Лечение кожи

Лечение кожи

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к косметическому лечению стареющей кожи. Более конкретно, изобретение относится к применению производных ингенола, в частности, ингенол ангелатов, при лечении фотостареющей и/или естественно (хроно) стареющей кожи.

Уровень техники

Приведенные в настоящем описании ссылки на публикации предшествующего уровня техники (или информация, полученная из таких публикаций), или на любые общедоступные сведения не следует рассматривать как признание или предложение в любой форме того, что публикация предшествующего уровня техники (или информация, полученная из этой публикации) или общедоступные сведения являются частью общего знания в той области деятельности, к которой относится настоящее описание.

Старение кожи является динамическим процессом, на который оказывают влияние не только естественные клеточные и внеклеточные изменения, происходящие со временем, но также и экологические, или внешние, факторы, такие как недостаточное питание, курение, чрезмерное потребление алкоголя и, в частности, хроническое воздействие УФ излучения.

Естественное, или хронологическое, старение кожи является результатом врожденной дегенерации соединительной ткани кожи. Этот вид старения кожи является неизбежным, хотя генетические особенности могут сдерживать его начало и/или клиническое прогрессирование. Естественно стареющая кожа проявляется в виде эпидермальной и дермальной атрофии, сглаживания эпидермальных выростов, а также уменьшения количества фибробластов и мастоцитов и уменьшения уровня коллагена. С косметической точки зрения такая кожа может выглядеть безупречно, но иметь тонкие линии, складки и может потерять эластичность. (Baumann, L, 2007; Helfrich, Y.R., 2008; и приведенные там ссылки).

Фотостарение, общий каузативный фактор старения, вызываемого воздействием внешних условий, является термином, используемым для описания косметического и физиологического влияния на кожу длительного воздействия естественного или искусственного УФ излучения. Хотя фотостарению может быть подвержена любая часть тела, которая находится под воздействием УФ излучения, наиболее часто этому подвержены лицо, руки, кисти рук, шея и верхняя часть груди. Фотостареющая кожа проявляется в виде увеличения толщины эпидермального слоя или атрофии эпидермального слоя и прежде всего в виде солнечного эластоза, накопления эластин-содержащего материала непосредственно под дермо-эпидермальным соединением. Коллагеновые и эластиновые волокна становятся фрагментированными и неорганизованными. На косметическом уровне это может выглядеть в виде покраснения и/или утолщения кожи (в виде “задубевшей” кожи), хрупкость кожи и неровной пигментации, потери тонуса и эластичности (Baumann, L, 2007; Helfrich, Y.R., 2008; и приведенные там ссылки), а также в виде появления морщин, сухости, веснушек и образования глубоких борозд.

Гиалуронан, или гиалуроновая кислота (HA), представляет собой высокомолекулярный (1×10⁴-1×10⁷ Да) несульфатированный полисахаридный компонент семейства гликозаминогликанов и является важным компонентом внеклеточного матрикса (ECM) дермы, выполняющим множество основных структурных и физиологических функций. Он состоит из повторяющихся дисахаридных звеньев сахаров N-ацетилглюкозамина и D-глюкуроновой кислоты и синтезируется ферментами HA-синтазами (HAS), из которых были выделены три гена позвоночных и охарактеризованы как HAS1, HAS2 и HAS3. Гиалуронан может связывать до 1000 раз больше воды, чем весит сам, и, вместе с другим гликозаминогликанами (GAS) способствует сохранению и поддержанию воды в коже, таким образом, поддерживая ее гладкий и округлый вид. Он был обнаружен в дерме и эпидермисе, в частности, в эпидермальном межклеточном пространстве, и синтезируется, главным образом, фибробластами и кератиноцитами.

Кожа эмбриона/внутриутробного плода на ранней стадии, архитипичная кожа без признаков естественного старения/фотостарения, отличается повышенными уровнями гиалуронана. Гиалуронан в коже плода усиливает реорганизацию коллагеновой решетки и увеличивает синтез коллагена типа III и V, в молодой коже гиалуронан обнаружен на периферии коллагена и эластиновых волокон и в местах их пересечения. Стареющая кожа, напротив, отличается сниженными уровнями гиалуронана, и фотостареющая кожа, как было отмечено, также демонстрирует уменьшенное содержание гиалуронана. (Baumann, L., 2007 и приведенные там ссылки).

Увеличенные уровни гиалуронана, ассоциированные с отсутствием признаков естественно стареющей/фотостареющей кожи, объясняются увеличенной экспрессией генов гиалуронан-синтазы (HAS). Общепринято, что три гена HAS являются ответственными за регулирование гиалуронан-синтазы; HAS1, HAS2 и HAS3. Экспрессия гена HAS1 отсутствует в фибробластах естественно стареющей/фотостареющей кожи. HAS2 считается ответственным за эмбриональное/фетальное развитие, а HAS3 связан с естественно стареющей/фотостареющей кожей.

Молекулярная масса гиалуронана (вместе с концентрацией) также имеет важное влияние на архитектуру кожи: с высокомолекулярным гиалуронаном формируется более эффективная перицеллюлярная оболочка по сравнению с низкомолекулярным гиалуронаном (Meran et al., 2007, 2008; Stern and Maibach, 2008). Действительно, молекулярная масса вновь синтезированного гиалуронана в человеческой коже имеет высокую молекулярную массу как в эпидермисе, так и в дерме. В то время как HAS1 и HAS3 связаны с синтезом более низкомолекулярного гиалуронана, и, как описано выше, ассоциированы со стареющей/фотостареющей кожей, HAS2-синтезированный гиалуронан имеет высокую молекулярную массу (обычно, по меньшей мере, 1,5×10⁶ Да).

Хотя общепризнано, что лучшим и наиболее эффективным способом профилактики или, по меньшей мере, минимизации процесса фотостарения является исключение воздействия УФ излучения на кожу, в частности, нахождение в тени и ношение защитной одежды и использование солнцезащитного крема, и что естественный процесс старения является неизбежным, тем не менее, в современном одержимом молодостью обществе остается устойчивый спрос на лечение, которое может "повернуть время вспять" путем возвращения или, по меньшей мере, улучшения или совершенствования одного или нескольких косметических проявлений процесса естественного старения и/или фотостарения, таких как линии, морщины, сухость, глубокие морщины, покраснение, утолщение, веснушки, потеря тонуса и эластичности, хрупкость и неравномерная пигментация. Действительно, потребительский спрос на косметические средства, которые могут восстановить моложавость естественно стареющей или фотостареющей кожи, в частности кожи лица, постоянно увеличивается, при этом ожидается, что к 2010 в одних только Соединенных Штатах рынок антивозрастных технологий превысит по сумме продаж 16,5 миллиардов долларов (Helfrich, Y.R., et al., 2008).

Учитывая такую потребность, имеется необходимость в новом лечении, которое может помочь вернуть, улучшить или каким-либо иным способом усовершенствовать одно или несколько косметических проявлений, ассоциированных с естественным старением и фотостарением кожи.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение основано на открытии того, что ингенол-3-ангелат, производное ингенола, обнаруженное в растениях вида Euphorbia, индуцирует синтез эндогенного высокомолекулярного гиалуранона в дермальных фибробластах. Таким образом, предоставляется способ улучшения косметического вида кожи, в частности естественно или фотостареющей кожи.

Следовательно, в первом аспекте настоящее изобретение предоставляет способ лечения естественно стареющей и/или фотостареющей кожи у субъекта, содержащий введении в кожу указанного субъекта производного ингенола или его фармацевтически приемлемой соли.

В других аспектах изобретение также предоставляет производные ингенола или их фармацевтически приемлемые соли, а также композиции, содержащие фармацевтически приемлемый носитель и указанные производные или соли для применения при лечении естественно стареющей и/или фотостареющей кожи. Также предоставляется использование производных ингенола или их фармацевтически приемлемых солей при изготовлении композиции или лекарственного средства для лечения естественно стареющей и/или фотостареющей кожи.

В другом аспекте, предоставляется способ индуцирования синтеза эндогенного гиалуронана у субъекта, содержащий введение в кожу указанного субъекта производного ингенола или его фармацевтически приемлемой соли.

Другой аспект изобретения предоставляет применение производного ингенола или его фармацевтически приемлемой соли для индуцирования синтеза эндогенного гиалуронана у субъекта.

Еще один аспект предоставляет применение производного ингенола или его фармацевтически приемлемой соли при изготовлении лекарственного средства для индуцирования синтеза эндогенного гиалуронана у субъекта.

В некоторых вариантах осуществления изобретения используют топическое введение в кожу производного ингенола.

В некоторых вариантах осуществления изобретения данное соединение выбирают из следующих: ингенол-3-ангелата, 20-O-ацетил-ингенол-3-ангелата и 20-дезокси-ингенол-3-ангелата, и их фармацевтически приемлемых солей и пролекарств. В одном из примеров это соединение представляет собой ингенол-3-ангелат или его фармацевтически приемлемую соль.

Краткое описание чертежей

На Фиг.1 графически изображен средний уровень синтеза гиалуронана дермальными фибробластами, культивируемыми в 0 мкг/мл, 0,01 мкг/мл, 0,1 мкг/мл, 1 мкг/мл, 10 мкг/мл или 100 мкг/мл PEP005 без или с TGF-β₁ (нг/мл) за (A) 24 часа и (B) 72 часа, (N=3, среднее значение ± SE, *p<0,05, **p<0,01 и ***p<0,001, по сравнению с контролями дермальных фибробластов, культивируемых без PEP005).

На Фиг.2 приведены характерные цифровые изображения, полученные для процесса формирования перицеллюлярной гиалуроновой оболочки дермальными фибробластами, культивируемыми в (A) 0, (B) 0,01 мкг/мл, (C) 0,1 мкг/мл, (D) 1 мкг/мл, (E) 10 мкг/мл и (F) 100 мкг/мл PEP005 без TGF-β₁ (10 нг/мл) за 24 часа (×200).

На Фиг.3 приведены характерные цифровые изображения, полученные для процесса формирования перицеллюлярной гиалуроновой оболочки дермальными фибробластами, культивируемыми в (A) 0, (B) 0,01 мкг/мл, (C) 0,1 мкг/мл, (D) 1 мкг/мл, (E) 10 мкг/мл и (F) 100 мкг/мл PEP005 без TGF-β₁ (10 нг/мл) за 72 часа (×200).

На Фиг.4 приведены характерные цифровые изображения, полученные для процесса формирования перицеллюлярной гиалуроновой оболочки дермальными фибробластами, культивируемыми в (A) 0, (B) 0,01 мкг/мл, (C) 0,1 мкг/мл, (D) 1 мкг/мл, (E) 10 мкг/мл и (F) 100 мкг/мл PEP005 в присутствии TGF-β₁ (10 нг/мл) за 24 часа (×200).

На Фиг.5 приведены характерные цифровые изображения, полученные для процесса формирования перицеллюлярной гиалуроновой оболочки дермальными фибробластами, культивируемыми в (A) 0, (B) 0,01 мкг/мл, (C) 0,1 мкг/мл, (D) 1 мкг/мл, (E) 10 мкг/мл и (F) 100 мкг/мл PEP005 в присутствии TGF-β₁ (10 нг/мл) за 72 часа (×200).

На Фиг.6 показан средний уровень экспрессии гена HAS1 дермальными фибробластами, культивируемыми в 0 мкг/мл, 0,01 мкг/мл, 0,1 мкг/мл, 1 мкг/мл, 10 мкг/мл или 100 мкг/мл PEP005 без или с TGF-β₁ (10 нг/мл) за (A) 24 часа и (B) 72 часа (N=2, среднее значение ± SE, *p<0,05, **p<0,01, по сравнению с контролями дермальных фибробластов, культивируемых без PEP005).

На Фиг.7 показан средний уровень экспрессии гена HAS2 дермальными фибробластами, культивируемыми в 0 мкг/мл, 0,01 мкг/мл, 0,1 мкг/мл, 1 мкг/мл, 10 мкг/мл или 100 мкг/мл PEP005 без или с TGF-β₁ (10 нг/мл) за (A) 24 часа и (B) 72 часа (N=3, среднее значение ± SE).

На Фиг.8 показан средний уровень экспрессии гена HAS3 дермальными фибробластами, культивируемыми в 0 мкг/мл, 0,01 мкг/мл, 0,1 мкг/мл, 1 мкг/мл, 10 мкг/мл или 100 мкг/мл PEP005 без или с TGF-β₁ (10 нг/мл) за (A) 24 часа и (B) 72 часа (N=3, среднее значение ± SE).

На Фиг.9 показано включение [3H]-глюкозамина (за День 1) в дермальные фибробласты, обработанные 0, 0,01, 0,1, 1,0 и 10 мкг/мл PEP005 без TGF-β₁.

На Фиг.10 показано включение [3H]-глюкозамина (за День 3) в дермальные фибробласты, обработанные 0, 0,01, 0,1, 1,0 и 10 мкг/мл PEP005 без TGF-β₁.

На Фиг.11 показано включение [3H]-глюкозамина (за День 1) в дермальные фибробласты, обработанные 0, 0,01, 0,1, 1,0 и 10 мкг/мл PEP005 в присутствии TGF-β₁.

На Фиг.12 показано включение [3H]-глюкозамина (за День 3) в дермальные фибробласты, обработанные 0, 0,01, 0,1, 1,0 и 10 мкг/мл PEP005 в присутствии TGF-β₁.

Подробное описание изобретения

Формы единственного числа включают аспекты множественного числа, если из контекста в явном виде не следует иное. Таким образом, например, ссылка на "ангелоил-замещенный ингенан", или "ингенол ангелат" включает одно соединение, а также, соответственно, два или несколько соединений.

Во всем описании и следующей за ним формуле изобретения, если из контекста не следует иное, слово "содержать" и его варианты, такие как "содержит" и "содержащий", следует понимать, как подразумевающие включение указанного объекта или стадии или группы объектов, а не исключение любого другого объекта или стадии или группы объектов.

Используемый здесь термин "лечение" означает улучшение, полное или частичное восстановление, или, по меньшей мере, некоторое изменение эстетических или косметических характеристик и/или физиологических свойств (таких как увеличение уровня гиалуранона) кожи. С косметической точки зрения, это может включать сокращение, устранение, ослабление или какое-либо улучшение проявления одного или нескольких из следующих показателей: сухости, тонких линий, морщин, борозд, красноты, веснушек и неравномерной пигментации.

Это можно оценить или определить каким-либо способом, обычно используемым в данной области техники. В одном из способов, приведенных в качестве примера, используется описанная здесь фотография TruVu®. Другие способы могут включать измерение или оценку морщин согласно способам, известным в данной области.

Ссылка на "высокомолекулярный гиалуронан" означает молекулярную массу, по меньшей мере, примерно 1,5×10⁶ Да. Величина молекулярной массы может быть определена согласно способам, известным в данной области техники, таким как гель-фильтрационная хроматография относительно известных стандартов, см., например, Simpson, R.M., et al., 2009.

Ссылка на "ингенол" относится к соединениям, имеющим скелет С₃-, С₄-, C₅-триокси транс-бицикло[4.4.1]-ундекан ингенана. О таких соединениях имеется множество сообщений, и они известны в литературе и могут быть выделены из растений, таких как виды семейства Euphorbiaceae или могут быть полностью или частично синтезированы химическим способом (см., например, Winkler et al., 2002, and Tanino et al., 2003). Искусственно полученные производные ингенола могут включать стереоизомеры встречающихся в природе ингенолов. Таким образом, в настоящем описании также рассматриваются смеси рацематов и стереоизомеров. Рассмотренные здесь соединения вообще были обнаружены в экстрактах растений Euphorbiaceae. Следовательно, экстракт может содержать сок или жидкий или полужидкий материал, выделяемый или находящийся в листьях, стебле, цветах, семенах, коре или между корой и стеблем. Наиболее предпочтительным является экстракт сока. Кроме того, экстракт может содержать жидкий или полужидкий материал, находящийся во фракциях, экстрагированных из сока, листьев, стеблей, цветов, коры или другого растительного материала растения семейства Euphoriaceae. Например, растительный материал может быть подвергнут физической обработке для разрушения растительных волокон и материала межклеточного и внеклеточного матрикса и внутренней и внешней тканей, экстрагированных в растворителе, включая водную среду. Настоящее изобретение охватывает все такие источники соединений, включая соединения, полученные с помощью химического синтеза. В некоторых вариантах осуществления изобретения производное ингенола используется в выделенной или очищенной форме, что означает, что оно является или было получено из естественного источника или способом выделения или синтеза по существу свободным или не содержащим другие соединения или загрязняющие агенты. Однако следует учитывать, что очищенная форма может быть затем смешана или включена в фармацевтическую композицию с другими соединениями, включая, при необходимости, соединения из природного источника. В некоторых вариантах осуществления по существу очищенное производное ингенола является чистым, по меньшей мере, на 95%. В других вариантах осуществления по существу очищенное соединение является чистым, по меньшей мере, на 97 или 98%. В других вариантах осуществления по существу очищенное соединение является чистым, по меньшей мере, на 99 или 99,5%.

Приведенная здесь ссылка на члены семейства Euphorbiaceae включает ссылку на виды следующих родов: Acalypha, Acidoton, Actinostemon, Adelia, Adenocline, Adenocrepis, Adenophaedra, Adisca, Agrostistachys, Alchornea, Alchorneopsis, Alcinaeanthus, Alcoceria, Aleurites, Amanoa, Andrachne, Angostyles, Anisophyllum, Antidesma, Aphora, Aporosa, Aporosella, Argythamnia, Astrococcus, Astrogyne, Baccanrea, Baliospermum, Bernardia, Beyeriopsis, Bischofia, Blachia, Blumeodondron, Bonania, Bradleia, Breynia, Breyniopsis, Briedelia, Buraeavia, Caperonia, Caryodendron, Celianella, Cephalocroton, Chaenotheca, Chaetocarpus, Chamaesyce, Cheilosa, Chiropetalum, Choriophyllum, Cicca, Chaoxylon, Cleidon, Cleistanthus, Cluytia, Cnesmone, Cnidoscolus, Coccoceras, Codiaeum, Coelodiscus, Conami, Conceveiba, Conceveibastrum, Conceveibum, Corythea, Croizatia, Croton, Crotonopsis, Crozophora, Cubanthus, Cunuria, Dactylostemon, Dalechampia, Dendrocousinsia, Diaspersus, Didymocistus, Dimorphocalyx, Discocarpus, Ditaxis, Dodecastingma, Drypetes, Dysopsis, Elateriospermum, Endadenium, Endospermum, Erismanthus, Erythrocarpus, Erythrochilus, Eumecanthus, Euphorbia, Euphorbiodendron, Excoecaria, Flueggea, Calearia, Garcia, Gavarretia, Gelonium, Giara, Givotia, Glochidion, Clochidionopsis, Glycydendron, Gymnanthes, Gymnosparia, Haematospermum, Hendecandra, Hevea, Hieronima, Hieronyma, Hippocrepandra, Homalanthus, Hymenocardia, Janipha, Jatropha, Julocroton, Lasiocroton, Leiocarpus, Leonardia, Lepidanthus, Leucocroton, Mabea, Macaranga, Mallotus, Manihot, Mappa, Maprounea, Melanthesa, Mercurialis, Mettenia, Micrandra, Microdesmis, Microelus, Microstachy, Maocroton, Monadenium, Mozinna, Neoscortechinia, Omalanthus, Omphalea, Ophellantha, Orbicularia, Ostodes, Oxydectes, Palenga, Pantadenia, Paradrypeptes, Pausandra, Pedilanthus, Pera, Peridium, Petalostigma, Phyllanthus, Picrodendro, Pierardia, Pilinophytum, Pimeleodendron, Piranhea, Platygyna, Plukenetia, Podocalyx, Poinsettia, Poraresia, Prosartema, Pseudanthus, Pycnocoma, Quadrasia, Reverchonia, Richeria, Richeriella, Ricinella, Ricinocarpus, Rottlera, Sagotia, Sanwithia, Sapium, Savia, Sclerocroton, Sebastiana, Securinega, Senefeldera, Senefilderopsis, Serophyton, Siphonia, Spathiostemon, Spixia, Stillingia, Strophioblachia, Synadenium, Tetracoccus, Tetraplandra, Tetrorchidium, Thyrsanthera, Tithymalus, Trageia, Trewia, Trigonostemon, Tyria и Xylophylla.

Предпочтительным родом и, в частности, подходящим для практической реализации настоящего изобретения является род Euphorbia. Особенно полезные виды этого рода включают следующие: Euphorbia aaron-rossii, Euphorbia abbreviata, Euphorbia acuta, Euphorbia alatocaulis, Euphorbia albicaulis, Euphorbia algomarginata, Euphorbia aliceae, Euphorbia alta, Euphorbia anacampseros, Euphorbia andromedae, Euphorbia angusta, Euphorbia anthonyi, Euphorbia antiguensis, Euphorbia apocynifolia, Euphorbia arabica, Euphorbia ariensis, Euphorbia arizonica, Euphorbia arkansana, Euphorbia arteagae, Euphorbia arundelana, Euphorbia astroites, Euphorbia atrococca, Euphorbia baselicis, Euphorbia batabanensis, Euphorbia bergeri, Euphorbia bermudiana, Euphorbia bicolor, Euphorbia biformis, Euphorbia bifurcata, Euphorbia bilobata, Euphorbia biramensis, Euphorbia biuncialis, Euphorbia blepharostipula, Euphorbia blodgetti, Euphorbia boerhaavioides, Euphorbia boliviana, Euphorbia bracei, Euphorbia brachiata, Euphorbia brachycera, Euphorbia brandegee, Euphorbia brittonii, Euphorbia caesia, Euphorbia calcicola, Euphorbia campestris, Euphorbia candelabrum, Euphorbia capitellata, Euphorbia carmenensis, Euphorbia carunculata, Euphorbia cayensis, Euphorbia celastroides, Euphorbia chalicophila, Euphorbia chamaerrhodos, Euphorbia chamaesula, Euphorbia chiapensis, Euphorbia chiogenoides, Euphorbia cinerascens, Euphorbia clarionensis, Euphorbia colimae, Euphorbia colorata, Euphorbia commutata, Euphorbia consoquitlae, Euphorbia convolvuloides, Euphorbia corallifera, Euphorbia creberrima, Euphorbia crenulata, Euphorbia cubensis, Euphorbia cuspidata, Euphorbia cymbiformis, Euphorbia darlingtonii, Euphorbia defoliata, Euphorbia degeneri, Euphorbia deltoidea, Euphorbia dentata, Euphorbia depressa, Euphorbia dictyosperma, Euphorbia dioeca, Euphorbia discoidalis, Euphorbia dorsiventralis, Euphorbia drumondii, Euphorbia duclouxii, Euphorbia dussii, Euphorbia eanophylla, Euphorbia eggersii, Euphorbia eglandulosa, Euphorbia elata, Euphorbia enalla, Euphorbia eriogonoides, Euphorbia eriophylla, Euphorbia esculaeformis, Euphorbia espirituensis, Euphorbia esula, Euphorbia excisa, Euphorbia exclusa, Euphorbia exstipitata, Euphorbia exstipulata, Euphorbia fendleri, Euphorbia filicaulis, Euphorbia flliformis, Euphorbia florida, Euphorbia fruticulosa, Euphorbia garber, Euphorbia gaumerii, Euphorbia gerardiana, Euphorbia geyeri, Euphorbia glyptosperma, Euphorbia gorgonis, Euphorbia gracilior, Euphorbia gracillima, Euphorbia gradyi, Euphorbia graminea, Euphorbia graminiea, Euphorbia grisea, Euphorbia guadalajarana, Euphorbia guanarensis, Euphorbia gymnadenia, Euphorbia haematantha, Euphorbia hedyotoides, Euphorbia heldrichii, Euphorbia helenae, Euphorbia helleri, Euphorbia helwigii, Euphorbia henricksonii, Euphorbia heterophylla, Euphorbia hexagona, Euphorbia hexagonoides, Euphorbia hinkleyorum, Euphorbia hintonii, Euphorbia hirtula, Euphorbia hirta, Euphorbia hooveri, Euphorbia humistrata, Euphorbia hypericifolia, Euphorbia inundata, Euphorbia involuta, Euphorbia jaliscensis, Euphorbia jejuna, Euphorbia johnston, Euphorbia juttae, Euphorbia knuthii, Euphorbia lasiocarpa, Euphorbia lata, Euphorbia latazi, Euphorbia latericolor, Euphorbia laxiflora Euphorbia lecheoides, Euphorbia ledienii, Euphorbia leucophylla, Euphorbia lineata, Euphorbia linguiformis, Euphorbia longecornuta, Euphorbia longepetiolata, Euphorbia longeramosa, Euphorbia longinsulicola, Euphorbia longipila, Euphorbia lupulina, Euphorbia lurida, Euphorbia lycioides, Euphorbia macropodoides, Euphorbia macvaughiana, Euphorbia manca, Euphorbia mandoniana, Euphorbia mangleti, Euphorbia mango, Euphorbia marylandica, Euphorbia mayana, Euphorbia melanadenia, Euphorbia melanocarpa, Euphorbia meridensis, Euphorbia mertonii, Euphorbia mexiae, Euphorbia microcephala, Euphorbia microclada, Euphorbia micromera, Euphorbia misella, Euphorbia missurica, Euphorbia montana, Euphorbia montereyana, Euphorbia multicaulis, Euphorbia multiformis, Euphorbia multinodis, Euphorbia multiseta, Euphorbia muscicola, Euphorbia neomexicana, Euphorbia nephradenia, Euphorbia niqueroana, Euphorbia oaxacana, Euphorbia occidentalism, Euphorbia odontodenia, Euphorbia olivacea, Euphorbia olowaluana, Euphorbia opthalmica, Euphorbia ovata, Euphorbia pachypoda, Euphorbia pachyrhiza, Euphorbia padifolia, Euphorbia palmeri, Euphorbia paludicola, Euphorbia parciflora, Euphorbia parishii, Euphorbia parryi, Euphorbia paxiana, Euphorbia pediculifera, Euphorbia peplidion, Euphorbia peploides, Euphorbia peplus, Euphorbia pergamena, Euphorbia perlignea, Euphorbia petaloidea, Euphorbia petrina, Euphorbia picachensis, Euphorbia pilosula, Euphorbia pilulifera, Euphorbia pinariona, Euphorbia pinetorum, Euphorbia pionosperma, Euphorbia platysperma, Euphorbia plicata, Euphorbia poeppigii, Euphorbia poliosperma, Euphorbia polycarpa, Euphorbia polycnemoides, Euphorbia polyphylla, Euphorbia portoricensis, Euphorbia portulacoides Euphorbia portulana, Euphorbia preslii, Euphorbia prostrata, Euphorbia pteroneura, Euphorbia pycnanthema, Euphorbia ramosa, Euphorbia rapulum, Euphorbia remyi, Euphorbia retroscabra, Euphorbia revoluta, Euphorbia rivularis, Euphorbia robusta, Euphorbia romosa, Euphorbia rubida, Euphorbia rubrosperma, Euphorbia rupicola, Euphorbia sanmartensis, Euphorbia saxatilis М. Bieb, Euphorbia schizoloba, Euphorbia sclerocyathium, Euphorbia scopulorum, Euphorbia senilis, Euphorbia serpyllifolia, Euphorbia serrula, Euphorbia setiloba Engelm, Euphorbia sonorae, Euphorbia soobyi, Euphorbia sparsiflora, Euphorbia sphaerosperma, Euphorbia syphilitica, Euphorbia spruceana, Euphorbia subcoerulea, Euphorbia stellata, Euphorbia submammilaris, Euphorbia subpeltata, Euphorbia subpubens, Euphorbia subreniforme, Euphorbia subtrifoliata, Euphorbia succedanea, Euphorbia tamaulipasana, Euphorbia telephioides, Euphorbia tenuissima, Euphorbia tetrapora, Euphorbia tirucalli, Euphorbia tomentella, Euphorbia tomentosa, Euphorbia torralbasii, Euphorbia tovariensis, Euphorbia trachysperma, Euphorbia tricolor, Euphorbia troyana, Euphorbia tuerckheimii, Euphorbia turczaninowii, Euphorbia umbellulata, Euphorbia undulata, Euphorbia vermiformis, Euphorbia versicolor, Euphorbia villifera, Euphorbia violacea, Euphorbia whitei, Euphorbia xanti Engelm, Euphorbia xylopoda Greenm., Euphorbia yayalesia Urb., Euphorbia yungasensis, Euphorbia zeravschanica и Euphorbia zinniiflora.

В некоторых вариантах осуществления виды рода Synadenium включают Synadenium grantii и Synadenium compactum.

В некоторых вариантах осуществления виды рода Monadenium включают Monadenium lugardae и Monadenium guentheri.

В одном из вариантов осуществления вид рода Endadenium представляет собой Endadenium gossweileni.

В другом варианте осуществления при реализации настоящего изобретения используется Euphorbia peplus в части обеспечения источника производных ингенола, таких как ангелаты ингенола. Используемая здесь ссылка на "Euphorbia peplus" или его сокращение "E. peplus" включает различные разновидности, сорта, линии, гибриды или производные этого растения, а также его ботанических или садоводческих родственников. Кроме того, настоящее изобретение может быть реализовано с использованием целого растения Euphorbiaceae или его части, включая сок или семена, или может быть использован другой репродуктивный материал. Обычно для использования семян или репродуктивного материала, сначала необходимо размножить растение или саженец.

Используемая здесь ссылка на растение Euphorbiaceae, вид Euphorbia или E. peplus также охватывает генетически модифицированные растения. Генетически модифицированные растения включают трансгенные растения или растения, у которых удален какой-либо характерный признак, или у которых последовательность эндогенного гена подавлена, мутирована или изменена иным образом, включая изменение или введение генетического материала, который оказывает регуляторное воздействие на конкретный ген. Следовательно, растение, которое выглядит не естественным для растения Euphorbiaceae или вида Euphorbia, или E. peplus, образом, тем не менее рассматривается в настоящем изобретении и включено в объем указанных выше терминов.

В одном из вариантов осуществления изобретения производное ингенола имеет формулу:

где

R¹-R³ независимо выбирают из водорода, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного ацила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, S(О)₂R', S(О)₂OR', P(О)(OR')₂ (где R' представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, ацил, арил, или арилалкил) и гликозила, или R¹ и R² или R² и R³ могут образовать метиленовую или этиленовую цепь; и

R⁴ выбирают из водорода, гидрокси, необязательно замещенного алкокси, необязательно замещенного алкенокси, необязательно замещенного алкинокси, необязательно замещенного ацилокси, необязательно замещенного арилалкокси, OS(О)₂R', OS(О)₂OR', OP(О)(OR')₂ (где R' представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, ацил, арил или арилалкил) и гликокси.

В некоторых примерах, по меньшей мере, один из R¹-R⁴ не является водородом. В другом примере, R¹ не является водородом.

В некоторых примерах изобретения R¹ представляет собой необязательно замещенную ацильную группу C(О)-R. В других примерах R представляет собой необязательно замещенный алкил, алкенил или алкинил. В других примерах R может быть прямой или разветвленной цепью и может иметь до 6 или до 10 атомов углерода. В других примерах, R является разветвленным.

В некоторых примерах изобретения один из R¹-R³ представляет собой группу ангелоила, изображенную ниже в виде формулы (i), или R⁴ представляет собой группу O-ангелоила. В настоящем описании такие соединения называются ангелатами ингенола. В одном из таких примеров изобретения R¹ представляет собой группу ангелоила формулы (i).

(i)

В некоторых примерах изобретения один или оба, R² и R³, представляют собой водород. R² и R³ вместе также могут образовать метиленовую или этиленовую диоксигруппу.

В некоторых примерах изобретения R⁴ представляет собой водород, гидрокси или ацилокси, такой как группа формулы -OC(О)C_1-6алкил, например ацетокси.

В некоторых примерах изобретения соединения для применения в описанных способах, применениях и композициях представляют собой ингенол-3-ангелат, 20-O-ацетил-ингенол-3-ангелат и 20-дезокси-ингенол-3-ангелат (изображенный ниже), и его фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.

R⁴=ОН, ингенол-3-ангелат

R⁴=OAc, 20-O-ацетил-ингенол-3-ангелат

R⁴=H, 20-дезокси-ингенол-3-ангелат

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения соединение представляет собой ингенол-3-ангелат. Используемое в настоящем описании название "ингенол-3-ангелат" включает встречающиеся в природе, а также химически синтезированные формы.

Несмотря на признание того, что эти соединения можно использовать в виде сока или экстракта Euphorbiacae, рассматриваемые в настоящем описании производные ингенола преимущественно используются, по меньшей мере, в частично очищенной или изолированной форме, такой как, по меньшей мере, 95% очищенная форма, обычно чистая, по меньшей мере, на 97, 98 или 99%.

Производные ингенола можно подвергать алкилированию, алкенилированию, алкинилированию, арилированию, арилалкилированию или ацилированию с помощью способов, известных в области химии синтеза для алкилирования, алкенилирования, алкинилирования, арилирования, арилалкилирования или ацилирования свободных гидрокси групп (см. например, Greene и Wutz, Protective Groups in Organic Synthesis, 1999; March, Advanced Organic Chemistry, 5th Edition; Larock, Comprehensive Organic Transformations, 1999; содержание которых включено в настоящее описание в виде ссылки). Например, гидрокси группы могут быть алкилированы (или арилалкилированы) с помощью алкил (или арилалкил) галогенидов, таких как метилйодид (или бензилбромид), или диалкилсульфатов, таких как диметил- или диэтилсульфат. Ацилирование можно осуществлять путем обработки соответствующими карбоновыми кислотами, галогенангидридами и кислотными ангидридами в присутствии основания или связывающего агента. Гликозид может быть получен химическим способом, например, с помощью реакции между производным ингенола и защищенным соединением сахара, в котором C-1 был активирован галогенированием для присоединения к гидроксильным или карбоксильным группам, а гидроксильные группы сахара были заблокированы защитными группами. В качестве альтернативы, гликозид может быть образован с участием соответствующих ферментов, например, гликозилтрансферазы, такой как UDP-галактозо-зависимая галактоцилтрансфераза и UDP-глюкозо-зависимая гликотрансфераза. Предпочтительные C-1 связанные сахариды представляют собой сахаридный (сахара) заместитель фуранозной или пиранозной формы, который связан со структурой ингенол ангелата через C-1 сахарид (согласно традиционной нумерации) путем формирования ацетильной связи. Иллюстративные сахаридные группы включают редуцирующие сахара, такие как глюкоза, рибоза, арабиноза, ксилоза, манноза и галактоза, каждый из которых связан с атомом кислорода производного ингенола.

Сульфатные, сульфонатные и фосфатные группы могут быть получены способами, известными в данной области. Примеры R' включают водород, C_1-6алкил, фенил и бензил.

Используемый в настоящем описании термин "алкил" означает алкил с прямой или разветвленной цепью, предпочтительно С_1-20 алкил, например, С_1-10 или C_1-6. Примеры алкила с прямой и разветвленной цепью включают: метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, 1,2-диметилпропил, 1,1-диметилпропил, гексил, 4-метилпентил, 1-метилпентил, 2-метилпентил, 3-метилпентил, 1,1-диметилбутил, 2,2-диметилбутил, 3,3-диметилбутил, 1,2-диметилбутил, 1,3-диметилбутил, 1,2,2,-триметилпропил, 1,1,2-триметилпропил, гептил, 5-метилгексил, 1-метилгексил, 2,2-диметилпентил, 3,3-диметилпентил, 4,4-диметилпентил, 1,2-диметилпентил, 1,3-диметилпентил, 1,4-диметилпентил, 1,2,3-триметилбутил, 1,1,2-триметилбутил, 1,1,3-триметилбутил, октил, 6-метилгептил, 1-метилгептил, 1,1,3,3-тетраметилбутил, нонил, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- или 7-метилоктил, 1-, 2-, 3-, 4- или 5-этилгептил, 1-, 2- или 3-пропилгексил, децил, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- и 8-метилнонил, 1-, 2-, 3-, 4-, 5- или 6-этилоктил, 1-, 2-, 3- или 4-пропилгептил, ундецил, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7-, 8- или 9-метилдецил, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- или 7-этилнонил, 1-, 2-, 3-, 4- или 5-пропилоктил, 1-, 2- или 3-бутилгептил, 1-пентилгексил, додецил, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7-, 8-, 9- или 10-метилундецил, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-этилдецил, 1-, 2-, 3-, 4-, 5- или 6-пропилнонил, 1-, 2-, 3- или 4-бутилоктил, 1-2-пентилгептил и т.п. Там, где алкильная группа указана в общем виде как "пропил", "бутил" и т.д., следует иметь в виду, что это может относиться к любому из соответствующих прямых, разветвленных или циклических изомеров. Алкильная группа может быть необязательно замещенной одним или несколькими определенными здесь необязательными заместителями. "Циклоалкильная" группа представляет собой циклическую алкильную группу, по меньшей мере, из трех атомов углерода, например, С₃-C₈, такую как C₃-, С₄-, С₅- или С₆-циклоалкил. Примеры "циклоалкила" включают моно- или полициклические алкильные группы, такие как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил, циклононил, циклодецил и т.п. Циклоалкильная группа может быть необязательно замещенной одним или несколькими определенными здесь необязательными заместителями.

Используемый в настоящем описании термин "алкенил" означает, что группы, образованные из углеводородных остатков с прямой или разветвленной цепью или циклических остатков, содержат, по меньшей мере, одну двойную связь углерод-углерод, включая этилен моно- ди- или полиненасыщенные алкильные или циклоалкильные группы, определенные выше, предпочтительно C_2-20 алкенил (например, C_2-10 или С_2-6). Примеры алкенила включают винил, аллил, 1-метилвинил, бутенил, изобутенил, 3-метил-2-бутенил, 1-пентенил, циклопентенил, 1-метил-циклопентенил, 1-гексенил, 3-гексенил, циклогексенил, 1-гептенил, 3-гептенил, 1-октенил, циклооктенил, 1-ноненил, 2-ноненил, 3-ноненил, 1-деценил, 3-деценил, 1,3-бутадиенил, 1,4-пентадиенил, 1,3-циклопентадиенил, 1,3-гексадиенил, 1,4-гексадиенил, 1,3-циклогексадиенил, 1,4-циклогексадиенил, 1,3-циклогептадиенил, 1,3,5-циклогептатриенил и 1,3,5,7-циклооктатетраенил. Алкенильная группа может быть необязательно замещенной одним или несколькими определенными здесь необязательными заместителями.

Используемый в настоящем описании термин "алкинил" означает группы, образованные из углеводородных остатков с прямой или разветвленной цепью, или циклических остатков, содержащих, по меньшей мере, одну тройную связь углерод-углерод, включая этинил моно- ди- или полиненасыщенные алкильные или циклоалкильные группы, определенные выше. Если количество атомов углерода не определено, этот термин предпочтительно относится к C_2-20 алкинилу (например, C_2-10 или C_2-6). Примеры включают изомеры этинила, 1-пропинила, 2-пропинила и бутинила, и изомеры пентинила. Алкильная группа может быть необязательно замещенной одним или несколькими определенными здесь необязательными заместителями.

Термин "арил" означает любой из одиночных, многоядерных, сопряженных и конденсированных остатков ароматических углеводородных кольцевых систем. Примеры арила включают фенил, бифенил, терфенил, кватерфенил, нафтил, тетрагидронафтил, антраценил, дигидроантраценил, бензантраценил, дибензантраценил, фенантренил, флуоренил, пиренил, иденил, азуленил, хризенил. Предпочтительный арил включает фенил и нафтил. Арильная группа может быть необязательно замещенной одним или несколькими определенными здесь необязательными заместителями.

Термин "ацил" означает группу C(О)-R, где R может представлять собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, алкинил, арилалкил или арильный остаток. Примеры ацила включают формил, алканоил с прямой или разветвленной цепью (например, C_1-20), такой как ацетил, пропаноил, бутаноил, 2-метилпропаноил, пентаноил, 2,2-диметилпропаноил, гексаноил, гептаноил, октаноил, нонаноил, деканоил, ундеканоил, додеканоил, тридеканоил, тетрадеканоил, пентадеканоил, гексадеканоил, гептадеканоил, октадеканоил, нонадеканоил и икозаноил; циклоалкилкарбонил, такой как циклопропилкарбонил циклобутилкарбонил, циклопентилкарбонил и циклогексилкарбонил; алкеноил с прямой или разветвленной цепью (например, C_2-20), такой как ангелоил; и ароил, такой как бензоил, толуоил и нафтоил. Остаток R может быть необязательно замещенным, как описано здесь.

Арилалкильная группа представляет собой определенную здесь алкильную группу, замещенную определенной здесь арильной группой. В одном из вариантов осуществления алкильная группа является терминально замещенной арильной группой. Примеры арилалкила включают фенил-C₁-C₂₀алкил, такой как бензил, фенилэтил, фенилпропил, фенилбутил, фенилпентил и фенилгексил. Одна или обе из алкильной и арильной групп могут быть независимо необязательно замещенными одним или несколькими определенными здесь необязательными заместителями.

Термин "необязательно замещенный" означает, что группа может быть незамещенной или замещенной одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями. Необязательные заместители для алкила, алкенила, алкинила, арила, арилалкила, арила, и таким образом ацила, включают: галоген (хлор, бром, йод и фтор), гидрокси, C_1-6алкокси, C_1-6алкил, C_3-6циклоалкил, фенил, нитро, галогенметил (например, трибромметил, трихлорметил, трифторметил), галогенметокси (например, трифторметокси, трибромметокси), C(О)C_1-6алкил, амино (NH₂), C_1-6алкиламино, (например, метиламино, этиламино и пропиламино) диC_1-6алкиламино (например, диметиламино, диэтиламино и дипропиламино), CO₂H, CO₂C_1-6алкил, тио (SH) и C_1-6алкилтио. Необязательный заместитель также включает замену CH₂ группы карбонильной (C=О) группой или может быть метилен- или этилендиокси группой.

Следует иметь в виду, что во время синтетического или полусинтетического способа получения производных ингенола по настоящему изобретению может возникнуть необходимость или может быть желательным защитить другие функциональные группы, которые могут быть реакционными или чувствительными к проводимым реакциям или условиям трансформации. Подходящие защитные группы для таких функциональных групп известны в данной области техники и могут использоваться согласно стандартной практике. Используемый здесь термин "защитная группы" означает вводимую функциональную группу, которая временно дезактивирует определенную функциональную группу в условиях, которым подвергнуто соединение. Такие защитные группы и способы их введения и последующего удаления на соответствующей стадии синтеза хорошо известны (Greene и