Стабильная композиция (варианты), лекарственное средство (варианты) и способы лечения и профилактики кожных инфекций и инфекций кожных структур, вызванных бактериями, заболеваний, передающихся половым путем, и инфекций половых путей, вызванных бактериями, и инфекций носоглотки, вызванных бактериями, у человека или животного

Стабильная композиция (варианты), лекарственное средство (варианты) и способы лечения и профилактики кожных инфекций и инфекций кожных структур, вызванных бактериями, заболеваний, передающихся половым путем, и инфекций половых путей, вызванных бактериями, и инфекций носоглотки, вызванных бактериями, у человека или животного

Реферат

Область техники, к которой относится изобретение

В настоящем изобретении описаны композиции для местного применения, которые содержат дезфторхинолоновое соединение.

Уровень техники

Несмотря на успехи антимикробной терапии в течение последних 20 лет, возрастает доля инфекций, вызываемых грамположительными организмами с множественной лекарственной устойчивостью, которые являются основными патогенами в первично неосложненных кожных инфекциях и инфекциях кожных структур (импетиго, фолликулит, фурункулез, акне, вторично инфицированные травматические повреждения, вторично инфицированные дерматозы и вторично инфицированные ожоги). Недавно описано повышение уровня внебольничных инфекций метициллиноустойчивого Staphylococcus aureus (MRSA) и возникновение плазмидной устойчивости к мупироцину также среди MRSA. Озеноксацин представляет собой новое нефторированное хинолоновое соединение, которое продемонстрировало высокий уровень активности в отношении грамположительных организмов, включая распространенные устойчивые к хинолону бактерии. Озеноксацин, вследствие своего двунаправленного механизма действия, активен в отношении ряда устойчивых мутантных штаммов. Таким образом озеноксацин является хорошим потенциальным антибактериальным препаратом для преодоления существующих в настоящее время механизмов устойчивости к антибиотикам вследствие своей высокой активности в отношении устойчивых грамположительных бактерий.

Озеноксацин активен в отношении большого числа патогенов, таких как Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus, метициллиночувствительный Staphylococcus aureus (MSSA), метициллиноустойчивый Staphylococcus aureus (MRSA), включая штаммы, устойчивые к ципрофлоксацину, метициллиночувствительный Staphylococcus epidermidis (MSSE), метициллиноустойчивый Staphylococcus epidermidis (MRSE), Streptococcus pyogenes, стрептококки группы G, пенициллиноустойчивый Streptococcus pneumoniae, положительный по β-лактамазе Haemophilus influenzae, нетипируемые штаммы Haemophilus influenzae, положительная по β-лактамазе Moraxella catarrhalis, Neisseria meningitides, Legionella pneumophila, Mycoplasma pneumoniae, Legionella pneumophila, Mycobacterium tuberculosis, Streptococcus agalactiae группы В, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum, Helicobacter pylori, Bacteroides fragilis, Clostridium perfringens, Escherichia coli, хинолонустойчивая Escherichia coli, Salmonella spp., Shigella spp., ципрофлоксациночувствительный Pseudomonas aeruginosa, Clostridium difficile и Listeria monocytogenes.

Озеноксацин (I) впервые описан в патенте US6335447 и патентах-аналогах. Его химическое название 1-циклопропил-8-метил-7-[5-метил-6-(метиламино)-3-пиридинил]-4-оксо-1,4-дигидро-3-хинолинкарбоновая кислота. Его химическая формула представляет собой:

Местное применение антимикробных препаратов представляет собой эффективный инструмент для лечения кожных инфекций и инфекций кожных структур, заболеваний, передаваемых половым путем, и инфекций половых путей, а также ряда системных инфекций, чувствительных к местному лечению. Местная антимикробная терапия обладает некоторыми потенциальными преимуществами по сравнению с системной терапией. Во-первых, она может избежать необязательного воздействия кишечной флоры, которое может приводить к селекции на устойчивость. Во-вторых, ожидают, что высокая местная концентрация лекарственного препарата при местном применении и незначительное системное всасывание должны подавлять множество форм мутационной устойчивости. В-третьих, менее вероятно, что местное применение по сравнению с системным лечением вызывает побочные эффекты. Соответственно, некоторые местные композиции, содержащие озеноксацин, описаны в области техники.

JP2002356426A раскрывает мази и гели для кожи. Мазь, содержащая озеноксацина 1 мас.%, N-метил-2-пирролидона 8 мас.%, пропиленгликоля 14,9 мас.%, олеиновой кислоты 0,9 мас.%, диизопропаноламина 2,3 мас.%, полиэтиленгликоля 400 20,2 мас.%, полиэтиленгликоля 4000 50,2 мас.% и воды 3,2 мас.%, описана в примере 2.

JP2003226643A раскрывает водные растворы, содержащие озеноксацин, циклодекстрин и компонент, придающий вязкость.

ЕР1731138А1 раскрывает жидкую дисперсию тонких частиц, содержащую озеноксацин, которая предназначена для применения при изготовлении фармацевтических композиций.

WO2007015453A1 раскрывает лосьоны, содержащие озеноксацин.

JP2007119456A раскрывает водные суспензии, содержащие наночастицы и растворимые гранулы озеноксацина, предназначенные для применения при изготовлении фармацевтических композиций. Преимущественно упоминают глазные растворы.

Комбинированное использование озеноксацина, ионов магния и гидроксипропил-β-циклодекстрина, в частности, для глазного применения, описано в статье Yamakawa, Т. et al., Journal of Controlled Release (2003), 86(1), 101-103.

Полутвердые композиции для местного применения представляют собой эффективные альтернативы жидким композициям, поскольку ими легче манипулировать и в результате они предпочтительны для пациентов. Однако, несмотря на большое разнообразие компонентов, присутствующих в полутвердых композициях, раскрытых в области техники, не имеется никаких количественных исследований их стабильности. Таким образом, существует потребность в испытанных стабильных полутвердых композициях для местного применения, содержащих озеноксацин в качестве активного ингредиента, для которых удостоверены микробиологическая и терапевтическая активность, поскольку показана устойчивая и длительная фармацевтическая стабильность.

Раскрытие изобретения

Соответственно, объект настоящего изобретения относится к фармацевтическим стабильным полутвердым композициям для местного применения, содержащим от 0,2 до 5 мас.% композиции озеноксацина и носитель, подходящий для изготовления мази или крема. Предпочтительно, когда количество озеноксацина составляет от 0,5 мас.% до 2 мас.%, и более предпочтительно составляет 1 мас.%. В настоящем изобретении все проценты выражают в массовых процентах, пока не определено иначе.

Согласно настоящему изобретению, предусматривают мазь, в которой подходящий носитель выбран из белого воска, бесцветного мягкого парафина и их смесей. Бесцветный мягкий парафин является предпочтительным.

Согласно настоящему изобретению, предусматривают крем, в котором подходящий носитель содержит смесь эмульгаторов, поверхностно-активных веществ, восков с низкой температурой плавления, диспергирующихся в воде компонентов и консервантов, не выделяющих формальдегид.

Соответственно, настоящее изобретение предусматривает крем, содержащий

a) 0,2÷5 мас.% озеноксацина и

b) подходящий носитель, содержащий:

b.1) 15÷25 мас.% одного или более эмульгаторов;

b.2) 10÷20 мас.% одного или более поверхностно-активных

веществ;

b.3) 5÷15 мас.% масляного компонента;

b.4) 1÷10 мас.% одного или более восков с низкой температурой плавления, выбранных из жирных кислот с 8-30 атомами углерода, жирных спиртов с 8-30 атомами углерода сложных эфиров жирных кислот с 8-30 атомами углерода, амидов жирных кислот с 8-30 атомами углерода, силиконовых восков и их смесей;

b.5) воду;

b.6) 10÷20 мас.% одного или более диспергирующихся в воде компонентов, выбранных из полиэтиленгликоля 400, гексиленгликоля, пропиленгликоля, эфира метилглюкозы и полипропиленгликоля 10, этоксидигликоля, полиэтиленгликоль 6 глицерида каприловой/каприновой кислоты, монобутилового эфира этиленгликоля, полиэтиленгликоль 8 глицеридов каприловой/каприновой кислоты, 3-метокси-3-метил-1-бутанола, диметилизосорбида и их смесей и

b.7) 0,01÷1 мас.% одного или более консервантов, не образующих формальдегид;

причем количество компонента b.5 представляет собой количество, дополняющее композицию до 100 мас.%, и все проценты являются мас.% и основаны на общей массе композиции.

Согласно одному из вариантов осуществления, настоящее изобретение предусматривает крем, в котором носитель содержит:

18÷22 мас.% компонента b.1;

13÷15 мас.% компонента b.2;

7÷9 мас.% компонента b.3;

3÷5 мас.% компонента b.4;

компонент b.5;

13÷17 мас.% компонента b.6;

0,05÷0,15 мас.% компонента b.7;

причем количество компонента b.5 представляет собой количество, дополняющее композицию до 100 мас.%.

Согласно следующему варианту осуществления, настоящее изобретение предусматривает крем, в котором носитель содержит:

20 мас.% компонента b.1;

14 мас.% компонента b.2;

8 мас.% компонента b.3;

4 мас.% компонента b.4;

компонент b.5;

15 мас.% компонента b.6;

0.1 мас.% компонента b.7;

причем количество компонента b.5 представляет собой количество, дополняющее композицию до 100 мас.%.

Согласно следующему варианту осуществления количество воды в носителе составляет 30÷45 мас.%.

В настоящем изобретении эмульгаторы выбраны из этиленгликольмоностеарата, сорбиттристеарата, смеси ПЭГ6 стеарата, гликольстеарата и ПЭГ32 стеарата, а также гидрированного лецитина и их смесей, предпочтительно, когда эмульгаторы представляют собой смесь ПЭГ6 стеарата, гликольстеарата и ПЭГ32 стеарата.

В настоящем изобретении поверхностно-активные вещества выбраны из сорбитолеатмоноолеин/пропиленгликоля, моно- и диглицеридов C₈/C₁₀ жирных кислот из кокосового масла, соевого лецитина, яичных фосфатидов, сложных эфиров моноглицеридов и лимонной кислоты, сложных эфиров моноглицеридов и молочной кислоты, сложных эфиров моноглицеридов и диацетилвинной кислоты, сложных эфиров моноглицеридов и янтарной кислоты, сложных эфиров сахарозы и жирных кислот, полигликолизированных глицеридов олеиновых кислот, полигликолизированных глицеридов линоленовой кислоты, сложных полиглицериновых эфиров жирных кислот, включая жирные кислоты как с длинной, так и со средней цепью и сложных полиглицериловых эфиров смешанных жирных кислот и их смесей. Предпочтительно, когда поверхностно-активные вещества представляют собой полигликолизированные глицериды олеиновых кислот.

В настоящем изобретении масляные компоненты выбраны из спиртов Гербе с основой из жирных спиртов, содержащих 8-10 атомов углерода, сложных эфиров С_6-22 неразветвленных жирных кислот с неразветвленными или разветвленными С_6-22 жирными спиртами, сложных эфиров разветвленных С_6-13 карбоновых кислот с неразветвленными или разветвленными С_6-22 жирными спиртами, сложных эфиров неразветвленных С_6-22 жирных кислот с 2-этилгексанолом, сложных эфиров С_3-38 алкилгидроксикарбоновых кислот с неразветвленными или разветвленными С_6-22 жирными спиртами, сложных эфиров неразветвленных или разветвленных жирных кислот с полигидроспиртами или спиртами Гербе, триглицеридов на основе С_6-10 жирных кислот, жидких смесей моно-, ди- и триглицеридов на основе С_6-18 жирных кислот, сложных эфиров С_6-22 жирных спиртов или спиртов Гербе с бензойной кислотой, сложных эфиров С_2-12 дикарбоновых кислот с неразветвленными или разветвленными спиртами, содержащими 1-22 атома углерода, или полиолами, содержащими 2-10 атомов углерода и 2-6 гидроксильных групп, растительных масел, разветвленных первичных спиртов, замещенных циклогексанов, неразветвленных и разветвленных карбонатов С_6-22 жирных спиртов, карбонатов Гербе на основе жирных спиртов, содержащих 8-10 атомов углерода, сложных эфиров бензойной кислоты с неразветвленными или разветвленными С_6-22 спиртами, неразветвленными или разветвленными, симметричными или асимметричными диалкиловыми эфирами, содержащие 6-22 атома углерода на алкильную группу, открывающие цикл продукты сложных эфиров эпоксидированных жирных кислот с полиолами, силиконовых масел и алифатических или нафтеновых углеводов и их смесей. Предпочтительно, когда масляные компоненты представляют собой спирты Гербе на основе жирных спиртов, содержащих 8-10 атомов углерода, такие как 2-октилдодеканол (Eutanol^® G РН).

Поскольку они являются первичными, разветвленными и имеют высокую молекулярную массу, спирты Гербе обладают низкой потенциальной возможностью вызывать раздражение, представляют собой жидкость до чрезвычайно низких температур и имеют низкую летучесть, эффективны в качестве пережиренных компонентов и являются хорошими смазывающими веществами.

В настоящем изобретении воска с низкой температурой плавления выбраны из жирных кислот из 8-30 атомов углерода, жирных спиртов из 8-30 атомов углерода, сложных эфиров жирных кислот из 8-30 атомов углерода, амидов жирных кислот из 8-30 атомов углерода, силиконовых восков и их смесей.

Предпочтительно, когда воска с низкой температурой плавления являются жирными спиртами из 8-30 атомов углерода. Более предпочтительно, когда из жирных спиртов выбирают стеариловый спирт.

Вследствие характеристик, обусловливающих консистенцию, стеариловый спирт действует как удобный регулятор вязкости.

В настоящем изобретении диспергирующиеся в воде компоненты выбраны из полиэтиленгликоля 400, гексиленгликоля, пропиленгликоля, эфира метилглюкозы и полипропиленгликоля 10, этоксидигликоля, полиэтиленгликоль 6 глицерида каприловой/каприновой кислоты, монобутилового эфира этиленгликоля, полиэтиленгликоль 8 глицеридов каприловой/каприновой кислоты, 3-метокси-3-метил-1-бутанола, диметилизосорбида и их смесей. Предпочтительно, когда диспергирующийся в воде компонент представляет собой пропиленгликоль.

В настоящем изобретении консерванты, не образующие формальдегид, выбраны из бензоата аммония, пропионата аммония, бензизотиазолинона, бензойной кислоты, бензотриазола, бензилового спирта, бензилпарабена, 5-бром-5-нитро-1,3-диоксана, 2-бром-2-нитропропан-1,3-диола, бутилбензоата, бутилпарабена, бензоата кальция, парабена кальция, пропионата кальция, салицилата кальция, сорбата кальция, хлоргексидиндиацетата, хлоргексидиндиглюконата, хлоргексидиндигидрохлорида, хлорацетамида, хлорбутанола, п-хлор-м-крезола, хлорофена, п-хлорфенола, хлорфенезина, хлортимола, хлороксенола, м-крезола, о-крезола, п-крезола, дегидроуксусной кислоты, дибромпропамидин диизетионата, диметилоксазолидина, дитиометилбензамида, домефена, этилферулата, этилпарабена, феруловой кислоты, глиоксаля, гексамидина, гексамидиндипарабена, гексамидинпарабена, 4-гидроксибензойной кислоты, гидроксиметилдиоксоазабициклооктана, йодопропинилбутиларбамата, изобутилпарабена, изодецилпарабена, изопропилкрезолов, изопропилпарабена, изопропилсорбата, лаурилдиэтилендиаминоглицина HCl, бензоата магния, пропионата магния, метил-хлоризотиазолинона, метилпарабена, октилизотиазолинона, бензоат пантенилэтилового эфира, фенетилового спирта, фенола, феноксиэтанола, феноксиэтилпарабена, феноксиизопропанола, фенилбензоата, фенилпарабена, о-фенилфенола, полиметоксибициклического оксазолидина, бензоата калия, бутилпарабена калия, этилпарабена калия, метилпарабена калия, парабена калия, феноксида калия, пропионата калия, пропилпарабена калия,сорбата калия, пропионовой кислоты, пропилбензоата, пропилпарабена, кватерниума-8 (метил- и стеарилдиметиламиноэтилметакрилат, кватернизированный (переведенный в четвертичную форму) диметилсульфатом), кватерниума-14 (этанаминий, N,N,N-триметил-2-[(2-метил-1-оксо-2-пропенил)окси]-, метилсульфат, гомополимер), кватерниума-15 (этанаминий, N,N,N-триметил-2-[(2-метил-1-оксо-2-пропенил)окси]-хлорид, полимер с 2-пропенамидом), бензоата натрия, бутилпарабена натрия, натрий п-хлор-м-крезола, дегидроацетата натрия, этилпарабена натрия, формиата натрия, гидроксиметансульфоната натрия, гидроксиметилглицината натрия, изобутилпарабена натрия, изопропилпарабена натрия, лаурилдиэтилендиаминглицината натрия, метилпарабена натрия, парабена натрия, фенилсульфоната натрия, феноксида натрия, о-фенилфената натрия, пропионата натрия, пропилпарабена натрия, сорбата натрия, сорбиновой кислоты, ТЕА-сорбата (триэтаноламинсорбата), тионтола (2,7-диметил-тиантрена), триклокарбана, триклозана и ундециленоил ПЭГ5 парабена (сложного эфира ундециленовой кислоты и ПЭГ5 парабена) и их смесей. Предпочтительно, когда консервант, не образующий формальдегид, представляет собой бензойную кислоту.

Другим объектом настоящего изобретения является применение композиций, соответствующих настоящему изобретению, при лечении или предупреждении (профилактике) кожных инфекций и инфекций кожных структур у человека или животного. Соответственно, настоящее изобретение предусматривает использование мазей и кремов, соответствующих настоящему изобретению, при лечении или профилактике кожных инфекций и инфекций кожных структур, причем неограничивающими примерами данных кожных инфекций и инфекций кожных структур являются импетиго, фолликулит, фурункулез, акне, вторично инфицированные травматические повреждения, вторично инфицированные дерматозы и вторично инфицированные ожоги, а также те кожные инфекции и инфекции кожных структур, которые вызывают метициллиночувствительный Staphylococcus aureus (MSSA), метициллиноустойчивый Staphylococcus aureus (MRSA), включая штаммы, устойчивые к ципрофлоксацину, метициллиночувствительный Staphylococcus epidermidis (MSSE), метициллиноустойчивый Staphylococcus epidermidis (MRSE), Streptococcus pyogenes и стрептококки группы G.

Другим объектом настоящего изобретения является применение новых композиций при лечении или предупреждении заболеваний, передаваемых половым путем, и инфекции половых путей у человека или животного. Соответственно, настоящее изобретение предусматривает применение мазей и кремов, соответствующих настоящему изобретению, при лечении или профилактике заболеваний, передаваемых половым путем, и инфекции половых путей, таких как вызываемые Streptococcus agalactiae группы В, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum.

Другим объектом настоящего изобретения является применение новых композиций для борьбы с инфекциями носоглотки у бессимптомных назальных носителей у человека или животного. Соответственно, настоящее изобретение предусматривает применение мазей и кремов, соответствующих настоящему изобретению, для борьбы с инфекциями носоглотки у бессимптомных назальных носителей, причем инфекций, вызываемых метициллиночувствительным Staphylococcus aureus (MSSA), метициллиноустойчивым Staphylococcus aureus (MRSA), включая штаммы, устойчивые к ципрофлоксацину, пенициллиноустойчивым Streptococcus pneumoniae, положительным по β-лактамазе Haemophilus influenzae, нетипируемыми штаммами Haemophilus influenzae, положительной по β-лактамазе Moraxella catarrhalis, Neisseria meningitides, Legionella pneumophila, Mycoplasma pneumoniae, Legionella pneumophila и Mycobacterium tuberculosis.

Композиции, соответствующие настоящему изобретению, можно использовать путем непосредственного нанесения на пораженную или требующую защиты кожу или область половых органов. Кроме того, композиции можно использовать путем введения в полость носа, предпочтительно в носоглотку, в частности, переднюю часть носоглотки.

Кроме того, композиции, соответствующие настоящему изобретению, можно использовать для лечения кожных инфекций и инфекций кожных структур, заболеваний, передающихся половым путем, и инфекций половых путей, и для борьбы с инфекциями носоглотки у бессимптомных назальных носителей, когда данные инфекции устойчивы к обычным антибиотикам для местного применения, например, к мупироцину, фузидиевой кислоте, ретапамулину и хинолоновым соединениям, т.е. надифлоксацину.

Другим объектом настоящего изобретения является разработка новых способов лечения или предупреждения кожных инфекций и инфекций кожных структур у человека или животного, нуждающихся во введении композиций, соответствующих настоящему изобретению.

Другим объектом настоящего изобретения является разработка новых способов лечения или предупреждения заболеваний, передающихся половым путем, и инфекций половых путей у человека или животного, нуждающихся во введении композиций, соответствующих настоящему изобретению.

Другим объектом настоящего изобретения является разработка новых способов борьбы с инфекциями носоглотки у бессимптомных назальных носителей у человека или животного, нуждающихся во введении композиций, соответствующих настоящему изобретению.

Композиции, соответствующие изобретению, можно эффективно и безопасно использовать без клинически значимых дерматологических или системных вредных событий, поскольку всасывание кожей озеноксацина незначительно.

На протяжении описания и формулы изобретения слово "содержит" и варианты данного слова, например "содержащий", не предусматривают исключение других технических признаков, добавок, компонентов или стадий. Дополнительные объекты, преимущества и признаки изобретения будут очевидны компетентным специалистам в области техники на основании изучения описания или могут быть выяснены при практической реализации изобретения. Следующие примеры представлены в виде иллюстрации и не предназначены для ограничения настоящего изобретения.

Осуществление изобретения

Пример 1. Мазь, содержащая 1 мас.% озеноксацина

а) 100 г композиции

Озеноксацин	1 г
Бесцветный мягкий парафин	99 г

b) Изготовление

Бесцветный мягкий парафин (99 часть) растапливают до однородности при 70-75°С в реакторе соответствующего объема для изготовления партии, снабженном низкоскоростной мешалкой (якорная мешалка) и высокоскоростной мешалкой и системой нагревания и охлаждения. Парафин охлаждают до 50-55°С. Добавляют озеноксацин (1 часть) и диспергируют в парафине перемешиванием. Конечную дисперсию охлаждают до 25-30°С. Получают однородную бледно-желтую мазь с маслянистой основой. Конечную мазь упаковывают в алюминиевые тюбики объемом 20 мл при использовании автоматической системы.

c) Стабильность

Инертная природа носителя в виде жидкого парафина гарантирует, что мазь можно стабильно хранить в течение по меньшей мере 18 месяцев.

Пример 2. Крем, содержащий 1% озеноксацина

а) 100 г композиции

Озеноксацин	1 г (1 мас.%)
ПЭГ6 стеарат и гликольстеарат и ПЭГ32 стеарат (Tefose® 63)	20 г (20 мас.%)
Олеоилмакрогол-6-глицериды (Labrafil® М1944 CS)	14 г (14 мас.%)
2-октилдодеканол (Eutanol® G PH)	8 г (8 мас.%)
Стеариловый спирт (Lanette® 18)	4 г (4 мас.%)
Пропиленгликоль	15 г (15 мас.%)
Бензойная кислота	0,1 г (0.1 мас.%)
Дистиллированная вода	37,9 г (37.9 мас.%)

b) Изготовление

1. Пропиленгликоль (15 частей) и воду (37,9 частей) добавляют в реактор для полутвердых составов соответствующего объема.

2. Смесь нагревают при 70-75°С при низкоскоростном перемешивании.

3. Смесь Tefose^® 63 (20 частей), Labrafil^® М 1944 CS (14 частей), Lanette^® 18 (4 частей) и бензойной кислоты (0,1 часть) расплавляют при 70-75°С в стеклянном/алюминиевом стакане соответствующего объема при низкоскоростном перемешивании.

4. Конечную смесь, полученную на стадии 3 (органическая фаза), добавляют в реактор с полутвердым составом. Смесь перемешивают при низкой скорости с помощью якорной мешалки и при высокой скорости с помощью высокоскоростного смесителя со сдвигом в течение 5 минут.

5. Смесь Eutanol^® G РН (8 частей) и озеноксацина (1 часть) добавляют в стеклянный стакан соответствующего объема, снабженный соответствующей мешалкой. Смесь нагревают при 50-55°С при перемешивании.

6. Суспензию, полученную на стадии 5, добавляют к эмульсии, полученной на стадии 4, и перемешивают при низкой скорости с помощью якорной мешалки и при высокой скорости с помощью высокоскоростного смесителя со сдвигом в течение 20 минут.

7. Температуре полученного в результате крема дают опуститься до 25-30°С, прекращая нагревание. Проверяют однородность массы.

8. Конечный крем упаковывают в алюминиевые тюбики объемом 20 мл с крышкой из полиэтилена высокой плотности при использовании автоматической системы.

с) Стабильность

В таблицах 1-12 суммируют результаты исследований стабильности, проведенные с некоторыми опытными партиями.

Таблица 1
Объем загрузки: 600 г	Исходные данные	t=6 месяцев
Условия эксперимента:
25±2°С/60%±5% ОВ (1)
Внешний вид	Соответствует	Соответствует
Анализ активного ингредиента (мас.%; среднее)	100,91	100,61
Анализ примесей (мас.%)	Неизвестные примеси	н.о. (2)	н.о.
Общие примеси	н.о.	н.о.
Анализ продуктов разложения (мас.%)	н.о.	н.о.
Анализ бензойной кислоты (мас.%, среднее)	102,14	105,65
Размер частиц (D 90, микрон)	4,44	3,90
Вязкость (сП)	300406	212344
рН	3,97	3,99
(1) Относительная влажность; (2) Не определяют t - период

Таблица 2
Объем загрузки: 600 г	Исходные данные	t=6 месяцев
Условия эксперимента:
30±2°С/65%±5% ОВ
Внешний вид	Соответствует	Соответствует
Анализ активного ингредиента (мас.%; среднее)	100,91	100,96
Анализ примесей (мас.%)	Неизвестные примеси	н.о.	н.о.
Общие примеси	н.о.	н.о.
Анализ продуктов разложения (мас.%)	н.о.	н.о.
Анализ бензойной кислоты (мас.%, среднее)	102,14	108,76
Размер частиц (D 90, микрон)	4,44	5,46
Вязкость (сП)	300406	304312
pН	3,97	3,89

Таблица 3
Объем загрузки: 600 г	Исходные данные	t=1 месяц	t=3 месяца	t=6 месяцев
Условия эксперимента:
40±2°С/75%±5% ОВ
Внешний вид	Соответствует	Соответствует	Соответствует	Соответствует
Анализ активного ингредиента (мас.%; среднее)	100,91	99,14	100,85	99,73
Анализ примесей (мас.%)	Неизвестные примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Общие примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Анализ продуктов разложения (мас.%)	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Анализ бензойной кислоты (мас.%, среднее)	102,14	100,12	102,65	108,75
Размер частиц (D 90, микрон)	4,44	5,30	5,97	9,64
Вязкость (сП)	300406	360031	280969	398719
рН	3,97	3,91	4,10	3,89

Таблица 4
Объем загрузки: 600 г	Исходные данные	t=6 месяцев
Условия эксперимента:
25±2°С/60%±5% ОВ
Внешний вид	Соответствует	Соответствует
Анализ активного ингредиента (мас.%; среднее)	101,33	100,81
Анализ примесей (мас.%)	Неизвестные примеси	н.о.	н.о.
Общие примеси	н.о.	н.о.
Анализ продуктов разложения (мас.%)	н.о.	н.о.
Анализ бензойной кислоты (мас.%, среднее)	103,85	109.0
Размер частиц (D 90, микрон)	4,18	3,88
Вязкость (сП)	498375	395062
рН	4,04	4,18

Таблица 5
Объем загрузки: 600 г	Исходные данные	t=6 месяцев
Условия эксперимента:
30±2°С/65%±5% ОВ
Внешний вид	Соответствует	Соответствует
Анализ активного ингредиента (мас.%; среднее)	101,33	100,41
Анализ примесей (мас.%)	Неизвестные примеси	н.о.	н.о.
Общие примеси	н.о.	н.о.

Объем загрузки: 600 г	Исходные данные	t=6 месяцев
Условия эксперимента:
30±2°С/65%±5% ОВ
Анализ продуктов разложения (мас.%)	н.о.	н.о.
Анализ бензойной кислоты (мас.%, среднее)	103,85	110,03
Размер частиц (D 90, микрон)	4,18	5,01
Вязкость (сП)	498375	198156
рН	4,04	4,22

Таблица 6
Объем загрузки: 600 г	Исходные данные	t=1 месяц	t=3 месяца	t=6 месяцев
Условия эксперимента:
40±2°С/75%±5% ОВ
Внешний вид	Соответствует	Соответствует	Соответствует	Соответствует
Анализ активного ингредиента (мас.%; среднее)	101,33	99,82	101,22	100,56
Анализ примесей (мас.%)	Неизвестные примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Общие примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Анализ продуктов разложения (мас.%)	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Анализ бензойной кислоты (мас.%, среднее)	103,85	103,22	107,47	111,47
Размер частиц (D90, микрон)	4,18	4,93	6,0	7,86
Вязкость (сП)	498375	555500	324719	506062
рН	4,04	3,93	3,93	4,06

Таблица 7
Объем загрузки: 8 кг	Исходные данные	t=3 месяца	t=6 месяцев	t=12 месяцев
Условия эксперимента:
25±2°С/60%±5% ОВ
Внешний вид	Соответствует	Соответствует	Соответствует	Соответствует
Анализ активного ингредиента (мас.%; среднее)	102,16	103,38	101,79	99,98
Анализ примесей (мас.%)	Неизвестные примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Общие примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Анализ продуктов разложения (мас.%)	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Анализ бензойной кислоты (мас.%, среднее)	100,59	100,20	103,71	102,54
Размер частиц (D 90, микрон)	5,85	6,02	3,64	2,89
Вязкость (сП)	400234	209531	320094	384188
рН	4,18	4,42	4,21	4,05

Таблица 8
Объем загрузки: 8 кг	Исходные данные	t=1 месяц	t=3 месяца	t=6 месяцев	t=12 месяцев
Условия эксперимента:
30±2°С/65%±5% ОВ
Внешний вид	Соответствует	Соответствует	Соответствует	Соответствует	Соответствует
Анализ активного ингредиента (мас.%; среднее)	102,16	101,67	103,12	102,92	98,98
Анализ примесей (мас.%)	Неизвестные примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Общие примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.

Объем загрузки: 8 кг	Исходные данные	t=1 месяц	t=3 месяца	t=6 месяцев	t=12 месяцев
Условия эксперимента:
30±2°С/65%±5% ОВ
Анализ продуктов разложения (мас.%)	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Анализ бензойной кислоты (мас.%, среднее)	100,59	99,70	101,38	105,21	103,26
Размер частиц (D 90, микрон)	5,85	5,5	5,03	3,68	3,79
Вязкость (сП)	400234	350875	224031	334219	338812
рН	4,18	3,95	4,05	3,95	4,04

Таблица 9
Объем загрузки: 8 кг	Исходные данные	t=1 месяц	t=3 месяца	t=6 месяцев
Условия эксперимента:
40±2°С/75%±5% ОВ
Внешний вид	Соответствует	Соответствует	Соответствует	Соответствует
Анализ активного ингредиента (мас.%; среднее)	102,16	100,17	102,89	102,43
Анализ примесей (мас.%)	Неизвестные примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Общие примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Анализ продуктов разложения (мас.%)	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Анализ бензойной кислоты (мас.%, среднее)	100,59	103,35	102,28	103,21
Размер частиц (D 90, микрон)	5,5	8,27	5,96	3,56
Вязкость (сП)	400234	439250	308437	3285,62
рН	4,18	3,97	3,99	3,83

Таблица 10
Объем загрузки: 8 кг	Исходные данные	t=3 месяца	t=6 месяцев	t=12 месяцев
Условия эксперимента:
25±2°С/60%±5% ОВ
Внешний вид	Соответствует	Соответствует	Соответствует	Соответствует
Анализ активного ингредиента (мас.%; среднее)	99,70	102,59	100,45	99,30
Анализ примесей (мас.%)	Неизвестные примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Общие примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Анализ продуктов разложения (мас.%)	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Анализ бензойной кислоты (мас.%, среднее)	102,72	101,14	103,71	103,06
Размер частиц (D 90, микрон)	4,68	5,96	2,97	2,41
Вязкость (сП)	309312	264656	247500	317875
рН	4,30	4,38	3,89	4,29

Таблица 11
Объем загрузки: 8 кг	Исходные данные	t=1 месяц	t=3 месяца	t=6 месяцев	t=12 месяцев
Условия эксперимента:
30±2°С/65%±5% ОВ
Внешний вид	Соответствует	Соответствует	Соответствует	Соответствует	Соответствует
Анализ активного ингредиента (мас.%; среднее)	99,70	100,65	102,37	100,90	99,54
Анализ примесей (мас.%)	Неизвестные примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Общие примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.

Объем загрузки: 8 кг	Исходные данные	t=1 месяц	t=3 месяца	t=6 месяцев	t=12 месяцев
Условия эксперимента:
30±2°С/65%±5% ОВ
Анализ продуктов разложения (мас.%)	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Анализ бензойной кислоты (мас.%, среднее)	102,72	102,0	102,11	104,11	103,78
Размер частиц (D 90, микрон)	4,68	6,46	5,30	4,61	4,02
Вязкость (сП)	309312	321250	257843	304437	340750
рН	4,30	3,98	4,10	3,89	4,02

Таблица 12
Объем загрузки: 8 кг	Исходные данные	t=1 месяц	t=3 месяца	t=6 месяцев
Условия эксперимента:
40±2°С/75%±5% ОВ
Внешний вид	Соответствует	Соответствует	Соответствует	Соответствует
Анализ активного ингредиента (мас.%; среднее)	99,70	100,68	102,94	101,58
Анализ примесей (мас.%)	Неизвестные примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Общие примеси	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Анализ продуктов разложения (мас.%)	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.
Анализ бензойной кислоты (мас.%, среднее)	102,72	102,98	103,09	104,75
Размер частиц (D 90, микрон)	5,68	6,67	4,82	3,86
Вязкость (сП)	309312	400937	303625	310844
рН	4,30	3,97	4,02	3,86

Пример 3. Антибактериальная активность мази, содержащей 1 мас.% озеноксацина

а) Ход эксперимента

Антибактериальную активность оценивают на модели инфекции, состоящей из кожной раны, инфицированной Staphylococcus aureus (АТСС 6538), у мышей после местного нанесения мази, соответствующей Примеру 1.

Самцов мышей CD-1 (45 животных) массой тела 22-27 г в начале лечения помещают в стандартные лабораторные условия (температура 22±1°С и относительная влажность 65±10%; 12-часовое освещение (7:00-19:00/12 - часовой темновой цикл).

Для того чтобы инфицировать шовные нити, их погружают на 30 минут в суточный бульон S. aureus в концентрации 108 КОЕ (колониеобразующие единицы)/мл, предварительно подведенный в соответствии с данными спектрофотометрии.

Нити вынимают и оставляют сушиться на фильтровальной бумаге. Из каждой шовной нити вырезают два отрезка длиной 1 см, и каждый отрезок взбалтывают в пробирке с 1 мл 0,2 мас.% дрожжевого экстракта. Делают разведения данных бульонов и переносят в двух повторностях и параллельно на агар с дефицитом цистина-лактозы-электролитов (CLED) для определения концентрации на шовных нитях. Остаток шовной нити хранят в холодильнике до использования.

За день до начала эксперимента животных бреют и проводят удаление шерсти с использованием коммерческого крема-депилатория.

Мышей случайным образом распределяют по трем группам, состоящим из 15 животных. Группы кодируют, чтобы обеспечить лечение вслепую, согласно Таблице 13.

Таблица 13

К