Усовершенствованный способ получения ингибитора дипептидилпептидазы-iv и промежуточного соединения

Усовершенствованный способ получения ингибитора дипептидилпептидазы-iv и промежуточного соединения

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ПЕРЕКРЕСТНЫЕ ССЫЛКИ НА РОДСТВЕННУЮ ЗАЯВКУ

Эта заявка на патент испрашивает приоритет заявки на патент Кореи №10-2009-0027106, поданной 30 марта 2009 года, содержание которой включено сюда посредством ссылки.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

1. Область изобретения

Настоящее изобретение относится к усовершенствованному способу производства ингибитора дипептидилпептидазы-IV и промежуточного соединения.

2. Описание предшествующего уровня техники

ДПП-IV (дипептидилпептидаза-IV) является ферментом, выполняющим функцию расщепления N-концевого дипептида пептида, имеющего концевую последовательность H-Xaa-Pro-Y (или H-Xaa-Ala-Y, где Xaa представляет собой любую липофильную аминокислоту, Pro представляет собой пролин, и Ala представляет собой аланин) (Heins J et al. Biophys Acta 1988; 161), и также называемым ДП-IV, ДП-4 или ДАП-IV. После открытия факта, что ДПП-IV разрушает глюкагоноподобный пептид-1 (в дальнейшем именуемый ГПП-1), который, как известно, оказывает мощное воздействие на функцию инсулина по контролю содержания глюкозы в крови после приема пищи (Mentlein R et al. Eur J Biochem 1993: 829-35), появилась возможность получения очень мощного терапевтического агента для лечения диабета II типа, и, следовательно, исследование по разработке ингибитора ДПП-IV ускорилось.

Компания Merck разработала триазолопиперазиновое соединение со структурой бета-аминокислоты, ситаглиптин, при изыскании ингибитора ДПП-IV. Соединение является первым ингибитором ДПП-IV для лечения диабета II типа и в настоящее время имеется в продаже под товарным знаком Januvia™ по всему миру после получения одобрения лекарственного средства от FDA (Управление по контролю за качеством пищевых продуктов и лекарственных препаратов) США в 2006 году. По этому вопросу в публикации патента Кореи №2008-0094604 раскрыто, что когда триазолопиперазиновая часть ситаглиптина замещена пиперазиноном, содержащим гетероатом, он обладает превосходной ингибиторной активностью в отношении ДПП-IV и также значительно улучшенной биодоступностью по сравнению с традиционным ингибитором ДПП-IV; и предложено гетероциклическое соединение, содержащее новую бета-аминогруппу, представленное следующей химической формулой 1, или его фармацевтически приемлемая соль, способ получения этого соединения и фармацевтическая композиция, которая содержит это соединение в качестве эффективного компонента, для предупреждения и лечения диабета или ожирения.

[Химическая формула 1]

.

Как показано на следующей схеме реакции A, в публикации патента Кореи №2008-0094604 раскрыт способ получения гетероциклического соединения, представленного химической формулой 1, с бета-аминогруппой, включающий: (I) получение соединения, представленного химической формулой 4, связанного пептидной связью, путем взаимодействия соединения с бета-аминогруппой, представленного химической формулой 2, и замещенного гетероциклического соединения, представленного химической формулой 3, с использованием 1-гидроксибензотриазола (HOBT), 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (EDC) и третичного амина; и (II) взаимодействие соединения, представленного химической формулой 4, в кислой среде:

[Схема реакции A]

(В вышеприведенной схеме реакции A, PG представляет собой защитную группу).

В то же время соединение с бета-аминогруппой, представленное химической формулой 2 в вышеприведенной схеме реакции A, может быть использовано для получения различных ингибиторов ДПП-IV, как раскрыто в бюллетенях с опубликованными международными заявками на патент WO 03/000181, WO 03/004498, WO 03/082817, WO 04/007468, WO 04/032836, WO 05/011581, WO 06/097175, WO 07/077508, WO 07/063928, WO 08/028662, WO 08/087560 и им подобным, помимо получения ингибитора ДПП-IV, представленного вышеприведенной химической формулой 1, и может быть получено различными способами.

Например, соединение, представленное вышеприведенной химической формулой 2, может быть получено с использованием способа, раскрытого в J. Med. Chem. 2005: 141 и Synthesis 1997: 873, как показано на следующей схеме реакции:

В частности, сложноэфирное соединение получают путем защитной реакции амина после взаимодействия (2S)-(+)-2,5-дигидро-3,6-диметокси-2-изопропилпиразина с 2,4,5-трифторбензилбромидом и обработки кислотой. Сложноэфирное соединение может быть снова гидролизовано с получением 3-(2,4,5-трифторфенил)-2-аминопропионовой кислоты; затем диазокетон может быть получен с использованием изобутилхлорформиата, третичного амина, такого как триэтиламин или диизопропилэтиламин, и диазометана; и соединение, представленное химической формулой 2, может быть получено путем взаимодействия диазокетона с бензоатом серебра. Однако упомянутое выше взаимодействие имеет недостатки, поскольку его следует проводить при низкой температуре (-78°C) или следует использовать дорогостоящую альфа-аминокислоту и крайне опасный диазометан.

Другой способ получения соединения, представленного вышеприведенной химической формулой 2, также известен из Tetrahedron: Asymmetry 2006; 205 или подобным образом Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 2007; 2622, как показано на следующей схеме реакции:

В частности, 2,4,5-трифторфенилуксусную кислоту активируют с использованием 1,1'-карбонилдиимидазола и затем подвергают взаимодействию с монометилмалонатом калия с получением бета-кетоэфирного соединения. Бета-кетоэфирное соединение подвергают взаимодействию с ацетатом аммония и водным раствором аммиака с получением сложного енаминового эфира, и сложноэфирное соединение затем подвергают взаимодействию с димером хлоро(1,5-циклооктадиен)родия(I) и хиральным ферроценовым лигандом (I) путем реакции гидрогенирования при высоком давлении с получением соединения, которое представляет собой бета-аминоэфир, имеющий только хиральный первичный амин. И затем соединение может быть гидролизовано с получением соединения, представленного химической формулой 2. Однако, способ, описанный выше, имеет недостаток в том, что реакцию гидрогенирования при высоком давлении следует проводить с использованием дорогостоящего металлического катализатора.

Кроме того, способ получения соединения, представленного химической формулой 2, также раскрыт в публикации международной заявки на патент № WO 04/87650.

В частности, 2,4,5-трифторфенилуксусную кислоту подвергают взаимодействию с 2,2-диметил-1,3-диоксан-4,6-дионом и оксалилхлоридом, которые являются агентом кислотного активирования, и затем полученный продукт нагревают с обратным холодильником в метаноле с получением соответствующего соединения. Соответствующее соединение подвергают взаимодействию с (s)-BINAP-RuCl₂, который является восстановителем, обладающим энантиоселективностью, путем гидрогенирования с получением соединения с (S)-координацией, и затем полученное соединение снова гидролизуют и затем подвергают реакции сочетания с O-бензилгидроксиламином с получением промежуточного соединения. Промежуточное соединение, полученное, как упомянуто выше, может быть подвергнуто реакции конденсации с замыканием кольца в присутствии трифенилфосфина и диизопропилазодикарбоксилата (DIAD) и обработано водным раствором гидроксида лития с получением соединения, представленного химической формулой 2, с (R)-координацией, в котором аминогруппа также защищена O-бензилом. Однако, способ, описанный выше, имеет недостаток в том, что процесс в целом является длительным и трудоемким, так что выход реакции низкий, и взаимодействие следует проводить в течение длительного времени.

Как упомянуто выше, традиционный известный способ получения соединения, представленного химической формулой 2, имеет некоторые недостатки, такие как использование дорогостоящего реагента, длительное время синтеза и низкий выход и, поэтому, неприемлем для массового промышленного производства.

Далее, соединение, представленное химической формулой 3, может быть получено с использованием следующей схемы реакции, как раскрыто в публикации патента Кореи №2008-0094604:

В частности, соединение D-серинметиловый эфир, который является исходным веществом, подвергают замещению тритилхлоридом; затем гидроксильную группу снова замещают мезильной группой, и затем нагревают с обратным холодильником до превращения в азиридиновое соединение.

Тритильную группу удаляют из азиридинового соединения с использованием трифторуксусной кислоты (ТФУК); затем азиридиновое соединение защищают бензилоксикарбонилом (Cbz) и затем подвергают взаимодействию с трет-бутанолом; и снимают Cbz-защиту с получением метил-2-амино-3-замещенного карбоната. Промежуточное соединение может быть получено с использованием соединения, полученного путем защиты вторичного амина соединения, полученного путем взаимодействия N-бутилоксикарбонил-2-аминоацетальдегида с восстановителем (цианборгидрид натрия, триацетоксиборгидрид натрия, боргидрид натрия и тому подобное), и вторичный амин этого соединения защищают бензилоксикарбонилом (Cbz), и с этого соединения снимают бутилоксикарбонильную (Boc) защиту. Соединение, полученное как упомянуто выше, подвергают циклизации в присутствии триметилалюминия (или диизопропилэтиламина/этанола, гидрокарбоната натрия/метанола и тому подобного) для того, чтобы снять Cbz-защиту, с тем, чтобы можно было получить соединение, представленное химической формулой 3.

Однако, способ, описанный выше, имеет недостаток, поскольку в нем используют дорогостоящий реагент, время синтеза длительное, а выход низкий, поэтому данный способ не подходит для массового промышленного производства.

Кроме того, поскольку 1-гидроксибензотриазол (НОВТ) и 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (EDC), используемые для получения обычного соединения, представленного химической формулой 1, являются дорогостоящими реагентами, стоимость реакции будет высокой, поэтому она не подходит для массового промышленного производства.

По этой причине авторы настоящего изобретения разработали настоящее изобретение, подтвердив, что соединение, представленное химической формулой 1, может быть получено экономично с высоким выходом путем использования нового способа производства используемых соединений, представленных химической формулой 2 и химической формулой 3, при изучения способа производства, подходящего для массового промышленного производства, в котором используют более дешевые реагенты; который является экономичным; и который повышает выход.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Одна задача настоящего изобретения состоит в том, чтобы предложить способ производства соединения, полезного в качестве промежуточного соединения при производстве ингибитора дипептидилпептидазы-IV.

Другая задача настоящего изобретения состоит в том, чтобы предложить усовершенствованный способ производства ингибитора дипептидилпептидазы-IV.

Для решения этих задач согласно настоящему изобретению предложен новый способ производства промежуточного соединения ингибитора дипептидилпептидазы-IV.

Согласно настоящему изобретению также предложен усовершенствованный способ производства ингибитора дипептидилпептидазы-IV.

Настоящее изобретение может быть полезно при массовом производстве благодаря снижению стоимости производства путем использования более дешевых реагентов в реакции и повышению выхода.

ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВОПЛОЩЕНИЙ

В дальнейшем настоящее изобретение будет описано подробно.

Согласно настоящему изобретению, как показано на следующей схеме реакции 1, предложен новый способ получения промежуточного соединения ингибитора дипептидилпептидазы-IV, представленного химической формулой 2, включающий:

(стадия a) получение соединения, представленного химической формулой 6, путем раскрытия эпоксидного кольца с использованием реактива Гриньяра в соединении, представленном химической формулой 5; (стадия b) получение соединения, представленного химической формулой 7, путем взаимодействия соединения, представленного химической формулой 6, с азидом натрия; (стадия c) получение соединения, представленного химической формулой 8, путем взаимодействия соединения, представленного химической формулой 7, с трифенилфосфином; (стадия d) получение соединения, представленного химической формулой 9, путем раскрытия азиридинового кольца в соединении, представленном химической формулой 8, с использованием реактива на основе циана; и (стадия e) получение соединения, представленного химической формулой 2, гидролизом соединения, представленного химической формулой 9, с использованием основания.

[Схема реакции 1]

(В вышеприведенной схеме реакции 1, X представляет собой галоген, и PG представляет собой защитную группу).

В частности, соединение химической формулы 6, которое подвергают раскрытию эпоксидного кольца, получают посредством взаимодействия соединения, представленного химической формулой 5, на стадии (a) с бромидом 2,4,5-трифторфенилмагния в присутствии катализатора иодида меди(I). Затем азидосоединение, представленное химической формулой 7, получают взаимодействием соединения, представленного химической формулой 6, на стадии (b) с азидом натрия в присутствии катализатора иодида меди(I). Затем трифенилфосфин используют в соединении, представленном химической формулой 7, на стадии (c) с получением соединения с азиридиновым кольцом и затем вводят защитную группу амина с получением соединения, представленного химической формулой 8. В этом случае бутоксикарбонил (Boc), бензилоксикарбонил (Cbz), 9-флуоренилметоксикарбонил (Fmoc), ацетил, бензоил или тозил могут быть использованы в качестве защитной группы амина. Затем соединение, представленное химической формулой 9, получают взаимодействием соединения, представленного химической формулой 8, с реагентом на основе циана, таким как цианид натрия, цианид калия и так далее, в присутствии 18-краун-6 и хлорида аммония на стадии (d). Наконец, соединение, представленное химической формулой 2, получают гидролизом соединения, представленного химической формулой 9, с основанием, при этом в качестве предпочтительного основания могут быть использованы гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид лития и тому подобное.

Согласно настоящему изобретению также предложено соединение, представленное следующей химической формулой 8 или 9, которое получено в качестве промежуточного соединения при получении соединения, представленного химической формулой 2.

[Химическая формула 8]

[Химическая формула 9]

(В вышеприведенных химических формулах 8 и 9, PG представляет собой защитную группу).

Кроме того, как показано в следующей схеме реакции 2, согласно настоящему изобретению предложен новый способ получения промежуточного соединения ингибитора дипептидилпептидазы-IV, представленного химической формулой 3, включающий:

(стадия a') получение соединения, представленного химической формулой 11, путем введения трет-бутокси группы в гидроксильную группу соединения, представленного химической формулой 10; и (стадия b') получение соединения, представленного химической формулой 3, индуцированием циклизации путем взаимодействия соединения, представленного химической формулой 11, с этилендиамином.

[Схема реакции 2]

В частности, соединение, представленное химической формулой 11, в котором гидроксильная группа замещена трет-бутиловой группой, получают взаимодействием соединения, представленного химической формулой 10, с газообразным изобутиленом в присутствии кислотного катализатора на стадии (а'). В этом случае соединение, представленное химической формулой 10, имеется в продаже или может быть получено способами, известными в данной области техники, и может быть получено с использованием нитрита натрия и бромида калия из L-серина с заменой аминогруппы на бром, например, способом, описанным в Tetrahedron Letter: Asymmetry 1994:2517, и затем взаимодействия полученного продукта с метанолом в присутствии кислотного катализатора, такого как тионилхлорид. Затем соединение, представленное химической формулой 3, получают индуцированием циклизации путем взаимодействия соединения, представленного химической формулой 11, с этилендиамином в присутствии основания на стадии (b'), и в этом случае в качестве предпочтительного основания могут быть использованы гидрокарбонат натрия, карбонат натрия, карбонат калия, пиридин, триэтиламин и так далее.

Кроме того, как показано на следующей схеме реакции 3, согласно настоящему изобретению предложен усовершенствованный способ получения ингибитора дипептидилпептидазы-IV, представленного химической формулой 1, включающий: (стадия 1) получение соединения, представленного химической формулой 4, путем связывания пептидной связью соединения, представленного химической формулой 2, и соединения, представленного химической формулой 3, путем их взаимодействия с использованием трифенилфосфина и бис(2,2'-бензотиазолил)дисульфида и основания в присутствии растворителя реакции; и

(стадия 2) получение соединения, представленного химической формулой 1, удалением защитной группы амина с соединения, представленного химической формулой 4, полученного на вышеприведенной стадии (1).

[Схема реакции 3]

(В вышеприведенной схеме реакции 3, PG представляет собой защитную группу).

Во-первых, стадия (1) представляет собой стадию получения соединения, представленного химической формулой 4, путем связывания пептидной связью соединения, представленного химической формулой 2 и соединения, представленного химической формулой 3, путем их взаимодействия с использованием трифенилфосфина, бис(2,2'-бензотиазолил)дисульфида и основания в присутствии реакционного растворителя.

В настоящем изобретении толуол, тетрагидрофуран, метиленхлорид, ацетонитрил, N,N-диметилформамид и так далее могут быть использованы в качестве реакционного растворителя.

В настоящем изобретении более чем одно соединение, выбранное из третичного амина, такого как N-метилморфолин, изопропилэтиламин, триэтиламин, пиридин и так далее, могут быть использованы в качестве основания.

В настоящем изобретении соединение, представленное химической формулой 2 или 3, имеется в продаже или может быть получено с использованием известного способа или способа, описанного на схеме реакции 1 или 2.

В настоящем изобретении предпочтительно, чтобы взаимодействие на вышеприведенной стадии (1) проводили при температуре от -20°C до 80°C, а в случае выхода за пределы вышеуказанного диапазона может возникнуть проблема, заключающаяся в том, что взаимодействие будет протекать с затруднениями, так что выход снизится.

Затем, стадия (2) представляет собой стадию получения соединения, представленного химической формулой 1, удалением защитной группы амина с соединения, представленного химической формулой 4, полученного на вышеприведенной стадии (1).

Удаление защитной группы на стадии (2) может быть проведено в кислой среде или посредством реакции гидрогенирования. В частности, когда защитная группа амина представляет собой бутоксикарбонил (Boc), она может быть удалена в кислой среде, такой как трифторуксусная кислота/дихлорметан, этилацетат/хлороводород, диэтиловый эфир/хлороводород, хлороводород/дихлорметан или метанол/хлороводород, а когда защитная группа амина представляет собой бензилоксикарбонил (Cbz), она может быть удалена посредством реакции гидрогенирования в присутствии палладия на угле.

Ингибитор дипептидилпептидазы-IV по настоящему изобретению, представленный химической формулой 1, может быть использован в форме фармацевтически приемлемой соли, и в качестве соли полезна соль присоединения кислоты, образованная с помощью фармацевтически приемлемой свободной кислоты. Неорганические и органические кислоты могут быть использованы в качестве свободной кислоты, в качестве неорганической кислоты может быть использована соляная кислота, бромноватая кислота, серная кислота, фосфорная кислота и так далее, и в качестве органической кислоты может быть использована лимонная кислота, уксусная кислота, молочная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, глюконовая кислота, метансульфоновая кислота, уксусная кислота, гликолевая кислота, янтарная кислота, винная кислота, 4-толуолсульфоновая кислота, галактуроновая кислота, эмбоновая кислота, глутаминовая кислота или аспарагиновая кислота. Предпочтительно соляная кислота может быть использована в качестве неорганической кислоты, и винная кислота может быть использована в качестве органической кислоты.

Соль присоединения кислоты согласно настоящему изобретению может быть получена обычным способом, например, путем растворения соединения, представленного химической формулой 1, в смешивающемся с водой органическом растворителе, например, ацетоне, метаноле, этаноле или ацетонитриле, и добавления избытка органической кислоты или путем добавления водного раствора неорганической кислоты и затем осаждения или кристаллизации. Затем получение можно осуществлять путем выпаривания растворителя или избытка кислоты из этой смеси и затем ее сушки с получением соли присоединения или фильтрата осажденной соли, полученного при фильтрации под вакуумом.

После получения соединений, представленных химическими формулами 1-3, полученных согласно настоящему изобретению, или их промежуточных соединений, их структуры могут быть установлены посредством инфракрасной спектрометрии, спектра ядерного магнитного резонанса, масс-спектрометрии, жидкостной хроматографии, рентгеноструктурной кристаллографии, поляриметрии и сравнения подсчитанных значений и фактически найденных значений в элементном анализе представленных соединений.

Таким образом, способ получения согласно настоящему изобретению может снижать стоимость при получении соединения химической формулы 1 путем использования дешевого бис(2,2'-бензотиазолил)дисульфида и может быть полезен при массовом производстве благодаря повышению выхода.

В дальнейшем настоящее изобретение будет описано более подробно со ссылкой на примеры. Однако следующие примеры даны только для иллюстрации, и настоящее изобретение не ограничено ими.

Пример 1. Получение (R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-(2,4,5-трифторфенил)бутановой кислоты (химическая формула 2)

Стадия a: получение (S)-1-хлор-3-(2,4,5-трифторфенил)пропан-2-ола (химическая Формула 6)

84,4 г 1-бром-2,4,5-трифторбензола и 42,1 мл тетрагидрофурана добавляли в колбу на 250 мл, и полученный раствор охлаждали до температуры -15-20°C. В атмосфере азота в реакционный раствор по каплям добавляли 20 мл хлорида изопропилмагния [2,0 М тетрагидрофурановый раствор] и перемешивали при температуре от 0 до 5°C в течение 2 часов с получением реактива Гриньяра. 31,6 мл (S)-эпихлоргидрина и 42,1 мл тетрагидрофурана добавляли в другую колбу на 250 мл; полученный реакционный раствор охлаждали до температуры от -15 до -20°C; и затем добавляли 7,6 г иодида меди. По каплям добавляли 42,1 мл реактива Гриньяра, полученного в атмосфере азота, и перемешивали в течение 3 часов, поддерживая температуру реакции при этом от -15 до -20°C. 297 мл 2 н водного раствора соляной кислоты, охлажденного при температуре от 0 до 5°C, по каплям добавляли в реакционный раствор и затем экстрагировали с использованием 297 мл изопропилового эфира. Органический слой отделяли, сушили сульфатом магния и затем концентрировали при пониженном давлении с получением 89,8 г указанного в заголовке соединения.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7.14 (m, 1H), 6.92 (m, 1H), 4.17 (m, 1H), 3.72-3.43 (m, 2H), 2.95-2.74 (m, 2H), 2.66 (m, 1H).

Стадия b: получение (S)-1-азидо-3-(2,4,5-трифторфенил)пропан-2-ола (химическая Формула 7)

89,9 г (S)-1-хлор-3-(2,4,5-трифторфенил)пропан-2-ола, полученного на вышеприведенной стадии а, добавляли в колбу на 2 л; растворяли в 898 мл диметилформальдегида; добавляли 6,0 г иодида натрия и 52,0 г азида натрия; температуру полученного реакционного раствора повышали до 70°C; и затем перемешивали в течение 16 часов. После завершения взаимодействия раствор охлаждали до комнатной температуры; добавляли 898 мл изопропилового эфира и 898 мл воды; и затем перемешивали в течение 10 минут. Органический слой отделяли; промывали 1 н водным раствором соляной кислоты и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия по порядку; сушили сульфатом натрия; и затем концентрировали при пониженном давлении с получением 75,4 г указанного в заголовке соединения.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7.13 (m, 1H), 6.92 (m, 1H), 4.00 (m, 1H), 3.42-3.23 (m, 2H), 2.86-2.72 (m, 2H), 2.70 (m, 1H).

Стадия c: получение (R)-N-(защитная группа амина)-2-(2,4,5-трифторбензил)азиридина (химическая Формула 8)

Стадия с-1: получение (R)-трет-бутил-2-(2,4,5-трифторбензил)азиридин-1-карбоксилата (химическая Формула 8)

18,9 г (S)-1-азидо-3-(2,4,5-трифторфенил)пропан-2-ола, полученного на вышеприведенной стадии b, растворяли в 188 мл ацетонитрила в колбе на 1 л и затем добавляли 21,4 г трифенилфосфина. После перемешивания полученного реакционного раствора в течение 1,5 часа при комнатной температуре, температуру реакционного раствора повышали до 70°C, и затем реакционный раствор перемешивали в течение 12 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры; 1,0 г 4-диметиламинопиридина и 17,8 г ди-трет-бутилдикарбоната добавляли в охлажденный реакционный раствор; и затем полученный реакционный раствор перемешивали в течение 2 часов. После завершения взаимодействия добавляли 0,91 г пероксида водорода; и полученный реакционный раствор перемешивали и затем концентрировали при пониженном давлении. 180 мл н-гексана добавляли к концентрированному остатку; и полученный концентрированный остаток перемешивали в течение 1 часа. Полученное твердое вещество отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 20,0 г указанного в заголовке соединения.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7.38 (m, 1H), 6.89 (m, 1H), 2.94 (dd, 1H), 2.65 (dd, 2H), 2.60 (m, 1H), 2.37 (d, 1H), 2.01 (d, 1H), 1.42 (s, 9H).

Стадия c-2: получение (R)-бензил-2-(2,4,5-трифторбензил)азиридин-1-карбоксилата (химическая Формула 8)

12,83 г (S)-1-азидо-3-(2,4,5-трифторфенил)пропан-2-ола, полученного на вышеприведенной стадии b, растворяли в 130 мл ацетонитрила в колбе на 500 мл и затем добавляли 14,56 г трифенилфосфина. После перемешивания полученного реакционного раствора в течение 1,5 часа при комнатной температуре, температуру реакционного раствора повышали до 70°C, и затем реакционный раствор перемешивали в течение 21 часа. Реакционный раствор охлаждали до температуры от 0 до 5°C; 6,74 г триэтиламина и 9,47 г бензилоксихлорформиата добавляли в охлажденный реакционный раствор; и затем полученный реакционный раствор перемешивали в течение 1 часа. После завершения взаимодействия добавляли 0,63 г пероксида водорода; и полученный реакционный раствор перемешивали в течение 1 часа и затем концентрировали при пониженном давлении. 130 мл изопропилового эфира добавляли к концентрированному остатку; и полученный концентрированный остаток перемешивали в течение 1 часа. Полученное твердое вещество отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с получением 15,78 г указанного в заголовке соединения.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7.41-7.15 (m, 6H), 6.90 (m, 1H), 5.15 (s, 2H), 2.90 (m, 1H), 2.69 (m, 2H), 2.40 (d, 1H), 2.08 (d, 1H).

Стадия c-3: получение 1-((R)-2-(2,4,5-трисрторбензил)азиридин-1-ил)этанона (химическая Формула 8)

7,97 г (S)-1-азидо-3-(2,4,5-трифторфенил)пропан-2-ола, полученного на вышеприведенной стадии b, растворяли в 80 мл ацетонитрила в колбе на 500 мл и затем добавляли 9,05 г трифенилфосфина. После перемешивания полученного реакционного раствора в течение 1,5 часа при комнатной температуре температуру реакционного раствора повышали до 70°C, и затем реакционный раствор перемешивали в течение 20 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры; добавляли 5,35 г N,N-диизопропилэтиламина, 0,43 г 4-диметиламинопиридина и 3,0 г ацетилхлорида в охлажденный реакционный раствор; и затем полученный реакционный раствор перемешивали в течение 2 часов. После завершения взаимодействия добавляли 0,4 г пероксида водорода; и полученный реакционный раствор перемешивали в течение 1 часа и затем концентрировали при пониженном давлении. 40 мл н-гексана добавляли к концентрированному остатку; и полученный концентрированный остаток перемешивали в течение 1 часа. Полученное твердое вещество отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с получением 4,74 г указанного в заголовке соединения.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7.16 (m, 1H), 6.95 (m, 1H), 2.92 (dd, 1H), 2.76 (dd, 1H), 2.66 (m, 1H), 2.39 (d, 1H), 2.05 (d, 1H), 2.04 (s, 3H).

Стадия c-4: получение (R)-2-(2,4,5-трифторбензил)азиридин-1-ил)фенилметанона (химическая формула 8)

7,97 г (S)-1-азидо-3-(2,4,5-трифторфенил)пропан-2-ола, полученного на вышеприведенной стадии b, растворяли в 80 мл ацетонитрила в колбе на 500 мл и затем добавляли 9,05 г трифенилфосфина. После перемешивания полученного реакционного раствора в течение 1,5 часа при комнатной температуре температуру реакционного раствора повышали до 70°C, и затем реакционный раствор перемешивали в течение 21 часа. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры; 5,35 г N,N-диизопропилэтиламина, 0,43 г 4-диметиламинопиридина и 5,34 г бензоилхлорида добавляли в охлажденный реакционный раствор; и затем полученный реакционный раствор перемешивали в течение 2 часов. После завершения взаимодействия добавляли 0,4 г пероксида водорода; и полученный реакционный раствор перемешивали в течение 1 часа и затем концентрировали при пониженном давлении. 40 мл н-гексана добавляли к концентрированному остатку; и полученный концентрированный остаток перемешивали в течение 1 часа. Полученное твердое вещество отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией с получением 7,03 г указанного в заголовке соединения.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 8.0 (m, 2H), 7.55 (m, 1H), 7.45 (m, 2H), 7.21 (m, 1H), 6.95 (m, 1H), 3.05 (dd, 1H), 2.90 (dd, 1H), 2.82 (m, 1H), 2.53 (d, 1H), 2.28 (d, 1H).

Стадия c-5: получение (R)-(9H-флуорен-9-ил)метил-2-(2,4,5-трифторбензил)азиридин-1-карбоксилата (химическая формула 8)

7,97 г (S)-1-азидо-3-(2,4,5-трифторфенил)пропан-2-ола, полученного на вышеприведенной стадии b, растворяли в 80 мл ацетонитрила в колбе на 500 мл и затем добавляли 9,05 г трифенилфосфина. После перемешивания полученного реакционного раствора в течение 1,5 часа при комнатной температуре температуру реакционного раствора повышали до 70°C, и затем реакционный раствор перемешивали в течение 20 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры; 5,35 г N,N-диизопропилэтиламина, 0,43 г 4-диметиламинопиридина и 12,81 г 9-флуоренилметоксикарбонилхлорида добавляли в охлажденный реакционный раствор; и затем полученный реакционный раствор перемешивали в течение 2 часов. После завершения взаимодействия добавляли 0,4 г пероксида водорода; и полученный реакционный раствор перемешивали в течение 1 часа и затем концентрировали при пониженном давлении. 40 мл н-гексана добавляли к концентрированному остатку; и полученный концентрированный остаток перемешивали в течение 1 часа. Полученное твердое вещество отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с получением 10,03 г указанного в заголовке соединения.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7.67 (d, 2H), 7.54 (dd, 2H), 7.43 (t, 2H), 7.32 (t, 2H), 7.21 (m, 1H), 6.93 (m, 1H), 4.46 (d, 2H), 4.20 (t, 1H), 2.85 (dd, 1H), 2.68 (dd, 1H), 2.54 (m, 1H), 2.30 (d, 1H), 2.06 (d, 1H).

Стадия c-6: получение (R)-2-(2,4,5-трифторбензил)-1-тозилазиридина (химическая формула 8)

7,97 г (S)-1-азидо-3-(2,4,5-трифторфенил)пропан-2-ола, полученного на вышеприведенной стадии b, растворяли в 80 мл ацетонитрила в колбе на 500 мл и затем добавляли 9,05 г трифенилфосфина. После перемешивания полученного реакционного раствора в течение 1,5 часов при комнатной температуре, температуру реакционного раствора повышали до 70°C, и затем реакционный раствор перемешивали в течение 20 часов. Реакционный раствор охлаждали до температуры от 0 до 5°C; 5,35 г N,N-диизопропилэтиламина и 7,24 г тозилхлорида добавляли в охлажденный реакционный раствор; полученный реакционный раствор перемешивали в течение 2 часов; и затем концентрировали при пониженном давлении. 40 мл изопропилового эфира добавляли к концентрированному остатку, и затем полученный концентрированный остаток перемешивали в течение 1 часа. Полученное твердое вещество отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с получением 7,07 г указанного в заголовке соединения.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7.71-7.58 (m, 2H), 7.25-7.18 (m, 2H), 6.80 (m, 1H), 6.05 (m, 1H), 3.07 (m, 1H), 2.80 (m, 1H), 2.43 (m, 4H), 2.11 (d, 1H), 1.42 (s, 3H).

Стадия d: получение (R)-N-(защитная группа амина)амино-4-(2,4,5-трифторфенил)бутаннитрила (химическая формула 9)

Стадия d-1: получение (R)-трет-бутил-1-циано-3-(2,4,5-трифторфенил)пропан-2-илкарбамата (химическая формула 9)

6,7 г (R)-трет-бутил-2-(2,4,5-трифторбензил)азиридин-1-карбоксилата растворяли в 67 мл диметилсульфоксида в колбе на 250 мл; затем по порядку добавляли 3,0 г цианида калия, 1,4 г хлорида аммония и 6,8 г 18-краун-6; и затем полученный реакционный раствор перемешивали в течение 2 часов при 80°C. После завершения взаимодействия добавляли в реакционный раствор 100 мл толуола и 100 мл воды, и затем полученный реакционный раствор перемешивали в течение 10 минут. Органический слой отделяли; промывали 1 н водным раствором соляной кислоты и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия по порядку; сушили сульфатом натрия; и затем концентрировали при пониженном давлении с получением 75,4 г указанного в заголовке соединения. Водный слой отделяли; сушили сульфатом натрия; и затем концентрировали при пониженном давлении. 100 мл н-гексана добавляли к концентрированному остатку, и затем полученный концентрированный остаток перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. Полученное твердое вещество фильтровали при пониженном давлении и сушили под вакуумом с получением 4,0 г указанного в заголовке соединения.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7.08 (m, 1H), 6.94 (m, 1H), 4.80 (m, 1H), 4.06 (m, 1H), 2.88 (m, 2H), 2.80-2.50 (m, 2H), 1.39 (s, 9H).

Стадия d-2: получение (R)-бензил-1-циано-3-(2,4,5-трифторфенил)пропан-2-илкарбамата (химическая формула 9)

15,78 г (R)-бензил-2-(2,4,5-трифторбензмл)азиридин-1-карбоксилата растворяли в 63,2 мл диметилсульфоксида и 15,8 мл воды в колбе на 250 мл; затем добавляли 7,89 г силикагеля. 6,40 г цианида калия медленно добавляли в реакционный раствор, и полученный реакционный раствор перемешивали в течение 24 часов при 50°C. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и затем по порядку добавляли в охлажденный реакционный раствор 160 мл дихлорметана и 800 мл воды. Органический слой отделяли; дважды промывали 80 мл воды; сушили сульфатом натрия; и затем концентрировали при пониженном давлении. 80 мл диизопропилэтилового эфира добавляли к концентрированному остатку, и затем полученный концентрированный остаток перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. Полученное твердое вещество фильтровали при пониженном давли и сушили под вакуумом с получением 14,66 г указанного в заголовке соединения.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7.40-7.10 (m, 5H), 7.91 (m, 1H), 6.77 (m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.95 (m, 1H), 4.08 (m, 1H), 2.89 (m, 2H), 2.72 (dd, 1H), 2.53 (dd, 1H).

Стадия e: получение (R)-3-(защитная группа амина)-амино-4-(2,4,5-трифторфенил)бутановой кислоты (химическая формула 2)

Стадия e-1: получение (R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-4-(2,4,5-трифторфенил)бутановой кислоты (химическая формула 2)

2,0 г (R)-трет-бутил-1-циано-3-(2,4,5-трифторфенил)пропан-2-илкарбамата, полученного на вышеприведенной стадии d-1, растворяли в 20 мл смешанного раствора этанол: вода, 1:1, в колбе на 250 мл; затем добавляли 3,4 г 85% гидроксида калия; и затем полученный реакционный раствор перемешивали в течение 12 часов при 80°C. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры; 8,0 г дигидрата щавелевой кислоты медленно добавляли в охлажденный реакционный раствор. После завершения взаимодействия добавл