Способ коррекции эндотелиальной дисфункции раствором гомеопатических разведений антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека в комплексе с раствором гомеопатических разведений антител к с-концевому фрагменту рецептора ангиотензина ii

Способ коррекции эндотелиальной дисфункции раствором гомеопатических разведений антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека в комплексе с раствором гомеопатических разведений антител к с-концевому фрагменту рецептора ангиотензина ii

Реферат

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии, и может быть использовано для коррекции L-Name-индуцированной эндотелиальной дисфункции.

Из уровня техники известен способ коррекции эндотелиальной дисфункции смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200, описанный в патенте РФ №2306953 C1 (А61K 39/395, 27.09.2007 г.).

Недостатком данного способа является то, что основным механизмом действия смеси растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - С12, С30, С200 является увеличение количества eNOS, что ограничивает его эффективность.

Задачей изобретения является повышение эффективности коррекции эндотелиальной дисфункции смесью как за счет повышения количества eNOS, так и за счет устранения эффектов ангиотензина II.

Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что на фоне моделирования L-name-индуцированной эндотелиальной дисфункции в эксперименте внутрибрюшинным введением лабораторному животному в течение 28 суток блокатора синтеза NO L-нитро-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 12,5 мг/кг/сут., проводится ее коррекция введением смеси растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200 (внутрижелудочно, 2 раза в сутки по 4,5 мл/кг (9 мл/кг/сут.)) в комбинации с смесью растворов гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II -С12, С30, С200, внутрижелудочно, 2 раза в сутки по 4,5 мл/кг (9 мл/кг/сут.).

Использование в заявленном способе смеси растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - С12, С30, С200 в комбинации с смесью растворов гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200 приводит не только к увеличению количества eNOS но и к блокаде ангиотензиновых рецепторов-1 типа и устраняют такие эффекты ангиотензина II, как: превращение оксида азота в пероксинитрат, стимуляция синтеза эндотелина, стимуляция выработки цитокинов и инициация тем самым воспаления в сосудистой стенке, гиперактивация ренин-ангиотензин альдостероновой системы (РААС), ведущая к формированию эндотелиальной дисфункции.

Заявленный способ может быть осуществлен следующим образом.

Опыты проводят на белых крысах самцах линии Wistar массой 250-300 г. N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 12,5 мг/кг/сут. На 29 день от начала эксперимента под наркозом (тиопентал-натрия 50 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика TSD104A и аппаратно-программного комплекса МР100, производства Biopac System, Inc., США. Функциональные пробы: эндотелий зависимая вазодилатация (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелий независимая вазодилатация (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг.

Степень развития эндотелиальной дисфункции оценивается с помощью коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД), являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления артериального давления (АД) в ответ на введение нитропруссида (НП), при этом точками меньшего катета являются точка максимального падения АД и точка выхода уровня АД на плато при введении функциональной пробы с введением НП, к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение ацетилхолина (АХ), причем за меньший из катетов принимают разность между точкой окончания кардиального компонента и точкой восстановления АД при введении функциональной пробы с введением АХ, а большими катетами в этих треугольниках являются показатели времени восстановления сосудистой реакции на введение АХ и НП, выражаемое в секундах; площадь исчисляемых треугольников выражается в условных единицах (см., например, известную методику, описанную в патенте RU 2301015).

При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при p<0,05.

Обработка полученных экспериментальных данных при проведении функциональных проб на эндотелийзависимое (ацетилхолин 40 мкг/кг в/в) и эндотелийнезависимое (нитропруссид 30 мг/кг в/в) расслабление сосудов у экспериментальных животных, позволили установить, что внутрибрюшинное введение L-Name в дозе 12,5 мг/кг в течение 28 дней вызывает повышение коэффициента эндотелиальной дисфункции до 3,5±0,5 усл. ед. (Таблица 1), тогда как в контрольной группе животных (внутрижелудочное введение дистиллированной воды, в дозе 9 мл/кг/сут) он составил 1,2±0,1 усл. ед.

В группе животных, где на фоне введения L-NAME в дозе 12,5 мг/кг, в течение 28 дней внутрижелудочно вводилась смесь растворов гомеопатических разведении поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе окасида азота человека, в дозе 9 мл/кг - С12, С30, С200 КЭД составил - 1,8±0,1 усл. ед.

Таблица 1
Динамика показателей АД и коэффициента эндотелиальной дисфункции при моделировании L-Name-индуцированной эндотелиальной дисфункции и ее коррекции смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека, в дозе 9 мл/кг - С12, С30, С200 в комплексе с смесью растворов гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200 в дозе 9 мл/кг/сут
Группы животных	Функциональная проба	САД, мм рт.ст.	ДАД, мм рт.ст.	S сосудистой реакции при проведении ЭЗВД с АХ и ЭНВД с НП, усл.ед.	КЭД, усл. ед.
Контрольная (ежедневное, внутрижелудочное введение дистиллированной воды 9 мл/кг/сут)	Исходные	159,2±5,4	124,2±4,7		1,2±0,1
АХ	96,9±6,7	52,0±3,0	3071,2±501,1
НП	113,8±6,1	55±2,4	3617,2±560,1
Получавшие L-NAME (12,5 мг/кг)	Исходные	204,8±10*	164,2±5,9*		3,5±0,5*
АХ	111,3±7,4	64,7±4,3*	3700,2±536,9
НП	118,2±9,9	61,4+4,4	11922,8±1838,9*
L-NAME (12,5 мг/кг)+смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NOS человека - С12, С30, С200 (9 мл/кг/сут)	Исходные	230,1±8,8*	175,1±6,4*		1,8±0,2**
АХ	116,4±4,0*	73,5±3,5*	5826,0±801,2**
НП	108,1±4,6	60±3,6	9628,5±970,1*
L-NAME (12,5 мг/кг)+смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NOS человека - С12, С30, С200 (9 мл/кг/сут)+смесью растворов гомеопатических разведений антител к с-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II -С12, С30, С200 (9 мл/кг/сут)	Исходные	213,6±4,6*	166,8±2,7*		1,4±0,1**
АХ	116,9±5,5*	73,3±3,4*	3295,3±201,4
НП	122,3±4,6	70,5±4,5*	4546,2±299,4**
Примечание: * - р<0,05 в сравнении с контрольной группой; ** - р<0,05 в сравнении с группой L-NAME. САД - систолическое артериальное давление, ДАД - диастолическое артериальное давление, S - площадь над кривой восстановления артериального давления при проведении фармакологических проб, КЭД - коэффициент эндотелиальной дисфункции.

В группе животных, где на фоне введения L-Name в дозе 12,5 мг/кг, в течение 28 дней внутрижелудочно вводилась смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека, в дозе 9 мл/кг - С12, С30, С200 в комплексе с смесью растворов гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200 КЭД составил - 1,4±0,1, что достоверно ниже, чем в группе с моделированием патологии и в группе с моно коррекцией смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека, в дозе 9 мл/кг - С12, С30, С200.

Таким образом, полученные результаты позволяют констатировать коррекцию L-Name-индуцированной эндотелиальной на фоне введения L-Name в дозе 12,5 мг/кг, в течение 28 дней смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека, в дозе 9 мл/кг - С12, С30, С200 в комплексе с смесью растворов гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200, при внутрижелудочном введении в дозе 9 мл/кг каждой из них, снижая КЭД до уровня такового в контрольной группе животных - 1,2±0,1 усл.ед.

Способ коррекции эндотелиальной дисфункции раствором гомеопатических разведений антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека в комплексе с раствором гомеопатических разведений антител к C-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II, характеризующийся тем, что в эксперименте крысам-самцам линии Wistar в течение 28 дней, на фоне внутрибрюшинного введения L-Name в дозе 12,5 мг/кг, ежедневно, 2 раза в сутки по 4,5 мл/кг (9 мл/кг/сут.), внутрижелудочно вводят смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200, в дозе 9 мл/кг в комплексе с смесью растворов гомеопатических разведений антител к C-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200 (2 раза в сутки по 4,5 мл/кг (9 мл/кг/сут.), внутрижелудочно.