группы поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, производное метилцеллюлозы (Na КМЦ), стабилизатор устойчивости к микробной контаминации, выбранный из группы: нипагин, четвертичные аммонийные соединения, хлоргексидин, антиоксидант, димедрол, и буферную смесь, в качестве которой они содержат ацетатно-боратный или фосфатный буфер при следующем соотношении компонентов в 1 мл раствора (RU, 2140286, А61К 38/21, 1999 г.).

Однако накопленный в последние годы опыт клинического применения интерферонов свидетельствует о возможности повышения их эффективности применением соответствующих лекарственных форм (с учетом патогенетических особенностей конкретных заболеваний) с целью обеспечения противовирусного, иммуномодулирующего действия, при этом не проявляется ни цитостатический, ни другие побочные эффекты. Это обусловливает целесообразность разработки различных лекарственных форм глазных капель.

Задачей изобретения является создание глазных капель, обладающих повышенной противовирусной, иммуномодулирующей, антигистаминной, регенерирующей активностью, улучшенной проникающей способностью, пролонгированным действием, способствующих восстановлению прозрачной стромы роговицы при вирусных поражениях глаз.

Техническим результатом изобретения является повышение терапевтической эффективности заявленных глазных капель за счет их пролонгированного действия путем увеличения времени контакта препарата с роговицей глаза, обеспечивающего сокращение курса терапии и снижение осложнений по сравнению с прототипом.

Для достижения указанного технического результата глазные капли, содержащие рекомбинантный интерферон, стабилизатор биологических, физико-химических свойств, стабилизатор устойчивости к микробной контаминации, антиоксидант и буферную смесь, согласно изобретению содержат антигистаминные препараты, выбранные из группы: антазолин, азеластин, тетризолин, дифенгидрамина гидрохлорид, в качестве стабилизатора биологических, физико-химических свойств содержат выбранные из группы: поливинилпирролидон низкомолекулярный, макрогол 400-12000, пропиленгликоль, в качестве стабилизатора устойчивости к микробной контаминации содержат выбранные из группы: нипазол, кислота сорбиновая, кислота борная, кроме того содержат натрия хлорид и/или натрия ацетат при следующем соотношении компонентов в 1 мл раствора:

рекомбинантный интерферон, ME	500-10000000
антигистаминные препараты, г	0,0001-0,1
стабилизатор биологических, физико-химических свойств, г	0,0001-0,1
стабилизатор устойчивости к микробной контаминации, г	0,0001-0,1
антиоксидант, г	0,0001-0,1
натрия хлорид, г	0,0001-0,1
и/или
натрия ацетат, г	0,0001-0,1
буферная смесь, мл	остальное

Глазные капли в качестве антиоксиданта содержат трилон Б или бутилокситолуол в количестве 0,0001-0,1 г в 1 мл раствора.

Глазные капли содержат рекомбинантный интерферон, выбранный из группы: альфа-, бета-, гамма-интерферон.

Глазные капли в качестве буферной смеси содержат боратно-ацетатный, или фосфатный, или боратный буфер.

Сущность изобретения поясняется на следующих примерах.

Пример 1. Технология получения глазных капель "Офтальмоферон". Берут стабилизаторы: поливинилпироролидон низкомолекулярный, нипазол. Смешивают с антазолином. Добавляют Трилон Б, изотонический раствор хлорида натрия в фосфатном буфере с pH 6,8-7,6. Смешивают их, стерилизуют на фильтрах. Затем добавляют альфа-рекомбинантный интерферон, перемешивают. Готовый препарат разливают в необходимую емкость, герметизируют и маркируют. Указанные компоненты берут в следующем соотношении в 1 мл раствора:

	Вариант 1	Вариант 2	Вариант 3
Альфа-рекомбинантный интерферон, ME	500	10000	10000000
Поливинилпирролидон, г	0,0001	0,001	0,1
Нипазол, г	0,0001	0,001	0,1
Антазолин, г	0,0001	0,001	0,1
Трилон Б, г	0,0001	0,001	0,1
Натрия хлорид, г	0,0001	0,001	0,1
Фосфатный буфер, мл	Остальное

Пример 2. Осуществляют аналогично примеру 1 за исключением состава компонентов, которые берут в следующем соотношении на 1 мл раствора:

	Вариант 1	Вариант 2	Вариант 3
Бета-рекомбинантный интерферон, ME	500	1000	10000000
Макрогол 400, г	0,0001	0,001	0,1
Кислота сорбиновая, г	0,0001	0,001	0,1
Азеластин, г	0,0001	0,001	0,1
Бутилокситолуол, г	0,0001	0,001	0,1
Натрия ацетат, г	0,0001	0,001	0,1
Боратный буфер, мл	Остальное

Пример 3. Осуществляют аналогично примеру 1 за исключением состава компонентов, которые берут в следующем соотношении на 1 мл раствора:

	Вариант 1	Вариант 2	Вариант 3
Гамма-рекомбинантный интерферон, ME	500	100000	10000000
Макрогол 1200, г	0,0001	0,001	0,1
Кислота борная, г	0,0001	0,01	0,1
Тетризолин, г	0,0001	0,001	0,1
Трилон Б, г	0,0001	0,001	0,1
Натрия хлорид, г	0,00005	0,005	0,05
Натрия ацетат, г	0,00005	0,005	0,05
Боратно-ацетатный буфер, мл	Остальное

Пример 4. Осуществляют аналогично примеру 1 за исключением состава компонентов, которые берут в следующем соотношении на 1 мл раствора:

	Вариант 1	Вариант 2	Вариант 3
Альфа-рекомбинантный интерферон, ME	500	5000	10000000
Бета-рекомбинантный интерферон, ME	500	5000	10000000
Пропиленгликоль, г	0,0001	0,001	0,1
Нипазол, г	0,00005	0,0005	0,05
Кислота борная, г	0.00005	0,0005	0,05
Дифенгидрамина гидрохлорид, г	0,0001	0,001	0,1
Трилон Б, г	0,0001	0,001	0,1
Натрия хлорид, г	0,0001	0,001	0,1
Фосфатный буфер, мл	Остальное

Пример 5. Осуществляют аналогично примеру 1 за исключением состава компонентов, которые берут в следующем соотношении на 1 мл раствора:

	Вариант 1	Вариант 2	Вариант 3
Альфа-рекомбинантный интерферон, ME	500	10000	10000000
Гамма-рекомбинантный интерферон, ME	500	10000	10000000
Макрогол 400, г	0,00005	0,001	0,05
Макрогол 12000, г	0,00005	0,001	0,05
Кислота сорбиновая, г	0,0001	0,01	0,1
Азеластин, г	0,00005	0,001	0,05
Дифенгидрамина гидрохлорид, г	0,00005	0,001	0,05
Бутилокситолуол, г	0,0001	0,01	0,1
Натрия хлорид, г	0,0001	0,001	0,1
Боратный буфер, мл	Остальное

Полученные глазные капли "Офтальмоферон" имеют вид прозрачной жидкости.

У полученных составов контролировали ряд характеристик, отражающих доброкачественность и эффективность. Это значения pH, прозрачность, оптическое преломление, увлажняющее действие, поверхностное натяжение, динамическую вязкость, отсутствие раздражающего действия на роговицу глаза, а также длительность удерживания на роговице.

Значения pH разработанных составов глазных капель подвергались незначительному изменению и лежали в пределах 6,8-7,6.

Исследуемые растворы глазных капель на черном фоне в рассеянном свете не отличались от воды по прозрачности.

Измерение известными методами поверхностного натяжения составов глазных капель показало, что все составы обладают поверхностной активностью и, следовательно, хорошо растекаются по роговице.

Коэффициент преломления разработанных составов глазных капель невелик, не вызывает затуманивания взора и близок к слезной жидкости (1,334).

Время удерживания заявленных глазных капель на роговице определялось на группе кроликов. Результаты исследования показали в 2-3 раза большую пролонгирующую способность заявленных составов глазных капель за счет повышенного проникновения в ткани глаза, повышенного их обволакивающего действия, повышенной вязкости и повышенной избирательности относительно поверхности глаза по сравнению с прототипом.

Раздражающее и токсическое действие составов глазных капель исследовали на кроликах при введении их в конъюнктивальный мешок 5-8 раз в день по 1-2 капли в течение 2-х недель. В результате исследования не было обнаружено гиперемии, отеков или других изменений конъюнктивы. Не было зарегистрировано также случаев смерти животных или острого отравления.

На модели легкого неинфекционного воспаления конъюнктивы глаза сокращалось время лечения воспалительных поражений конъюнктивы глаза при применении заявленных глазных капель.

Эффективность глазных капель, изготовленных по представленным примерам, была исследована на 4 группах больных, по 5 человек в каждой, страдающих БСГ или сухого кератоконъюнктивита.

Первой группе больных (контрольной), с диагнозом - герпетический стромальный кератит одного глаза, проводили лечение по прототипу с одновременной антибактериальной терапией. Через 20 дней наблюдалось улучшение самочувствия больных. Глаз полностью успокоился. Восстановление прозрачности роговой оболочки на обоих глазах наступило через месяц после начала лечения.

Вторая группа больных. Диагноз: герпетический стромальный кератит обоих глаз. Назначено лечение заявленными глазными каплями, изготовленными по примеру 1, по 5 капель 6 раз в день в течение двух недель. Одновременно назначена инсталляция левомицетина. В результате лечения у больных на 2-й день отмечены признаки улучшения состояния: уменьшились слезотечение и светобоязнь. Через неделю глаз стал более спокойным, инфильтраты в строме роговицы уменьшились. Глаз полностью успокоился. К 16 дню после начала лечения наступило полное восстановление прозрачности роговой оболочки.

Третья группа больных. Диагноз: аденовирусный кератоконъюнктивит: резкая гиперемия и отек слизистой одного глаза. В роговице субэпителиальные точечные инфильтраты. Рецидивирующие эрозии роговицы глаз. Наряду с общепринятым лечением антибиотиками назначено лечение заявленными глазными каплями, изготовленными по примеру 2, по 5-8 капель 3-4 раза в день в течение двух недель. На четвертый день достигнут положительный эффект: уменьшилась гиперемия, исчез дискомфорт. Через две недели наступили полное рассасывание помутнения и полная эпителизация. При исследовании больных через 6 месяцев рецидивов эрозии роговицы глаз не отмечено.

Четвертая группа больных. Диагноз: аденовирусный кератоконъюнктивит. Назначена инсталляция левомицитина и заявленными глазными каплями по примеру 3. На 5 день отмечено заметное уменьшение светобоязни, рассасывание части субэпителиальных помутнений. На 14 день после начала лечения глаз полностью успокоился. Роговица стала полностью прозрачной.

Анализ результатов лечения предлагаемыми глазными каплями показал положительный терапевтический результат во 2, 3 и 4 группах больных, проявляющийся в отсутствии побочного действия и аллергических реакций на фоне применения заявленных глазных капель.

Выбор компонентов глазных капель и их количественных значений дал возможность получить новый технический результат - проявление хорошего противовоспалительного эффекта, предотвращение патологических изменений в эпителиальных клетках конъюнктивы и роговицы, которые могут привести к повреждению стромы роговицы и возникновению эрозий, язв, перфораций.

Таким образом, заявленные глазные капли обладают повышенной терапевтической эффективностью лечения вирусных инфекций глаз за счет пролонгирующего действия, способствующего сокращению сроков продолжительности заболевания и увеличению периода ремиссии до 6 месяцев в случаях хронических заболевания.

1. Глазные капли, содержащие рекомбинантный интерферон, стабилизатор биологических, физико-химических свойств, стабилизатор устойчивости к микробной контаминации, антиоксидант и буферную смесь, отличающиеся тем, что содержат антигистаминные препараты, выбранные из группы: антазолин, азеластин, тетризолин, дифенгидрамина гидрохлорид, в качестве стабилизатора биологических, физико-химических свойств содержит выбранные из группы: поливинилпирролидон низкомолекулярный, макрогол 400-12000, пропиленгликоль, в качестве стабилизатора устойчивости к микробной контаминации содержат выбранные из группы: нипазол, кислота сорбиновая, кислота борная, кроме того, содержат натрия хлорид и/или натрия ацетат при следующем соотношении компонентов в 1 мл раствора:

рекомбинантный интерферон, ME	500-10000000
антигистаминные препараты, г	0,0001-0,1
стабилизатор биологических, физико-химических свойств, г	0,0001-0,1
стабилизатор устойчивости к микробной контаминации, г	0,0001-0,1
антиоксидант, г	0,0001-0,1
натрия хлорид, г	0,0001-0,1
натрия ацетат, г	0,0001-0,1
буферная смесь, мл	остальное

2. Глазные капли по п.1, отличающиеся тем, что в качестве антиоксиданта содержат трилон Б и/или бутилокситолуол в количестве 0,0001-0,1 г в 1 мл раствора.

3. Глазные капли по п.1, отличающиеся тем, что содержат рекомбинантный интерферон, выбранный из группы: альфа-, бета-, гамма-интерферон.

4. Глазные капли по п.1, отличающиеся тем, что в качестве буферной смеси содержат боратно-ацетатный, или фосфатный, или боратный буфер.