Гемостатическая композиция, включающая гиалуроновую кислоту

Изобретение относится к медицине. Описана гемостатическая композиция, включающая биологически поглощаемый материал и гиалуроновую кислоту или ее производное. Описаны способы получения таких композиций и описаны применения указанных композиций. В частности, способ получения указанной гемостатической композиции включает обработку ее сухим жаром при температуре от 110 до 200°C. Композиции проявляют улучшенные гемостатические свойства. 8 н. и 60 з.п. ф-лы, 1 табл., 8 пр.

Реферат

Область, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к гемостатической композиции, включающей биологически поглощаемый материал, предпочтительно желатин и гиалуроновую кислоту или ее производное. Описанные гемостатические композиции имеют лучшие гемостатические свойства по сравнению с обычными композициями.

Описание предшествующего уровня техники

Когда кровеносные сосуды повреждены физическими травмами, включая хирургические вмешательства, возникают кровотечения. Кровотечения, в зависимости от степени повреждения, могут привести к потерям крови, которые могут воздействовать на нормальную функцию индивидуума, или, в случаях кровотечений, возникающих в костных, не расширяемых полостях, накопление излившейся из сосудов крови может вызвать повреждения мягких тканей вследствие повышенного давления. Если кровотечения не остановить, то они в конечном счете прекратятся происходящим в норме физиологическим процессом, характеризуемым цепью явлений, включающих комбинированную активность сосудистых, тромбоцитарных и плазматических факторов. Этот процесс именуется физиологическим гемостазом, важным элементом которого является свертывание крови, которое описано ниже. В случае небольшого поверхностного кровотечения, этот физиологический гемостаз адекватен для остановки кровотечения.

Свертывание крови можно описать как происходящее в несколько стадий.

(1) Образование активатора протромбина, который является предшественником тромбина плазматической серинпротеазы. Активатор протромбина представляет собой комплекс ферментного фактора Ха и двух факторов: фактора Va и прокоагулянтных фосфолипидов, обоих присутствующих на поверхности активированных тромбоцитов. Кроме того, для функции активатора необходимо присутствие ионов кальция.

(2) Расщепление протромбина указанной выше системой активатора на 2 фрагмента, один из которых представляет собой фермент тромбин.

(3) Превращение тромбином плазматического предшественника фибриногена в вещество свертывания фибрин. Этот процесс включает несколько стадий, первая из которых включает расщепление мелких пептидов из фибриногена, посредством чего образуются мономеры фибрина, которые затем полимеризуются для образования нерастворимых полимеров фибрина. В качестве конечной стадии, тромбин активирует фактор XIII плазмы, фермента, который катализирует образование ковалентных связей между молекулами фибрина, посредством этого поперечно сшивая молекулы, для образования крепкого сгустка, устойчивого к растворению.

На указанной выше стадии (1), ведущей к образованию системы активатора протромбина, несколько плазменных протеаз участвуют в каскаде протеолитических явлений. Эти факторы свертывания крови в настоящее время обозначаются использованием римских цифр, например, фактор VII, фактор VIII, фактор IX, фактор XI и фактор XII. Каскад включает последовательные протеолитические активации следующего фермента в каскаде. Таким образом, активированные факторы свертывания крови обозначаются их римскими цифрами с последующим «а», например, фактор VIIa, фактор VIIIa, фактор XIIIa или фактор IXa.

Однако кровотечения, возникающие в результате более обширных повреждений, особенно таких повреждений, которые включают более крупные артерии, или когда длительная утечка крови происходит из более крупных слизистых поверхностей или в полостях без дренирования, требуют принятия хирургических и/или терапевтических гемостатических мер. Хирургическая остановка кровотечения включает перевязку или сшивание разорванных кровеносных сосудов, тампонирование использованием тампонов в полостях, коагулирование поверхностей тканей, включая их обнаженные разорванные кровеносные сосуды, нагретыми инструментами или применением прижигающих средств или нагретого воздуха. Хирургическому гемостазу может также содействовать наложение на поврежденный участок блоков, пластин или пленок биологически поглощаемых гемостатических губок соответствующего размера. Использовались также порошки или хлопья, которые обычно смачиваются перед наложением, для создания пасты.

В этом контексте, под термином «губка» подразумевается пористая структура, характеризуемая тем, что структура является сетчатой и имеет внутреннюю поверхность, которая значительно больше, чем ее наружная поверхность, тем, что она содержит полые пространства внутри сетчатой структуры, и тем, что она может поглощать жидкости, масса которых во много раз превышает ее собственную массу.

Такие гемостатические губки или композиции можно использовать для усиления остановки кровотечений в некоторых случаях хирургических вмешательств или других повреждений, таких как при операциях на крупных органах брюшной полости (печени, селезенке или кишечнике); при операциях на легких; в нейрохирургии для предотвращения вызванных сдавливанием повреждений мозговых или нервных тканей; в ортопедической хирургии, во время которых часто возникают обширные кровотечения, которые трудно остановить другими средствами; в сосудистой хирургии для остановки утечки крови из участков наложения швов; при операциях в ротовой полости или в стоматологической хирургии, такой как удаление зубов; и при носовом кровотечении (эпистаксисе).

В настоящее время считается, что гемостатический эффект (или тип действия) губки связан с пористостью губки и способностью губки поглощать кровь. Обычная желатиновая губка сцепляется с участком кровотечения и поглощает количество крови, приблизительно в 45 раз превышающее ее собственную массу. Благодаря равномерной пористости обычной желатиновой губки захватываются тромбоциты, и активируется каскад свертывания, трансформирующий растворимый фибриноген в сеть нерастворимого фибрина, которая останавливает кровотечение. Таким образом, считается, что высокая поглощающая способность существенна для способа действия обычных желатиновых губок.

Как указано выше, способность обычной желатиновой губки действовать в качестве кровоостанавливающего средства связана с ее способностью к поглощению, в результате чего неизбежно увеличится объем губки. Однако набухание губки может привести к неблагоприятным явлениям, если губка не используется в соответствии с инструкциями. Обычно, инструкция по применению включает фразу: «При помещении в полости или замкнутые тканевые пространства рекомендуется минимальное предварительное сдавливание и следует принять предосторожности во избежание избыточного уплотнения. Желатиновая губка может набухать до ее первоначального размера после поглощения жидкостей, создавая возможность повреждения нервов». Тем не менее, в прошлом происходили неблагоприятные явления, и Агентство Медицинских Устройств Великобритании, а также FDA (Федеральная Администрация Пищевых Продуктов и Лекарственных Средств США) уделяли большое внимание этому недостатку обычных губок.

Соответственно, существует потребность в гемостатических губках, которые, сохраняя достаточный кровоостанавливающий (гемостатический) эффект, набухают в гораздо меньшей степени, чем обычные гемостатические губки. Очевидно, что такие губки составили бы более безопасный продукт.

Настоящее изобретение относится к гемостатическим композициям с улучшенными свойствами и к способам получения указанных композиций.

Изобретатели с удивлением обнаружили, что гемостатические композиции по настоящему изобретению более эффективны при остановке кровотечения, чем обычные композиции, такие как Surgifoam®, порошок Surgifoam® или порошок Gelfoam®, т.е. гемостатические свойства композиций в соответствии с изобретением улучшены по сравнению с обычными композициями.

Кроме того, заявители решили указанную выше проблему набухания включением гиалуроновой кислоты (НА) или ее производного в гемостатическую композицию или нанесением их на нее.

К удивлению, было обнаружено, что набухание гемостатической губки в соответствии с настоящим изобретением значительно уменьшается, по сравнению с обычными губками, такими как Surgifoam®. Очевидно, что описанные гемостатические губки безопаснее в использовании, чем обычные губки.

Указанные выше свойства, т.е. уменьшенная тенденция к набуханию и улучшенные гемостатические свойства, связаны с присутствием НА или ее производного. Известно, что НА и ее производные придают губкам антиадгезивные свойства, как описано, например, в документах Laurent et al. Am J Otolaryngol; 7: 181-186, 1986; Патент США 6548081; Патент США 6099952; Патент США 5503848; Патент США 5700476; EP 1022031 A1; WO 94/17840). Тем не менее, удивительные эффекты придания композиции улучшенных гемостатических свойств и снижения способности губки набухать не были описаны ни в одном из указанных выше документов предшествующего уровня техники.

Гемостатические композиции и, в частности, гемостатическая губка по настоящему изобретению имеют многочисленные преимущества по сравнению с обычными и имеющимися в продаже гемостатическими композициями и губками:

i) уменьшенное набухание, делающее посредством этого более безопасным использование губки,

ii) улучшенные гемостатические свойства, и

iii) улучшенные антиадгезивные свойства, снижающие посредством этого послеоперационное сцепление с тканями.

Краткое описание сущности изобретения

В первом аспекте, настоящее изобретение относится к гемостатической губке, включающей биологически поглощаемый материал и гиалуроновую кислоту (НА) или ее производное.

Во втором аспекте, настоящее изобретение относится к способу получения гемостатической композиции, включающему стадии:

i) смешивания биологически поглощаемого материала, гиалуроновой кислоты или ее производного и растворителя;

ii) обработки смеси, полученной на стадии i), сухим жаром при температуре от 110 до 200°С.

В третьем аспекте, настоящее изобретение относится к композиции, которую можно получить указанным выше способом.

Другие аспекты настоящего изобретения относятся к способам получения гемостатических композиций, а также к способам их медицинского применения. Эти и другие аспекты будут очевидны из приведенного ниже описания и прилагаемой формулы изобретения.

Детальное описание изобретения

Общий эффект гемостатических композиций представляет собой усиление процесса физиологического свертывания крови, посредством чего уменьшается время, проходящее от момента открытия кровеносных сосудов до образования прочного кровяного сгустка. Этот период в целом именуется «время до гемостаза». В этом контексте, термин «гемостатический» следует понимать как обозначающий эффект объекта или средства, который уменьшает время до гемостаза, посредством этого содействуя гемостазу.

Как указано выше, настоящее изобретение в его в самом широком аспекте направлено на гемостатическую композицию, включающую биологически поглощаемый материал и гиалуроновую кислоту (НА) или ее производное.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к гемостатической композиции, которую можно получить способом получения гемостатической композиции, включающим стадии:

i) смешивания биологически поглощаемого материала и гиалуроновой кислоты или его производного и растворителя;

ii) обработки смеси, полученной на стадии i), сухим жаром при температуре от 110 до 200°С.

Особенности этого способа могут представлять собой, как описано ниже.

В определенном варианте осуществления настоящего изобретения, указанная композиция может быть в форме губки, т.е. гемостатическая композиция может представлять собой губку, где под термином «губка» подразумевается пористая структура, отличающаяся тем, что структура является сетчатой и имеет внутреннюю поверхность, которая значительно больше, чем наружная поверхность, то есть она содержит полые пространства внутри сетчатой структуры, и что она может поглощать жидкости, масса которых во много раз превышает ее собственную массу.

Биологически поглощаемый материал может представлять собой любой материал, который, как известно, подходит для получения губок, порошков или хлопьев, в то же самое время являясь биологически поглощаемым. Примеры подходящих биологически поглощаемых материалов включают желатин, коллаген, хитин, хитозан, альгинат, целлюлозу, например, окисленную целлюлозу, окисленную регенерированную целлюлозу, карбоксиметилцеллюлозу (СМС) или гидроксиэтилцеллюлозу (НЕС), полигликолевую кислоту, полиуксусную кислоту, их производные и их смеси. Следует понимать, что их различные формы, такие как линейные или поперечно сшитые формы, соли, сложные эфиры и им подобные, можно также использовать в качестве биологически поглощаемого материала, подлежащего включению в гемостатические губки по изобретению. В одном варианте осуществления биологически поглощаемый материал может быть твердым, где термин «твердый» относится к термодинамической фазе соединения.

«Биологически поглощаемый» представляет собой термин, который в настоящем контексте используется для описания того, что материалы, из которых изготовлены указанные гемостатические композиции, могут разлагаться в организме на более мелкие молекулы, имеющие размер, который позволяет им переноситься в поток крови. Путем указанного разложения и поглощения, указанные губчатые материалы постепенно будут удалены из участка применения. Например, желатин может разлагаться протеолитическими тканевыми ферментами до поглощаемых более мелких молекул, посредством чего желатиновая губка при наложении на ткани обычно поглощается в пределах примерно 3-6 недель, а при наложении на кровоточащие поверхности и слизистые оболочки обычно в пределах 3-5 дней.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения, биологически поглощаемый материал представляет собой желатин. Желатин предпочтителен, поскольку желатин является высоко биологически поглощаемым. Кроме того, желатин является высоко биологически совместимым, означая, что он нетоксичен для животного, такого как человек, когда или если он попадает в поток крови или находится в длительном контакте с тканями человека.

Желатин обычно происходит из свиного сырья, но может происходить из другого животного сырья, например, из коровьего и рыбного сырья. Желатин можно также изготовить синтетически, т.е. получить рекомбинантными средствами. В интересном варианте осуществления, желатин получают денатурацией коллагена. Желатин обычно получают таким путем - денатурацией коллагена химической обработкой кислотами, растворителями, альдегидами, мочевиной или детергентами, такими как додецилсульфат натрия и гуанидин гидрохлорид. С помощью указанной выше процедуры денатурации, модифицируются характеристики коллагена, приводя посредством этого к увеличению растворимости в воде.

Кроме того, желатин может быть стабилизирован, что считается предпочтительным в отношении использования губки в качестве гемостатического средства, причем механическая прочность структуры значительно увеличивается по сравнению со структурой нестабилизированного желатина, который, становясь увлажненным, растворится и, вследствие этого, спадется. Напротив, стабилизированная желатиновая губка сохранит свою структуру в течение значительного периода времени после наложения на кровоточащий участок. Способы стабилизации таких губок включают обработку химическим поперечно сшивающим агентом или сухим жаром, как описано в последующих абзацах.

Даже хотя желатин, в частности, полученный денатурацией коллагена, как определено выше, представляет особенно подходящий вариант осуществления настоящего изобретения, следует понимать, что могут также использоваться другие биологически разлагаемые материалы, используемые в настоящее время для гемостатических целей, такие как коллаген, хитин, хитозан, альгинат, целлюлоза, например, окисленная целлюлоза, регенерированная окисленная целлюлоза, карбоксиметилцеллюлоза (СМС) или гидроксиэтилцеллюлоза (НЕС), полигликолевая кислота, полимолочная кислота, их производные и их смеси, причем указанные материалы представлены в их нативной форме или структурно модифицированные, и это не считается отходом от сущности и объема настоящего изобретения.

Как указано ранее, преимущественные свойства гемостатических губок по настоящему изобретению связаны с присутствием в губке НА или ее производных. Другое присущее преимущество НА или ее производного представляет собой превосходные свойства способности биологического поглощения и биологической совместимости молекулы.

НА представляет собой естественный гетерополисахарид, состоящий из чередующихся остатков D-глюкуроновой кислоты и N-ацетил-D-глюкозамина. Она представляет собой линейный полимер, имеющий молекулярную массу в диапазоне от примерно 50 до примерно 13000 кДа, в зависимости от источника, из которого она получена, и от способа получения. НА присутствует в природе в околоклеточных гелях, в основном веществе соединительной ткани в организмах позвоночных (из которых - это один из основных компонентов), в синовиальной жидкости суставов, в водяной влаге и в пупочном кантике. НА играет важную роль в биологическом организме в качестве механической опоры для клеток многих тканей, таких как кожа, сухожилия, мышцы и хрящ. Это основной компонент внеклеточной матрицы, но она имеет другие функции, такие как гидратация тканей, смазка, а также миграция и дифференциация клеток. Подходящая молекулярная масса в описанных здесь целях будет в диапазоне от 50 до 5000 кДа, например, в диапазоне от 50 до 4000 кДа, например, в диапазоне от 100 до 3000 кДа. В определенном предпочтительном варианте осуществления изобретения, НА или его производное имеет молекулярную массу в диапазоне от 250 до 3500 кДа, предпочтительнее, в диапазоне от 500 до 2500 кДа, например, в диапазоне от 500 до 2000 кДа.

Необязательно, молекула НА может быть поперечно сшитой, например, химическими или физическими средствами. В предпочтительном варианте осуществления изобретения, используемая НА имеет нейтральный рН, т.е. водный раствор используемой НА проявляет величину рН в диапазоне от 5 до 9, предпочтительно, в диапазоне от 6 до 8, в частности, в диапазоне от 6,5 до 7,5, например, примерно 7. НА, используемую в настоящем изобретении, можно экстрагировать из любого источника, например, из петушиного гребешка. Альтернативно, НА можно получить ферментацией.

Производные НА включают, например, сложные эфиры НА, а также производные, описанные в Патенте США 5356883; Патенте США 6548081; Патенте США 4851521; Патенте США 6027741; Патенте США 2003 181689; EP 1095064; EP 0341745; WO 02/18450 и WO 2004/035629), кроме того, термин «производное» также предназначен для охвата гиалуроната, включая, но не ограничиваясь, гиалуронат натрия, гиалуронат калия, гиалуронат магния и гиалуронат кальция.

Определенные примеры производных НА включают следующие производные НА:

НА, осоленную органическими и/или неорганическими основаниями,

Hyaff®, т.е. сложные эфиры НА со спиртами алифатического, аралифатического, циклоалифатического, ароматического, циклического и гетероциклического ряда со степенью эстерификации, которая может варьироваться в зависимости от типа и длины используемого спирта,

Hyadd®, т.е. амиды НА с аминами алифатического, аралифатического, циклоалифатичесого, ароматического, циклического и гетероциклического ряда со степенью амидирования, которая может варьироваться в зависимости от типа и длины используемого амина,

Hyoxx®, т.е. перкарбоксилированные производные НА, полученные окислением первичной гидроксильной группы N-ацетил-D-глюкозаминового элемента,

Деацетилаты НА, т.е. полученные в результате деацетилирования группы N-ацетил-D-глюкозаминового элемента, и

О-сульфатированные производные НА.

Гемостатическая композиция по настоящему изобретению может, в частности, содержать, по меньшей мере, 0,5% (масс./масс.) НА или его производного, рассчитанное на основании общей массы «безводной» композиции, или, по меньшей мере, 1% (масс./масс.) НА или его производного, или, по меньшей мере, 2% (масс./масс.) НА или его производного, или, по меньшей мере, 3% (масс./масс.) НА или его производного, или, по меньшей мере, 5% (масс./масс.) НА или его производного, или, по меньшей мере, 7% (масс./масс.) НА или его производного, или, по меньшей мере, 8% (масс./масс.) НА или его производного, или, по меньшей мере, 10% (масс./масс.) НА или его производного. В интересном варианте осуществления изобретения, гемостатическая композиция по изобретению включает, по меньшей мере, 15% (масс./масс.) НА или его производного, например, по меньшей мере, 20% (масс./масс.) НА или его производного, например, по меньшей мере, 25% (масс./масс.) НА или его производного, предпочтительно, по меньшей мере, 30% (масс./масс.) НА или его производного, например, по меньшей мере, 35% (масс./масс.) НА или его производного, например, по меньшей мере, 40% (масс./масс.) НА или его производного.

Аналогичным образом, гемостатическая композиция по настоящему изобретению обычно включает не больше, чем 99,5% (масс./масс.) указанного биологически поглощаемого материала, например, не больше, чем 99% (масс./масс.) указанного биологически поглощаемого материала или не больше, чем 95% (масс./масс.) указанного биологически поглощаемого материала, или не больше, чем 90% (масс./масс.) указанного биологически поглощаемого материала, или не больше, чем 85% (масс./масс.) указанного биологически поглощаемого материала, например, не больше, чем 80% (масс./масс.) указанного биологически поглощаемого материала, например, не больше, чем 75% (масс./масс.) указанного биологически поглощаемого материала, предпочтительно, не больше, чем 70% (масс./масс.) указанного биологически поглощаемого материала, например, не больше, чем 65% (масс./масс.) указанного биологически поглощаемого материала, например, не больше, чем 60% (масс./масс.) указанного биологически поглощаемого материала.

Как будет понятно специалисту в данной области, значительное количество биологически поглощаемого материала должно, однако, присутствовать в губке, для предоставления губки с удовлетворительными механическими и структурными свойствами, т.е. количество НА или его производного предпочтительно не должно быть слишком высоким. Соответственно, в предпочтительном варианте осуществления изобретения, губка включает не больше, чем 90% (масс./масс.) НА или ее производного, например, не больше, чем 80% (масс./масс.) НА или ее производного, например, не больше, чем 70% (масс./масс.) НА или ее производного, предпочтительно, не больше, чем 65% (масс./масс.) НА или ее производного, например, не больше, чем 60% (масс./масс.) НА или ее производного, например, не больше, чем 55% (масс./масс.) НА или ее производного, в частности, не больше, чем 50% (масс./масс.) НА или ее производного.

Хорошо известно, что для некоторых соединений водные молекулы могут быть связаны с соединением, даже когда соединение рассматривается как «сухое» и твердое. В контексте настоящего изобретения, термин «безводная» означает, что нет присутствующей воды, т.е., что вода отсутствует. Таким образом, даже такие молекулы воды, которые могут быть связаны с соединением, как описано выше, не включены, когда используется термин «безводная», например, термин «безводное соединение» относится к соединению, исключая любые молекулы воды, которые могут быть связаны. Для гемостатической губки по настоящему изобретению, некоторое количество остаточной воды, такое как примерно до 10% (масс./масс.) может присутствовать в губке. Однако остаточная вода не рассчитывается как часть общей массы губки. Это означает, что когда речь идет о том, что губка содержит определенный % масс. определенного компонента (такого как НА, его производное или биологически поглощаемый материал), то этот % масс. рассчитывается на основании общей безводной массы губки, т.е. на основании общей массы губки, исключая любую воду, которая может быть связана, например, как описано выше.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения, гемостатическая губка является сухой. В этом контексте, термин «сухая» относится к губке, которая может включать некоторое количество остаточной воды, но где содержание воды в губке находится в равновесии с водой в воздухе. Таким образом, содержание воды меньше или равно количеству воды, которое может присутствовать, когда оно находится в равновесии с водой в воздухе.

В наиболее предпочтительном в настоящее время варианте осуществления изобретения, НА или ее производное включено в гемостатическую губку. Под термином «включены» следует понимать, что молекулы НА расположены более или менее равномерно в сетчатой структуре губки, предпочтительно, таким образом, что в губке нельзя обнаружить или можно найти лишь несколько «горячих участков» молекул НА. Присутствие «горячих участков» не оказывает никакого воздействия на функциональность губки. Таким образом, термин «включены» при использовании здесь можно использовать синонимически с выражениями, подобными «поглощенные», «смешанные» и им подобные.

В другом варианте осуществления изобретения, НА или ее производное накладывается на одну или более поверхностей губки. В предпочтительном варианте осуществления, НА или ее производное накладывается на поверхность, предназначенную для нахождения в непосредственном контакте с участком кровотечения, т.е. в предпочтительном варианте осуществления НА или его производное накладывается только на одну, две или три из поверхностей губки. Следует понимать, что, когда НА или ее производное накладывается на одну или более поверхностей губок, основная часть НА или ее производного будет расположена на указанной поверхности (поверхностях). Тем не менее, определенное количество НА или ее производного может заканчиваться, будучи включенным в губку, так как размер пор губки может быть таким, что, когда слой НА или ее производного накладывается на поверхность(и) губки, молекулы НА или ее производного могут частично проникнуть в поры губки.

Даже хотя НА или ее производное представляет особенно подходящий вариант осуществления настоящего изобретения, следует понимать, что другие полисахариды со свойствами, аналогичными НА, можно использовать в настоящем изобретении, не рассматривая это как отхождение от сущности и объема настоящего изобретения. Примеры полисахаридов, которые могут заместить НА или ее производное, в губках по изобретению, включают мукополисахариды, такие как хитин, хитозан, хондроитин сульфат, дерматан сульфат, кератан сульфат, а также альгинат.

Как объяснялось выше, одно особое преимущество гемостатической губки по изобретению представляет собой антиадгезивные свойства НА или ее производного. Что, в свою очередь, имеет преимущество, состоящее в том, что можно избежать послеоперационного сцепления с тканями, как объясняется, например, в патенте США № 5548081 и в документе Laurent et al. Am J Otolaryngol; 7:181-186, 1986.

Однако основное преимущество гемостатических губок по настоящему изобретению представляет собой их способность обеспечивать эффективное гемостатическое действие, в то же самое время, обладая сниженной тенденцией к набуханию. Набухание гемостатических губок можно измерить различными способами. Например, тенденцию к набуханию можно выразить в виде способности губки поглощать воду: чем больше воды поглощено, тем получается большее набухание (больший объем).

Как будет очевидно из представленных здесь экспериментов, гемостатическая губка по изобретению имеет сниженную тенденцию к набуханию, т.е. поглощению воды, при определении в соответствии с 24 USP (Фармакопеей США). Соответственно, предпочтительная гемостатическая губка по изобретению поглощает меньше воды, т.е. она набухает в меньшей степени, чем поглощаемая желатиновая губка, такая как Surgifoam®. Конкретнее, в предпочтительном варианте осуществления изобретения, соотношение между водой, поглощенной гемостатической губкой по изобретению, и водой, поглощенной поглощаемой желатиновой губкой, такой как Surgifoam®, составляет не больше, чем 0,95 при определении в соответствии с 24 USP. Предпочтительнее, соотношение составляет не более, чем 0,90, например, не более, чем 0,85, или не более, чем 0,80, или не более, чем 0,75, например, не более, чем 0,70, не более, чем 0,65, еще предпочтительнее, не более, чем 0,60, например, не более, чем 0,55, в частности, не более, чем 0,50.

Альтернативно, свойства набухания можно оценить пропитыванием гемостатической губки в избыточном количестве дистиллированной воды. Губку затем извлекают и сушат на воздухе в течение 10 мин для стекания избыточной свободной воды. Масса губки до и после поглощения воды используется для расчета отношения набухания: Отношение набухания=(mf-mi)/mi, где mf представляет собой массу губки после пропитывания и удаления избыточной воды, а mi представляет собой исходную массу губки перед пропитыванием.

Альтернативно или в дополнение к указанным выше тестам, можно измерить увеличение объема губки в градуированном цилиндре с дистиллированной водой. Известную массу и объем губки предварительно смачивают и массируют, и для количественного определения поглощенную воду выливают в цилиндр. Затем измеряют увеличенный объем и делят на исходную массу губки, т.е. массу губки перед предварительным смачиванием.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения, губка, кроме того, включает, по меньшей мере, один фактор свертывания крови, такой как фактор свертывания крови, выбранный из группы, состоящей из тромбина или его предшественника, фактора Va, фактора VIIa, фактора VIIIa, фактора IXa, фактора Xa, фактора XIa, фактора XIIa, фактора XIIIa и ионов кальция. В высоко предпочтительном варианте осуществления изобретения, указанный фактор свертывания крови представляет собой тромбин или его предшественник, в частности, сам тромбин. Как видно из примеров, присутствие тромбина в губке по настоящему изобретению дополнительно уменьшает время до гемостаза. Тромбин можно получить из плазмы, обычно из плазмы млекопитающего, такого как человек. Альтернативно, тромбин можно получить рекомбинантными средствами.

Тромбин, а также его предшественники, могут быть включены в гемостатическую губку обычными способами, известными специалисту в данной области, и как подробно объяснено в документе WO 90/13320.

В случае включения тромбина или его предшественника в губку по изобретению, губка предпочтительно, кроме того, включает стабилизирующий тромбин агент, такой как стабилизирующий тромбин агент, выбранный из группы, состоящей из естественно встречающихся аминокислот, моно- или дисахаридов, полигликолей, белков и их смесей.

Под естественно встречающимися аминокислотами подразумеваются любые аминокислоты, которые обнаруживаются в биологически продуцируемых белках, включая незаменимые и не незаменимые пищевые аминокислоты в их двух стереоизомерных формах, такие как аргинин, гистидин, изолейцин, лейцин, лизин, метионин, фенилаланин, треонин, триптофан, валин, аланин, аспартат, цистеин, глутамат, глицин, пролин, серин, тирозин, глутамин и аспарагин. Предпочтительные аминокислоты выбираются из группы, состоящей из глицина, лизина и аргинина.

Подходящие моносахариды могут быть выбраны из D- или L-форм пентоз, таких как рибоза, арабиноза, ксилоза и ликсоза, и гексоз, таких как аллоза, алтроза, глюкоза, манноза, гулоза, идоза, галактоза, талоза и их производные, например, пентозамины, гексозамины и глюкуроновая кислота. Дисахариды могут быть выбраны из лактозы, сахарозы, мальтозы, фруктозы и целлюлозы, включая их производные.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения, в качестве стабилизирующего тромбин агента используется поливалентный спирт. Подходящий поливалентный спирт можно выбрать из этиленгликоля, диэтиленгликоля, пропиленгликоля, глицерина, маннита, инозита, ксилита, эритритола, пентаэритритола, пентитолов, гекситов, таких как сорбит и гептиты. Кроме того, в качестве стабилизирующего тромбин агента, можно использовать полигликоли, такие как полипропиленгликоль и полиэтиленгликоли. Среди последней группы соединений, предпочтительны полиэтиленгликоли, имеющие молекулярную массу в диапазоне от 400 до 20000, например, примерно 6000.

В интересном варианте осуществления изобретения, НА или ее производное оказывает самостоятельно стабилизирующий тромбин эффект, причем в этом случае гемостатическая губка не содержит какое-либо дополнительные стабилизирующие тромбин агенты.

Организм млекопитающего имеет присущую ему фибринолитическую систему, которая активируется отложением фибрина. Путем растворения фибрина, эта система помогает поддерживать открытым просвет поврежденного кровеносного сосуда. Однако в ситуации, когда целью является быстрый гемостаз, фибринолитическая активность может противодействовать гемостатическому эффекту гемостатического дополнительного средства, такого как гемостатическая губка в соответствии с настоящим изобретением. Фибринолитическая система включает активацию плазминогена, плазматического предшественника для активного протеолитического фермента, плазмина, который связан с остатками лизина на фибрине. Соответственно, может иметь преимущество наличие агентов, включенных в гемостатическю губку по настоящему изобретению, которые оказывают антифибринолитический эффект. Конкретные примеры включают антифибринолитическое средство, выбранное из группы, состоящей из апротинина, пепстатина, лейпептина, антипаина, химостатина, габексат месилата, фибронектина, ε-аминокапроновой кислоты и транексамовой кислоты. Наиболее предпочтительно, антифибринолитическое средство представляет собой ε-аминокапроновую кислоту или транексамовую кислоту, в частности, транексамовую кислоту.

Кроме того, гемостатическая губка по изобретению может содержать забуферивающий агент. Примеры забуферивающих агентов включают соли щелочных металлов, такие как ацетаты, цитраты, фосфаты, гидрофосфаты, карбонаты, гидрокарбонаты и сукцинаты. Другие полезные забуферивающие агенты включают имидазол, TRIS и цвиттерионные забуферивающие системы. Очевидно, можно также использовать смеси указанных выше забуферивающих агентов.

Ввиду превосходящих свойств набухания описанных здесь губок, следует понимать, что губку, в дополнение или альтернативно обеспечению гемостатического эффекта, также можно использовать для местной доставки желательных средств, используя, посредством этого, губку в качестве носителя или матрицы доставки. Желательное средство может быть включено в губку или нанесено на одну или более поверхностей губки обычным путем, например, пропитыванием, погружением, опылением губки по изобретению раствором желательного средства или другими способами, известными специалисту в данной области. Это может быть сделано, например, перед использованием продукта клиницистом или изготовителем.

Соответственно, в другом аспекте настоящее изобретение относится к губке, включающей биологически поглощаемый материал и гиалуроновую кислоту (НА) или ее производное, причем указанная губка, кроме того, включает, по меньшей мере, один желательный агент, в частности, желательный агент, выбранный из группы, состоящей из поверхностно-активных веществ, противомикробных средств, антибактериальных средств, таких как антисептики и антибиотики, средств, облегчающих боль, химиотерапевтических средств, анестетиков, средств, содействующих заживлению, витаминов, минералов, аминокислот, белков, ростовых факторов, клеток, ферментов, контрастных агентов, консервантов, эмульгаторов, поперечно сшивающих агентов для содействия заживлению и т.д.

В еще одном аспекте, настоящее изобретение относится к применению губки, включающей биологически поглощаемый материал и гиалуроновую кислоту (НА) или ее производное, причем указанная губка, кроме того, включает, по меньшей мере, один желательный агент, для местной доставки указанного желательного агента.

В еще одном аспекте, настоящее изобретение относится к способу местной доставки желательного агента нуждающемуся в нем пациенту, причем указанный способ включает помещение губки, включающей биологически поглощаемый материал и гиалуроновую кислоту (НА) или ее производное, причем указанная губка, кроме того, включает, по меньшей мере, один